山東省濟(jì)寧市部分學(xué)校2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期3月大聯(lián)考生物試題（解析版）

高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1山東省濟(jì)寧市部分學(xué)校2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期3月大聯(lián)考試題注意事項(xiàng)：1.答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、考場號、座位號、準(zhǔn)考證號填寫在答題卡上。2.回答選擇題時，選出每小題〖答案〗后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的〖答案〗標(biāo)號涂黑，如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他〖答案〗標(biāo)號?；卮鸱沁x擇題時，將〖答案〗寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3.考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回?？荚嚂r間為90分鐘，滿分100分一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求。1.如圖為將胡蘿卜的離體組織在一定條件下培育形成試管苗的過程示意圖，有關(guān)敘述正確的是（）A.利用此過程獲得的試管苗可能為雜合子B.①、②過程中均發(fā)生細(xì)胞的增殖和分化C.多倍體植株的培育需經(jīng)過如圖所示過程D.對愈傷組織細(xì)胞進(jìn)行處理使其發(fā)生突變，就可以得到對人們有用的新品種〖答案〗A〖祥解〗分析題圖可知，圖示為植物組織培養(yǎng)技術(shù)。圖中①是脫分化過程，②為再分化并發(fā)育為試管苗的過程。【詳析】A、分析題圖可知，圖示為植物組織培養(yǎng)技術(shù)，利用此過程獲得的試管苗的基因型與親本的基因型相同，可能為雜合子，也可能為純合子，A正確；B、圖中①是脫分化過程，沒有發(fā)生細(xì)胞分化，B錯誤；C、多倍體植株的培育需利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，不需要經(jīng)過組織培養(yǎng)，C錯誤；D、對愈傷組織細(xì)胞進(jìn)行處理使其發(fā)生突變，由于基因突變具有不定向性，因此不一定能得到人們有用的品種，D錯誤。故選A。2.下列有關(guān)菊花組織培養(yǎng)的敘述，錯誤的是（）A.外植體一般選自于未開花植株的莖上部新萌生的嫩枝B.培育菊花叢狀苗的過程可以不經(jīng)歷脫分化過程C.培養(yǎng)形成的愈傷組織可繼續(xù)在原培養(yǎng)基中分化形成植株D.用藥劑對外植體消毒時，要兼顧消毒效果和植物的耐受性〖答案〗C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性?！驹斘觥緼、在以快速繁殖為主要目的時，菊花未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝是最為常用的外植體，因?yàn)樵撎幖?xì)胞分裂能力強(qiáng)、分化程度低，全能性容易表達(dá)，A正確；B、從帶芽的莖段上長出叢狀苗不需要經(jīng)歷脫分化，長出的叢狀苗需分株，B正確；C、培養(yǎng)形成的愈傷組織需要轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基中才能再分化形成根和芽，進(jìn)而發(fā)育成植株，C錯誤；D、外植體接種前常進(jìn)行流水沖洗、酒精處理、消毒液處理等消毒措施，要兼顧消毒效果和植物的耐受性，最后為了避免消毒液的危害，還需要用無菌水清洗三次，D正確。故選C。3.下圖表示用仙臺病毒誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的部分過程，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.細(xì)胞a和細(xì)胞b必須為同種細(xì)胞才能融合B.細(xì)胞c同時有細(xì)胞a和細(xì)胞b的遺傳物質(zhì)C.該融合過程體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有選擇透過性D.植物細(xì)胞的融合過程與動物細(xì)胞完全相同〖答案〗B〖祥解〗細(xì)胞工程是生物工程的一個重要方面?？偟膩碚f，它是應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的理論和方法，按照人們的設(shè)計(jì)藍(lán)圖，進(jìn)行在細(xì)胞水平上的遺傳操作及進(jìn)行大規(guī)模的細(xì)胞和組織培養(yǎng)。當(dāng)前細(xì)胞工程所涉及的主要技術(shù)領(lǐng)域有細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合、細(xì)胞拆合、染色體操作及基因轉(zhuǎn)移等方面。通過細(xì)胞工程可以生產(chǎn)有用的生物產(chǎn)品或培養(yǎng)有價值的植株，并可以產(chǎn)生新的物種或品系。【詳析】A、不同種的細(xì)胞也能融合，如人、鼠細(xì)胞融合，A錯誤；B、如題圖所示，細(xì)胞a和細(xì)胞b融合成一個細(xì)胞，細(xì)胞c同時有細(xì)胞a和細(xì)胞b的遺傳物質(zhì)，B正確；C、該融合過程體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有一定的流動性，C錯誤；D、植物細(xì)胞的融合通常要先去除細(xì)胞壁，其細(xì)胞融合的過程與動物細(xì)胞不完全相同，D錯誤。故選B。4.理論上來說，正常的植物細(xì)胞都具有全能性。下列有關(guān)植物細(xì)胞全能性的敘述，錯誤的是（）A.植物細(xì)胞具有全能性的原因是細(xì)胞中含有與發(fā)育成完整個體的全部信息B.一粒玉米種子發(fā)育成完整植株的過程體現(xiàn)了植物細(xì)胞全能性C.一般來說，植物體內(nèi)分化程度越高的體細(xì)胞，其全能性越低D.