2025版高考生物一輪總復(fù)習(xí)選擇性必修3第10單元生物技術(shù)與工程第6講基因工程的基本工具提能訓(xùn)練

第10單元生物技術(shù)與工程第6講基因工程的基本工具A組一、單選題1．如圖是三種限制酶的脫氧核苷酸識(shí)別序列和切割位點(diǎn)示意圖(↓表示切點(diǎn))。下列相關(guān)分析錯(cuò)誤的是(D)A．這三種限制酶切割出的DNA片段末端都是黏性末端B．不同限制酶切割DNA所得的黏性末端可能相同C．能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割D．同一個(gè)DNA分子經(jīng)限制酶1和限制酶3分別切割后所得片段數(shù)一定相等解析：據(jù)圖可知，這三種限制酶切割位點(diǎn)均位于中軸線兩側(cè)，切割出的DNA片段末端都是黏性末端，A正確；DNA經(jīng)限制酶1和限制酶3分別切割，所得的DNA片段黏性末端相同，B正確；能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割，但能被限制酶1切割的DNA不一定能被限制酶3切割，故同一個(gè)DNA分子經(jīng)限制酶1和限制酶3分別切割后所得片段數(shù)不一定相等，C正確，D錯(cuò)誤。2．(2024·天津六校聯(lián)考)如表列舉了幾種限制酶的識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)(箭頭表示相關(guān)酶的切割位點(diǎn))。如圖是酶切后產(chǎn)生的幾種末端。下列說(shuō)法正確的是(B)A．BamHⅠ切割的是氫鍵，AluⅠ切割的是磷酸二酯鍵B．Sau3AⅠ和BamHⅠ切割的序列產(chǎn)生的片段能夠相連，連接后的片段還能被Sau3AⅠ切割C．DNA連接酶能連接②⑤，不能連接②④D．E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶都能連接①③，且連接效率低解析：BamHⅠ與AluⅠ切割的均是磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；BamHⅠ切割，Sau3AⅠ切割，故二者切割后產(chǎn)生的黏性末端是相同的，因此二者切割后產(chǎn)生的黏性末端能夠相連，連接后的片段能被Sau3AⅠ切割，但是不一定能被BamHⅠ切割，B正確；②⑤的黏性末端相同，②④的黏性末端也相同，因此DNA連接酶能連接②⑤，也能連接②④，C錯(cuò)誤；E.coliDNA連接酶是從大腸桿菌中獲得的DNA連接酶，只能連接黏性末端，T4DNA連接酶既可以連接黏性末端也可以連接平末端，而圖中①③屬于平末端，只能用T4DNA連接酶連接，D錯(cuò)誤。3．楊樹(shù)被根瘤農(nóng)桿菌感染后會(huì)增生并長(zhǎng)出瘤狀物，稱為冠癭，冠癭內(nèi)的冠癭堿是一種含氮有機(jī)物，是根瘤農(nóng)桿菌生存的唯一碳源和氮源。冠癭的形成是由于根瘤農(nóng)桿菌攜帶有天然的Ti質(zhì)粒，其結(jié)構(gòu)如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是(C)A．Ti質(zhì)粒上的生長(zhǎng)素基因可在楊樹(shù)生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮作用B．Ti質(zhì)粒上的T－DNA區(qū)域，至少含有一個(gè)限制酶的酶切位點(diǎn)C．冠癭堿合成基因在根瘤農(nóng)桿菌細(xì)胞中表達(dá)并分泌到細(xì)胞外D．根瘤農(nóng)桿菌內(nèi)Ti質(zhì)粒的存在，決定了其侵染植物的范圍解析：根瘤農(nóng)桿菌感染植物體后，農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒中含有的生長(zhǎng)素基因、細(xì)胞分裂素基因經(jīng)表達(dá)產(chǎn)生了生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，生長(zhǎng)素促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)，細(xì)胞分裂素促進(jìn)細(xì)胞分裂，因此植物產(chǎn)生瘤狀結(jié)構(gòu)，A正確；Ti質(zhì)粒上的T－DNA區(qū)域，至少含有一個(gè)限制酶的酶切位點(diǎn)，以便于切割后與目的基因結(jié)合，構(gòu)建基因表達(dá)載體，B正確；T－DNA上的冠癭堿合成基因在農(nóng)桿菌中不表達(dá)，在植物細(xì)胞中可以表達(dá)，故根瘤農(nóng)桿菌不會(huì)形成冠癭，而楊樹(shù)被根瘤農(nóng)桿菌感染后會(huì)形成冠癭，C錯(cuò)誤；結(jié)合題意“冠癭的形成是由于根瘤農(nóng)桿菌攜帶有天然的Ti質(zhì)?！?