實(shí)驗(yàn)室基本常識(shí)

高級(jí)食品檢驗(yàn)工復(fù)習(xí)題第6頁(yè)共9頁(yè)附件一實(shí)驗(yàn)室基本常識(shí)實(shí)驗(yàn)室工作是科學(xué)實(shí)踐的重要手段之一。只有嚴(yán)肅認(rèn)真地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，才能獲得可靠的結(jié)果，并從中引出反映客觀實(shí)際的規(guī)律來(lái)。隨隨便便、粗心大意是做不出正確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果的。因此，必須養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)室工作習(xí)慣。下面的問(wèn)題希望引起注意。1：挪動(dòng)干凈玻璃儀器時(shí)，勿使手指接觸儀器內(nèi)壁。拿吸管時(shí)切勿用手觸及其尖端需放入液體中的部位。2：洗凈的儀器要放在架上或干凈紗布上晾干，不能用抹布擦拭，更不能用抹布擦拭儀器的內(nèi)壁。吸管、攪拌等用后要放在架上或底部墊有干凈紗布的燒杯內(nèi)，切勿亂放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，實(shí)驗(yàn)臺(tái)要保持清潔整齊。3：量瓶是量器，不要用作盛器。4：量瓶等帶有磨口玻璃塞的儀器塞子，不要蓋錯(cuò)。洗滌時(shí)塞子和儀器本身要放在一起，以免弄混。不用時(shí)要用紙條把塞子和瓶口隔開(kāi)。抹過(guò)凡士林的磨口玻塞要用有機(jī)溶劑將凡士林洗凈后，再用紙條隔開(kāi)放置。5：不要用濾紙稱量藥品，也不要用濾紙作記錄。6：不要用石蠟封閉精細(xì)藥品的瓶口，以免摻混。7：標(biāo)簽紙的大小應(yīng)與容器相稱，貼在試劑瓶或燒杯的上2/3處，試管等則貼在上部。標(biāo)簽上應(yīng)寫(xiě)明物質(zhì)的名稱、規(guī)格和濃度、配制的日期和配制人。8：標(biāo)準(zhǔn)試劑烘干后，應(yīng)以稱量瓶放在干燥器中。稱取后立即放回干燥器備用。9：取用試劑和標(biāo)準(zhǔn)溶液后，需立即將試劑瓶塞嚴(yán)，放回原處。取出的試劑和標(biāo)準(zhǔn)溶液如未用盡，切勿倒回瓶?jī)?nèi)，以免摻混。取標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)，應(yīng)根據(jù)需要倒出一定量于干凈燒杯內(nèi)，再用移液管由燒杯中量取。不能用移液管直接由試劑瓶量取。10：凡是發(fā)生煙霧、有毒氣體和有臭味氣體的實(shí)驗(yàn)，均應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。櫥門(mén)應(yīng)關(guān)閉，非必要時(shí)不能打開(kāi)。11：用動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，在殺死或解剖等操作中，必須按照規(guī)定方法進(jìn)行。不許戲弄?jiǎng)游铮^對(duì)不能用動(dòng)物、手術(shù)器械開(kāi)玩笑。12：在實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)要緊張嚴(yán)肅。不許談天說(shuō)笑，更不許大聲喧嘩或互相打鬧。實(shí)驗(yàn)室的藥品器材，未經(jīng)允許不得帶出實(shí)驗(yàn)室。13：在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，要將實(shí)驗(yàn)的結(jié)果及時(shí)如實(shí)地記錄下來(lái)，數(shù)據(jù)要記在一定的記錄本中，不要隨便記在紙條上，以免丟失。需要拍照的及時(shí)拍照。記錄不能隨意涂改。14：要愛(ài)護(hù)儀器和節(jié)省藥品。貴重儀器在使用前應(yīng)熟知使用方法。使用時(shí)，要嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。發(fā)生故障時(shí)，應(yīng)立即停止儀器的運(yùn)轉(zhuǎn)，告知管理人員。切勿擅自拆修。使用后應(yīng)按規(guī)定登記。