花藥在體外被誘導(dǎo)成完整的單倍體植株不能體現(xiàn)體細(xì)胞全能性〖答案〗B〖祥解〗細(xì)胞的全能性：（1）概念：細(xì)胞的全能性是指細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后，仍具有產(chǎn)生完整有機(jī)體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能和特性。（2）細(xì)胞具有全能性的原因：細(xì)胞中含有該生物生長發(fā)育所需要的全部遺傳信息。（3）細(xì)胞全能性大小：受精卵>干細(xì)胞>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞。（4）細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的條件：離體、適宜的營養(yǎng)條件、適宜的環(huán)境條件?！驹斘觥緼、正常的植物體細(xì)胞經(jīng)受精卵有絲分裂產(chǎn)生相同的細(xì)胞，這些相同的細(xì)胞再經(jīng)基因的選擇性表達(dá)分化成不同功能的細(xì)胞，這些細(xì)胞仍含有與受精卵相同的本物種生長、發(fā)育所需的全部遺傳信息；正常的植物生殖細(xì)胞經(jīng)原始生殖細(xì)胞減數(shù)分裂產(chǎn)生，仍含有本物種生長、發(fā)育所需的全套遺傳信息，因此植物細(xì)胞即使分化后仍具全能性，A正確；B、玉米種子中含有胚，種子發(fā)育成植株是胚發(fā)育成個體的過程，是正常的生長發(fā)育過程，不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，B錯誤；C、植物細(xì)胞的全能性與植物細(xì)胞的分化程度相關(guān)，一般來說，分化程度越高，越難體現(xiàn)出細(xì)胞的全能性，C正確；D、植物花藥在體外被誘導(dǎo)成為完整的單倍體植株，利用的是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，體現(xiàn)的是生殖細(xì)胞的全能性而不是體細(xì)胞全能性，D正確。故選B。5.粉美人萱草形態(tài)優(yōu)美、色彩艷麗，具有極大的栽培價值。剪取健壯、無病蟲害的單株粉美人萱草的新鮮花莖進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列相關(guān)說法錯誤的是（）A.首選花序軸作為外植體，脫分化后形成具有特定結(jié)構(gòu)和功能的愈傷組織B.取樣時間也會影響粉美人萱草無菌材料的獲得C.不同種類植物對培養(yǎng)基的成分如激素濃度、比例要求不同，再生能力也存在差異D.為防止一些代謝產(chǎn)物的積累等因素影響培養(yǎng)物生長，一般需要在2～4周后將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至新鮮培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)〖答案〗A〖祥解〗1、植物組織培養(yǎng)的過程：離體的植物組織、器官或細(xì)胞（外植體）愈傷組織胚狀體→植株（新植體）。2、植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長素和細(xì)胞分裂素）；決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”?！驹斘觥緼、細(xì)胞若離體后在培養(yǎng)基上培養(yǎng)時會由原來的分化狀態(tài)，失去原有的某些具有特定結(jié)構(gòu)和功能的細(xì)胞結(jié)構(gòu)（如葉肉細(xì)胞的葉綠體等），變成分生狀態(tài)的細(xì)胞，分裂產(chǎn)生愈傷組織，即愈傷組織是沒有特定功能的，A錯誤；B、幼嫩的材料容易在酒精中失綠或被酒精殺死，不同取樣時期消毒處理方法有差別，故取樣時間也會影響粉美人萱草無菌材料的獲得，B正確；C、植物生命活動受到激素、環(huán)境以及基因表達(dá)的共同調(diào)控，不同種類植物對培養(yǎng)基的成分如激素濃度、比例要求不同，再生能力也存在差異，C正確；D、為了防止由于營養(yǎng)物質(zhì)的枯竭，水分的散失，以及一些組織代謝產(chǎn)物的積累，必須將組織及時轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上，以免影響細(xì)胞正常生命活動，D正確。故選A。6.制備單克隆抗體所采用的細(xì)胞工程技術(shù)包括()①細(xì)胞培養(yǎng)②細(xì)胞融合③胚胎移植④細(xì)胞核移植A.①② B.①③C.②③ D.③④〖答案〗A〖祥解〗單克隆抗體的制備流程：人工誘導(dǎo)經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，通過培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞得到單克隆抗體，整個過程不涉及胚胎移植和細(xì)胞核移植這兩項(xiàng)技術(shù)。單克隆抗體主要涉及的細(xì)胞工程技術(shù)包括動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合技術(shù)等?！驹斘觥勘绢}考查單克隆抗體的制備原理。制備單克隆抗體時，首先采用細(xì)胞融合技術(shù)得到雜交瘤細(xì)胞，再采用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，故選A。7.試管嬰兒、試管苗和克隆羊三者均屬于生物工程技術(shù)的杰出成果，下面敘述正確的是（）A.都需細(xì)胞工程的技術(shù)支持 B.都能保持母本性狀屬于無性生殖C.都充分體現(xiàn)了體細(xì)胞的全能性 D.都可能發(fā)生突變和基因重組〖答案〗A〖祥解〗1、試管動物技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。