核移植技術(shù)及應(yīng)用資料

核移植技術(shù)及應(yīng)用報告人：孫志杰導(dǎo)師：馬小軍研究員Seminar

Ⅰ5/8/20241核移植技術(shù)及應(yīng)用資料精卵結(jié)合胚胎細(xì)胞個體5/8/20242核移植技術(shù)及應(yīng)用資料顯微操作儀5/8/20243核移植技術(shù)及應(yīng)用資料

目錄一

核移植技術(shù)簡介二核移植的分類核移植的應(yīng)用四展望5/8/20244核移植技術(shù)及應(yīng)用資料1.1定義：將供體細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中,使后者不經(jīng)精子穿透等有性過程即可被激活、分裂并發(fā)育,使得核供體的基因得到完全復(fù)制。一核移植技術(shù)簡介5/8/20245核移植技術(shù)及應(yīng)用資料1切開卵母細(xì)胞透明帶2擠出卵母細(xì)胞細(xì)胞核3注入供體細(xì)胞核4電融合儀融合培養(yǎng)123455/8/20246核移植技術(shù)及應(yīng)用資料供體細(xì)胞核的來源體細(xì)胞核移植胚胎細(xì)胞核移植胚胎干細(xì)胞核移植供受體種間關(guān)系異種核移植同種核移植核移植目的生殖性克隆治療性克隆二核移植分類5/8/20247核移植技術(shù)及應(yīng)用資料2.1生殖性克隆5/8/20248核移植技術(shù)及應(yīng)用資料2.2克隆動物的鑒定DNA指紋：指每個個體所特有的基因多態(tài)性鑒定方法：RAPD微衛(wèi)星RFLPDOLLY的鑒定：微衛(wèi)星

5/8/20249核移植技術(shù)及應(yīng)用資料綿羊2019小鼠2019牛2019山羊2000張涌西北農(nóng)林科技大學(xué)豬2000兔2019大鼠2019周琪中科院動物所狗20192.3已克隆的動物5/8/202410核移植技術(shù)及應(yīng)用資料2.4治療性克隆細(xì)胞治療組織替代器官移植5/8/202411核移植技術(shù)及應(yīng)用資料

細(xì)胞治療異種器官移植生產(chǎn)治療性蛋白保護瀕危物種培育各種疾病動物模型三核移植技術(shù)的應(yīng)用5/8/202412核移植技術(shù)及應(yīng)用資料1細(xì)胞治療三核移植技術(shù)的應(yīng)用1.1定義細(xì)胞移植可以治療由于細(xì)胞功能缺陷所引起的各種疾病，如糖尿病;中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾?。ㄅ两鹕?，阿爾莫茨癥）;肝功能衰竭;甲狀腺疾病。

面臨的問題解決方法

細(xì)胞來源尸源性異種細(xì)胞

免疫排斥免疫抑制劑基因敲除免疫隔離5/8/202413核移植技術(shù)及應(yīng)用資料核移植消除免疫排斥胚胎干細(xì)胞提供細(xì)胞來源三核移植技術(shù)的應(yīng)用2019韓國科學(xué)家黃禹錫應(yīng)用體細(xì)胞核移植，從糖尿??；脊索損傷；先天性低丙球蛋白血癥病人的皮膚細(xì)胞中克隆出了早期胚胎，并成功提取出新的胚胎干細(xì)胞系，突破克隆早期胚胎和提取干細(xì)胞的效率從

1/240提高到1/20。體細(xì)胞全部來自于患有各種疾病的病人

5/8/202414核移植技術(shù)及應(yīng)用資料遺傳疾病的治療5/8/202415核移植技術(shù)及應(yīng)用資料2異種器官移植

可移植器官短缺豬的器官大小、結(jié)構(gòu)和功能上與人體器官相近

急性免疫排斥反應(yīng)基因敲除半乳糖基轉(zhuǎn)移酶核移植基因敲除SPF克隆豬器官移植三核移植技術(shù)的應(yīng)用5/8/202416核移植技術(shù)及應(yīng)用資料3生產(chǎn)藥用蛋白目的基因

轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系核移植動物乳腺

乳液提取目的產(chǎn)

物基因打靶

3.1方法三核移植技術(shù)的應(yīng)用5/8/202417核移植技術(shù)及應(yīng)用資料3.2研究實例

2019年底,英國Roslin研究所和PPL公司通過克隆轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞，獲得了6只整合neo或neo和F2IX基因綿羊,這標(biāo)志著核移植介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)成功問世。2000年,英國PPL公司將人AAT基因定點整合到胎兒成纖維細(xì)胞的α1原膠原(Procollagen)基因座位,而后用轉(zhuǎn)基因細(xì)胞進行核移植,生產(chǎn)出世界首例基因打靶綿羊,其乳中AAT蛋白含量達到了650mg/L,遠高顯微注射法18mg/L的水平。2019年，臺灣培育帶有治療血友病的“第八凝血因子”的體細(xì)胞克隆羊。2019年，這只克隆羊產(chǎn)下一只同樣帶有第八凝血因子的公羊。三核移植技術(shù)的應(yīng)用5/8/202418核移植技術(shù)及應(yīng)用資料4保護瀕危物種細(xì)胞核去核卵母細(xì)胞核移植重構(gòu)胚三核移植技術(shù)的應(yīng)用5/8/202419核移植技術(shù)及應(yīng)用資料5培育各種疾病動物模型應(yīng)用核移植技術(shù)可以培育基因完全一致的實驗動物模型，為遺傳學(xué)，病理學(xué)研究提供良好的實驗材料。

動物種類疾病模型數(shù)豬65貓123狗203三核移植技術(shù)的應(yīng)

用5/8/202420核移植技術(shù)及應(yīng)用資料四展望

雖然核移植技術(shù)有著廣闊的應(yīng)用前景，并且已取得了一些進展如體細(xì)胞核移植等，但也存在著一些問題。主要包括核移植效率低，動物畸形。這要求研究人員進一步了解核質(zhì)作用機理，改進培養(yǎng)方式。5/8/202421核移植技術(shù)及應(yīng)用資料Bortvin,A.,Eggan,K.,Skaletsky,H.(2019).IncompletereactivationofOct4-relatedgenesinmouseembryosclonedfromsomaticnuclei.Development130,1673-1680.Buehr,M.,Nichols,J.,Stenhouse,F.(2019).Rapidlossofoct-4andpluripotencyinculturedrodentblastocystsandderivativecelllines.BiolReprod68,222-229.Ferguson-Smith,A.C.,andSurani,M.A.(2019).Imprintingandtheepigeneticasymmetrybetweenparentalgenomes.Science293,1086-1089.Giles,J.,andKnight,J.(2019).Dolly'sdeathleavesresearcherswoollyoncloneageingissue.Nature421,776.Gurdon,J.B.(2019).GeneticreprogrammingfollowingnucleartransplantationinAmphibia.SeminCellDevBiol10,p239-243.Jaenisch,R.,andWilmut,I.(2019).Developmentalbiology.Don'tclonehumans!Science291,2552.Rideout,W.M.,Eggan,K.,andJaenisch,R.(2019).Nuclearcloningandepigeneticreprogrammingofthegenome.Science293,1093-1098.基本參考文獻5/8/202422核移植技術(shù)及應(yīng)用資料

謝謝敬請批評指正5/8/202423核移植技術(shù)及應(yīng)用資料三目前存在的問題及原因1.1核移植效率低供體核小鼠囊胚率表型胚胎干細(xì)胞15-30