衛(wèi)生理化檢驗技術概述

衛(wèi)生理化檢驗技術.1衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024衛(wèi)生理化檢驗

是什么？為什么學？學些什么？定義內容意義.2衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024是什么？——定義衛(wèi)生檢驗衛(wèi)生理化檢驗微生物學檢驗定義：運用物理、化學、生物的基礎理論和方法，檢測與分析與人類生活質量、健康因素密切相關的物質種類和數(shù)量的一門技術性學科。.3衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024為什么學？——意義1用來檢驗其監(jiān)測對象是否符合相應的衛(wèi)生

標準。2可初步闡明環(huán)境中各種物理、化學因素對

人體的影響程度。3為制定各類衛(wèi)生標準和采取衛(wèi)生措施提供

科學依據。.4衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024學什么？——內容及其分類衛(wèi)生理化檢驗檢驗性質研究領域檢驗對象監(jiān)督檢驗鑒定檢驗委托檢驗營養(yǎng)與食品衛(wèi)生檢驗環(huán)境衛(wèi)生檢驗勞動衛(wèi)生檢驗水質檢驗、食品檢驗、

空氣檢驗、土壤與底質檢驗、

化妝品檢驗.5衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024衛(wèi)生理化檢驗技術概述衛(wèi)生理化檢驗的一般程序樣品采集樣品前處理樣品分析檢驗結果報告.6衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024第一節(jié)樣品采集部分整體樣品從整體中抽出部分的過程，叫做樣品采集部分與整體是有差異的，兩者之間的差異稱之為采樣誤差.7衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024樣品采集原則樣品采集的基本原則：代表性整體的性質：均勻性或隨機性eg：從一個倉庫中，采集部分糧食進行分析，來說明該倉

庫存放的糧食是否符合食品衛(wèi)生標準。整體的某一特征：典型性eg：檢驗車間空氣，目的是了解某作業(yè)某有害物質的污

染程度以及對勞動者健康的影響。.8衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024制定方案實施采樣保存送檢監(jiān)督監(jiān)測和鑒定監(jiān)測，采樣時，衛(wèi)生監(jiān)督或衛(wèi)生監(jiān)測人員都要親臨采樣現(xiàn)場，進行周密調查，熟悉背景，制定樣品采集方案。樣品采集一般采集檢驗所需數(shù)量的三倍，供復檢和上級部門鑒定使用。影響因素：生物因素：新陳代謝。如食品、廢水等化學因素：化學組分之間發(fā)生反應等。物理因素：光照、溫度、振動等。樣品采集過程和注意事項.9衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024樣品采集注意事項合理選擇采樣儀器、設備和容器；密封、避光、防潮、防污染等；低溫冷藏法，防止樣品腐敗，一般不加入防腐劑。嚴格認真的填寫采樣記錄。.10衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024第二節(jié)樣品前處理樣品前處理：又叫樣品分析前的處理。

是在樣品分析前必須采取一定的措施，消除或減少干擾測定的各種因素。.11衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024樣品前處理的原則完全分離不受損；不引入被測組分和干擾組分；不影響后續(xù)分析；不用或少用試劑免雜質；安全、簡便、高效。.12衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024樣品前處理方法干法有機質分解法提取法揮發(fā)分離法其他方法浸漬法萃取法濕法蒸發(fā)法氣化法蒸餾法升華法頂空法吸附法沉淀法透析法離子交換法固相萃取組分分離有機質破壞.13衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024有機質分解法——干法又稱灰化法

在高溫灼燒下使樣品脫水、炭化，并在空氣中氧的作用下，使有機物徹底氧化分解，生成的二氧化碳、水和其他氣體揮發(fā)逸去，剩下的無機物用鹽酸溶解后供測定用。分三個步驟：炭化→灰化→溶解適用于：Pb、Cu、Zn、Cr、Fe等金屬元素不適用：As、Hg.14衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024干法三個階段①炭化脫水②灰化除去碳、氫、氧灰化完全標志：樣品成為無黑色顆粒的灰白色粉末狀殘渣。③溶解用稀鹽酸溶解灰白色粉末狀灼殘渣的無機鹽或氧化物后過濾待用。.15衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/20241.優(yōu)點：是有機物被破壞徹底，操作簡單，使用試劑少，適用于大批量樣品的分析測定。

2.缺點：是砷、汞、鉛等金屬容易在高溫下?lián)]發(fā)損失。

3.灰化助劑有兩類：

①乙醇、硝酸、碳酸銨、過氧化氫，灼燒后完全消失，不增加殘灰質量，可加速灰化。

②氧化鎂、碳酸鹽、硝酸鹽，與灰分混雜，使碳粒不被覆蓋，所以燃燒完全，應同時做空白試驗。

.16衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024坩堝鉗坩堝.17衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024有機質分解法——濕法

