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1DB14/T1384—2017羊主要寄生蟲(chóng)病防控技術(shù)規(guī)程本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了羊主要寄生蟲(chóng)病的常規(guī)檢測(cè)和防控措施。本標(biāo)準(zhǔn)適用于羊場(chǎng)主要寄生蟲(chóng)病的防控。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB16548病害動(dòng)物和病害動(dòng)物產(chǎn)品生物安全處理規(guī)程GB16549畜禽產(chǎn)地檢疫規(guī)范GB16567種畜禽調(diào)運(yùn)檢疫技術(shù)規(guī)范NY5027無(wú)公害食品畜禽飲用水水質(zhì)NY5030無(wú)公害食品畜禽飼養(yǎng)獸藥使用準(zhǔn)則NY5032無(wú)公害食品畜禽飼料和飼料添加劑使用準(zhǔn)則NY5149無(wú)公害食品肉羊飼養(yǎng)獸醫(yī)防疫準(zhǔn)則NY/T5151無(wú)公害食品肉羊飼養(yǎng)管理準(zhǔn)則中華人民共和國(guó)動(dòng)物防疫法3常規(guī)檢測(cè)3.1糞便檢查3.1.1蠕蟲(chóng)蟲(chóng)體檢測(cè)在羊體內(nèi)寄生的一些蠕蟲(chóng),常以孕卵節(jié)片、完整或不完整的蟲(chóng)體隨糞便排出體外,應(yīng)用糞便檢查法,可以肉眼或借助于顯微鏡觀察到蟲(chóng)體。方法測(cè)定參見(jiàn)附錄A。3.1.2蟲(chóng)卵檢測(cè)把糞便直接涂片或采用集卵法,借助顯微鏡觀察寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵。方法測(cè)定參見(jiàn)附錄A3.2血液內(nèi)原蟲(chóng)檢測(cè)主要是對(duì)血液內(nèi)原蟲(chóng)(泰勒焦蟲(chóng)、巴貝斯焦蟲(chóng)等)的檢測(cè)。方法參見(jiàn)附錄B。3.3體表寄生蟲(chóng)檢測(cè)主要檢測(cè)的蟲(chóng)體包括:疥螨、癢螨、羊鼻蠅、虱、蜱等。方法參見(jiàn)附錄C。4防控措施2DB14/T1384—20174.1引進(jìn)種羊檢疫按GB16549、GB16567和《中華人民共和國(guó)動(dòng)物防疫法》的規(guī)定執(zhí)行。4.2糞便無(wú)害化處理按GB16548的規(guī)定執(zhí)行。4.3飲水、用具及飼草衛(wèi)生飲水水質(zhì)應(yīng)符合NY5027的規(guī)定;飼料和飼料原料應(yīng)符合NY5032的規(guī)定;飼養(yǎng)用具應(yīng)符合NY/T5151的規(guī)定。4.4防止傳播媒介傳播滅鼠、滅蚊蠅應(yīng)符合NY/T5151的規(guī)定。加強(qiáng)中間宿主動(dòng)物的管理,羊舍周?chē)桂B(yǎng)狗、貓,并防止野狗、貓等動(dòng)物侵襲。如養(yǎng)狗、貓,禁止狗、貓吃生肉并要定期驅(qū)蟲(chóng),狗、貓的糞便及時(shí)進(jìn)行清理,進(jìn)行無(wú)害化處理,避免其糞便污染飼料、飲水。消滅養(yǎng)殖區(qū)、羊舍的蚊蠅,防止傳播寄生蟲(chóng)等病原體。同時(shí)消滅河、灣、塘、溝等處的水源中的地螺,用0.5%硫酸銅溶液或6%四聚乙醛(蝸牛敵每年噴灑1~2次。禁止飼喂低洼、湖泊池塘等處帶有地螺的飼草。4.5驅(qū)蟲(chóng)4.5.1消化道寄生蟲(chóng)的驅(qū)除4.5.1.1消化道寄生蟲(chóng)的種類(lèi)及驅(qū)蟲(chóng)藥物選擇驅(qū)蟲(chóng)藥物的選擇及使用應(yīng)符合NY5030的規(guī)定。