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文檔簡介
1、 第2章 細(xì)菌的生理 Bacterial physiology 第2章 細(xì)菌的生理重點與難點細(xì)菌的生長繁殖:了解細(xì)菌的繁殖方式和速度,掌握細(xì)菌的生長繁殖的條件。細(xì)菌的代謝產(chǎn)物及其實際意義:了解分解產(chǎn)物及其在細(xì)菌鑒別上的意義,掌握與醫(yī)學(xué)有關(guān)的合成代謝產(chǎn)物的種類及意義。細(xì)菌的人工培養(yǎng):熟悉培養(yǎng)基的定義及種類,熟悉細(xì)菌在人工培養(yǎng)基中的生長情況,掌握細(xì)菌菌落概念及意義。 重點與難點細(xì)菌的生長繁殖:了解細(xì)菌的繁殖方式和速度,掌握細(xì)菌 第一節(jié) 細(xì)菌的理化性狀 Physical and Chemical PropertyOptical property半透明Surface proportions較一般生物體
2、大1萬倍Electronic phenomenaG+菌 pI 23G-菌 pI 45permeability細(xì)胞壁、膜有半透性O(shè)smotic pressureG+菌 2025大氣壓G-菌 56大氣壓物理的性狀(physical Property) 第一節(jié) 細(xì)菌的理化性狀Optical prop化學(xué)組成(chemical component)占細(xì)胞總重量75%-90%carbon、hydrogen、nitrogen、oxygen、phosphorus、sulfur etc.鉀、鈉、鐵、鎂、鈣等肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸等water:organisminorganicsSpecial composit
3、ion化學(xué)組成(chemical component)占細(xì)胞總重量第二節(jié) 細(xì)菌的營養(yǎng)與生長繁殖Nutrition and growth第二節(jié) 細(xì)菌的營養(yǎng)與生長繁殖 nutrimentwaterCarbonNitrogeninorganic saltGrowth factors重要溶劑菌體成分能源菌體成分原料某些菌需之菌體及酶的組分能量儲存及轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)滲透壓與繁殖及致病相關(guān)一、細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì)nutritive substance nutrimentwaterCarbonNitrogen二、細(xì)菌攝取營養(yǎng)物質(zhì)的機制Mechanism of bacteria ingesting nutriment 被動
4、擴散(passive diffusion): 簡單擴散、易化擴散 (simple and facilitated diffusion)主動轉(zhuǎn)運(active transport): ABC轉(zhuǎn)運 、離子偶聯(lián)轉(zhuǎn)運、基團轉(zhuǎn)移、特異性轉(zhuǎn)運二、細(xì)菌攝取營養(yǎng)物質(zhì)的機制Mechanism of bac三.細(xì)菌營養(yǎng)類型nutriment types自養(yǎng)菌(autotroph) 以無機物或光合作用為能源異養(yǎng)菌(heterotroph) 以有機物為原料合成菌體成分,包括腐生菌和寄生菌病原菌都是異養(yǎng)菌,且大部為寄生菌。三.細(xì)菌營養(yǎng)類型nutriment types自養(yǎng)菌(au四.影響細(xì)菌生長的因素 Factors
5、Affecting Growth營養(yǎng)物質(zhì) Nutrients氫離子濃度pH 6.0 8.0溫度temperature Psychrophilic(嗜冷的)forms - 1020oC Mesophilic(嗜溫的)forms - 2040oC Thermophilic (嗜熱的)forms - 5060oC Pathogenic bacteria-37四.影響細(xì)菌生長的因素 Factors Affecting氣體(gas) 專性需氧菌 Obligate aerobe :如結(jié)核分枝桿菌 專性厭氧菌 Obligate anaerobe :如破傷風(fēng)梭菌 兼性厭氧菌facultative anaero
6、be:大多數(shù)病原菌 微需氧菌microaerophile:如空腸彎曲,CO2對細(xì) 菌的生長也很重要。滲透壓 Ionic strength & osmotic pressure 一般培養(yǎng)基滲透壓適于大多數(shù)細(xì)菌。氣體(gas)五、細(xì)菌的生長繁殖groth and multiplication個體生長繁殖: 二分裂法(binary fission),2030min一 代,而結(jié)核分支桿菌1820h才分裂一次。群體生長繁殖- 生長曲線: 遲緩期(lag phase) 對數(shù)期(logarithmic phase) 穩(wěn)定期(stationary phase) 衰亡期(decline phase)五、細(xì)菌的生
7、長繁殖groth and multiplicaBacteria MultiplicationBinary fission (二分裂)Bacteria MultiplicationThe Growth CurveA: The Lag PhaseE: The Maximum Stationary Phase C: The Exponential PhaseF: The Death Phase (Decline Phase)The Growth CurveA: The Lag PhaCOLONY FORMING UNITS TIMELagLogStationary DeathCOLONY TIMEL
8、agLogStationary De 分解代謝: 營養(yǎng)物質(zhì)分解和轉(zhuǎn)化為能量的過程 合成代謝: 幾種簡單的前體 + 能量 用于細(xì)胞組分的合成第三節(jié) 細(xì)菌的新陳代謝 分解代謝:第三節(jié) 細(xì)菌的新陳代謝一、分解代謝產(chǎn)物和生化反應(yīng) 細(xì)菌對糖、蛋白質(zhì)的分解能力的不同,因而代謝產(chǎn)物各異,利用生物化學(xué)方法鑒別不同細(xì)菌稱為細(xì)菌的生化反應(yīng)。糖發(fā)酵試驗 大腸埃希菌分解乳糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣; 傷寒沙門菌不分解乳糖吲哚試驗 大腸桿菌有色氨酸酶,分解色氨酸產(chǎn)生吲哚。甲基紅試驗VP試驗一、分解代謝產(chǎn)物和生化反應(yīng) 細(xì)菌對糖、蛋白質(zhì)的分解能力的不同枸櫞酸鹽利用試驗 產(chǎn)氣桿菌以枸櫞酸鹽為碳源、以銨鹽為氮源分解銨鹽產(chǎn)氨(堿性)指示劑淡綠
