(高清版)GBT 42239.2-2022 洗滌用酶制劑 第2部分：脂肪酶

洗滌用酶制劑第2部分：脂肪酶2022-12-30發(fā)布2022-12-30實(shí)施國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件是GB/T42239《洗滌用酶制劑》的第2部分。GB/T42239已經(jīng)發(fā)布了以下部分：——第1部分：堿性蛋白酶；——第2部分：脂肪酶。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由中國輕工業(yè)聯(lián)合會(huì)提出。本文件由全國表面活性劑和洗滌用品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC/TC272)歸口。本文件起草單位：中國日用化學(xué)研究院有限公司、諾維信(中國)投資有限公司、深圳市芭格美生物科技有限公司、杰能科(中國)生物工程有限公司、英聯(lián)酶制劑貿(mào)易(上海)有限公司、廣東溢多利生物科技股份有限公司、福建省夢(mèng)嬌蘭日用化學(xué)品有限公司、廣東中聯(lián)邦精細(xì)化工有限公司、黃河三角洲京博化工研究院有限公司、中國皮革制鞋研究院有限公司、大連潔仕清潔用品有限公司、中輕日用化學(xué)檢驗(yàn)認(rèn)證有限公司。Ⅱ洗滌用品行業(yè)是酶制劑重要的應(yīng)用領(lǐng)域之一，制定GB/T42239《洗滌用酶制劑》,對(duì)于我國洗滌用品行業(yè)規(guī)范含酶類洗滌用品細(xì)分領(lǐng)域的市場(chǎng)，指導(dǎo)行業(yè)內(nèi)企業(yè)創(chuàng)新開發(fā)新產(chǎn)品，杜絕不良企業(yè)欺騙消費(fèi)者，促進(jìn)洗滌用品行業(yè)快速、良性發(fā)展具有重要的意義。GB/T42239《洗滌用酶制劑》擬由以下2個(gè)部分構(gòu)成：——第1部分：堿性蛋白酶，目的在于確立洗滌用堿性蛋白酶的分類和技術(shù)要求；——第2部分：脂肪酶，目的在于確立洗滌用脂肪酶的分類和技術(shù)要求。1洗滌用酶制劑第2部分：脂肪酶保質(zhì)期。本文件適用于經(jīng)微生物發(fā)酵、提純等工藝制得的用于洗滌劑工業(yè)的脂肪酶。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T191包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T6003.1試驗(yàn)篩技術(shù)要求和檢驗(yàn)第1部分：金屬絲編織網(wǎng)試驗(yàn)篩GB/T6005試驗(yàn)篩金屬絲編織網(wǎng)、穿孔板和電成型薄板篩孔的基本尺寸GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T13174衣料用洗滌劑去污力及循環(huán)洗滌性能的測(cè)定GB15258化學(xué)品安全標(biāo)簽編寫規(guī)定QB/T2739洗滌用品常用試驗(yàn)方法滴定分析(容量分析)用試驗(yàn)溶液的制備JJF1070定量包裝商品凈含量計(jì)量檢驗(yàn)規(guī)則3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。可將甘油三酯(油脂)水解，在不同階段可釋放出脂肪酸、甘油二酯、甘油單酯及甘油，同時(shí)也能催化酯合成和酯交換反應(yīng)的酶。脂肪酶催化脂肪水解的能力。注：脂肪酶酶活力以脂肪酶酶活力單位表示，1g固體酶粉(或1mL液體酶),在一定溫度和pH條件下，1min內(nèi)水解底物產(chǎn)生1μmol的可滴定脂肪酸，即為1個(gè)酶活力單位，用U/g表示。4符號(hào)和縮略語下列符號(hào)和縮略語適用于本文件。JB-04:胡蘿卜素豬油污布。F?:洗前白度值。2F?:洗后白度值。R:去污值。P:去污比值。5產(chǎn)品分類按產(chǎn)品形態(tài)分為液體劑型和固體劑型。6要求6.1外觀和理化性能要求產(chǎn)品的外觀和理化性能指標(biāo)應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1外觀和理化性能指標(biāo)指標(biāo)液體劑型固體劑型外觀淺黃色至棕褐色液體白色、灰白色、黃褐色或其他顏色可自由流動(dòng)的顆粒酶活力/(U/g)≥標(biāo)示值 去污力比值(JB-04污布)*≥“試驗(yàn)溶液濃度：GB/T13174規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉為0.2%,脂肪酶制劑加入量為0.4%(相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)粉質(zhì)量計(jì))。