具體見(jiàn)表1。表1消化道寄生蟲(chóng)的種類(lèi)及驅(qū)蟲(chóng)藥物的選擇4.5.1.2驅(qū)蟲(chóng)時(shí)間3DB14/T1384—2017消化道驅(qū)蟲(chóng)應(yīng)選擇在每年冬季(以1月中旬為宜)進(jìn)行,可全部驅(qū)出秋末初冬感染的所有幼蟲(chóng)和少量殘存的成蟲(chóng),可有效保護(hù)羊度冬過(guò)春,減少春季死亡;驅(qū)出的幼蟲(chóng)、成蟲(chóng)和蟲(chóng)卵會(huì)很快死亡,起到無(wú)害驅(qū)蟲(chóng)的目的,防止春季高潮。母羊的驅(qū)蟲(chóng)應(yīng)在配種前25d進(jìn)行;羔羊應(yīng)分別在50日齡、90日齡進(jìn)行兩次驅(qū)蟲(chóng),以后每隔3個(gè)月進(jìn)行一次驅(qū)蟲(chóng);用藥前要停食或早晨空腹投藥,用藥時(shí)飲水減少應(yīng)激。4.5.2血液寄生蟲(chóng)的驅(qū)除4.5.2.1血液寄生蟲(chóng)的種類(lèi)及驅(qū)蟲(chóng)藥物選擇見(jiàn)表2。表2血液寄生蟲(chóng)的種類(lèi)及驅(qū)蟲(chóng)藥物選擇4.5.2.2驅(qū)蟲(chóng)時(shí)間應(yīng)在每年4~10月,血液原蟲(chóng)發(fā)病高潮前進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng),并對(duì)圈舍、運(yùn)動(dòng)場(chǎng)、墻壁定期噴灑殺蟲(chóng)劑驅(qū)殺中間宿主,消滅養(yǎng)殖區(qū)、羊舍的蚊蠅。4.5.3體表寄生蟲(chóng)的驅(qū)除4.5.3.1體表寄生蟲(chóng)的種類(lèi)及驅(qū)蟲(chóng)藥物選擇見(jiàn)表3。表3體表寄生蟲(chóng)的種類(lèi)及驅(qū)蟲(chóng)藥物的選擇4.5.3.2驅(qū)蟲(chóng)時(shí)間羊疥癬病具有明顯的發(fā)病規(guī)律,一般在12月至第二年4月期間發(fā)病,體外寄生蟲(chóng)的驅(qū)蟲(chóng)時(shí)間應(yīng)在剪毛后1周進(jìn)行藥?。ù杭舅幵。┖颓锛舅幵?。羊鼻蠅的防治從4月開(kāi)始藥浴,每周一次,直到成蠅消失為止。藥浴時(shí)間要保持30s,頭部要在藥浴液中浸2次。4DB14/T1384—20174.5.4患寄生蟲(chóng)病羊的治療患寄生蟲(chóng)病羊的治療應(yīng)符合NY5149的規(guī)定;患寄生蟲(chóng)病羊的治療用藥應(yīng)符合NY5030的規(guī)定。4.5.5驅(qū)蟲(chóng)后糞便的處理驅(qū)蟲(chóng)后的羊糞便要及時(shí)清理并按GB16548的規(guī)定進(jìn)行糞便的無(wú)害化處理。5DB14/T1384—2017(資料性附錄)羊寄生蟲(chóng)糞便檢查法A.1蠕蟲(chóng)蟲(chóng)體檢查法糞便中的節(jié)片和蟲(chóng)體,其中較大型者,很易發(fā)現(xiàn),對(duì)較小的,應(yīng)先將糞便收集于盆(或桶)內(nèi),加入5~10倍的清水,攪拌均勻,靜置待自然沉淀,而后將上層液體傾去。重新加入清水,攪拌沉淀,反復(fù)操作,直到上層液體清澈為止。最后將上層液傾去,取沉渣置大玻皿內(nèi),先后在白色背景和黑色背景上,以肉眼或借助于顯微鏡尋找蟲(chóng)體,有所發(fā)現(xiàn)時(shí),用鐵針或毛筆將蟲(chóng)體挑出供檢查。A.2蟲(chóng)卵檢查法(又分涂片檢查法和集卵法)A.2.1直接涂片檢查法先在載玻片上滴一些甘油與水的等量混合液,再用牙簽或火柴棍挑取少量糞便加入其中,混勻,夾去較大的或過(guò)多的糞渣,最后使玻片上留有一層均勻的糞液,其濃度的要求是將此玻片放于報(bào)紙上,能通過(guò)糞便液膜模糊地辨認(rèn)其下的字跡為合適。