，且Ti質(zhì)粒上有T－DNA，可以將目的基因整合到宿主細(xì)胞內(nèi)，故根瘤農(nóng)桿菌內(nèi)Ti質(zhì)粒的存在，決定了其侵染植物的范圍，D正確。4．如圖是利用基因工程技術(shù)構(gòu)建重組表達(dá)載體的過(guò)程示意圖，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ為四種限制酶。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(C)A．需要用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ來(lái)切割質(zhì)粒B．表達(dá)載體中的青霉素抗性基因在受體細(xì)胞中能復(fù)制C．任何基因表達(dá)載體中都必須要有青霉素抗性基因作為標(biāo)記基因D．表達(dá)載體中目的基因的上游有啟動(dòng)子，復(fù)制原點(diǎn)不一定位于目的基因上游解析：限制酶SmaⅠ的識(shí)別序列位于目的基因上，因此表達(dá)載體構(gòu)建時(shí)不能用限制酶SmaⅠ，應(yīng)用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ，A正確；表達(dá)載體中的青霉素抗性基因在受體細(xì)胞中能穩(wěn)定存在且遺傳給下一代，B正確；基因表達(dá)載體中標(biāo)記基因的種類很多，不一定都是青霉素抗性基因，C錯(cuò)誤；表達(dá)載體中目的基因的上游有啟動(dòng)子，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合部位，能驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，D正確。5．(2024·遼寧沈陽(yáng)質(zhì)檢)下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述，錯(cuò)誤的是(B)A．預(yù)冷的乙醇可使溶解于研磨液中的DNA析出B．用相同方法從等體積豬血和雞血中提取的DNA量相近C．DNA析出后，可將溶液倒入離心管中進(jìn)行離心，棄上清液，將管底的沉淀晾干D．用二苯胺試劑鑒定DNA需要進(jìn)行沸水浴加熱解析：豬是哺乳動(dòng)物，哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核，不含DNA，而雞的成熟紅細(xì)胞中有細(xì)胞核，含DNA，因此用同樣方法從等體積豬血和雞血中提取的DNA量不是相近的，B錯(cuò)誤。6．(2024·山東聯(lián)合調(diào)考)大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和陰離子去垢劑(SDS)處理后，擬核DNA就會(huì)纏繞在細(xì)胞壁碎片上，靜置一段時(shí)間，質(zhì)粒分布在上清液中。利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。下列關(guān)于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的分析錯(cuò)誤的是(C)A．DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可以用冷酒精析出上清液中的DNAB．DNA能溶于2mol/L的NaCl溶液，可用二苯胺試劑在沸水加熱條件下鑒定DNAC．用限制酶Ⅰ和Ⅱ處理提取的產(chǎn)物，電泳后出現(xiàn)圖示結(jié)果，說(shuō)明未提取到質(zhì)粒D．用瓊脂糖凝膠電泳鑒定質(zhì)粒，被染色的質(zhì)粒還需要通過(guò)紫外燈照射才能看到結(jié)果解析：限制性酶Ⅰ和限制性酶Ⅱ處理提取的產(chǎn)物，只得到一條帶，說(shuō)明提取物是環(huán)狀DNA，即提取物為質(zhì)粒，C錯(cuò)誤。7．(2023·遼寧大連統(tǒng)考二模)將溶葡球菌酶基因轉(zhuǎn)入奶?；蚪M中獲得轉(zhuǎn)基因牛，在其乳腺中表達(dá)的溶葡球菌酶可以有效預(yù)防由葡萄球菌引起的乳房炎，使感染率下降。