河川沙塘鱧種質標準

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DB

江西省地方標準

DBXX/XXXXX—XXXX

河川沙塘鱧種質標準

ThegermplasmofOdontobutispotamophila

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（送審稿）

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實施

江西省質量技術監(jiān)督局發(fā)布

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前言

本標準按照GB/T112009給出的規(guī)則起草。

本標準由江西省水產(chǎn)標準化技術委員會提出。

本標準起草單位：江西省水產(chǎn)科學研究所、江西一泉水產(chǎn)養(yǎng)殖公司聯(lián)合起草。

本標準主要起草人：王海華、徐先棟、吳斌、朱述淦、余連渭、康升云、肖林華、彭國萍、熊艷、

習宏斌、張斌華。

II

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河川沙塘鱧種質標準

1范圍

本標準規(guī)定了河川沙塘鱧（Odontobutispotamophila）的學名與分類地位、形態(tài)特征、生長繁殖、

細胞遺傳學和生化遺傳學特性以及檢測方法。

本標準適用于河川沙塘鱧種質的檢測和鑒定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T18654.3-2008養(yǎng)殖魚類種質檢驗第3部分：性狀測定

GB/T18654.12-2008養(yǎng)殖魚類種質檢驗第12部分：染色體組型分析

GB/T18654.13-2008養(yǎng)殖魚類種質檢驗第13部分：同工酶電泳分析

3學名和分類地位

3.1學名

河川沙塘鱧(Odontobutispotamophila)。

3.2分類地位

屬鱸形目(Perciformes)，沙塘鱧科（Odontobutidae），沙塘鱧屬(Odontobutis)。

4主要形態(tài)結構特征

4.1外部形態(tài)特征

4.2外部形態(tài)