9、變深藍(lán)為陽性尿素酶試驗 變形桿菌有尿素酶,可分解尿素產(chǎn)生氨培養(yǎng)基變堿酚紅指示劑顯紅色硫化氫試驗 變形桿菌、沙門菌分解含硫氨基酸產(chǎn)生硫化氫遇鉛或鐵離子生成黑色的硫化物枸櫞酸鹽利用試驗 IMViC試驗I : 吲哚試驗M: 甲基紅試驗Vi: VP試驗C: 枸櫞酸鹽利用實驗 常用于鑒定腸道桿菌,如大腸埃希菌+ + - -,產(chǎn)氣桿菌- - + +IMViC試驗I : 吲哚試驗Vitek鑒定系統(tǒng)-96E Vitek鑒定系統(tǒng)-96E 二、合成代謝產(chǎn)物 熱原質(zhì) 細(xì)菌合成的一種注入人體或動物體內(nèi)引起發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。大多數(shù)是G-菌的脂多糖,耐高溫、高壓,250 干烤才能破壞。 二、合成代謝產(chǎn)物 熱原質(zhì)毒素和侵襲性
10、酶 內(nèi)毒素:G菌的脂多糖 外毒素:G菌和少數(shù)G菌產(chǎn)生的蛋白質(zhì) 外毒素毒性強于內(nèi)毒素 侵襲性酶 損傷機體組織,促進(jìn)細(xì)菌侵襲和擴散,如卵磷脂酶(產(chǎn)氣莢膜梭菌 )、透明質(zhì)酸酶(鏈球菌)。毒素和侵襲性酶抗生素:某些微生物代謝過程中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死某些其他微生物或腫瘤細(xì)胞的物質(zhì)。如多粘菌素、桿菌肽。細(xì)菌素:只能殺傷有親緣關(guān)系的細(xì)菌,如大腸菌素。無治療意義,有助于細(xì)菌分型。維生素:某些腸道菌合成,如B族維生素、VK。色素: 金黃色色素(脂溶性) 綠色色素(水溶性)抗生素:某些微生物代謝過程中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死某些其他微 第四節(jié) 細(xì)菌的人工培養(yǎng)Artifical culture of bacter
11、ia一、細(xì)菌的培養(yǎng)方法分離培養(yǎng):劃線接種在固體培養(yǎng)基的表面,因劃線的分散作用,使許多原混雜的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基表面上散開。 純培養(yǎng):挑取一個菌落,移種到另一培養(yǎng)基中,可生長出來的大量的純種細(xì)菌。 發(fā)酵培養(yǎng):在適宜的條件下,發(fā)酵罐中大量培養(yǎng)微生物(細(xì)菌、真菌等)細(xì)胞和生產(chǎn)代謝產(chǎn)物的工藝過程。 第四節(jié) 細(xì)菌的人工培養(yǎng)一、細(xì)菌的培養(yǎng)方法分離培養(yǎng):劃線接種純培養(yǎng)(pure culture)液體培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)基菌落(colony)純培養(yǎng)液體斜面菌落(colony)菌種篩選搖瓶試驗發(fā)酵罐中試驗發(fā)酵培養(yǎng)由實驗室研究到產(chǎn)業(yè)化的過程發(fā)酵生產(chǎn)菌種篩選搖瓶試驗發(fā)酵罐中試驗發(fā)酵培養(yǎng)由實驗室研究到產(chǎn)業(yè)化二、培養(yǎng)基培養(yǎng)基(
12、culture medium):是由人工方法配制而成的,專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)物制品。Liquid mediumSolid mediumSemi-Solid medium二、培養(yǎng)基培養(yǎng)基(culture medium):是由人工方三、細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象 1.液體培養(yǎng)基中生長現(xiàn)象混濁:大多數(shù)細(xì)菌 沉淀:鏈狀生長的細(xì)菌菌膜:專性需氧菌,如結(jié)核桿菌、枯草桿菌。 三、細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象 1.液體培養(yǎng)基中生長現(xiàn)象2.菌落(colony)-單個細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細(xì)菌集團。Mycobacterium tuberculosis2.菌落(colony)-單個細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼
13、可見的細(xì)3.半固體培養(yǎng)基中生長情況 有鞭毛細(xì)菌: 擴散生長,周圍渾濁。無鞭毛細(xì)菌: 沿穿刺線生長,周圍透明。3.半固體培養(yǎng)基中生長情況 四、人工培養(yǎng)細(xì)菌的用途 在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用 感染性疾病的病原學(xué)診斷 細(xì)菌學(xué)的研究 生物制品的制備 在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用 在基因工程中的應(yīng)用 四、人工培養(yǎng)細(xì)菌的用途 在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用第五節(jié) 抑制或殺滅微生物 Prevention of microoganisms消毒Disinfection The process that reduces the number of pathogenic microorganisms. Bacterial spores and oth
14、er relatively resistant organisms may remain viable.滅菌(Sterilization) A treatment that destroys all microbial life, including vegetative form and endospores抑菌 (Bacteriostasis) To inhibit the growth of bacteria第五節(jié) 抑制或殺滅微生物 Prevention of m防腐(Antisepsis) A chemical agent safely used in or on living tis
15、sue to destroy microorganisms無菌(Asepsis) A condition in which living microorganisms are absent無菌或無菌操作技術(shù)(Aseptic techniques) Measures taken to ensure that living microorganisms are absent防腐(Antisepsis)METHODSPhysical methods of disinfection and sterilizationChemical methods of disinfection and steril