2、植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理為植物體細(xì)胞的全能性，即已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整植株的潛能；培養(yǎng)過程的順序是離體植物器官、組織或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，再分化形成根、芽等器官進(jìn)而形成新的植物體。3、動物核移植是將將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體，核移植得到的動物稱克隆動物?！驹斘觥緼、試管嬰兒涉及到的技術(shù)是體外受精和胚胎移植，屬于胚胎工程的技術(shù)，胚胎工程需要動物細(xì)胞工程的技術(shù)支持，通過植物組織培養(yǎng)獲得試管苗，以及核移植和胚胎移植獲得的克隆羊?qū)儆诩?xì)胞工程的相關(guān)技術(shù)，A正確；B、試管嬰兒屬于有性生殖，具有兩個親本的遺傳特性，植物組織培養(yǎng)獲得試管苗，屬于無性生殖，克隆羊?qū)儆跓o性生殖，遺傳特性主要來源于供體細(xì)胞，B錯誤；C、試管嬰兒體現(xiàn)受精卵的全能性，試管苗體現(xiàn)植物體細(xì)胞的全能性，克隆羊體現(xiàn)動物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，C錯誤；D、植物組織培養(yǎng)獲得試管苗和克隆羊都屬于無性生殖，不能發(fā)生基因重組，D錯誤。故選A。8.將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與一種B淋巴細(xì)胞融合，融合后的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體，其依據(jù)是（）A.骨髓瘤細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖B.B淋巴細(xì)胞只有與骨髓瘤細(xì)胞融合才能產(chǎn)生抗體C.骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖，且能產(chǎn)生抗體D.B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但在體外培養(yǎng)不能無限增殖，骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖〖答案〗D〖祥解〗在單克隆抗體的制備過程中，需要用漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合；誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合時，使用聚乙二醇或滅活的病毒作為誘導(dǎo)劑；動物細(xì)胞融合后，經(jīng)過篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞具有既能無限增殖又能分泌單一抗體的特點(diǎn)?！驹斘觥緼、骨髓瘤細(xì)胞不能產(chǎn)生專一性抗體，但在體外能無限繁殖，A錯誤；B、B淋巴細(xì)胞只有在抗原的刺激下才能增殖分化形成效應(yīng)B細(xì)胞（漿細(xì)胞），才能產(chǎn)生特異性抗體，B錯誤；C、骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體，C錯誤；D、B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖，骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖，D正確。故選D。9.如圖為科學(xué)家在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)“人造牛肉”的簡要過程，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.“人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)，但環(huán)境污染嚴(yán)重B.用胃蛋白酶處理牛肌肉組織，獲得分裂能力強(qiáng)的肌肉母細(xì)胞C.生物反應(yīng)器內(nèi)應(yīng)控制適宜的溫度，并充入純氧保證細(xì)胞呼吸D.培養(yǎng)瓶中的肌肉母細(xì)胞需定期用胰蛋白酶處理，分瓶后才能繼續(xù)增殖〖答案〗D〖祥解〗用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中懸液中的細(xì)胞會很快貼附在瓶壁上。動物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%CO2?！叭嗽炫Ｈ狻钡呐囵B(yǎng)不僅產(chǎn)量高，并可以減少成本和降低環(huán)境污染。【詳析】A、理論上來說，僅來自1只動物的干細(xì)胞，可制成的肉品數(shù)量，比宰殺1頭牛還多100萬倍，可有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)，同時也可減少對土地、飲用水和飼料的需求，且溫室氣體等其他環(huán)境污染物也會減少，A錯誤；B、胰蛋白酶處理動物組織，可以使組織分散成單個細(xì)胞，利于動物細(xì)胞培養(yǎng)，B錯誤；C、動物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%CO2，C錯誤；D、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中懸液中的細(xì)胞會很快貼附在瓶壁上，培養(yǎng)瓶中的肌肉母細(xì)胞需定期用胰蛋白酶處理，分瓶后才能繼續(xù)增殖，D正確。故選D。10.列有關(guān)哺乳動物早期胚胎發(fā)育的敘述正確的是（）A.受精完成并開始發(fā)育的標(biāo)志是在卵細(xì)胞膜和透明帶之間觀察到兩個極體B.受精卵在輸卵管內(nèi)進(jìn)行卵裂時，細(xì)胞數(shù)量增加但胚胎總體積并不增加C.受精卵發(fā)育為桑葚胚的過程是在透明帶內(nèi)完成的，孵化后進(jìn)入囊胚期D.胚胎發(fā)育至原腸胚時期即開始了細(xì)胞分化，隨后發(fā)育形成三個胚層〖答案〗B〖祥解〗1、卵細(xì)胞形成過程，其中減數(shù)第一次分裂是在雌性動物排卵前后完成的，場所在卵巢；減數(shù)第二次分裂是在受精過程中完成的，場所在輸卵管中。