GB∕T 43448-2023 蜂蜜中17-三十五烯含量的測定 氣相色譜質(zhì)譜法（正式版）

蜂蜜中17-三十五烯含量的測定氣相色譜質(zhì)譜法2023-11-27發(fā)布國家標準化管理委員會I本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由中華全國供銷合作總社提出。本文件由全國蜂產(chǎn)品標準化技術(shù)委員會(SAC/TC601)歸口。本文件起草單位：秦皇島海關(guān)技術(shù)中心、浙江大學(xué)、江蘇國測檢測技術(shù)有限公司、睿科集團(廈門)股份有限公司、中科標準(寧德)科技有限公司、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蜜蜂研究所、中國蜂產(chǎn)品協(xié)會、西雙版納金棕生物科技有限公司、山東安譜檢測科技有限公司、奧邁檢測有限公司、青島順昌檢測評價有限公司、浙江百萬名匠蜂業(yè)有限公司。本文件主要起草人：崔宗巖、胡福良、黃學(xué)者、張言政、孫國峰、劉曉茂、安俊芳、賈光群、趙文、1蜂蜜中17-三十五烯含量的測定氣相色譜質(zhì)譜法本文件描述了蜂蜜中17-三十五烯含量測定的氣相色譜質(zhì)譜法。本文件適用于蜂蜜中17-三十五烯含量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。試樣用水溶解，石油醚提取，濃縮后經(jīng)弗羅里硅土固相萃取柱凈化，氣相色譜質(zhì)譜法測定，外標法定量。5試劑和材料5.1.3石油醚：分析純或以上純度，沸程35℃~60℃。5.1.517-三十五烯標準物質(zhì)/標準樣品：17-Pentatriacontene,CasH?o,純度≥98%。5.1.6標準儲備液(1mg/mL):稱取17-三十五烯標準物質(zhì)/標準樣品(5.1.5)10mg,置于燒杯中，加入適量異辛烷(5.1.1)溶解，溶解液及清洗溶液完全轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶中，稀釋至刻度，混勻后配制成質(zhì)量濃度為1mg/mL的17-三十五烯標準儲備液。2℃~8℃保存，有效期6個月。5.2材料5.2.1弗羅里硅土固相萃取柱：1000mg/6mL,或相當者。26儀器和設(shè)備6.1氣相色譜質(zhì)譜儀：配有電子轟擊源(EI)。6.2電子天平：感量0.00001g和0.01g。6.3高速離心機。6.4固相萃取裝置6.5氮吹儀。6.6渦旋混合器。6.7振蕩器。7試樣制備與保存7.1試樣的制備對無結(jié)晶的試驗樣品，將其攪拌均勻；對有結(jié)晶的樣品，在密閉情況下，置于不超過60℃的水浴中溫熱、振蕩，待樣品全部融化后攪勻，冷卻至室溫。取0.5kg制備好的試樣置于樣品瓶中，密封，并做上標記。取無目標物檢出的樣品作為空白試樣，用于配制基質(zhì)匹配標準曲線。7.2試樣的保存將試樣于常溫下保存。8測定步驟稱取5g試樣(精確至0.01g)置于50mL離心管，加入10mL水，渦旋混勻。加入20mL石油醚(5.1.3),振蕩30min,10000r/min離心10min,收集上清液。殘渣中加入20mL石油醚，重復(fù)提取1次，合并2次提取液，40℃濃縮至干，用2mL正己烷(5.1.2)復(fù)溶，渦旋混勻，獲得提取液備用。固相萃取柱(5.2.1)用6mL正己烷活化后，取提取液上樣，用10mL正己烷洗脫，收集所有流出物，40℃氮氣吹干，加入1mL正已烷，渦旋1min溶解殘余物，過濾至進樣瓶，供氣相色譜質(zhì)譜儀測定。8.3基質(zhì)匹配標準曲線的配制精密量取標準儲備液適量，分別加入至6份經(jīng)提取和凈化的空白試樣殘渣中，40℃濃縮至干，加入正己烷1mL,渦旋溶解殘余物，配制成質(zhì)量濃度為2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、100μg/mL的基質(zhì)匹配系列標準溶液，過濾至進樣瓶，供氣相色譜質(zhì)譜儀測定。8.4.1氣相色譜條件氣相色譜參考條件如下。a)色譜柱：5%苯基-95%甲基聚硅氧烷(15m×0.25mm×0.25μm)石英毛細管柱，或相當者。3b)升溫程序：60℃保持1min,然后以30℃/min升至310℃,保持6min。c)載氣：氦氣(純度≥99.999%),流速1.5mL/min。f)進樣方式：分流進樣，分流比10:1。質(zhì)譜參考條件如下。c)檢測方式：選擇離子掃描(SIM)。d)選擇離子掃描參數(shù)見表1。表117-三十五烯選擇離子掃描參數(shù)中文名稱英文名稱選擇離子定量離子17-三十五烯97.1、111.1、125.1、490.68.5氣相色譜質(zhì)譜測定在相同試驗條件下，試樣溶液中17-三十五烯的保留時間與基質(zhì)匹配標準溶液中該化合物的保留時間偏差在±0.5%之內(nèi)，所有離子都出現(xiàn)，且相對離子豐度與濃度相當?shù)幕|(zhì)匹配標準溶液相對離子豐度一致(定性離子參考豐度比為97.1:111.1:125.1:490.6=100:54:27:3),其偏差應(yīng)符合表2的要求。17-三十五烯的全掃描質(zhì)譜圖和定量離子色譜圖見附錄A。表2定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差相對離子豐度>20%～50%>10%～20%最大允許偏差按照8.4.1和8.4.2設(shè)定儀器條件，以基質(zhì)匹配標準溶液濃度為橫坐標、峰面積為縱坐標，繪制標準工作曲線，按外標法計算試樣中目標物含量?；|(zhì)匹配標準溶液及試樣溶液中的目標物響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測的線性范圍內(nèi)。按以上步驟，對同一試樣進行平行試驗測定。8.7空白試驗除不加試樣外，采用完全相同的測定步驟進行測定。4GB/T43448—2023……………