新疆師市規(guī)模牛場傳染性牛鼻氣管炎病毒感染情況調(diào)查為牛場IBRV凈化工作提供參考

摘要[目的]了解新疆師市部分規(guī)模牛場疫病發(fā)病原因及流行情況，揭示致病原因，為制定防控措施奠定基礎(chǔ)。[方法]選擇師市范圍內(nèi)19個規(guī)模牛場，共采集健康牛血清樣品2923份，鼻拭子1127份，分別進行傳染性牛鼻氣管炎(IBR)實時熒光PCR檢測和傳染性牛鼻氣管炎ELISA方法檢測抗原和抗體。[結(jié)果]實時熒光PCR檢測抗原總陽性率為1.69%，其中：荷牛陽性率為1.83%，弗荷牛陽性率為1.57%，挪荷牛陽性率為1.66%；場群陽性率為78.95%。3個品系的犢牛、青年牛、后備牛、成母牛均檢測到IBRV，不同品系牛之間不影響IBR的流行，3個品系牛之間抗原陽性率差異不顯著。牛傳染性鼻氣管炎ELISA方法檢測抗體總陽性率為53.71%，其中：荷牛陽性率為54.82%，弗荷牛陽性率為53.86%，挪荷牛陽性率為52.30%，場群抗體陽性率為100%，3個品系牛之間抗體陽性率差異不顯著。[結(jié)論]師市?；?個品系牛均存在一定程度的傳染性牛鼻氣管炎病毒(IBRV)感染。1背景新疆師市養(yǎng)殖奶牛的歷史可追溯至20世紀(jì)60年代，為師市奶牛養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展做出了重大貢獻。2002年，師市為快速做大做強畜牧業(yè)，分6個批次從澳大利亞進口16673頭荷斯坦黑白花奶牛，均由北京市進出口檢疫檢驗局檢疫合格（IBRV等7種病毒檢測均為陰性），指定隔離場隔離45d后運回。截至目前，師市已發(fā)展到1700頭以上的奶牛場19個。2016年之后，有1個牛場使用挪威紅牛凍精×荷斯坦奶牛，培育出挪荷F1、F2牛1273頭；有2個牛場使用弗萊維赫乳肉兼用牛凍精×荷斯坦奶牛，培育出弗荷F1、F2牛1452頭；分別與本場荷斯坦奶牛分群飼養(yǎng)。2005年，羅瓊等從進口種用奶牛中分離出傳染性牛鼻氣管炎病毒后，又有學(xué)者先后在新疆各地分離到牛傳染性鼻氣管炎病毒（IBRV），證實了IBRV的存在。2022年3月，針對冬春季節(jié)出現(xiàn)犢牛眼角、鼻腔分泌大量膿性分泌物、呼吸極度困難等臨床癥狀，呈急性發(fā)病經(jīng)過，常因窒息而死等IBR感染現(xiàn)狀，筆者所在課題組開展了IBRV的血清學(xué)流行病學(xué)調(diào)查，進一步摸清IBRV的感染情況，為制定IBR綜合防控措施和推動牛場IBRV凈化工作提供參考依據(jù)。2材料與方法2.1

樣品來源以預(yù)期流行率抽樣原則，3個品系的犢牛、青年牛、后備牛和成母牛分別采用分階段抽樣原則。第1階段采取普查的方法，19個規(guī)模牛場全部作為抽樣單元；第2階段抽樣場內(nèi)按照95%置信水平（CI）、10%可接受誤差、50%預(yù)期流行率進行抽樣。共采集健康牛血清樣品2923份，鼻拭子1127份，－20℃保存?zhèn)溆茫斠姳?。每個品系牛群均按照犢牛（0~2月齡）、青年牛（3~17月齡）、后備牛（18月齡~產(chǎn)犢）、成母牛分為4組。表1

