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文檔簡介
大腸桿菌病的實驗室診斷技術實訓目標(1)學會犬、貓大腸桿菌病的細菌學診斷方法;(2)學會犬、貓大腸桿菌病血清學診斷技術。主要儀器設備與場地設備材料:病料、革蘭氏染色液、麥康凱瓊脂平板培養(yǎng)基、伊紅美蘭培養(yǎng)基、遠藤氏培養(yǎng)基、生化反應微量發(fā)酵管、大腸桿菌瓊脂擴散抗原、標準陽性血清和標準陰性血清、l%硫柳汞溶液、pH6.4的0.0lmol/L磷酸鹽緩沖(PBS)溶液、生理鹽水、酒精燈、打孔器、打孔圖樣、培養(yǎng)箱、毛細吸管等。場地:傳染病實驗室。病原大腸桿菌直接鏡檢檢查方法采集急性病例的肝、脾、心血、腸系膜淋巴結以及腸內容物等。作觸片或涂片;血液、尿液可以用一次性注射器取一滴涂片。自然干燥。將干燥好的抹片,涂抹面向上,作加熱進行固定。革蘭氏染色鏡檢。病原大腸桿菌的分離培養(yǎng)與鑒定取上述病料接種于麥康凱瓊脂平板、伊紅美蘭、遠藤氏培養(yǎng)基上,置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)18~24hr后,觀察。如在麥康凱瓊脂平板形成粉紅的菌落,在伊紅美蘭培養(yǎng)基上形成黑色具有金屬光澤的菌落,在遠藤氏培養(yǎng)基上,形成深紅色,并有金屬光澤的,即為陽性。大腸桿菌能發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、甘露醇、木糖、阿拉伯糖等,均產酸產氣。瓊脂擴散試驗檢測大腸桿菌腸毒素1、制備瓊脂平板2、打孔3、
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