6.2定量包裝要求每批產(chǎn)品的銷售包裝凈含量應(yīng)符合JJF1070的要求。7試驗(yàn)方法7.1通則除非另有說明，在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑和GB/T6682中規(guī)定的三級(jí)或以上的水。7.2外觀取適量樣品，置于干燥潔凈的透明實(shí)驗(yàn)器皿內(nèi)，在非直射光條件下進(jìn)行觀察。7.3酶活力按附錄A進(jìn)行。采用不同于附錄A的方法測(cè)定時(shí)，應(yīng)提供所應(yīng)用的酶活力單位與本文件確定的酶活力單位的轉(zhuǎn)換系數(shù)。按附錄B進(jìn)行。37.5去污力比值按附錄C進(jìn)行。按JJF1070的規(guī)定進(jìn)行。8檢驗(yàn)規(guī)則8.1檢驗(yàn)分類出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目為表1規(guī)定的外觀、酶活力。型式檢驗(yàn)為表1規(guī)定的全部項(xiàng)目，在下列情況下應(yīng)進(jìn)行型式檢驗(yàn)：b)生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)設(shè)備、原材料、催化劑等變化或不正常，以及生產(chǎn)管理要素(包括人員素質(zhì))的變化可能影響產(chǎn)品質(zhì)量和性能時(shí)；c)長期停產(chǎn)后再恢復(fù)生產(chǎn)時(shí)；d)出廠檢驗(yàn)結(jié)果與上次的型式檢驗(yàn)有較大差異時(shí)；e)市場(chǎng)監(jiān)督管理機(jī)構(gòu)、使用單位提出型式檢驗(yàn)要求時(shí)。8.2組批與抽樣原則產(chǎn)品應(yīng)經(jīng)生產(chǎn)廠的質(zhì)量檢驗(yàn)部門按本文件規(guī)定的檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)合格，并出具產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)合格證方可出廠。收貨單位應(yīng)在到貨一個(gè)月內(nèi)，憑合格證驗(yàn)收，必要時(shí)可按8.2.3抽樣驗(yàn)收。根據(jù)批量大小，按表2確定樣本大小，從批中隨機(jī)抽取樣本單位。取樣前應(yīng)將選定的樣本包裝中的樣品混合均勻，在保證均勻的前提下方可取樣。表2批量和樣本大小單位為桶/箱/袋批量樣本大小2348.3判定規(guī)則與復(fù)檢外觀指標(biāo)檢驗(yàn)不合格，可重新抽樣進(jìn)行復(fù)檢，復(fù)檢結(jié)果仍不合格則判該批產(chǎn)品不合格。4理化指標(biāo)檢驗(yàn)結(jié)果按修約值比較法修約后與指標(biāo)比較判定合格與否，如有一項(xiàng)指標(biāo)不合格，可重新取兩倍箱樣本采取樣品，對(duì)不合格項(xiàng)進(jìn)行復(fù)檢，復(fù)檢結(jié)果仍不合格，則判該批產(chǎn)品不合格。交收雙方因檢驗(yàn)結(jié)果不同，不能取得協(xié)議時(shí)，可商請(qǐng)仲裁檢驗(yàn)，仲裁檢驗(yàn)結(jié)果為最后依據(jù)。產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)及仲裁機(jī)構(gòu)抽查檢驗(yàn)時(shí)不進(jìn)行二次抽樣。收貨單位如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品質(zhì)量不符合本文件規(guī)定的要求，應(yīng)在到貨1個(gè)月內(nèi)向生產(chǎn)者交涉。若因檢驗(yàn)結(jié)果不同，不能取得協(xié)議時(shí)，雙方應(yīng)按8.2.3取樣。取樣總量不應(yīng)少于450g,將選取的試樣仔細(xì)混勻后，分別裝入3個(gè)潔凈干燥的樣品瓶中，簽封。標(biāo)簽上應(yīng)注明產(chǎn)品名稱、規(guī)格、批號(hào)、生產(chǎn)者名稱、取樣日期、取樣人。