2、受精作用的標(biāo)志：在卵黃膜和透明帶之間的間隙可以觀察到兩個極體（一個是第一極體，還有一個是第二極體）?！驹斘觥緼、在卵黃膜和透明帶之間觀察到兩個極體，說明卵細(xì)胞已經(jīng)完成了受精，這是判斷卵細(xì)胞是否受精的重要標(biāo)志，不是判斷開始發(fā)育的標(biāo)志，A錯誤；B、形成的受精卵在輸卵管內(nèi)開始進(jìn)行卵裂，卵裂過程中，每個細(xì)胞的體積不斷縮小，細(xì)胞的總體積基本不變或略有縮小，故卵裂過程中細(xì)胞數(shù)量增加但胚胎總體積基本不增加，B正確；C、孵化是指囊胚從透明帶出來，孵化后進(jìn)入原腸胚階段，C錯誤；D、細(xì)胞分化開始于囊胚時期，D錯誤。故選B。11.我國科學(xué)家利用猴胚胎干細(xì)胞首次創(chuàng)造了人工“猴胚胎”。研究流程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.睪丸中的精原干細(xì)胞也屬于胚胎干細(xì)胞B.③處的細(xì)胞將來可發(fā)育成胎兒的各種組織C.需要在充滿CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞D.人工“猴胚胎”的遺傳特性與代孕受體保持一致〖答案〗B〖祥解〗胚胎干細(xì)胞具有全能性，利用猴胚胎干細(xì)胞首次創(chuàng)造了人工“猴胚胎”，是利用了胚胎干細(xì)胞的全能性?！驹斘觥緼、由胚胎干細(xì)胞來自于早期胚胎或早期原始性腺，精原干細(xì)胞不屬于胚胎干細(xì)胞，A錯誤；B、③是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞，具有發(fā)育全能性，可發(fā)育成胎兒各種組織，B正確；C、動物細(xì)胞培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)需要在95%空氣和5%二氧化碳的環(huán)境中培養(yǎng)，C錯誤；D、人工“猴胚胎”的遺傳特性與提供胚胎干細(xì)胞的供體基本一致，代孕受體提供營養(yǎng)，D錯誤。故選B。12.采用機(jī)械方法將早期胚胎切割后移植，可以獲得同卵雙胎或多胎，下列說法正確的是（）A.胚胎分割時，應(yīng)選取發(fā)育良好、形態(tài)正常的囊胚或原腸胚B.利用胚胎分割技術(shù)可以獲得兩個基因型完全相同的胚胎C.胚胎分割時，需將囊胚的滋養(yǎng)層進(jìn)行均等分割D.胚胎移植充分發(fā)揮雌性優(yōu)良受體的繁殖潛能〖答案〗B〖祥解〗1、胚胎分割的特點(diǎn)：來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一。2、進(jìn)行胚胎分割時，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。對囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。【詳析】A、胚胎分割時，應(yīng)選取發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，A錯誤；B、來自同一個胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，因此利用胚胎分割技術(shù)可以獲得兩個基因型完全相同的胚胎，B正確；C、胚胎分割時需將囊胚階段的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割，C錯誤；D、胚胎移植充分發(fā)揮雌性優(yōu)良供體的繁殖潛能，產(chǎn)生更多的優(yōu)良后代，D錯誤。故選B。13.下列關(guān)于DNA重組技術(shù)基本工具說法，正確的是（）A.DNA連接酶可催化脫氧核苷酸鏈間形成氫鍵B.限制酶切割DNA后一定能產(chǎn)生黏性末端C.質(zhì)粒是基因工程中唯一的載體D.微生物中的限制性核酸內(nèi)切酶對自身DNA無損害作用〖答案〗D〖祥解〗基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種。（2）DNA連接酶：據(jù)酶的來源不同分為兩類：E．coliDNA連接酶、T4DNA連接酶。這二者都能連接黏性末端，此外T4DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時的效率比較低。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒等。【詳析】A、DNA連接酶可催化脫氧核苷酸鏈間形成磷酸二酯鍵，A錯誤；B、限制酶切割DNA后能產(chǎn)生黏性末端或平末端，B錯誤；C、質(zhì)粒是基因工程中常用的載體，噬菌體的衍生物、動植物病毒也可以作為基因工程的運(yùn)載體，C錯誤；D、微生物中的限制酶對自身DNA無損害作用，主要用于切割外源DNA，D正確。故選D。14.關(guān)于“DNA的粗提取及鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯誤的是（）A.初步分離DNA與蛋白質(zhì)的原理是DNA不溶于酒精而蛋白質(zhì)溶于酒精B.鑒定提取物中有DNA的原理是在常溫下，DNA遇二苯胺試劑呈藍(lán)色C.在提取白色絲狀物時單向攪拌比雙向攪拌更有利于獲得結(jié)構(gòu)完整的DNAD.往洋蔥研磨液經(jīng)離心后的上清液中加入冷酒精的目的是獲得含雜質(zhì)少的DNA〖答案〗B〖祥解〗DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精?！驹斘觥緼、初步分離DNA與蛋白質(zhì)原理是DNA不溶于酒精而蛋白質(zhì)溶于酒精，A正確；B、鑒定提取物中有DNA的原理是在水浴加熱條件下，DNA遇二苯胺試劑呈藍(lán)色，B錯誤；C、在提取白色絲狀物時單向攪拌比雙向攪拌更有利于獲得結(jié)構(gòu)完整的DNA，C正確；D、往洋蔥研磨液經(jīng)離心后的上清液中加入冷酒精的目的是獲得含雜質(zhì)少的DNA，D正確。故選B。15.RDX是一種彈藥使用后殘留的危險污染物。研究人員將兩個源于細(xì)菌的RDX降解酶基因XplA和XplB插入柳枝稷草染色體中，如圖所示，使柳枝稷草獲得降解實(shí)彈射擊場土壤中RDX的能力。若要通過PCR檢測所獲轉(zhuǎn)基因柳枝稷草中是否含有正確插入的XplA和XplB基因，應(yīng)選擇的引物組合是（）A.引物1+引物3B.引物1+引物4C.引物2+引物3D.引物2+引物4〖答案〗A〖祥解〗引物是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對的短單鏈核酸。用于PCR的引物長度通常為20~30個核苷酸，檢測所獲轉(zhuǎn)基因柳枝稷草中是否含有正確插入的XplA和XplB基因，應(yīng)該是擴(kuò)增包括XplA和XplB基因和兩側(cè)T-DNA基因片段?！驹斘觥緼BCD、根據(jù)啟動子的位置，若正確插入，模板鏈應(yīng)為甲圖中下鏈，則引物1應(yīng)與下鏈的3'端結(jié)合，引物3可以結(jié)合甲圖上鏈的3'端，引物