實(shí)驗(yàn)基本操作一：容量瓶

凡要求準(zhǔn)確配制一定濃度的溶液時(shí)必須使用容量瓶。容量瓶的容量有大有小，均在瓶上標(biāo)出（如50ml、500ml等）。瓶頸上有一刻度線，表示當(dāng)液體加到此刻度時(shí)就相當(dāng)于瓶上所標(biāo)容量。瓶上并標(biāo)有溫度，通常為20℃，表示瓶上所標(biāo)容量是在20℃時(shí)的容量。室溫不在配制溶液時(shí)，先將溶質(zhì)在燒杯中用少量溶劑溶解，再把溶液沿玻璃棒引入容量瓶；用少量溶劑沖液燒杯后倒入容量瓶，最后再添加溶劑到刻度線。加溶劑時(shí)在接近刻度線前，應(yīng)改用滴管吸取溶劑添加，以免超過(guò)刻度線。裝透明溶液時(shí)應(yīng)使液體凹面下線與瓶上刻度線重疊；非透明溶液則應(yīng)使液體凹面上線與刻度線重疊。混勻時(shí)，一手握瓶頸并按住瓶塞；一手托瓶底，反復(fù)顛倒、搖動(dòng)數(shù)次。為了保證容量瓶的準(zhǔn)確度，容量瓶中所裝溶液溫度應(yīng)在20℃二：吸量管

是精密的卸量容器。實(shí)驗(yàn)室常用的分三種：1：刻度吸管

這類吸管的管壁上刻印有多個(gè)刻度。刻度分為刻到尖端的及刻度不到尖端的；刻度讀數(shù)有從上而下及從下而上的，用前必須分清楚。用刻度吸量管量取液體時(shí)，若使用刻度不到尖端的，只要小心將液體放至下端最后刻度處即可。若使用刻度到尖端的吸管則要注意使用規(guī)則。北京等地生產(chǎn)的吸管規(guī)定：1ml（包括1ml）以上的刻度管，在放出液體后，尖端遺留的液體不應(yīng)吹出，只要使管尖緊靠容器內(nèi)壁轉(zhuǎn)動(dòng)幾秒鐘即可；1ml以下（不包括1ml）的刻度管則必須把尖端遺留的液體吹入容器內(nèi)。這類管上一般都印有“吹”字。若遇不明是否該吹的吸管，可作校正后（其校正法見(jiàn)附錄）再行使用，以免產(chǎn)生錯(cuò)誤。2：移液管

此類管中部有一圓柱狀空泡，只有一個(gè)刻度。由于卸出量已經(jīng)固定，所以準(zhǔn)確性比刻度吸管大。使用時(shí)，將所量取的液體慢慢放出，尖端所余少量液體不應(yīng)吹出，只須在最后將管尖觸及容器內(nèi)壁轉(zhuǎn)動(dòng)幾秒鐘即可。這類管主要作量卸液體之用。3：奧氏（Ostwald）吸管

這是一類特殊吸管。管下端有一卵形空泡，上端有一容量刻度。量取液體時(shí)，當(dāng)所量取的液體自行流出后，必須將遺留在管尖內(nèi)的少量液體吹入容器內(nèi)。該管的特點(diǎn)是每單位容器所占管壁的⑼換上待測(cè)溶液，輕輕晃動(dòng)幾次，以便電極與溶液接觸均勻。待測(cè)液的溫度應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)溶液一致。⑽撳下“讀數(shù)開(kāi)關(guān)”，指針?biāo)傅臄?shù)值即為待測(cè)溶液的PH。重復(fù)此操作幾次直至讀數(shù)不變?yōu)橹?。⑾測(cè)畢。將電極洗凈，玻璃電極浸泡入蒸餾水中保存?zhèn)溆?；甘汞電極套上皮帽放入電極盒。⑿關(guān)閉電源。4：注意事項(xiàng)⑴玻璃電極初次使用前，必須在蒸餾水中浸泡24h以上。用后浸泡于蒸餾水中以供隨時(shí)可用。⑵玻璃電極易損壞。使用時(shí)避免碰撞或用力推擦。玻璃電極不應(yīng)與強(qiáng)酸、堿接觸太久，應(yīng)盡快操作，用畢迅速以水洗凈。⑶甘汞電極內(nèi)KCL溶液應(yīng)保持飽和狀態(tài)（即有少許結(jié)晶出現(xiàn)），液柱要接觸電極絲。每次用后要及時(shí)套上兩個(gè)皮帽，以免揮發(fā)干使用時(shí)不能在水中浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，以防KCL稀釋。實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確度與精密度

