GBT 43966-2024 高效液相色譜-四極桿電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用法通則

高效液相色譜-四極桿電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用法通則2024-04-25發(fā)布國家市場監(jiān)督管理總局國家標準化管理委員會I前言 l2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4方法原理 5試劑和材料 6儀器設(shè)備 27試樣處理 8分析步驟及方法 9分析結(jié)果的計算 610質(zhì)量保證 11結(jié)果報告 12安全注意事項 8Ⅲ本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由中華人民共和國科學技術(shù)部提出。本文件由全國儀器分析測試標準化技術(shù)委員會(SAC/TC481)歸口。本文件起草單位：廣東省科學院測試分析研究所(中國廣州分析測試中心)、中山大學測試中心、廣東省農(nóng)業(yè)標準化協(xié)會、安捷倫科技(中國)有限公司廣州分公司、賽默飛世爾科技(中國)有限公司廣州分公司、北京吉天儀器有限公司、清華大學、貴州省分析測試研究院、山東英盛生物技術(shù)有限公司、瑞萊譜(杭州)醫(yī)療科技有限公司。1高效液相色譜-四極桿電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用法通則1范圍本文件確立了采用高效液相色譜-四極桿電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進行物質(zhì)定性和定量分析的通用規(guī)則。本文件適用于采用高效液相色譜-四極桿電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的定性和定量分析。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T4844純氦、高純氦和超純氦GB/T6041質(zhì)譜分析方法通則GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T13966分析儀器術(shù)語GB/T14599純氧、高純氧和超純氧GB/T16631高效液相色譜法通則GB/T27417—2017合格評定化學分析方法確認和驗證指南GB/T37837四極桿電感耦合等離子體質(zhì)譜方法通則JJG705液相色譜儀JJF1059.1測量不確定度評定與表示JJF1159四極桿電感耦合等離子體質(zhì)譜儀校準規(guī)范JJF1267同位素稀釋質(zhì)譜基準方法JY/T0568電感耦合等離子體質(zhì)譜分析方法通則3術(shù)語和定義GB/T6041、GB/T13966、GB/T16631、GB/T37837、JJF1159、JJF1267、JY/T0568界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。高效液相色譜-四極桿電感耦合等離子體質(zhì)譜儀highperformanceliquidchromatography-quadru-poleinductivelycoupledplasma-massspectrometer利用高效液相色譜法原理對待測組分進行分離后，通過聯(lián)用接口與四極桿電感耦合等離子體質(zhì)譜儀連接，按不同質(zhì)荷比對離子進行檢測的多元素濃度分析和同位素比值測定的儀器。2試樣溶液中待測組分以外的其他組分在測定分析時對待測組分響應(yīng)信號造成的影響。4方法原理試樣中的待測組分經(jīng)高效液相色譜儀分離，按照保留時間先后通過聯(lián)用接口系統(tǒng)進入四極桿電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，經(jīng)充分電離后根據(jù)離子的質(zhì)荷比(m/z)進行分離檢測，按其m/z及保留時間進行定性分析，按其m/z所對應(yīng)的響應(yīng)信號進行定量分析。5試劑和材料應(yīng)符合GB/T4842的要求，體積分數(shù)≥99.99%。應(yīng)符合GB/T14599的要求，體積分數(shù)≥99.999%。應(yīng)符合GB/T4844的要求，體積分數(shù)≥99.999%。應(yīng)符合GB/T6682規(guī)定的一級水標準。應(yīng)為優(yōu)級純或以上等級，不應(yīng)干擾分析，使用前應(yīng)做試劑空白分析。