交收雙方各執(zhí)一份，第三份簽封后，備仲裁檢驗(yàn)用。樣品存放于暗處，按照建議貯存溫度貯存，保存期1個(gè)月。仲裁檢驗(yàn)結(jié)果為最后依據(jù)。9.1標(biāo)志產(chǎn)品的外包裝使用符合GB/T191要求的標(biāo)志。產(chǎn)品的包裝上應(yīng)貼有牢固的標(biāo)簽。標(biāo)簽內(nèi)容應(yīng)包括產(chǎn)品名稱、凈含量、生產(chǎn)者和(或)經(jīng)銷者的名稱、地址和聯(lián)系方式、生產(chǎn)日期和保質(zhì)期、貯存條件、批號(hào)及其他需要標(biāo)示的內(nèi)容。化學(xué)品安全標(biāo)簽內(nèi)容應(yīng)符合GB15258的要求。9.2包裝產(chǎn)品的內(nèi)包裝和(或)包裝容器的內(nèi)涂料應(yīng)符合相關(guān)規(guī)定。9.3運(yùn)輸產(chǎn)品在運(yùn)輸過程中應(yīng)輕拿輕放，不應(yīng)倒置，嚴(yán)防雨淋和暴曬，不應(yīng)在箱上踩踏和堆放重物。運(yùn)輸工9.4貯存產(chǎn)品應(yīng)貯存在陰涼干燥的環(huán)境下。不應(yīng)與有毒、有害、有腐蝕性的物質(zhì)同存。堆垛要采取必要的防護(hù)措施，堆垛高度要適當(dāng)，避免損壞運(yùn)輸包裝。9.5保質(zhì)期保質(zhì)期由生產(chǎn)企業(yè)自定。在規(guī)定的運(yùn)輸和包裝貯存條件下，保質(zhì)期內(nèi)的酶活力不應(yīng)低于標(biāo)示酶活力。注：超過保質(zhì)期的產(chǎn)品仍具有使用價(jià)值，使用時(shí)重新測(cè)定酶活力。5(規(guī)范性)酶活力的測(cè)定A.1方法概要脂肪酶在一定條件下，能使甘油三酯水解成脂肪酸、甘油二酯、甘油單酯和甘油，所釋放的脂肪酸可用標(biāo)準(zhǔn)堿溶液進(jìn)行中和滴定，用酚酞指示劑或自動(dòng)滴定儀指示反應(yīng)終點(diǎn)，根據(jù)消耗的堿量，計(jì)算其酶活力。反應(yīng)式為：RCOOH+NaOH—→RCOONa+H,O注1:洗滌劑的存在會(huì)嚴(yán)重影響本方法。依不同洗滌劑的類型和濃度不同，這種影響表現(xiàn)為從完全抑制到激活。注2:酶會(huì)附著在塑料上，因此實(shí)驗(yàn)中用玻璃器具，避免使用塑料材質(zhì)器具(移液槍頭除外)。A.2試劑A.2.1聚乙烯醇(PVA),聚合度1750±50[不同來源或批號(hào)的PVA對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響，結(jié)果報(bào)告應(yīng)標(biāo)明聚乙烯醇(PVA)廠家及生產(chǎn)批號(hào)]。A.2.2橄欖油(不同來源或批號(hào)的橄欖油對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響，結(jié)果報(bào)告應(yīng)標(biāo)明橄欖油廠家及生產(chǎn)批A.2.7鹽酸。A.2.8酚酞。A.3儀器A.3.5自動(dòng)移液器。A.3.6電磁加熱攪拌器。A.3.7電磁攪拌器。A.3.9分析天平：精度為0.0001g。A.4溶液A.4.12%PVA溶液稱取聚乙烯醇(PVA)10g(精確至0.1g)到500mL燒杯中，加水400mL,放入合適的轉(zhuǎn)子，在電磁加熱攪拌器上邊加熱邊攪拌，攪拌速度以能把所有的PVA攪拌起來為宜，在微沸狀態(tài)下加熱攪拌約1h,直至全部溶解，在攪拌狀態(tài)下逐漸冷卻至室溫，定容到500mL,該溶液室溫下有效期為2d,密封6保存。注：不能使用如冰塊等快速冷卻方式。A.4.2橄欖油底物溶液稱取2%PVA溶液150g,加橄欖油50g,用高速勻漿機(jī)在7000r/min(當(dāng)乳化效果不好時(shí)可加大轉(zhuǎn)速)下處理3min,即成乳白色PVA乳化液，放入轉(zhuǎn)子，在電磁攪拌器上攪拌約20min,密封保存，該溶液室溫下有效期為2d。若底物溶液在保存期內(nèi)出現(xiàn)底部分層現(xiàn)象，應(yīng)重新配制，若重新配制依然有底部分層現(xiàn)象或者在水浴中反應(yīng)時(shí)有明顯沉淀產(chǎn)生，更換其他來源的聚乙烯醇(PVA)。注：每次使用前需要攪拌并在攪拌的狀態(tài)下移取該溶液，每次使用完畢及時(shí)密封保存。