下列敘述錯(cuò)誤的是(A)A．上述操作至少需要三種分子工具：限制酶、DNA聚合酶、載體B．可以通過(guò)PCR以及構(gòu)建基因文庫(kù)等方法來(lái)獲取溶葡球菌酶基因C．構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需加入乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子D．溶葡球菌酶基因與奶牛DNA都為雙螺旋結(jié)構(gòu)是二者拼接的基礎(chǔ)解析：上述操作采用了基因工程技術(shù)，該技術(shù)至少需要三種分子工具：限制酶、DNA連接酶、載體，A錯(cuò)誤；溶葡球菌酶基因?yàn)槟康幕?，獲取目的基因的方法有PCR、構(gòu)建基因文庫(kù)等，B正確；要使目的基因只在乳腺組織中特異性表達(dá)，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需加入乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子，C正確；不同DNA能相互拼接的基礎(chǔ)是它們具有相同的化學(xué)組成(都是由脫氧核苷酸組成)和結(jié)構(gòu)(雙螺旋結(jié)構(gòu))，D正確。故選A。二、綜合題8．大腸桿菌β－半乳糖苷酶(Z酶)可催化底物(X－gal)水解產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)。在pUC18質(zhì)粒中，lacZ′編碼Z酶氨基端的一個(gè)片段(稱為α－肽)，該質(zhì)粒結(jié)構(gòu)及限制酶識(shí)別位點(diǎn)如圖甲所示。已知α－肽、缺失α－肽的Z酶片段單獨(dú)存在時(shí)均無(wú)Z酶活性，共同存在時(shí)就會(huì)表現(xiàn)出Z酶活性。利用圖乙中的DNA片段與pUC18質(zhì)粒進(jìn)行基因工程操作。(1)限制酶能催化雙鏈DNA分子中磷酸二酯鍵(填化學(xué)鍵名稱)的斷裂。本實(shí)驗(yàn)可使用限制酶SalⅠ處理pUC18質(zhì)粒和圖乙中的DNA片段，再通過(guò)DNA連接酶連接，獲得含目的基因的重組質(zhì)粒。(2)用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，然后將大腸桿菌接種到含氨芐青霉素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，由于未發(fā)生轉(zhuǎn)化的大腸桿菌沒(méi)有該質(zhì)粒，因而不具有氨芐青霉素抗性，在該培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)。從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(3)當(dāng)上述培養(yǎng)基中含有X－gal時(shí)，生長(zhǎng)出的菌落有藍(lán)色和白色兩種類型，其中含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌的菌落顏色為白色，這是因?yàn)槟康幕蚺c質(zhì)粒連接后使lacZ′被破壞，不能合成α－肽。為保證能通過(guò)菌落顏色辨別出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌，本實(shí)驗(yàn)作為受體細(xì)胞的大腸桿菌中Z酶基因應(yīng)滿足的條件是編碼α－肽的DNA序列缺失，其他序列正常。解析：(1)限制酶能催化雙鏈DNA分子中磷酸二酯鍵的斷裂，將DNA降解。從圖中可知，HindⅢ可破壞目的基因，而質(zhì)粒和目的基因兩側(cè)都有SalⅠ識(shí)別位點(diǎn)，因此本實(shí)驗(yàn)可使用限制酶SalⅠ處理pUC18質(zhì)粒和圖乙中的DNA片段。(2)重組質(zhì)粒上有氨芐青霉素抗性基因，由于未發(fā)生轉(zhuǎn)化的大腸桿菌沒(méi)有該質(zhì)粒，因而不具有氨芐青霉素抗性，在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)。從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，選擇了含重組質(zhì)粒的大腸桿菌。