1+引物3可通過PCR檢測所獲轉(zhuǎn)基因柳枝稷草中是否含有正確插入的XplA

和

XplB

基因，A正確，BCD錯誤。故選A。二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。每小題有一個或多個選項(xiàng)符合題目要求，全部選對得3分，選對但不全的得1分，有選錯的得0分。16.花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。為培育抗黑腐病雜植株，研究者設(shè)計(jì)如下流程。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.過程①需要使用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶來處理兩種細(xì)胞B.過程②后，顯微鏡下觀察到有葉綠體的細(xì)胞即為融合細(xì)胞C.過程③的培養(yǎng)基中需加入植物激素來誘導(dǎo)脫分化和再分化D.可借助PCR技術(shù)、黑腐病菌接種實(shí)驗(yàn)對雜種植株進(jìn)行鑒定〖答案〗D〖祥解〗1、植物的體細(xì)胞雜交就是將同種或不同種的細(xì)胞經(jīng)過一定的誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)融合形成一個細(xì)胞，再將細(xì)胞培育成植株的過程。2、雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁是植物原生質(zhì)體融合的標(biāo)志，細(xì)胞中高爾基體與細(xì)胞壁的形成有關(guān)。3、植物體細(xì)胞雜交的優(yōu)點(diǎn)是：克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，培育遠(yuǎn)緣雜種植株。4、雜種細(xì)胞經(jīng)過植物組織培養(yǎng)的再分化過程，可選擇性表達(dá)出親本細(xì)胞的相應(yīng)性狀。5、分析題圖：圖示為采用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得抗黑腐病雜種植株的流程圖，其中①表示采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細(xì)胞壁的過程；②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過程；③是脫分化形成愈傷組織的過程?！驹斘觥緼、過程①是去除細(xì)胞壁，可用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，A錯誤；B、過程②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過程，顯微鏡下觀察有無葉綠體作為初步篩選的標(biāo)志，還需要鑒定是否具有抗黑腐病特性來確定融合細(xì)胞，B錯誤；C、過程③是脫分化形成愈傷組織的過程，沒有再分化，C錯誤；D、在分子水平上可通過PCR技術(shù)對雜種植株進(jìn)行鑒定，在個體水平上可以通過對雜種植株進(jìn)行黑腐病菌接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株，D正確。故選D。17.我國科學(xué)家首次通過把食蟹猴的胚胎干細(xì)胞注射到豬的胚胎中，培育出了“豬—猴嵌合體”仔豬（如下圖所示）。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞會因接觸抑制而停止分裂，需用胃蛋白酶處理后繼續(xù)傳代培養(yǎng)B.采集的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)至MII期才能與獲能的精子受精，進(jìn)而獲得豬胚胎C.從食蟹猴囊胚期胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)獲取胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育成各種組織、器官的潛能D.培育出的“仔豬”細(xì)胞遺傳物質(zhì)是猴細(xì)胞與豬細(xì)胞之和，具有猴和豬的融合性狀〖答案〗AD〖祥解〗動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。【詳析】A、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中會因接觸抑制而停止分裂增殖，需要用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理后繼續(xù)培養(yǎng)，A錯誤；B、體外受精時，需要將所采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，才可以與獲能精子完成受精作用，進(jìn)而獲得豬胚胎，B正確；C、胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，故從食蟹猴囊胚期胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)獲取的胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育成各種組織、器官的潛能，C正確；D、培育出的“仔豬”細(xì)胞遺傳物質(zhì)一部分來自猴細(xì)胞，一部分來自豬細(xì)胞，不是猴細(xì)胞與豬細(xì)胞之和，D錯誤。故選AD。18.