在強酸性和加熱沸騰的條件下，使樣品中的有機化合物被強氧化劑氧化，其化學結構被破壞，將待測元素釋放出來。常用消化方法：硫酸高溫催化法硝酸-硫酸法硝酸-高氯酸法.18衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024硝酸-硫酸法原理：4HNO32H2O+4NO2+2[O]硝酸浸泡開始消化補加氧化劑終止消化脫硝五個階段所加試劑現(xiàn)象硝酸硫酸硝酸水&飽和草酸銨無液體黃色液體黃色、棕紅色氣體液體無色或微黃色濃厚白煙產生濃厚白煙產生.19衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024消化操作技術敞口消化法回流消化法冷消化法密封管消化法微波消解法敞口消化法回流裝置圖.20衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024①優(yōu)點是加熱溫度較干法低，減少了金屬揮發(fā)逸散的損失。②缺點是會產生大量有毒氣體，操作需在通風柜中進行。耗用試劑較多。

消化初期，產生大量泡沫，易沖出瓶頸，造成損失，需操作人員隨時照管，操作中還應控制火力，注意防爆。必須做空白試驗。

.21衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024方法常用名樣品形態(tài)萃取劑形態(tài)固—液萃取浸漬法固體液體液—液萃取萃取法液體液體液—固萃取固相萃取液體固體提取法基本原理是：利用樣品中不同組分在溶劑中

溶解度的不同來實現(xiàn)分離的。Eg:AB兩種組分，A是待測組分，B是干擾組分。已知試劑甲，A組分可以溶解于甲試劑，B不能，就可以選用甲試劑，將A組分提取出來。.22衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024提取法——浸漬法原理：利用液體溶劑浸泡固體樣品，將其中要分離

的組分溶解，以達到提取分離的目的。常用溶劑：水、酸性水溶液、堿性水溶液缺點：1.樣品組分溶解擴散需要有一個過程才能最終達到平

衡狀態(tài)，需要重復幾次。

2.樣品中的雜質也會同時被浸出，檢測前需要凈化。分類：冷浸法、回流提取法。.23衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024冷浸法

固體樣品粉碎，放入溶劑中混勻，振搖30min后靜置，傾出或過濾出溶液，重復2-3次，合并溶液供后續(xù)測定操作。.24衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024回流提取法

采用回流提取裝置

當提取過程需要加熱時，為避免揮發(fā)性組分和溶劑的揮發(fā)損失，采用回流裝置，即利用蒸餾燒瓶和冷凝管作為提取一起，通過水加熱回流，以保證樣品中要分離的組分被溶劑充分溶解提取。提取效率高、不適用于受熱易分解的組分.25衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024提取法——萃取法利用液體萃取劑來提取與它互不相容或部分相溶的液體樣品中的組分。有機溶劑水溶液萃取操作：

取一定量樣品溶液于分頁漏斗中，調節(jié)至適宜的酸度后，加萃取劑，充分震蕩。靜置分層后，打開分液漏斗的玻璃塞，再將旋塞緩緩旋開，下層溶液放入另一容器中，使兩相分離。再取新的萃取劑，反復萃取3-4次，合并萃取液供分析測定。.26衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024基本原理：分配定律

在恒溫恒壓下，互不相容或部分相容的兩種溶液，在

彼此達到平衡時分為兩層，溶質以一定的

濃度比溶解分配在兩液層中。溶質在兩液

層中分配的濃度比，稱之為分配比（D）。分配系數(shù)：D=C有/C水表示了溶質在兩種不同溶劑中溶解度的大小提取法——萃取法有機溶劑水溶液.27衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024萃取效率：被萃取物質在有機相中的量E%=被萃取物質的總量X100%C有·V有E%=C有·V有+C水·V水X100%E%=1+V水/（V有·D）X100%1提取法——萃取法.28衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024Mn=1+V水/（V有·D）1提高萃取效果的方法：選擇合適的萃取劑。該溶劑對被提取的組分的分配比D越大，萃取效率越高。增加使用有機溶劑的體積。但是由于萃取劑費用較高，而且使用次數(shù)較多，因此一般萃取劑的體積為樣品溶液體積的相等或為其一半。增加萃取次數(shù)。N越大Mn越小，萃取效果也就越高。但過多地增加萃取次數(shù)，是工作量增加，也會增加操作誤差。MoN.29衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/20241.溶劑的選擇

與水互溶的有機溶劑，不適用液液萃取。如低分子量的醇、酮、醛、乙腈。常用的萃取液：乙醚、苯、甲苯、四氯化碳、二硫化碳、環(huán)己烷、正己烷.30衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/20242.乳化定義：一種液體以極微小液滴均勻地分散在互不相溶的另一種液體中的作用。

(1)急速振動樣品使其在分液漏斗中發(fā)生完全的混合，是一個非常重要的操作。

(2)由于物質劇烈振動，液液萃取中常發(fā)生乳化現(xiàn)象，尤其是含有表面活性劑和脂肪的樣品，會影響被測組分數(shù)據的準確。

避免和破壞乳化的方法有：

(1)混合震搖時，輕緩的固定一個方向震搖；

(2)采用高速離心振蕩或振蕩后再用玻璃棉或濾紙過濾；

(3)加鹽到水相，通常有NaCl固體、2%~5%NaCl溶液或Na2SO4溶液。

(4)加入少量另一種有機溶劑，如無水乙醇。

.31衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024

固相萃取法又稱液-固萃取法，是20世紀70年代才發(fā)展起來的樣品前處理。是利用某些大分子顆粒，通過吸附、分配或離子交換等作用，將待測的有機組分截留在柱子上，經過洗滌后再用少量溶劑洗脫下來，起到分離和弄濃縮的作用。提取法——固相萃取法.32衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024揮發(fā)分離法是利用物質揮發(fā)性的差別，在常溫或低溫加熱下，使樣品中易揮發(fā)的組分與不揮發(fā)的組分分離的方法。既可以用于被測組分的分離，也可以用于除去干擾組分。方法有：氣化法、蒸發(fā)法、蒸餾法、升華法、