16、izationBiotic controlling of pathogenic micobial infection METHODSPhysical methods of dis1. Physical controls on microoganismsIncluding: Heat Cold Drying Radiation Filtration Osmotic strength1. Physical controls on microoDry heat(干熱)Hot air sterilizationFlamingIncineration Hot air sterilization Cond
17、itions160-170, 1-2hrs Significance & applicationsglassware, metal objects(operating knife、scissor、forceps)Dry heat(干熱)Hot air sterilizatburning method(incineration)flowing steam disinfectionhot air drying method(烤箱)boiling water disinfectionburning method(incineration)flMoist heat(濕熱)Moist heat Boil
18、ing waterAutoclavingPasteurizationMoist heat(濕熱)Moist heat PasteurizationDefinition: a process in which fluids are heated at temperatures below boiling point to kill pathogenic microorganisms in the vegetative state without altering the fluids palatability. Conditions: 62, 30 minute or 71.7, 15secon
19、dSignificance: kills vegetative pathogensApplications: milk, beerPasteurizationBoiling 100 at 1 atmospheric pressure. 5min killing most non-sporing bacteria. For 1-2h will kill a few sporing microoganisms. 2% sodium carbonate can enhance the efficiency ,105(the boiling point).BoilingSteam sterilliza
20、tion(with common pressure) It applies water vapor to disinfect 100 for 1530min, not useful for spore.Fractional sterilization It takes water vapor intermittently to sterilization at common pressure.it usually applies to medium containing sugar or milk,which cannot bear high temperature.Steam sterill
21、ization(with commAutoclaving Conditions: When pressure is 103.4kpa, the temperature in the autoclave can reach 121.3c, 1520 minutes is enough for sterilization. Significance: kills both spores and vegetative microorganisms;the most common and effective method of sterilization.Application: sterilizes
22、 materials not damaged by heat and moisture.pressure kettleAutoclaving pressure kettleSummary: Moist heat is generally more effective than dry heat Reasons- Steam is more easily to inactivate proteins. Steam penetrates more easily.Steam has potent heat. Summary:RadiationUltraviolet radiation The mos
23、t effective wavelengths: 250-260nmMechanism: destroy DNA by forming thymine dimersCharacteristics:poor penetrating power damage of the eyes and the skin Applications: Air disinfectionsSurface disinfectionRadiationUltraviolet radiationFiltrationMechanismmechanically removes microorganismsApplications
24、terilize materials likely to be damaged by heatFiltrationMechanism2. Chemical antimicrobial methodsMechanisms Injury of cell membranes Inactivation of proteins (e.g., enzymes )Damage of genetic materials2. Chemical antimicrobial methCommon chemical agents Phenol(苯酚) Alcohols: 70-75% (乙醇) Heavy metals: Silver nitrate (1%)(硝酸銀) Chlorine(氯) Iodine(碘) 37% Formalin(甲醛) Crystal violet(龍膽紫)Common chemical agents Effects levelDisinfectants examplesHigh levelEthylene oxide, peracetic acid ,kinds of aldehydeNormal levelKinds of alcohol, kinds of io
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