(3)從圖中可知，重組質(zhì)粒是用SalⅠ分別處理過(guò)的質(zhì)粒和目的基因片段形成的，重組質(zhì)粒的lacZ′基因被破壞，不能合成β－半乳糖苷酶(Z酶)，不能催化底物(X－gal)水解產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，故菌落呈白色。已知α－肽、缺失α－肽的Z酶片段單獨(dú)存在時(shí)均無(wú)Z酶活性，共同存在時(shí)就會(huì)表現(xiàn)出Z酶活性，為保證能通過(guò)菌落顏色辨別出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌，本實(shí)驗(yàn)作為受體細(xì)胞的大腸桿菌中Z酶基因應(yīng)滿足的條件是編碼α－肽的DNA序列缺失，其他序列正常。B組一、單選題1．質(zhì)粒是基因工程中最常用的目的基因運(yùn)載工具。下列有關(guān)敘述正確的是(D)A．質(zhì)粒是只存在于細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中能自主復(fù)制的小型環(huán)狀雙鏈DNA分子B．在所有的質(zhì)粒上都能找到一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)C．?dāng)y帶目的基因的重組質(zhì)粒只有整合到宿主細(xì)胞的染色體DNA上才會(huì)隨后者的復(fù)制而復(fù)制D．質(zhì)粒上的抗性基因常作為標(biāo)記基因供重組DNA的鑒定和選擇解析：質(zhì)粒不只分布于原核生物中，在真核生物——酵母菌細(xì)胞內(nèi)也有分布；并不是所有的質(zhì)粒上都有限制酶的切割位點(diǎn)，從而成為合適的運(yùn)載目的基因的工具。重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞后，可以在細(xì)胞內(nèi)自我復(fù)制，也可以整合后復(fù)制。2．(2024·山東濟(jì)南高三期末)下列以洋蔥為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是(D)A．洋蔥研磨液需要用濾紙過(guò)濾，以保證提取的DNA量B．濾液中加入冷酒精后，用玻璃棒攪拌會(huì)使DNA的提取量增加C．向含DNA的濾液中加入2mol/L的NaCl溶液有利于去除雜質(zhì)D．用二苯胺試劑鑒定DNA時(shí)，需沸水浴加熱冷卻后再觀察顏色變化解析：洋蔥研磨液要用紗布過(guò)濾，A錯(cuò)誤；DNA在冷酒精中的溶解度很低，蛋白質(zhì)在冷酒精中的溶解度較高，故可以利用DNA不溶于冷酒精的原理，提純DNA，但提取量不變，B錯(cuò)誤；向含DNA的濾液中加入預(yù)冷的酒精溶液有利于去除雜質(zhì)，加入2mol/L的NaCl溶液是溶解DNA，C錯(cuò)誤；在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，用二苯胺試劑鑒定DNA時(shí)，需沸水浴加熱，冷卻后再觀察顏色變化，D正確。3．(2024·湖南常德高三質(zhì)檢)如圖表示由不同的限制酶切割而成的DNA末端及相關(guān)的酶作用位點(diǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是(C)A．甲、乙、丙都屬于黏性末端B．甲、乙片段可形成重組DNA分子，但甲、丙不能C．DNA連接酶的作用位點(diǎn)在圖乙中b處D．切割甲的限制酶不能識(shí)別由甲、乙片段形成的重組DNA分子解析：甲、乙、丙都屬于黏性末端，A正確；甲、乙的黏性末端相同，因此可在DNA連接酶的作用下形成重組DNA分子，但甲、丙的黏性末端不同，它們之間不能形成重組DNA分子，B正確；DNA連接酶將兩個(gè)DNA片段連接為一個(gè)DNA分子，作用部位是磷酸二酯鍵，即圖乙中a處，C錯(cuò)誤；切割甲的限制酶的識(shí)別序列為GAATTC∥CTTAAG，而甲、乙片段形成的重組DNA分子序列為GAATTG∥CTTAAC，因此切割甲的限制酶不能識(shí)別由甲、乙片段形成的重組DNA分子，D正確。4．T4DNA連接酶可將任意2個(gè)具有相同黏性末端的DNA片段連接在一起。該反應(yīng)過(guò)程需消耗ATP，其水解產(chǎn)生的腺苷一磷酸(AMP)通過(guò)共價(jià)鍵與酶相連，隨后AMP轉(zhuǎn)移至DNA片段，進(jìn)而完成連接反應(yīng)。下列敘述正確的是(C)A．T4DNA連接酶的底物種類較多，故其無(wú)專一性B．T4DNA連接酶催化反應(yīng)后，其組成成分已改變C．ATP在該反應(yīng)過(guò)程中可能打開(kāi)兩個(gè)特殊的化學(xué)鍵D．