頂空法等揮發(fā)分離法.33衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024氣化法是利用被測物質在常溫下所具有的揮發(fā)性，與不揮發(fā)的干擾組分分離的方法。通常是利用氧化還原反應使待測組分形成低沸點的單質或化合物，從樣品溶液中逸出供分析測定。Eg：SnCL2+HgCL2→SnCL2+Hg

低沸點化合物中最常見的是氫化物，因此可以用化學方法將待測組分轉變成氣態(tài)的氫化物。Eg:S2-+2H+→H2S揮發(fā)分離法——氣化法.34衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024

蒸發(fā)法是在低溫加熱的條件下使揮發(fā)性組分氣化逸出，達到分離的目的。當樣品中含有受熱易分解的組分時，通過減壓便可以在更低的溫度，甚至室溫下使揮發(fā)性組分氣化。Eg：食品中水分的測定揮發(fā)分離法——蒸發(fā)法.35衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024

在較高溫度下，利用蒸餾裝置，將樣品中具有揮發(fā)性或經處理后具有揮發(fā)性的組分更完全地蒸餾出來。借助蒸餾裝置，將具揮發(fā)性的組分與水或其他溶劑一起釋放出來，然后再冷凝成液體或被吸收液吸收。分：直接蒸餾法、

水蒸氣蒸餾法、

減壓蒸餾法揮發(fā)分離法——蒸餾法.36衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024直接蒸餾法裝置圖將樣品溶液置于燒瓶中，熱源直接加熱燒瓶。適用于沸點在40-150度之間的物質。如水中氨氮、氟化物、氰化物等水樣預處理。.37衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024水蒸氣蒸餾法裝置圖由于樣品中的某些組分，特別是有些有機化合物，沸點較高，又容易受熱分解的時候，建議采用水蒸氣蒸餾法。將水蒸氣通入盛有樣品的燒瓶，一方面水蒸氣給樣品加熱，使被測組分蒸發(fā)；一方面樣品中的可揮發(fā)被測組分被水蒸氣攜帶出來。加熱溫度不會超過100度，適用于具有一定蒸汽壓而沸點較高的組分。如水中揮發(fā)酚的測定。.38衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024減壓蒸餾裝置圖在低于常壓的條件下進行蒸餾，適用于高沸點、及易分解的有機化合物的預處理。減壓可降低沸點，因而可以再較低的溫度下蒸餾，防止組分分解。.39衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024

頂空法是利用待測組分的揮發(fā)性，而干擾成分不具揮發(fā)性，實現(xiàn)被測組分與干擾組分分離。在密閉的容器中，通過適當加溫或結合通入氮氣的方法使其從樣品溶液中揮發(fā)出來，在進行測定。分：靜態(tài)頂空法動態(tài)頂空法揮發(fā)分離法——頂空法.40衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024靜態(tài)頂空法動態(tài)頂空法將樣品置于密閉容器中，保持恒溫狀態(tài)，經過一段時間后達到平衡。用住誰器抽出上層的空氣，用于測定；動態(tài)頂空法一般和分析儀器一起配套使用，向樣品中不斷通入氮氣，揮發(fā)性成分隨氮氣一起排出，進入右邊的檢測儀器中檢測。因為用到了分析儀器，靈敏度高，可以測定痕量低沸點組分。.41衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024小結方法應用基本原理有機質破壞干法無機元素測定長時間高溫或氧化處理，破壞有機物，以離子的形式釋放出其他元素濕法分離提取法浸取法固體樣品利用待測組分與干擾組分溶解性不同進行分離。萃取法液體樣品固相萃取法液體樣品揮發(fā)法氣化法常溫利用被測組分與干擾組分揮發(fā)性不同進行分離蒸發(fā)法低溫加熱蒸餾法高溫，蒸餾裝置頂空法密閉容器.42衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024

在日常的衛(wèi)生理化檢驗工作中，采樣、樣品前處理之后，就將開始進行分析。由于檢驗目的不同，樣品的種類、狀態(tài)、性質各異，選用的分析方法就各不相同。

常用的分析方法有：感官檢驗、物理檢查、化學分析和物理化學分析（儀器分析）等。第三節(jié)衛(wèi)生理化檢驗常用分析方法.43衛(wèi)生理化檢驗技術概述5/8/2024選用的方法應適用于被檢樣品的性狀。測定方法應具有良好的精密度和準確度。方法的靈敏度或最低檢出濃度應滿足衛(wèi)生標準所規(guī)