A.4.3鹽酸溶液(1mol/L)A.4.4氫氧化鈉溶液(0.5molA.4.5磷酸緩沖液(pH為7.5)稱取磷酸二氫鉀(KH?PO?)19.64.5L,攪拌至溶解均勻，用0.5mol/Lg,十二水磷酸氫二鈉(Na?HPO?·12H?O)396.2g,加水約氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)整pH至7.50±0.05,定容到5L。A.4.6氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.05mol/L)按QB/T2739配制與標(biāo)定0.5mol/L的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液。使用時(shí)，準(zhǔn)確稀釋10倍。A.4.7酚酞指示液(10g/L)A.5樣品溶液的制備稱取約1g樣品(稱準(zhǔn)至0.001g),用磷酸緩沖液溶解并稀釋。樣品稱量定容后放入轉(zhuǎn)子，在電磁攪拌器上攪拌15min。稀釋時(shí)控制酶液濃度，推薦稀釋倍數(shù)參考表A.1,例如，當(dāng)樣品酶活力約為100000U/g時(shí)，稱量約1g樣品到100mL容量瓶中，再稀釋200倍。樣品與空白消耗堿量之差在1.4mL～1.6mL范圍內(nèi)，若最終滴定結(jié)果超出該范圍，重新稀釋直至該范圍內(nèi)。表A.1脂肪酶樣品稀釋表待測(cè)酶活力U/g推薦稀釋倍數(shù)A.6試驗(yàn)步驟A.6.1程序按照表A.2所列程序分別進(jìn)行空白和樣品試驗(yàn)，選擇自動(dòng)電位滴定法或酚酞指示劑滴定法進(jìn)行滴定。7表A.2試驗(yàn)步驟步驟內(nèi)容100mL燒杯A(空白)100mL燒杯B(樣品)1燒杯中放入轉(zhuǎn)子，加入底物溶液4.00mL和磷酸緩沖液5.00mL,磁力攪拌2加95%乙醇15.00mL,攪拌混勻直接進(jìn)行水浴3(40±0.2)℃水浴中預(yù)熱5min4加樣品1.00mL混勻計(jì)時(shí)，攪拌混勻時(shí)間約15s5(40±0.2)℃水浴中準(zhǔn)確反應(yīng)15min取出6直接取出加95%乙醇15.00mL混勻取出7加25mL水，立即開始滴定注：若使用酚酞指示劑滴定法，用100mL三角瓶代替燒杯。A.6.2.1自動(dòng)電位滴定法對(duì)自動(dòng)電位滴定儀進(jìn)行儀器校正，用0.05mol/L的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液即刻滴定，以突躍為滴定終點(diǎn)，最終溶液pH在30s內(nèi)保持不變，記錄消耗0.05mol/L的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。A.6.2.2酚酞指示劑滴定法加酚酞指示劑兩滴，用0.05mol/L的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液即刻滴定，滴定至微紅色并保持在30s內(nèi)不退色為滴定終點(diǎn)，記錄消耗0.05mol/L的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。A.7結(jié)果計(jì)算產(chǎn)品的酶活力X以U/g表示，按公式(A.1)計(jì)算：式中：X——產(chǎn)品的酶活力，單位為酶活力單位(U/g);V?——滴定樣品時(shí)消耗0.05mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為毫升(mL);V?——滴定空白時(shí)消耗0.05mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為毫升(mL);c——?dú)溲趸c標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，單位為摩爾每升(mol/L);0.05——?dú)溲趸c標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度換算系數(shù)；n—試樣的稀釋倍數(shù)；m——試樣的質(zhì)量，單位為克(g);1/15——反應(yīng)時(shí)間15min,以1min計(jì)。結(jié)果按修約值表示，當(dāng)結(jié)果大于或等于10?,后三位取整；當(dāng)結(jié)果大于或等于10?且小于10?,后兩位取整；當(dāng)結(jié)果大于或等于103且小于10?,后一位取整。