T4DNA連接酶需保存于最適溫度和pH條件下解析：T4DNA連接酶有專一性，A錯(cuò)誤；酶在催化反應(yīng)前后性質(zhì)不變，故T4DNA連接酶催化反應(yīng)后，其組成成分不變，B錯(cuò)誤；ATP水解產(chǎn)生AMP需要打開(kāi)兩個(gè)特殊的化學(xué)鍵，結(jié)合題干信息“該反應(yīng)過(guò)程需消耗ATP，其水解產(chǎn)生的腺苷一磷酸(AMP)通過(guò)共價(jià)鍵與酶相連”可推測(cè)，ATP在該反應(yīng)過(guò)程中可能打開(kāi)兩個(gè)特殊的化學(xué)鍵，C正確；T4DNA連接酶需在低溫和最適pH條件下保存，D錯(cuò)誤。5．(2024·山東日照高三檢測(cè))基因工程利用某目的基因(圖甲)和P1噬菌體載體(圖乙)構(gòu)建重組DNA。限制性內(nèi)切核酸酶BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ的酶切位點(diǎn)分別如圖所示。下列分析錯(cuò)誤的是(D)A．構(gòu)建重組DNA時(shí)，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體B．構(gòu)建重組DNA時(shí)，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體C．圖乙中的P1噬菌體載體只用EcoRⅠ切割后，含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)D．用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體，再用DNA連接酶連接，只能產(chǎn)生一種重組DNA解析：由題圖可知，BglⅡ、Sau3AⅠ及EcoRⅠ三種酶在目的基因和P1噬菌體上都有酶切位點(diǎn)，故可用BglⅡ和Sau3AⅠ或EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體；圖乙P1噬菌體載體為環(huán)狀DNA，只用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生兩條反向雙螺旋鏈狀DNA，有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)；用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體，再用DNA連接酶連接，能產(chǎn)生不止一種重組DNA。D錯(cuò)誤。6．(2024·章丘階段性測(cè)試)圖甲、乙中的箭頭表示三種限制性內(nèi)切核酸酶的酶切位點(diǎn)，ampr表示氨芐青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列敘述正確的是(C)A．圖甲中的質(zhì)粒用BamHⅠ切割后，含有1個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B．在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用PstⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒和外源DNAC．用PstⅠ和HindⅢ切割，可以保證重組DNA序列的唯一性D．導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)解析：圖甲中的質(zhì)粒用BamHⅠ切割后，獲得一個(gè)DNA片段，其只含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，A錯(cuò)誤；在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，不能使用BamHⅠ切割外源DNA，因?yàn)橛肂amHⅠ切割會(huì)破壞目的基因的結(jié)構(gòu)，但可以用PstⅠ和HindⅢ切割質(zhì)粒和外源DNA，B錯(cuò)誤；用PstⅠ和HindⅢ切割質(zhì)粒會(huì)得到2個(gè)DNA片段，再加入DNA連接酶，切開(kāi)的質(zhì)粒由于黏性末端不同，不會(huì)自身連接，從而保證只能得到一種符合要求的重組質(zhì)粒，即含有目的基因和標(biāo)記基因neo的重組質(zhì)粒，保證了重組DNA序列的唯一性，C正確；由于用PstⅠ切割質(zhì)粒后，其中的氨芐青霉素抗性基因會(huì)被破壞，所以導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌不能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，D錯(cuò)誤。