我國科學(xué)家將含有人凝血因子基因的DNA片段導(dǎo)入到羊的受精卵中，由該受精卵發(fā)育而成的羊，分泌的乳汁中含有人的凝血因子，可用于治療血友病。下列敘述正確的是（）A.這項(xiàng)研究說明人和羊共用一套遺傳密碼B.該羊的乳腺細(xì)胞中含有人的凝血因子基因C.該羊分泌的乳汁中含有人的凝血因子基因D.該羊的后代也可能含有人的凝血因子基因〖答案〗ABD〖祥解〗基因能控制蛋白質(zhì)合成，生物界共用同一套遺傳密碼?；蚬こ淌侵赴凑杖藗兊脑竿M(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?！驹斘觥緼、自然界中的所有生物共用同一套遺傳密碼，這是人的凝血因子基因能在羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)的基礎(chǔ)，A正確；BC、該羊分泌的乳汁中含有人的凝血因子，說明該羊的乳腺細(xì)胞中含有人的凝血因子基因，但該羊的乳汁中不含有人的凝血因子基因，B正確，C錯誤；D、將含有人凝血因子基因的DNA片段注射到羊的受精卵中，培育出的轉(zhuǎn)基因羊的性腺細(xì)胞含有該基因，通過減數(shù)分裂產(chǎn)生的卵細(xì)胞可能含有該基因，其后代也可能含有人的凝血因子基因，D正確。故選ABD。19.圖1為某種質(zhì)粒簡圖，圖2表示某外源DNA上的目的基因，小箭頭所指分別為限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位點(diǎn)。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.在基因工程中若只用一種限制酶完成對質(zhì)粒和外源DNA的切割，則可選EcoRⅠB.如果將一個外源DNA分子和一個質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRⅠ酶切點(diǎn)有1個C.為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時可使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理D.一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)EcoRⅠ切割后，含有1個游離的磷酸基團(tuán)〖答案〗AC〖祥解〗限制酶：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來。（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、目的基因兩側(cè)都有，且質(zhì)粒也有的限制酶是EcoRⅠ，所以在基因工程中若只用一種限制酶完成對質(zhì)粒和外源DNA的切割，可選EcoRⅠ，A正確；B、如果將一個外源DNA分子和一個質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRⅠ酶切點(diǎn)有2個，B錯誤；C、為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時可使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理，C正確；D、一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)EcoRⅠ切割后，產(chǎn)生兩個黏性末端，含有2個游離的磷酸基團(tuán)，D錯誤。故選AC。20.研究者用EBV（一種病毒顆粒）感染動物B淋巴細(xì)胞，獲得“染色體核型穩(wěn)定”的EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞，用以解決雜交瘤細(xì)胞傳代培養(yǎng)中B淋巴細(xì)胞染色體丟失的問題。EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞能夠在HAT培養(yǎng)基中存活，但對烏本苷（Oua）敏感，骨髓瘤細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基中存活。下圖為該實(shí)驗(yàn)操作示意圖。相關(guān)敘述錯誤的是（）A.B淋巴細(xì)胞可從多次間歇注射抗原動物脾臟中獲得B.HAT培養(yǎng)基的作用主要是為了去除未融合的EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞C.未融合的EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞死亡的原因相同D.篩選后的雜交瘤細(xì)胞具有產(chǎn)生抗EBV抗體的能力〖答案〗BCD〖祥解〗單克隆抗體制備時，首先要給小鼠免疫，產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞，然后將漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)過選擇培養(yǎng)基兩次篩選，最后獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。在單克隆抗體的制備過程中，使用了動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞融合等動物細(xì)胞工程技術(shù)?！驹斘觥緼、B淋巴細(xì)胞在骨髓中發(fā)育成熟，可分布于淋巴結(jié)和脾臟等處，故B淋巴細(xì)胞可來源于抗原刺激后動物的淋巴結(jié)和脾臟等處，A正確；B、HAT培養(yǎng)基的作用主要是為讓細(xì)胞存活，而烏本苷（Oua）起篩選作用，B錯誤；C、未融合的EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞的死亡為Oua的作用，而骨髓瘤細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基中存活，C錯誤；D、本實(shí)驗(yàn)中EBV的作用是獲得“染色體核型穩(wěn)定”的EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞，而不是刺激B細(xì)胞分化成漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體，所以該雜交瘤細(xì)胞不能產(chǎn)生抗EBV的抗體，D錯誤。