A.8精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于這兩個(gè)測(cè)定值的算術(shù)平均值的10%,以大于10%的情況不超過5%為前提。8GB/T42239.2—2022(規(guī)范性)粒度的測(cè)定篩分法B.1方法概要用規(guī)定孔徑的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)篩，經(jīng)振篩機(jī)篩分，測(cè)定篩子及底盤中試樣的質(zhì)量，計(jì)算其占試樣總質(zhì)量的百分?jǐn)?shù)。B.2分析儀器B.2.1標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)篩：符合GB/T6005和GB/T6003.1的規(guī)定。按產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的要求選取篩孔尺寸0.150mm(100目)的篩子，配以底盤和篩蓋。B.2.2天平：精度為0.1g。B.2.3振篩機(jī)：采用拍擊式電動(dòng)振篩機(jī)，篩體的運(yùn)動(dòng)方式為平行往復(fù)式，篩體振幅為30mm±10mm,振動(dòng)頻率為278次/min±10次/min,拍擊次數(shù)為150次/min±10次/min。B.3試驗(yàn)步驟把按要求選取的清潔、干燥的篩孔尺寸0.150mm(100目)篩子置于底盤之上，一起裝在電動(dòng)振篩機(jī)上。稱取試樣100.0g,置于上層篩中，加篩蓋。開啟電動(dòng)振篩機(jī)，振篩5min±30s。停止振蕩后取下底盤和篩子，收集篩子及底盤中的試樣質(zhì)量。B.4結(jié)果計(jì)算產(chǎn)品的粒度P;以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示，按公式(B.1)計(jì)算：……(B.1)式中：P;——產(chǎn)品的粒度；m;——底篩上留存樣品質(zhì)量，單位為克(g);m——試樣的質(zhì)量，單位為克(g)。以兩次平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示至小數(shù)點(diǎn)后一位作為測(cè)定結(jié)果。B.5準(zhǔn)確度和精密度試樣過篩的總質(zhì)量損失不得超過1%。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于這兩個(gè)測(cè)定值的算術(shù)平均值的1.5%,以大于1.5%的情況不超過5%為前提。9(規(guī)范性)去污力的測(cè)定C.1方法概要在去污試驗(yàn)機(jī)內(nèi)于規(guī)定的溫度和洗滌時(shí)間下，用一定硬度的水配制成確定濃度的標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉溶液，在加入脂肪酶樣品的情況下，對(duì)脂肪酶敏感的污漬試片進(jìn)行洗滌。首先需用白度計(jì)在選定波長下測(cè)定試片洗滌前后的白度值，以白度差評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉與脂肪酶整體的去污力，再將其與標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉的去污力做比較，判定該脂肪酶產(chǎn)品是否合格。C.2試劑與材料注：也可用一定水合數(shù)的氯化鈣，但在具體使用時(shí)需根據(jù)CaCl?用量進(jìn)行折算。注：也可用無水或其他水合數(shù)的氯化鎂，但在具體使用時(shí)需根據(jù)MgCl?·6H?O用量進(jìn)行折算。C.2.3污布：JB-04(胡蘿卜素豬油污布，按附錄D制備),可由標(biāo)準(zhǔn)歸口單位委托相關(guān)單位統(tǒng)一制作注：每張污布四周邊緣不均勻處，可裁去。C.2.4標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉：GB/T13174規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉。C.3儀器和設(shè)備普通實(shí)驗(yàn)室儀器及設(shè)備和符合GB/T13174中規(guī)定的立式去污機(jī)、白度計(jì)、漂洗器等。C.4試驗(yàn)步驟洗滌試驗(yàn)中配制洗滌劑溶液采用250mg/kg(以CaCO?