7．質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體，它存在于許多細(xì)菌體內(nèi)。質(zhì)粒上的標(biāo)記基因如圖所示，通過(guò)標(biāo)記基因可以推知外源基因(目的基因)是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同，細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況不同，下圖表示外源基因插入位置(插入點(diǎn)有a、b、c)，請(qǐng)根據(jù)表中提供細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，推測(cè)①②③三種重組后細(xì)菌的外源基因插入點(diǎn)，正確的一組是(A)推測(cè)細(xì)菌在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況細(xì)菌在含四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況①能生長(zhǎng)能生長(zhǎng)②能生長(zhǎng)不能生長(zhǎng)③不能生長(zhǎng)能生長(zhǎng)A.①是c；②是b；③是aB．①是a和b；②是a；③是bC．①是a和b；②是b；③是aD．①是c；②是a；③是b解析：推測(cè)①中重組后細(xì)菌能在含氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，說(shuō)明抗氨芐青霉素基因和抗四環(huán)素基因沒(méi)有被破壞，因此外源基因插入點(diǎn)是c。推測(cè)②中重組后細(xì)菌能在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，說(shuō)明抗氨芐青霉素基因沒(méi)有被破壞；不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，說(shuō)明抗四環(huán)素基因被破壞，因此外源基因插入點(diǎn)是b。推測(cè)③中重組后細(xì)菌不能在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，說(shuō)明抗氨芐青霉素基因被破壞；能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，說(shuō)明抗四環(huán)素基因沒(méi)有被破壞，因此外源基因插入點(diǎn)是a。二、綜合題8．(2024·遼寧錦州高三期末)Cre－loxP系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)特定基因的敲除，其技術(shù)過(guò)程如圖1所示?？茖W(xué)家把幾種熒光蛋白基因和Cre酶能識(shí)別并切割的序列(loxP1和loxP2)串在一起，構(gòu)建如圖2所示的表達(dá)載體T，在Cre酶的作用下，一部分熒光蛋白基因會(huì)被隨機(jī)地“剪掉”，而剩下的部分得以表達(dá)，這樣就可以隨機(jī)呈現(xiàn)不同的顏色。這種利用熒光蛋白“點(diǎn)亮”神經(jīng)元的大腦成像技術(shù)被稱為“腦彩虹”，能幫助科學(xué)家了解大腦。(1)loxP序列具有方向性，結(jié)構(gòu)如圖1所示，其中決定方向的序列是②(填序號(hào))。(2)構(gòu)建表達(dá)載體T需要用到限制酶和DNA連接酶，用顯微注射法將表達(dá)載體T導(dǎo)入小鼠的受精卵細(xì)胞中，經(jīng)篩選后獲得細(xì)胞中含一個(gè)表達(dá)載體T的轉(zhuǎn)基因小鼠a(不含Cre酶)。小鼠a的腦組織細(xì)胞和其他組織細(xì)胞的色彩分別是紅色和無(wú)色。(3)已知兩個(gè)loxP1之間或兩個(gè)loxP2之間的基因，最多會(huì)被Cre酶敲除一次。研究者將Cre酶基因與病毒基因重組構(gòu)建Cre病毒，然后將Cre病毒注入細(xì)胞中含一個(gè)表達(dá)載體T的轉(zhuǎn)基因小鼠A體內(nèi)，出現(xiàn)“腦彩虹”現(xiàn)象，小鼠A的一個(gè)腦細(xì)胞的色彩為紅色或黃色或藍(lán)色。(4