河川沙塘鱧魚體粗壯，前部圓筒形，后部側扁。頭寬大平扁，寬大于高。吻寬短，吻大于眼徑。眼

小，上側位，稍突出;眼間隔寬而凹入，大于眼徑。鼻孔2個，前鼻孔具一短管，后鼻孔小，圓形。

口大，端位，斜裂，下頜突出，上頜骨后延伸達眼中部下方或稍前。舌大，游離，前端圓形。牙細小

尖銳，兩頜各有多行，排列呈帶狀。犁骨無齒，有咽齒。體色可隨環(huán)境的變化而改變，呈褐色至黑褐色，

體背側有黑色大斑3塊。各鰭均有明暗交替的帶狀紋。河川沙塘鱧外形見圖1。

1

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圖1河川沙塘鱧外形圖

4.3可數(shù)性狀

見表1。

表1河川沙塘鱧可數(shù)性狀

可數(shù)性狀變幅

背鰭Ⅵ－Ⅷ，Ⅰ－7－10(以Ⅶ，Ⅰ－9為主)；臀鰭Ⅰ－6

鰭式

－9(以Ⅰ－7為主)；胸鰭14～17(以15為主)；腹鰭Ⅰ－5。

縱列鱗34～41(以36～37為主)；橫列鱗14～17(以15～

鱗式

16為主)；背鰭前鱗24～31(以27～28為主)。

第一鰓弓鰓耙數(shù)9～11

脊椎骨數(shù)28～29

體側感覺乳突線鱗28～29

4.4可量性狀

見表2。

表2河川沙塘鱧可量性狀

可量性狀

項目

體長/體高體長/頭長體長/尾柄長頭長/眼徑頭長/吻長尾柄長/尾柄高

樣本數(shù)，尾100100100100100100

均值±標準差3.69±0.533.12±0.624.97±0.475.89±0.793.11±0.441.59±0.23

變幅2.99-4.42.64-4.074.58-6.893.98-7.372.35-4.061.41-1.97

5生長與繁殖

2

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5.1生長

5.1.1不同年齡組的魚體長和體重的實測值見表3

表3河川沙塘鱧各年齡組的體長和體重實測值

年齡，齡IIIIII

樣本數(shù)，尾63289

體長均值（cm）±標準差7.17±1.049.86±1.5811.78±1.47

體長變幅5.64-8.528.46-10.7510.54-12.69

體重均值（cm）±標準差8.26±1.2421.48±4.5536.64±4.98

體重變幅7.48-9.6511.61-23.9725.63-39.44

5.1.2體長與體重關系式

W=0.032×L2.88(R=0.949；p＜0.05)，式中，W——魚體體重，單位為克（g）；L——魚體體長，

單位為厘米（cm）。

5.1.3VonBertalanffy生長方程

L=19.2[1-e-0.22(t+0.77)]；W=158.91[1-e-0.22(t+0.77)]3。

5.2繁殖

5.2.1性成熟年齡

兩性的I冬齡魚均已性成熟。

5.2.2產(chǎn)卵特性

產(chǎn)卵時間為3-6月，盛產(chǎn)期為4-5月，而且3月的成熟系數(shù)雖已很高，但產(chǎn)卵個體較少，隨著4月水

溫升高，產(chǎn)卵活動增多，表明繁殖需一定的溫度條件。在湖岸和湖灣的淺水處產(chǎn)卵，卵主要產(chǎn)在較密的

蘆葦根部、石塊、瓦片或其它基質造成的隱蔽洞穴。卵塊呈圓形或橢圓形，卵粒以一端的粘絲附著于基

質，另一端游離，相互緊密排列。

5.2.3懷卵量

產(chǎn)卵群體由I-III齡組組成。絕對懷卵量平均為4216粒(2537-6564粒)；相對懷卵量平均為82粒

(53-154粒)。

6遺傳學特性

6.1河川沙塘鱧染色體核型

6.1.1二倍體染色體數(shù)目

3

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對河川沙塘鱧100個分散良好的中期分裂相進行觀察和計數(shù)，結果表明，河川沙塘鱧，80%的中期