表示，下同)硬水，Ca2+與Mg2+摩爾比為6:4,配制方法如下：稱取16.70g氯化鈣和20.37g氯化鎂，配制10.0L,即為2500mg/kg硬水。使用時(shí)取1.0L沖至10.0L即為250mg/kg硬水。配制用水建議用蒸餾水或去離子水或純度相當(dāng)?shù)乃?。JB-04試片每組應(yīng)有6片，同時(shí)做好編號(hào)記錄，每組試片用于一個(gè)樣品的性能試驗(yàn)。洗前，將試片相疊，用白度計(jì)在457nm下逐一讀取洗滌前的白度值。洗前白度以正面取兩個(gè)點(diǎn)(兩個(gè)點(diǎn)應(yīng)中心對(duì)稱),測(cè)量白度值，以兩次測(cè)量的平均值為該試片的洗前白度F?;洗后白度則以洗后試片正面取兩個(gè)點(diǎn)(兩個(gè)點(diǎn)應(yīng)中心對(duì)稱),測(cè)量白度值，以兩次測(cè)量的平均值為該試片的洗后白度F?。注：由于胡蘿卜素對(duì)光較敏感，需將洗后試片在無光陰涼處平鋪晾干，洗后21h統(tǒng)一測(cè)量白度值。測(cè)試含脂肪酶洗滌劑去污力，每組試片為6片。洗滌試驗(yàn)在立式去污機(jī)(C.3)內(nèi)進(jìn)行，測(cè)定前先將攪拌葉輪、工作槽、去污浴缸一一編號(hào)固定組成一個(gè)“工作單元”,并預(yù)熱儀器至(30±1)℃下穩(wěn)定一段時(shí)間。試驗(yàn)時(shí)用250mg/kg硬水(事先預(yù)熱至約30℃時(shí)使用)將標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉(C.2.4)配制成0.2%的溶液每1L倒入對(duì)應(yīng)的去污浴缸內(nèi)，然后浴缸放入所對(duì)應(yīng)的位置并裝好攪拌葉輪，調(diào)節(jié)儀器使洗滌試驗(yàn)溫度保持在(30±1)℃,準(zhǔn)備加入脂肪酶樣品(需要留出一個(gè)不加酶的空白標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉溶液去污浴缸作參比)。開動(dòng)機(jī)器攪拌，在0s時(shí)將0.4%脂肪酶試樣(以標(biāo)準(zhǔn)洗衣粉質(zhì)量計(jì)，例如加量為2g,則加入脂肪酶試樣8mg)加入去污浴缸內(nèi)，攪拌30s后，將C.4.2測(cè)定過白度的JB-04試片投入浴缸中，同時(shí)開始對(duì)該浴缸計(jì)算主洗時(shí)間，20min后停止洗滌。注1:鑒于脂肪酶試樣稱取量較低，為便于測(cè)定和提高試驗(yàn)精度，可以采用擴(kuò)容的方式準(zhǔn)備脂肪酶樣品。即事先將脂肪酶試樣配置成一定濃度的溶液。去污測(cè)試時(shí)，用移液管定量移取該溶液添加至去污浴缸中。擴(kuò)容步驟在加樣前進(jìn)行，不宜將擴(kuò)容后樣品放置過久。注2:向浴缸中加入試片要展開，必要時(shí)將試片快速一片片放入，以免試片貼在一起。將含酶和不含酶去污浴缸中的試片分別在兩個(gè)漂洗器(C.3)中漂洗(避免脂肪酶交叉污染)。首先將試片放入內(nèi)筒中，控干水分，倒出污水后，加入1500mL去離子水，蓋上蓋子，轉(zhuǎn)動(dòng)蓋子上手柄，使內(nèi)筒轉(zhuǎn)動(dòng)約30s后停止(期間應(yīng)使內(nèi)筒充分轉(zhuǎn)動(dòng)，但宜避免因轉(zhuǎn)動(dòng)過快導(dǎo)致容器內(nèi)漂洗水的溢出)。放掉漂洗后的水，再次加入1500mL去離子水，重復(fù)進(jìn)行第二次漂洗。接著進(jìn)行第三次漂洗，最后放掉漂洗水，對(duì)試片進(jìn)行手工脫水15s(轉(zhuǎn)速應(yīng)達(dá)到使布片水分瀝干)。去除漂洗完成后的試片，在無光陰涼處懸以一一對(duì)應(yīng)的方式，計(jì)算每片試片洗滌前后的白度差(F?-F?),并對(duì)每組試片，分別在置信度90%下，進(jìn)行Q檢驗(yàn)，對(duì)可疑值進(jìn)行取舍(參見GB/T13174—2021的附錄D)。每組試片中超出極限范圍，需要取舍的數(shù)據(jù)不超過1個(gè)，否則該組試驗(yàn)作廢，應(yīng)重做試驗(yàn)。確認(rèn)有效的白度差和試片數(shù)量nC.5結(jié)果計(jì)算去污值(R)按式(C.1)計(jì)算。R=Z(F?-F?)/n…………………(C.1)式中：R——去污值，%;F?——每組污布試片洗前光譜反射率，%;F?——每組污布試片洗后光譜反射率，%;n——經(jīng)Q值檢驗(yàn)后，