在生物化學(xué)分析工作中，無(wú)論怎樣謹(jǐn)慎地操作，測(cè)定結(jié)果總會(huì)產(chǎn)生誤差，因此，掌握精確度與精密度實(shí)驗(yàn)，是進(jìn)行分析工作的基礎(chǔ)。一：實(shí)驗(yàn)誤差

在實(shí)際的分析工作中，由于儀器的性能，實(shí)驗(yàn)的技巧以及化學(xué)反應(yīng)是否完全等原因，使測(cè)得的結(jié)果往往不是客觀的真實(shí)值，只能是與真實(shí)值接近，所以稱測(cè)得值為近似值。測(cè)得的近似值與真實(shí)值之間的差別稱為誤差。近似值比真實(shí)值大時(shí)誤差為正，比真實(shí)值小時(shí)誤差為負(fù)。表示誤差的方法有絕對(duì)誤差和相對(duì)誤差。1：絕對(duì)誤差

測(cè)得值與真實(shí)值的差值稱為絕對(duì)誤差。以A表示真實(shí)值，a表示近似值，r表示絕對(duì)誤差，則

r=a-A如，滴定讀數(shù)為20.24ml，而其真實(shí)體積為20.23ml，則絕對(duì)誤差為：r=20.24-20.23=+0.01ml；而另一滴定讀數(shù)為2.033ml，其真實(shí)體積為2.023ml，其絕對(duì)誤差為：r=2.033-2.023=+0.01ml。兩份測(cè)定的絕對(duì)誤差均為0.01，但兩份測(cè)定的體積相差10倍，可見(jiàn)r不能反映問(wèn)題的全面，因此有另一種表示誤差的方式。2：相對(duì)誤差

絕對(duì)誤差占真實(shí)值的百分?jǐn)?shù)為相對(duì)誤差。相對(duì)誤差用R表示，即：R（%）=(a-A

)

/A

×100=

r/A×100如上例滴定讀數(shù)的相對(duì)誤差為：0.05%；0.5%。由此可見(jiàn)，兩份滴定讀數(shù)的絕對(duì)誤差雖然相等，但當(dāng)用相對(duì)誤差表示時(shí)，第一份滴定比第二份滴定的準(zhǔn)確度大10倍。顯然，當(dāng)被測(cè)定的量較大時(shí)，R就越小，測(cè)定的準(zhǔn)確度也就越高。所以應(yīng)該用相對(duì)誤差來(lái)表示分析結(jié)果的準(zhǔn)確度。二：系統(tǒng)誤差與回收率實(shí)驗(yàn)根據(jù)誤差產(chǎn)生的原因和性質(zhì)，可分為系統(tǒng)誤差和偶然誤差。1：系統(tǒng)誤差

系統(tǒng)誤差是由分析過(guò)程中經(jīng)常性的原因造成的，在每次測(cè)定中都比較穩(wěn)定的重復(fù)出現(xiàn)，它與分析結(jié)果的準(zhǔn)確度有關(guān)，主要產(chǎn)生的原因有：⑴方法誤差

由于分析方法本身所造成的，如容量分析中等當(dāng)點(diǎn)與滴定終點(diǎn)不完全符合等。⑵儀器誤差

由于儀器不夠精密，或未進(jìn)行校正所造成的。⑶試劑誤差

試劑或蒸餾水不純。⑷操作誤差

每個(gè)人對(duì)實(shí)驗(yàn)條件控制不同而造成，如不同操作者對(duì)滴定終點(diǎn)顏色變化的判斷不同等。同時(shí)在操作中尚存在一些不可避免的損耗及污染，如奧氏吸管，用的再精心，也免不了有少量的樣品沾壁而損耗，用濾紙濾過(guò)也是如此。由于上述種種原因引起的系統(tǒng)誤差，其特點(diǎn)是無(wú)論重復(fù)做多少次試驗(yàn)，都是經(jīng)常反復(fù)出現(xiàn)，同真實(shí)數(shù)值之間的差距是比較一定的，并有相同的符號(hào)，（+）或（-）。為了檢驗(yàn)系統(tǒng)誤差的大小，衡量測(cè)定的準(zhǔn)確度，常用回收率實(shí)驗(yàn)來(lái)表達(dá)。2：回收率實(shí)驗(yàn)