分裂相的二倍體染色體為44條，由此可以判定河川沙塘鱧二倍體染色體數(shù)目為44條(表4)。

表4河川沙塘鱧二倍體染色體計數(shù)結果

染色體數(shù)目＜424243444546＞46合計

分裂相數(shù)目35880211100

所占百分比35880211100

6.1.2染色體核型圖

選取形態(tài)清晰，著絲點易辨的中期分裂相進行觀察，獲得河川沙塘鱧染色體相核型圖（圖2），結果

表明，河川沙塘鱧染色體組全部由端部著絲粒染色體構成，其核型公式為2n=44t，染色體臂數(shù)為44。

圖2河川沙塘鱧核型圖

6.2河川沙塘鱧同工酶檢測

6.2.1酯酶酶譜表型

沙塘鱧酯酶（EST）共檢測到6條帶(圖3)。肝臟中酯酶條帶數(shù)量和含量最豐富，共有6條帶，且活性

強，條帶著色深，鰓中酯酶酶活性次之，檢出一條染色較深的酶帶EST-3，其余組織酯酶酶活性較低，

均只檢出染色較淺的兩條帶EST-2及EST-3。

4

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圖3河川沙塘鱧不同組織酯酶電泳圖譜及酶譜示意圖

（G：鰓，B：腦，L：肝臟，S：脾臟，H：心臟，K：腎臟，M：肌肉，下同）

6.2.2乳酸脫氫酶酶譜表型

乳酸脫氫酶（LDH）在沙塘鱧各組織中含量較為豐富，酶帶比較多，共檢測到5條酶帶（圖2）。酶

帶分布具有明顯的組織差異性：腦組織中條帶數(shù)量及含量最為豐富，共檢出5條清晰的酶帶；鰓組織次

之，共檢出4條酶帶；肝臟中檢出3條帶，顏色較淡；心、腎組織中檢出兩條帶；脾臟和肌肉組織中只檢

出1條酶帶。

圖4河川沙塘鱧不同組織乳酸脫氫酶電泳圖譜及酶譜示意圖

7檢測方法

7.1形態(tài)特征的測定

按GB/T18654.3-2008的規(guī)定執(zhí)行。

7.2細胞遺傳學特性

（1）標本的制備。

魚體規(guī)格約12cm，充氧運輸至實驗室，并在充氣玻璃缸中暫養(yǎng)1周備用，每天投喂鮮活小雜魚一次。

（2）前期處理

按照10μL/g尾靜脈抽血，再以10μg/g魚體從胸鰭基部注射植物血凝素(PHA)。3.5h后，按

照1μg/g胸鰭基部注射秋水仙素，15min后剪鰓放血，取頭腎制備細胞懸液，經(jīng)500r/min離心

收集細胞，加入0.075mol/LKCl溶液37℃水浴低滲30min，離心后加入新配制的卡諾氏固定液

室溫固定20min，之后重復固定2次。再次離心后取沉淀，加入適量新配制的卡諾氏固定液重懸細

胞，用吸管吸取細胞懸液滴在玻片上，過酒精燈火焰3次，自然涼干備用。

（3）核型分析

按GB/T18654.12-2008養(yǎng)殖魚類種質檢驗第12部分：染色體組型分析規(guī)定執(zhí)行。

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7.3生化遺傳學特性測定

快速提取試驗魚鰓、腦、肝、脾、心、腎及肌肉組織少許，雙蒸水沖洗干凈，濾紙吸干，置于離心

管中，按1:3(W/V)加入0.1mol/L的磷酸緩沖液(pH7.0)，使用電動研磨器冰浴研磨。完成后于4℃下

10000r/min離心30min，吸取上清液，-20℃儲存?zhèn)溆谩?/p>

按GB/T18654.13-2008養(yǎng)殖魚類種質檢驗第13部分：同工酶電泳分析規(guī)定執(zhí)行。

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AA

附錄A

（規(guī)范性附錄）

試劑配制

A.1生理鹽水

氯化鈉8.5g

ddH2O1000ml

121℃高溫高壓滅菌20min備用。

A.2秋水仙素

稱取20mg秋水仙素，加入0.85%生理鹽水溶液20mL，待完全溶解后，經(jīng)121℃高溫高壓滅菌15min，

避光保存于4℃冰箱備用。

A.3植物血凝素

稱取20mg植物凝集素，加入0.85%生理鹽水溶液20mL，待完全溶解后，保存于4℃冰箱備用。

A.4卡諾氏固定液(Carnoy'sFluid)

配方：純酒精3份+冰醋酸1份。

A.5磷酸緩沖液

pH7.00.1mol/LPBS

KH2PO413.6g

K2HPO422.832g

NaCl8.5g

加ddH2O至1000mL

經(jīng)121℃高溫高壓滅菌20min，保存于4℃冰箱備用。

A.60.075mol/L氯化鉀低滲液

氯化鉀0.559g，蒸餾水100ml。

A.7姬姆薩染液

Giemsa原液1ml

1/15mol/L磷酸緩沖液（pH6.8或7.4）10ml。

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目次

前言................................................................................II

1范圍..............................................................................1

2規(guī)范性引用文件....................................................................1

3學名和分類地位....................................................................1

3.1學名..........................................................................1

3.2分類地位......................................................................1

4主要形態(tài)結構特征..................................................................1

4.1外部形態(tài)特征..................................................................1

4.2外部形態(tài)......................................................................1

4.3可數(shù)性狀......................................................................2

