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熒光標(biāo)記技術(shù)熒光標(biāo)記技術(shù)熒光標(biāo)記技術(shù)是用熒光素標(biāo)記在抗體或抗原上,與相應(yīng)的抗原或抗體特異性結(jié)合,然后用熒光顯微鏡觀察所標(biāo)記的熒光,以分析示蹤相應(yīng)的抗原或抗體的方法。其中,最常用的是熒光素標(biāo)記抗體或抗抗體,用于檢測相應(yīng)的抗原或抗體。該技術(shù)是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展最早的一種。Coons等于1941年首次采用熒光素進(jìn)行標(biāo)記而獲得成功?;驹頍晒馑卦?0-6的超低濃度時,仍可被專門的短波光源激發(fā),在熒光顯微鏡下可觀察到熒光。熒光抗體標(biāo)記技術(shù)就是將抗原抗體反應(yīng)的特異性,熒光檢測的高敏性,以及顯微鏡技術(shù)的精確性三者結(jié)合起來的一種免疫檢測技術(shù)。熒光素?zé)晒馑厥悄墚a(chǎn)生明顯熒光,能作為染料使用的有機(jī)化合物。主要是以苯環(huán)為基礎(chǔ)的芳香族化合物和一些雜環(huán)化合物。它們受到激發(fā)光(如紫外光)照射后,可發(fā)射熒光??捎糜跇?biāo)記的熒光素有異硫氰酸熒光黃、四乙基羅丹明和四甲基異硫氰酸羅丹明,其中異硫氰酸熒光黃應(yīng)用最廣,為黃色結(jié)晶。抗體經(jīng)熒光素標(biāo)記后,不影響與抗原的結(jié)合能力和特異性。當(dāng)熒光抗體與相應(yīng)的抗原結(jié)合時,就形成了帶有熒光性的抗原抗體復(fù)合物,從而可在熒光顯微鏡下檢出抗原存在?;静襟E1.制作標(biāo)本片。根據(jù)被檢樣品的不同,采用不同的制備方法,固定處理環(huán)節(jié)尤為重要。2.使熒光抗體與標(biāo)本切片中組織或細(xì)胞表面的抗原進(jìn)行反應(yīng)。3.洗滌除去游離的熒光抗體。4.

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