故選BCD。三、非選擇題：本題共5小題，共55分。21.辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域，辣椒素的獲得途徑如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）圖中①和②分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細(xì)胞的__________和__________過程，要獲得脫毒苗，對外植體的取材要求是__________。（2）圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是__________。培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素用量的比值__________（填“高”或“低”）時，有利于芽的分化。對培養(yǎng)基徹底滅菌時，應(yīng)采取的滅菌方法是___________。（3）圖中外植體的消毒所需酒精的體積分?jǐn)?shù)是___________。用酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞時，常用的酶是__________和纖維素酶。（4）細(xì)胞產(chǎn)物工廠化生產(chǎn)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)的重要應(yīng)用。高產(chǎn)細(xì)胞系須培養(yǎng)至__________，再從中提取辣椒素?！即鸢浮剑?）①.脫分化②.再分化③.切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)（2）①.瓊脂②.低③.濕熱滅菌法（高壓蒸汽滅菌法）（3）①.70%②.果膠酶（4）愈傷組織〖祥解〗分析題圖：①是脫分化過程、②是再分化過程。上面一種途徑是通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗，再從果實(shí)中獲得相應(yīng)的產(chǎn)物；下面一種途徑是采用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得大量細(xì)胞產(chǎn)物。（1）由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程稱為脫分化，脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可重新分化成根或芽等器官，這個過程叫做再分化。要獲得脫毒苗，對外植體的取材要求是切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)。（2）培養(yǎng)基中常用的凝固劑是瓊脂。生長素和細(xì)胞分裂素用量的比值低時，有利于芽的分化；反之則利于根的分化。培養(yǎng)基應(yīng)用濕熱滅菌法滅菌（高壓蒸汽滅菌法）。（3）外植體消毒所用酒精的體積分?jǐn)?shù)是70%；植物細(xì)胞的細(xì)胞壁含有纖維素和果膠，故用酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞時，常用的酶是果膠酶和纖維素酶。（4）人們期望利用植物細(xì)胞培養(yǎng)來獲得目標(biāo)產(chǎn)物，這個過程就是細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。植物細(xì)胞培養(yǎng)是指在離體條件下對單個植物細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖的技術(shù)。高產(chǎn)細(xì)胞系須在培養(yǎng)基培養(yǎng)至愈傷組織，再從中提取辣椒素。22.動物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能?，F(xiàn)在已經(jīng)廣泛應(yīng)用于多種學(xué)科的研究：新發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為制備單克隆抗體開辟了新途徑。研究表明DNA合成有兩條途徑：“S途徑”和“D途徑”，淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)有“S途徑”和“D途徑”；骨髓瘤細(xì)胞只有“D途徑”；HAT培養(yǎng)液中氨基蝶呤可以阻斷DNA合成的“D途徑”。下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖?；卮鹣铝袉栴}：⑴___________技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。⑵單克隆細(xì)胞是指__________________________________________________。⑶單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是____________。⑷雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的_____________特點(diǎn)，又具備淋巴細(xì)胞的__________特點(diǎn)。⑸圖示過程，有兩次的篩選。第一次是用HAT培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細(xì)胞，那么淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是_________，骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是_______?！即鸢浮剑?）