4.4可量性狀......................................................................2

5生長與繁殖........................................................................3

5.1生長..........................................................................3

5.2繁殖..........................................................................3

6遺傳學特性........................................................................4

6.1河川沙塘鱧染色體核型..........................................................4

6.2河川沙塘鱧同工酶檢測..........................................................5

7檢測方法..........................................................................6

7.1形態(tài)特征的測定................................................................6

7.2細胞遺傳學特性................................................................6

7.3生化遺傳學特性測定............................................................6

附錄A（規(guī)范性附錄）試劑配制........................................................7

I

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河川沙塘鱧種質標準

1范圍

本標準規(guī)定了河川沙塘鱧（Odontobutispotamophila）的學名與分類地位、形態(tài)特征、生長繁殖、

細胞遺傳學和生化遺傳學特性以及檢測方法。

本標準適用于河川沙塘鱧種質的檢測和鑒定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T18654.3-2008養(yǎng)殖魚類種質檢驗第3部分：性狀測定

GB/T18654.12-2008養(yǎng)殖魚類種質檢驗第12部分：染色體組型分析

GB/T18654.13-2008養(yǎng)殖魚類種質檢驗第13部分：同工酶電泳分析

3學名和分類地位

3.1學名

河川沙塘鱧(Odontobutispotamophila)。

3.2分類地位

屬鱸形目(Perciformes)，沙塘鱧科（Odontobutidae），沙塘鱧屬(Odontobutis)。

4主要形態(tài)結構特征

4.1外部形態(tài)特征

4.2外部形態(tài)

河川沙塘鱧魚體粗壯，前部圓筒形，后部側扁。頭寬大平扁，寬大于高。吻寬短，吻大于眼徑。眼

小，上側位，稍突出;眼間隔寬而凹入，大于眼徑。鼻孔2個，前鼻孔具一短管，后鼻孔小，圓形。

口大，端位，斜裂，下頜突出，上頜骨后延伸達眼中部下方或稍前。舌大，游離，前端圓形。牙細小

尖銳，兩頜各有多行，排列呈帶狀。犁骨無齒，有咽齒。體色可隨環(huán)境的變化而改變，呈褐色至黑褐色，

體背側有黑色大斑3塊。各鰭均有明暗交替的帶狀紋。河川沙塘鱧外形見圖1。

1

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圖1河川沙塘鱧外形圖

4.3可數(shù)性狀

見表1。

表1河川沙塘鱧可數(shù)性狀

可數(shù)性狀變幅

背鰭Ⅵ－Ⅷ，Ⅰ－7－10(以Ⅶ，Ⅰ－9為主)；臀鰭Ⅰ－6

鰭式

－9(以Ⅰ－7為主)；胸鰭14～17(以15為主)；腹鰭Ⅰ－5。

縱列鱗34～41(以36～37為主)；橫列鱗14～17(以15～

鱗式

16為主)；背鰭前鱗24～31(以27～28為主)。

第一鰓弓鰓耙數(shù)9～11

脊椎骨數(shù)28～29

體側感覺乳突線鱗28～29

4.4可量性狀

見表2。

表2河川沙塘鱧可量性狀

可量性狀

項目

體長/體高體長/頭長體長/尾柄長頭長/眼徑頭長/吻長尾柄長/尾柄高

樣本數(shù)，尾100100100100100100

均值±標準差3.69±0.533.12±0.624.97±0.475.89±0.793.11±0.441.59±0.23

變幅2.99-4.42.64-4.074.58-6.893.98-7.372.35-4.061.41-1.97

5生長與繁殖

2

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5.1生長

5.1.1不同年齡組的魚體長和體重的實測值見表3

表3河川沙塘鱧各年齡組的體長和體重實測值

年齡，齡IIIIII

樣本數(shù)，尾63289

體長均值（cm）±標準差7.17±1.049.86±1.5811.78±1.47

體長變幅5.64-8.528.46-10.7510.54-12.69

體重均值（cm）±標準差8.26±1.2421.48±4.5536.64±4.98

體重變幅7.48-9.6511.61-23.9725.63-39.44

5.1.2體長與體重關系式

W=0.032×L2.88(R=0.949；p＜0.05)，式中，W——魚體體重，單位為克（g）；L——魚體體長，

單位為厘米（cm）。

5.1.3VonBertalanffy生長方程

L=19.2[1-e-0.22(t+0.77)]；W=158.91[