5.4標準物質(zhì)/標準樣品應(yīng)采用有證標準物質(zhì)/有證標準樣品。5.5標準溶液配制依次配制一系列不同濃度的待測組分標準溶液，配制標準溶液的溶劑洗脫能力應(yīng)等于或小于初始流動相，標準溶液的濃度范圍應(yīng)涵蓋試樣溶液中待測組分的含量范圍。6儀器設(shè)備主要組成部分至少應(yīng)包括高效液相色譜儀、聯(lián)用接口、四極桿電感耦合等離子體質(zhì)譜儀。高效液相色譜儀的輸液系統(tǒng)和柱溫箱性能應(yīng)符合JJG705中的規(guī)定，四極桿電感耦合等離子體質(zhì)3譜儀的性能符合JJF1159中的規(guī)定，以滿足實際分析用途為原則。聯(lián)用接口宜盡可能短，管線與霧化器之間的接頭宜盡量緊密，以減少傳輸管線的死體積。7試樣處理試樣在進入高效液相色譜-四極桿電感耦合等離子體質(zhì)譜儀之前，應(yīng)針對分析的目的、試樣性質(zhì)和測試項目選擇合適的方法進行試樣前處理。一般原則是：a)保持待測組分的穩(wěn)定；b)消除測量的干擾物質(zhì)；c)流動相與高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜儀兼容；d)防止試樣受到污染；e)盡可能提高試樣中待測組分的提取效率；f)試樣前處理的同時做空白試驗。8分析步驟及方法8.1分析步驟按照儀器操作規(guī)程開機預熱，使儀器處于待機狀態(tài)。8.1.2分析條件的選擇根據(jù)分析需要選擇流動相的種類和流速以及洗脫方式、色譜柱的種類和溫度、進樣體積、四極桿電方式等參數(shù)，必要時設(shè)置氧氣(5.1.2)流速、氦氣(5.1.3)流速，使儀器的分析性能達到最佳。一般原則是：色譜分離度不小于1.0,流動相中溶解性總固體不大于2000mg/L、流動相中有機物的濃度不超8.2干擾的消除8.2.1色譜分離度干擾分離度是衡量色譜系統(tǒng)分離效能的關(guān)鍵指標，當分離度小于1.0時，會影響定性和定量的準確性，為了提高色譜的分離度，可選用以下一種或幾種方式：a)改變流動相中各組分的比例；b)采用梯度洗脫；c)減少進樣量；d)降低流動相流速；e)改變色譜柱的溫度；f)增加色譜柱長度；g)更換色譜柱種類。8.2.2基體效應(yīng)干擾抑制或減少基體效應(yīng)干擾可選用以下一種或幾種方式：a)稀釋試樣溶液；4b)采用標準加入法；c)采用內(nèi)標法；d)去除基體；e)采用有機進樣系統(tǒng)。8.2.3同量異位素干擾可采用測定不受干擾的同位素或使用干擾校正方程來減少或消除同量異位素干擾，干擾校正方程在使用前應(yīng)經(jīng)過驗證。8.2.4多原子離子干擾減少或消除多原子離子干擾可選用以下一種或幾種方式：a)優(yōu)化操作條件，降低多原子離子產(chǎn)率；b)采用碰撞/反應(yīng)池技術(shù)；c)采用干擾校正方程進行校正；d)采用適當?shù)脑嚇臃蛛x方法去除干擾基體。8.2.5雙電荷離子干擾減少或消除雙電荷離子干擾可選用以下一種或幾種方式：a)優(yōu)化操作條件，降低雙電荷產(chǎn)率；b)采用干擾校正方程進行校正，干擾校正方程在使用前應(yīng)經(jīng)過驗證。8.3定性方法在相同的條件下分析試樣溶液與標準溶液，將試樣溶液的色譜圖與標準溶液的色譜圖進行比較，根據(jù)保留時間和m/z進行定性分析。為了進行定量分析，需要進行峰面積(或峰高)測量，采用標準曲線法、標準加入法、內(nèi)標法、同位素稀釋法進行測定。使用工作站進行數(shù)據(jù)處理時，需要按色譜峰形，選擇合理的積分參數(shù)，得出準確的色譜峰面積(或峰高)。8.4.2標準曲線法配制不少于6個不同質(zhì)量濃度的標準溶液(包括溶劑空白，現(xiàn)用現(xiàn)配),按照質(zhì)量濃度從低到高依次測定標準溶液中各分離組分的色譜峰面積(或峰高),以標準溶液中待測組分的質(zhì)量濃度為橫坐標，相應(yīng)的待測組分色譜峰面積(或峰高)為縱坐標，繪制校準曲線、計算回歸方程，其相關(guān)系數(shù)不小于0.99。在相同條件下分離試樣溶液中各待測組分，測定各組分色譜峰面積(或峰高),并據(jù)此計算試樣溶液中待測組分的質(zhì)量濃度。使用標準曲線法時：a)標準曲線法盡可能在無基體效應(yīng)干擾或干擾可以忽略的情況下使用；b)盡量消除試樣溶液中的基體效應(yīng)干擾；c)標準溶液與試樣溶液的基體盡可能保持一致；d)試樣溶液中待測組分的質(zhì)量濃度在校準曲線的線性范圍內(nèi)。5圖1標準曲線法的校準曲線8.4.3標準加入法當不能通過稀釋試樣溶液來避免基體效應(yīng)時，可采用標準加入法進行測定。