回收率實(shí)驗(yàn)是在要測(cè)定的溶液中添加已知量的標(biāo)準(zhǔn)被測(cè)物，與待測(cè)的未知樣品同時(shí)做平行測(cè)定，測(cè)得的添加標(biāo)準(zhǔn)物量與所添加的標(biāo)準(zhǔn)物量之比的百分率就稱為回收率?；厥章剩?）=(（樣品+標(biāo)準(zhǔn)物）測(cè)定值-樣品測(cè)定值

)

/添加標(biāo)準(zhǔn)物量×100系統(tǒng)誤差越大，回收率越低；回收率越接近100%，系統(tǒng)誤差越小。由于系統(tǒng)誤差對(duì)分析結(jié)果的影響比較穩(wěn)定，重復(fù)測(cè)定可以重復(fù)出現(xiàn)，因而可以設(shè)法減少或校正。3：系統(tǒng)誤差的減免或校正

為了減免系統(tǒng)誤差常采用下列措施：⑴儀器的校正

對(duì)所用的測(cè)量?jī)x器（如砝碼、容量?jī)x器）進(jìn)行校正，以減少誤差。⑵做空白實(shí)驗(yàn)

由于試劑中含有影響測(cè)定結(jié)果的雜質(zhì)或侵蝕器皿等而發(fā)生誤差，可用空白實(shí)驗(yàn)來(lái)校正。其方法是用空白樣品（即不含被測(cè)物的試劑溶液）與被測(cè)樣品在完全相同的條件下進(jìn)行測(cè)定，最后將被測(cè)樣品所得的測(cè)定值，減去空白實(shí)驗(yàn)的測(cè)得值，可以得到比較準(zhǔn)確的結(jié)果。⑶用回收率實(shí)驗(yàn)對(duì)測(cè)得值進(jìn)行校正，按上述方法求出回收率之后，對(duì)測(cè)得值可用下式進(jìn)行校正：被測(cè)樣品的實(shí)際含量=樣品的分析結(jié)果（含量）

回收率應(yīng)該指出，由于真實(shí)值是無(wú)法知道的，因此在實(shí)際工作中無(wú)法求出真正的準(zhǔn)確度，只得用精密度來(lái)評(píng)價(jià)分析的結(jié)果。

三：偶然誤差與精密度1：偶然誤差

偶然誤差是指在某項(xiàng)測(cè)定中由于偶然的一些因素引起的誤差，這些因素時(shí)隱時(shí)現(xiàn)，如儀器的臨時(shí)故障，天平兩側(cè)溫度不一，電壓不穩(wěn)定，取樣不均勻等，另外，操作者不小心也是產(chǎn)生偶然誤差的原因，如吸量血液后管外擦的不凈，或放出的速度不均勻等，偶然誤差的大小通常用精密度來(lái)衡量。2：精密度

精密度是指對(duì)同一樣品在同一條件下多次測(cè)定結(jié)果之間接近的程度。同一樣品的一系列測(cè)值越是接近，精密度越高，表明偶然誤差越小。若測(cè)定高低不一，表明偶然誤差很大，精密度很低。精密度一般用偏差來(lái)表示。偏差也分為絕對(duì)偏差和相對(duì)偏差：絕對(duì)偏差=個(gè)別測(cè)定值-測(cè)定值的算術(shù)平均值（不計(jì)正負(fù)號(hào)）相對(duì)偏差（%）=絕對(duì)偏差