在糞膜上覆以蓋玻片,置顯微鏡下檢查。檢查時(shí)應(yīng)順序地查遍蓋玻片下的所有部分。A.2.2集卵法將分散在糞便中的蟲(chóng)卵集中起來(lái),再行檢查,以提高檢出率。所采用的方法一般有二種類(lèi)型。其一是利用蟲(chóng)卵和糞渣中其它成分的比重的差別,而將其集中。蟲(chóng)卵的比重一般比水略重,但輕于飽和食鹽水(在1000mL毫升水中加食鹽380g,比重約1.18)。當(dāng)糞便中的蟲(chóng)卵在水中時(shí)則沉于水底,而糞便中的一些飼料纖維和可溶性物則混于或溶于糞液中。當(dāng)糞便以飽和鹽水稀釋時(shí),蟲(chóng)卵則漂浮于溶液表面,而有些較重的糞渣則下沉于底部。這樣根據(jù)蟲(chóng)卵在不同液體中沉或浮的情況,而采取沉渣或浮起物檢查,就可以在其中檢查到比較多的蟲(chóng)卵,而提高檢出率。蟲(chóng)卵在溶液中下沉或浮起的時(shí)間,受到溶液粘稠度的影響,一般需20min~60min。有時(shí)將糞液放離心管中,在離心機(jī)內(nèi)離心,利用離心力加速其中蟲(chóng)卵的下沉或浮起的時(shí)間。A-.-蟲(chóng)毫毫并并錐錐2膜紅紅染染用,,,,。。是,體濃這這此此,,胞和胞和先先染時(shí)時(shí)周固定集再血血,沉沉進(jìn)進(jìn)沉沉感感色定,,)后加然漿漿淀淀血片行行)染染降降可3,其-制制定,,細(xì)細(xì)固用772研胞胞述述將水水紅紅,可5查查正正,,將無(wú)懸懸.將將,色色次胞胞液染分勻勻其其上干干,的的,搖,0原原,,搖檢即直滴,,,和分分中中查查分分,,,是是重重,為,,過(guò)瑞,用用層層倒,鐘的的管管以以色性,,一氏氏,,內(nèi)22用用法錐錐離離%%甘次次,則則色,,上,溫,后毫,入入售酸酸焦焦鐘鐘鐘鐘成,,濃濃易易,置每26DB14/T1384—2017(資料性附錄)血液內(nèi)原蟲(chóng)檢查法B.1鮮血壓滴標(biāo)本檢查將采出的血液,滴在潔凈的載玻片上,加等量的生理鹽水與之混合,覆以蓋玻片,立即放顯微鏡下用低倍鏡檢查,發(fā)現(xiàn)有運(yùn)動(dòng)的可疑蟲(chóng)體時(shí),可再換高倍鏡檢查。冬季室溫過(guò)低,應(yīng)先將玻片在酒精燈上或爐旁略加溫,以保持蟲(chóng)體的活力。由于蟲(chóng)體未染色,檢查時(shí)應(yīng)使視野中的光線弱些。本法適用于檢查伊氏錐蟲(chóng)。B.2涂片染色標(biāo)本檢查采血,滴于載玻片之一端,按常規(guī)推制成血片,并晾干。滴甲醇2~3滴于血膜上,使其固定,而后用姬氏或瑞氏液染色。染后用油浸鏡頭檢查。本法適用于各種血液原蟲(chóng)。B.2.1姬氏染色法取市售姬氏染色粉0.5g,中性純甘油25mL,無(wú)水中性甲醇25mL。先將姬氏染色粉置研缽中,加少量甘油充分研磨,再加再磨,直到甘油全部加完為止。將其倒入60mL~100mL容量的棕色小口試劑瓶中;在研缽中加少量甲醇以沖洗甘油染液,沖洗液仍傾入上述瓶中,再加再洗再傾入,直至25mL甲醇全部用完為止。塞緊瓶塞,充分搖勻,而后將瓶置于65℃溫箱中24h或室溫內(nèi)3~5d,并不時(shí)搖動(dòng),此即為原液。染色時(shí)將原液2mL加到中性蒸餾水100mL中,即為染液。染液加于血膜上染色30min,后用水洗2min~5min,晾干,鏡檢。B.2.2瑞氏染色法以市售的瑞氏染色粉0.2g,置棕色小口試劑瓶中,加入無(wú)水中性甲醇100mL,加塞,置室溫內(nèi),每日搖4min~5min,一周后可用。如需急用,可將染色粉0.2g,置研缽中,加中性甘油3.0mL,充分研勻,然后以100mL甲醇,分次沖洗研缽,沖洗液均倒入瓶?jī)?nèi),搖勻即成。本法染色時(shí),血片不必預(yù)先固定,可將染液5~8滴直接加到未固定的血膜上,靜置2min(此時(shí)作用是固定),其后加等量蒸餾水于染液上,搖勻,過(guò)3min~5min(此時(shí)為染色)后,流水沖洗,晾干,鏡檢。