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紫外-可見(jiàn)分光光度法
三氯苯酚存在時(shí)苯酚含量的測(cè)定
5/9/20241紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)紫外吸收光譜法的基本原理;了解紫外分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)及其操作方法;掌握等吸光度法消除干擾的原理和方法。5/9/20242紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚Lamber-Beer定律:吸收光譜法基本定律
圖1物質(zhì)對(duì)光的吸收
描述物質(zhì)對(duì)單色光吸收強(qiáng)弱與液層厚度和待測(cè)物濃度的關(guān)系假設(shè)一束平行單色光通過(guò)一個(gè)吸光物體二、基本原理5/9/20243紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚三、儀器結(jié)構(gòu)圖2756CRT紫外分光光度計(jì)
5/9/20244紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚鎢燈或鹵鎢燈——可見(jiàn)光源350~1000nm氫燈或氘燈——紫外光源200~360nm1.光源:2.單色器:包括狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件
棱鏡——對(duì)不同波長(zhǎng)的光折射率不同色散元件分出光波長(zhǎng)不等距光柵——衍射和干涉分出光波長(zhǎng)等距5/9/20245紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚3.吸收池:
玻璃——能吸收UV光,僅適用于可見(jiàn)光區(qū)
石英——不能吸收紫外光,適用于紫外和可見(jiàn)光區(qū)要求:匹配性(對(duì)光的吸收和反射應(yīng)一致)光電池光電管光電倍增管二極管陣列檢測(cè)器4.檢測(cè)器:將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)的裝置5.記錄裝置:訊號(hào)處理和顯示系統(tǒng)5/9/20246紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚光源單色器樣品池檢測(cè)器記錄裝置圖3分光光度計(jì)構(gòu)造方框圖5/9/20247紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚圖4單光束分光光度計(jì)基本結(jié)構(gòu)示意圖特點(diǎn):使用時(shí)來(lái)回拉動(dòng)吸收池
→移動(dòng)誤差對(duì)光源要求高比色池配對(duì)5/9/20248紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚特點(diǎn):不用拉動(dòng)吸收池,可以減小移動(dòng)誤差對(duì)光源要求不高可以自動(dòng)掃描吸收光譜
圖5雙光束分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)示意圖5/9/20249紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚特點(diǎn):利用吸光度差值定量消除干擾和吸收池不匹配引起的誤差圖6雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)示意圖5/9/202410紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚四、定量分析方法
多組分的定量方法三種情況:1.兩組分吸收光譜不重疊(互不干擾)
兩組分在各自λmax下不重疊→分別按單組分定量5/9/202411紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚2.兩組分吸收光譜部分重疊
λ1→測(cè)A1→b組分不干擾→可按單組分定量測(cè)Caλ2→測(cè)A2→a組分干擾→不能按單組分定量測(cè)Cb
5/9/202412紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚3.兩組分吸收光譜完全重疊——混合樣品測(cè)定(1)解線性方程組法(2)等吸收雙波長(zhǎng)消去法5/9/202413紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚(1)解線性方程組法步驟:5/9/202414紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚(2)等吸收雙波長(zhǎng)法步驟:
消除a的影響測(cè)b5/9/202415紫外分光光度法測(cè)定水樣中的苯酚消去b的影響測(cè)a注:須滿足兩個(gè)基本條件選定的兩個(gè)波長(zhǎng)下干擾組分具有等吸收點(diǎn)選定的兩個(gè)波長(zhǎng)下待測(cè)物的吸光度差值應(yīng)足夠大5
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