/

算術(shù)平均值

×100精密度的表示方法和誤差的表示方法一樣，用相對(duì)偏差表示比絕對(duì)偏差更有意義。在實(shí)驗(yàn)中，對(duì)某一樣品通常須進(jìn)行多次平行測(cè)定，求得其算術(shù)平均值，作為該樣品的分析結(jié)果。對(duì)于該結(jié)果的精密度則有多種表示方法。⑴平均絕對(duì)偏差和平均相對(duì)偏差的表示法：如

一份血樣共作4次血氯測(cè)定，其結(jié)果如下：

測(cè)定結(jié)果（t）

算術(shù)平均值

個(gè)別測(cè)值的絕對(duì)偏差（d）

566mg%

9mg%

584mg%

575mg%

9mg%

570mg%

5mg%

580mg%

5mg%

平均絕對(duì)偏差（d）=9+9+5+5

/

4=7mg%平均相對(duì)偏差=7

/

575=1.2%在實(shí)驗(yàn)中，有時(shí)只做兩次測(cè)定，精確度可用下式計(jì)算：

兩次分析結(jié)果的差值

/

平均值

×100%不同的實(shí)驗(yàn)方法，允許誤差的要求不相同。如用滴定法對(duì)同一樣品進(jìn)行平行測(cè)定時(shí)，其各測(cè)值之間的允許誤差不應(yīng)超過(guò)0.2%。⑵標(biāo)準(zhǔn)偏差或均方根偏差：利用絕對(duì)偏差（d）和測(cè)定次數(shù)（n）可計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)偏差（S.D）：

S.D=±√Σd2

n-1

標(biāo)準(zhǔn)偏差表示所測(cè)定的這些樣品中待測(cè)物的含量變化范圍。這是從生物統(tǒng)計(jì)推導(dǎo)來(lái)的一種精密度表示法，標(biāo)準(zhǔn)偏差越小表示樣品中各個(gè)測(cè)值的變異度（集中或分散的程度）越小。表示越精確。其結(jié)果可以用平均值（x）±標(biāo)準(zhǔn)偏差（S.D）來(lái)表示。3：偶然誤差的減免及校正

偶然誤差與分析結(jié)果的精密度有關(guān)，它來(lái)源于難以預(yù)料和不固定的因素?；蚴怯捎谌硬痪鶆颍蚴怯捎跍y(cè)定過(guò)程中某些不易控制的外界因素的影響等。在生物測(cè)定法中，由于影響生物的因素是多方面的，往往還會(huì)造成較大的誤差。為了減少偶然誤差，一般采取的措施是：⑴均勻取樣

動(dòng)、植物新鮮組織可制成勻漿后取樣；細(xì)菌通常制成懸液，經(jīng)玻璃球打散搖勻后，再量取一定體積的菌體樣品進(jìn)行分析；固體樣品極不均勻，應(yīng)于取樣前先進(jìn)行粉碎、混勻。⑵多次取樣

根據(jù)偶然誤差出現(xiàn)的規(guī)律，如果進(jìn)行多次平行測(cè)定，然后取其算術(shù)平均值，就可以減少偶然誤差。平行測(cè)定的次數(shù)愈多，其平均偶然誤差就愈少。關(guān)于上述的系統(tǒng)誤差，偶然誤差及準(zhǔn)確度和精密度的問(wèn)題，有幾個(gè)問(wèn)題再進(jìn)一步說(shuō)明。1：除系統(tǒng)誤差、偶然誤差之外，還有因錯(cuò)誤操作引起的“過(guò)失誤差”，如讀錯(cuò)刻度、溶液濺出，加錯(cuò)試劑等。這時(shí)可能出現(xiàn)一個(gè)很大的誤差值，此種數(shù)值應(yīng)棄去不用。2：誤差與偏差具有不同的含義，誤差以真實(shí)值為標(biāo)準(zhǔn)，而偏差是以平均值為標(biāo)準(zhǔn)。由于物質(zhì)的真實(shí)值一般是無(wú)法知道的，所以我們平時(shí)所說(shuō)的真實(shí)值實(shí)際上只是采用了各種方法進(jìn)行多次平行分析所得到的相對(duì)正確的平均值。用這一平均值代替真實(shí)值來(lái)計(jì)算誤