細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù)（2）單個細(xì)胞增殖，形成的細(xì)胞群（3）特異性強(qiáng)，靈敏度高（4）在體外大量增殖（無限增殖）分泌特異性抗體（5）缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力其DNA合成途徑被氨基蝶呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制〖祥解〗單克隆抗體制備過程中兩次篩選的方法及目的：【詳析】（1）細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。（2）單克隆細(xì)胞是指單個細(xì)胞增殖，形成的細(xì)胞群。（3）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備。（4）雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的在體外大量增殖（無限增殖）的特點(diǎn)，又具備淋巴細(xì)胞能分泌特異性抗體的特點(diǎn)。（5）圖示過程中有兩次的篩選，第一次是用HAT培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細(xì)胞，那么淋巴細(xì)胞（效應(yīng)B細(xì)胞）在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力；骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是其DNA合成途徑被氨基蝶呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制。23.近年來，由于世界人口的迅速增長、生物資源的過度開發(fā)和環(huán)境污染的日漸增重等諸多問題，導(dǎo)致野生動物郊狼的物種數(shù)量不斷減少、瀕臨滅絕，采集精子或卵子開展常規(guī)輔助生殖較為困難，甚至無法完成。科研人員利用種間體細(xì)胞核移植技術(shù)（iSCNT）在野生動物遺傳資源的保護(hù)中發(fā)揮了重要作用。具體流程如下：（1）圖示過程中①是___，②是___，③通常需要激活，使其完成___進(jìn)程。（2）與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，iSCNT技術(shù)難度更___，原因是___。（3）一般來說，郊狼的耳廓組織在培養(yǎng)時除營養(yǎng)外，還需提供的條件是適宜的溫度、pH和滲透壓、___、___。（4）從生態(tài)的角度分析，iSCNT技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是___?！即鸢浮剑?）①.第一極體②.透明帶③.細(xì)胞分裂和發(fā)育（2）①.大②.體細(xì)胞分化程度高，表現(xiàn)全能性更困難（3）①.無菌、無毒的環(huán)境②.適宜的氣體環(huán)境（4）利于保護(hù)生物多樣性，維持生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性〖祥解〗動物細(xì)胞培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。（3）溫度和pH：哺乳動物多以36.5℃為宜，最適pH為7.2-7.4。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH。）（1）據(jù)圖可知，圖中①是第一極體，②是透明帶；③是重組細(xì)胞，通常需要激活，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。（2）與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，種間體細(xì)胞核移植技術(shù)（iSCNT）的成功率更低，這是由于動物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易，動物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，故與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，iSCNT技術(shù)難度更大。（3）郊狼的耳廓組織在培養(yǎng)時除營養(yǎng)外，還需提供的條件是適宜的溫度、pH和滲透壓、無菌、無毒的環(huán)境以及適宜的氣體環(huán)境（95%空氣和5%的CO2）。（4）從生態(tài)的角度分析，iSCNT技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是利于保護(hù)生物多樣性，維持生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性，故iSCNT在野生動物遺傳資源的保護(hù)中發(fā)揮了重要作用。24.北極比目魚體內(nèi)含有抗凍基因A，其編碼的抗凍蛋白中含有一段具有11個氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)與其抗凍能力呈顯著正相關(guān)。如圖是利用抗凍基因A獲得轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖。回答下列問題：（1）進(jìn)行過程①時需要____（答3種）等基本條件。（2）過程②屬于可遺傳變異中的____，判斷的依據(jù)是____。（3）圖中表示構(gòu)建表達(dá)載體的步驟是____（填序號），該過程需要的工具酶有____。（4）為了檢測抗凍番茄植株是否成功培育，應(yīng)將該植株放在____環(huán)境中培養(yǎng)。（5）欲獲得無籽番茄，應(yīng)該對番茄花進(jìn)行的處理有____。（編號選填）①人工授粉②人工去雄③施加生長素類似物④施加秋水仙素〖答案〗（1）模板（RNA）、原料（脫氧核苷三磷酸/dNTP）、能量（ATP）、酶（逆轉(zhuǎn)錄酶）、引物（2）①.基因突變②.該過程中抗凍基因A內(nèi)部發(fā)生了堿基序列的改變（堿基增添）（3）①.③②.限制酶（限制性內(nèi)切核酸酶）和DNA連接酶（4）低溫（寒冷）（5）②③〖祥解〗題圖分析，過程①是以mRNA為模板通過逆轉(zhuǎn)錄方法合成DNA并獲得目的基因，②是擴(kuò)增目的基因的過程，獲得具有多個重復(fù)序列的基因A，③是構(gòu)建基因表達(dá)載體，④是通過組織培養(yǎng)形成植株的過程。（1）過程①是以RNA為模板合成DNA的過