3個品系牛血清、鼻拭子樣品采集情況

(

份

)2.2

檢測試劑牛皰疹病毒I型（BHV-1）實時熒光PCR檢測試劑盒（批號：BHVI20230131P），購于哈爾濱元亨生物藥業(yè)有限公司；牛傳染性鼻氣管炎ELISA檢測試劑盒（批號：210232A）；購于青島瑞爾生物技術(shù)有限公司。2.3

檢測方法血清和鼻拭子樣品送新疆農(nóng)墾科學(xué)院獸醫(yī)研究所進行IBRV抗原、抗體的檢測。IBRV抗原、抗體檢測均按照檢測試劑盒說明書的操作方法和判斷標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。2.4

數(shù)據(jù)處理試驗數(shù)據(jù)采用Excel軟件整理和制圖，并將其按照不同年齡段、不同品系進行統(tǒng)計，利用χ2檢驗法進行數(shù)據(jù)間的差異性比較。3結(jié)果與分析3.13個品系牛鼻拭子樣品IBRV抗原檢測情況由表2可知：共檢測鼻拭子樣品1127頭份，陽性樣品檢出19頭份，IBRV總陽性率為1.69%。其中，荷后備?？乖栃月首罡?，為2.78%，弗荷青年?？乖栃月首畹?，為1.01%；3個品系間抗原陽性率差異不顯著，說明IBRV陽性率與品系無顯著相關(guān)，不同品系牛之間不影響IBRV的流行。3個品系后備牛和成母牛IBRV陽性率顯著高于犢牛和青年牛，這可能是由于犢牛單獨飼喂，青年?；顒臃秶?，與其他牛只接觸機會少和生長時間短。表2

3個品系牛血清樣品IBRV抗原檢測結(jié)果3.23個品系牛血清樣品IBRV抗體檢測情況由表3可知：共檢測血清樣品2923頭份，陽性樣品檢出1570頭份，抗體總陽性率為53.71%。其中：荷成母牛抗體陽性率最高，為64.59%，荷犢?？贵w陽性率最低，為35.94%；3個品系間抗體陽性檢出率差異不顯著，說明不同品系牛之間不影響IBRV的流行。3個品系青年牛、后備牛和成母牛IBRV抗體陽性率顯著高于犢牛，這可能是由于犢牛單獨飼喂、青年?；顒臃秶?，與其他牛只接觸機會少和生長時間短。表3

3個品系牛血清樣品IBRV抗體檢測結(jié)果3.3

場群血清樣品IBRV抗原、抗體檢測情況場群抗原陽性率為78.95%，IBRV抗原陽性最高的牛場檢出率為4.27%，IBRV抗原陽性最低的牛場檢出率為1.02%。場群抗體陽性率為100%，IBRV抗體陽性最高的牛場檢出率為79.13%，IBRV抗體陽性最低的牛場檢出率為25.62%。提示師市牛場IBRV感染范圍大、危害嚴(yán)重，應(yīng)引起相關(guān)部門高度重視。4討論研究結(jié)果表明，寧夏地區(qū)牛傳染性鼻氣管炎病毒核酸個體陽性率為3.23%；李穎等研究結(jié)果表明，山西省部分牛病毒性腹瀉和牛傳染性鼻氣管炎抗體陽性率40.3%，群體陽性率71.21%：在新疆南疆部分規(guī)模牛場牛傳染性鼻氣管炎血清流行病學(xué)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，群間IBRV抗體陽性率為100%；研究發(fā)現(xiàn)，IBRV抗體陽性率為74%以上；白明山在山東省牛傳染性鼻氣管炎流行病學(xué)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，IBRV抗體陽性率為58%。在本試驗中，新疆師市IBRV的血清抗原陽性率為1.69%，抗體陽性總檢出率為53.71%，相較于新疆南疆、寧夏、山西和山東部分地區(qū)，師市IBRV的抗原陽性率較低，但遠高于IBR的凈化標(biāo)準(zhǔn)。因此，從IBRV抗原、抗