B.3蟲(chóng)體濃集法血液中的蟲(chóng)體較少時(shí),不易查出蟲(chóng)體。為此,常先進(jìn)行集蟲(chóng),再行制片檢查。其操作過(guò)程是,在離心管中加2%的檸檬酸鈉生理鹽水3mL~4mL,再加病畜血液6mL~7mL,混勻后,以500轉(zhuǎn)/min的速度,離心5min,使其中大部分紅細(xì)胞沉降;而后將含有少量紅細(xì)胞,白細(xì)胞和蟲(chóng)體的上層血漿,用吸管移入另一離心管中,并在這血漿中補(bǔ)加一些生理鹽水,將此管以2500轉(zhuǎn)/min的速度離心10min,可得到沉淀物。取此沉淀物制成抹片,按上述染色法染色檢查。此法適用于伊氏錐蟲(chóng)病和焦蟲(chóng)病。其原理是錐蟲(chóng)和感染有焦蟲(chóng)的紅細(xì)胞較正常紅細(xì)胞的比重為輕,所以在第一次沉淀時(shí),正常紅細(xì)胞下降,而錐蟲(chóng)和感染有焦蟲(chóng)的紅細(xì)胞尚懸浮在血漿中。第二次離心沉淀時(shí),則將其濃集于管底。7DB14/T1384—2017(資料性附錄)羊體表寄生蟲(chóng)檢查法C.1病料的采取疥螨、癢螨等大多數(shù)寄生于家畜的體表或皮內(nèi),因此應(yīng)刮取皮屑,置于顯微鏡下,尋找蟲(chóng)體或蟲(chóng)卵。刮取皮屑的方法甚為重要,應(yīng)選擇患病皮膚與健康皮膚交界處,這里的螨較多。刮取時(shí)先剪毛,取凸刃小刀,在酒精燈上消毒,用手握刀,使刀刃與皮膚表面垂直,刮取皮屑,直到皮膚輕微出血(此點(diǎn)對(duì)檢查寄生于皮內(nèi)的疥螨尤為重要)。在野外進(jìn)行工作時(shí),為了避免風(fēng)將刮下的皮屑吹去,可根據(jù)所采用的檢查的方法的不同,在刀上先蘸一些水、液體石蠟或5%的氫氧化鈉溶液,這樣,可使皮屑粘附在刀上。將刮下的皮屑集中于培氏皿或試管內(nèi),帶回供檢查。蠕形螨病,可用力擠壓病變部,擠出膿液,將膿液攤于載玻片上供檢查。C.2檢查方法C.2.1直接檢查法在沒(méi)有顯微鏡的條件下,可將刮下的干燥皮屑,放于培養(yǎng)皿內(nèi)或黑紙上,在日光下曝曬,或用熱水或爐火等對(duì)皿底或黑紙底面給以40℃~50℃的加溫,經(jīng)30min~40min后,移去皮屑,用肉眼觀察(如在培養(yǎng)皿中,在觀察時(shí)則應(yīng)在皿下襯以黑色背景),可見(jiàn)白色的蟲(chóng)體在黑色背景上移動(dòng)。此法較適用于體形較大的螨(如癢螨)。C.2.2顯微鏡直接檢查法將刮下的皮屑,放于載玻片上,滴加氫氧化鈉,覆以一張蓋玻片。搓壓玻片使病料散開(kāi),置顯微鏡下檢查。氫氧化鈉有透明皮屑的作用,使其中蟲(chóng)體易被發(fā)現(xiàn)。C.2.3蟲(chóng)體濃集法為了在較多的病料中,檢出其中較少的蟲(chóng)體,而提高檢出率,可采用濃集法。此法先取較多的病料,置于試管中,加入10%氫氧化鈉溶液。浸泡過(guò)夜(如急待檢查可在酒精燈上煮數(shù)分鐘),使皮屑溶解,蟲(chóng)體自皮屑中分離出來(lái)。而后待其自然沉淀(或以2000轉(zhuǎn)/min的速度離心沉淀5min),蟲(chóng)體即沉于管底,棄去上層液,吸取沉渣檢查;或向沉渣中加入60%硫代硫酸鈉溶液,直立待蟲(chóng)體上浮,再取表面液體檢查。C.2.4溫水檢查法將病料浸入40℃~45℃的溫水里,置恒溫箱中,1h~2h后,將其傾入表面玻璃上,顯微鏡下檢查?;铗龑⒃跍?zé)岬淖饔孟?,由皮屑?nèi)爬出,集結(jié)成團(tuán),沉于水底部。C.2.5培養(yǎng)皿內(nèi)加溫法將刮取到的干的病料,放于培養(yǎng)皿內(nèi),加蓋。將培養(yǎng)皿放于盛有
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