GB∕T 20552-2023 長牡蠣（正式版）

2023-12-28發(fā)布國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件代替GB/T20552—2006《太平洋牡蠣》,與GB/T20552—2006相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動外，主要技術(shù)變化如下：a)更改了分類地位(見4.2,2006年版的3.2);b)更改了可量性狀比值(見5.2,2006年版的4.1.2.1);c)刪除了殼高與殼長、殼長與體重的關(guān)系式(見2006年版的4.1.2.3);d)刪除了生化遺傳學(xué)特征及檢測方法(見2006年版的第7章、8.2);e)增加了分子遺傳學(xué)特性描述及檢測方法(見第8章、9.5);f)增加了判定規(guī)則(見第10章)。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出。本文件由全國水產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(SAC/TC156)歸口。本文件起草單位：中國海洋大學(xué)。本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：——2006年首次發(fā)布為GB20552—2006,2017年轉(zhuǎn)為推薦性國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T20552—2006;——本次為第一次修訂。1本文件界定了長牡蠣[Crassostreagigas(Thunberg,1793)]的術(shù)語和定義，確立了學(xué)名與分類，規(guī)定了主要形態(tài)結(jié)構(gòu)特征、生長與繁殖特性、細(xì)胞遺傳學(xué)特性與分子遺傳學(xué)特性，描述了相應(yīng)的檢測方本文件適用于長牡蠣的種質(zhì)鑒定和檢測。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T18654.2養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗第2部分：抽樣方法GB/T22213水產(chǎn)養(yǎng)殖術(shù)語GB/T32757貝類染色體組型分析3術(shù)語和定義GB/T22213界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。殼頂至殼腹緣的最大距離。殼長shelllength垂直于殼高、與兩殼絞合線平行方向的前后緣間最寬部分的長度。4學(xué)名與分類4.2分類地位gigas(Thunberg,1793)。軟體動物門(Mollusca),雙殼綱(Bivalvia),牡蠣目(Ostreida),牡蠣科(Ostreidae),巨蠣屬(Cras-sostrea)。5主要形態(tài)結(jié)構(gòu)特征5.1外部形態(tài)2明顯。殼頂腔深，并常具有白堊色的沉積物。殼表白堊色到紫褐色。長牡蠣外形見圖1。//h標(biāo)引序號說明：1——右殼；l——?dú)らL；h——?dú)じ摺?齡～2齡長牡蠣的殼高為53mm～162mm,殼長為26mm～92mm,殼高與殼長的比值為5.3.3鰓：左右各1對，共4片。6生長與繁殖特性1齡長牡蠣殼高為53mm～114mm,殼長為26mm～68mm,質(zhì)量為8g～53g;2齡長牡蠣殼高為78mm～162mm,殼長為46mm～92mm,質(zhì)量為53g～214g。3數(shù)百萬粒至數(shù)千萬粒。7細(xì)胞遺傳學(xué)特性7.1染色體數(shù)染色體組型見圖2,染色體核型公式為：2n=20m,NF=40,其中，m指中部著絲粒染色體，NF指XKXKX×8×<XXXKKNXXKX下圖2長牡蠣染色體組型8分子遺傳學(xué)特性線粒體COI基因堿基參考序列如下(621bp):ATAGTATTTGGATTTTGAGCTGTTCTTGCGGGAACTAGGTTATTCGTTGGAGACTTTATAACCCTGGAGCTAAGTTTTTAGACCCCGTGA100GCTTCTAGTAGCAGACATGCAATTTCCTCGATTAAATGCATTTAGATTTT250GAGTTTTGCCAGGGTCTCTTTATCTTATGCTTATGTCTAACATTGTAGAA300AACGGAGTTGGGGCAGGGTGAACAATTTACCCTCCTTTATCAACTTACTC3504TTATCATGGAGTTTGTATAGACCTTGCAATTCTAAGCCTTCACCTTGCTG400GTATTAGCTCTATTTTCAGGTCAATTAATTTCATAGTAACGATTAGAAAT450ATGCGATCTGTTGGGGGCCATTTACTAGCACTATTCCCTTGATCTATTAA500GGTTACTTCATTCTTGCTTTTGACTACTCTCCCAGTTTACTATACTTTTGACTGATCGTCATTTTAATACCTCTTTTTTTGACCCT600GTCGGAGGGGGGGACCCTGT621種內(nèi)K2P遺傳距離小于2%。9檢測方法按照GB/T18654.2的規(guī)定執(zhí)行。9.2主要形態(tài)結(jié)構(gòu)特征在充足光線下肉眼觀察。殼高和殼長按照定義用游標(biāo)卡尺測量。用游標(biāo)卡尺測量殼高和殼長，用電子秤稱量質(zhì)量。查詢養(yǎng)殖記錄。通過顯微鏡觀察生殖細(xì)胞分辨性別。通過顯微鏡觀察排放的生殖細(xì)胞判斷生殖方式。肉眼觀察性腺的發(fā)育程度并結(jié)合顯微鏡觀察生殖細(xì)胞判斷繁殖季節(jié)。卵的濃度，進(jìn)而計算懷卵量，測3次取平均值。5在顯微鏡下觀察卵的形態(tài)。9.4細(xì)胞遺傳學(xué)特性采用成體鰓組織法，將長牡蠣在0.005%的秋水仙素海水中處理10h,取鰓組織用含0.05%秋水仙素的海水處理45min,其余操作按照GB/T32757的規(guī)定執(zhí)行，其中，低滲時間為30min～45min,解離時間為50min,熱滴片法滴片。9.5分子遺傳學(xué)特性按附錄A執(zhí)行。10判定規(guī)則10.1當(dāng)檢測結(jié)果符合第5章和第7章的要求，可判定該種質(zhì)時，按第5章和第7章的要求判定。10.2當(dāng)出現(xiàn)下列情況之一時，增加檢測第6章和第8章要求的內(nèi)容，依據(jù)檢測結(jié)果進(jìn)行輔助鑒定：a)第5章和第7章的項目無法進(jìn)行檢測或者判定時；b)第三方提出要求時。6(規(guī)范性)取閉殼肌100mg,按照標(biāo)準(zhǔn)的酚-三氯甲烷抽提法或者使用試劑盒進(jìn)行DNA提取。COI-F:5'-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3',COI-R:5'-TAAACTTCAGGGTGAC-A.3PCR擴(kuò)增KCl;100mmol/L(NH)?SO?;15μL的10×PCR緩沖液[200mmol/LTris-HCl,pH8.4;200mmol/Lmmol/LMgCl?],加