分別取等體積的試樣溶液n份，一份不加標準溶液，其余溶液分別按比例加入不同體積標準溶液，再稀釋至相同體積，溶液質(zhì)量濃度通常分別為p檢，P檢+Po,P檢+2po,…,p檢+(n—1)p?(p?為標準溶液質(zhì)量濃度；標準溶液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配)。在規(guī)定儀器條件下，依次測定這n份溶液各組分色譜峰面積(或峰高),以加入標準溶液質(zhì)量濃度為橫坐標，相應(yīng)的待測組分色譜峰面積(或峰高)為縱坐標繪制校準曲線，其相關(guān)系數(shù)不小于0.99。曲線反向延伸與濃度軸反向延伸的交點的絕對值即為溶液中待測組分的質(zhì)量濃度p,見圖2。根據(jù)p檢計算試樣溶液中待測組分的質(zhì)量濃度。使用標準加入法時：a)至少采用5點(包括試樣溶液本身)來繪制校準曲線；b)標準加入法只適用于質(zhì)量濃度與響應(yīng)信號成線性的區(qū)域；c)加入標準溶液的最小質(zhì)量濃度p?與試樣溶液中待測組分的質(zhì)量濃度p檢大致相同。標準溶液質(zhì)量濃度p圖2標準加入法的校準曲線制備不少于6個不同質(zhì)量濃度的標準溶液(包括溶劑空白，現(xiàn)配現(xiàn)用),每個標準溶液取一定量進6GB/T43966—2024樣。內(nèi)標物加入方式通常有以下兩種：a)在線內(nèi)標實時校正：同一質(zhì)量濃度的內(nèi)標物在流動相中加入或在流動相進入四極桿電感耦合等離子體質(zhì)譜儀的霧化器前通過蠕動泵在線加入，數(shù)據(jù)采集點用對應(yīng)的內(nèi)標物信號進行點對點校正，即根據(jù)每個數(shù)據(jù)采集點的待測元素計數(shù)值與內(nèi)標計數(shù)值的校正值繪制色譜峰；b)加入法：內(nèi)標物加在試樣或試樣溶液中以及標準溶液中，并使內(nèi)標物的最終質(zhì)量濃度保持一致，經(jīng)高效液相色譜儀與待測組分分離后進入四極桿電感耦合等離子體質(zhì)譜儀進行測定。以標準溶液中待測組分的質(zhì)量濃度為橫坐標，待測組分與內(nèi)標物的色譜峰面積(或峰高)或點對點校正后的色譜峰面積(或峰高)比值為縱坐標，繪制校準曲線，計算回歸方程，其相關(guān)系數(shù)不低于0.99,所繪制的校準曲線范圍盡可能涵蓋所有測量點。在相同條件下對試樣溶液進行分析，測定待測組分與內(nèi)標元素的峰面積(或峰高)或點對點校正后的色譜峰面積(或峰高),并據(jù)此計算出試樣溶液中待測組分的質(zhì)量濃度，見圖3。使用內(nèi)標法時：a)在線內(nèi)標實時校正時內(nèi)標物含有與待測元素質(zhì)量數(shù)和電離能相近的元素，且待測試樣中不含該元素或其含量可以忽略；b)加入法校正時該內(nèi)標物含有待測元素，但與待測元素的形態(tài)不同，試樣中不含與內(nèi)標元素形態(tài)相同的元素或其含量可以忽略；c)內(nèi)標物本身不受到質(zhì)譜干擾；d)內(nèi)標物不對待測組分產(chǎn)生干擾；e)內(nèi)標物不易受環(huán)境污染。圖3內(nèi)標法的校準曲線8.4.5同位素稀釋質(zhì)譜法同位素稀釋質(zhì)譜法按照JJF1267執(zhí)行。9分析結(jié)果的計算固體試樣中待測組分的含量按照公式(1)計算： (1)式中：X——試樣中待測組分的含量，單位為毫克每千克(mg/kg);7p檢——試樣溶液中待測組分的質(zhì)量濃度，單位為微克每升(μg/L)p空自——空白溶液中待測組分的質(zhì)量濃度，單位為微克每升(μg/L)V——試樣溶液的體積，單位為毫升(mL);m——試樣稱樣量，單位為克(g)。液體試樣中待測組分的含量按照公式(2)計算：式中：X——試樣中待測組分的含量，單位為毫克每升(mg/L);p——試樣溶液中待測組分的質(zhì)量濃度，單位為微克每升(μg/L);P空白——空白溶液中待測組分的質(zhì)量濃度，單位為微克每升(μg/L);V?——試樣溶液的體積，單位為毫升(mL);V?——試樣移取體積，單位為毫升(mL)。10質(zhì)量保證10.1檢出限和定量限檢出限和定量限按照GB/T27417中的方法與原則評估。10.2準確度(精密度和正確度)10.2.1精密度精密度反映偶然誤差的分布，通常用標準偏差s或相對標準偏差RSD來表示，按公式(3)、公式(4)計算。精密度與質(zhì)量濃度有關(guān)，報告精密度時應(yīng)指明獲得該精密度的被測組分的質(zhì)量濃度，同時標明測量次數(shù)n(n≥7),按照GB/T27417—2017附錄B進行評價。式中：…………s——n次測量結(jié)果的實驗標準偏差；x;——第i次測量結(jié)果；x