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第第頁紫外可見分光光度計使用說明及工作原理紫外可見分光光度計使用說明
紫外可見分光光度計來自于美國,產(chǎn)品包含光源,單色器,吸取池,檢測器和顯示器等,它是一款對物質(zhì)進行定性,定量以及結構分析的儀器。這款儀器和人們常用的可見光光度計有有很大的區(qū)分,除了波長范圍,使用光源都不一樣等,價格也是后者要要貴一些;平常的使用和注意事項不一樣的,今日就先來學習一下紫外可見分光光度計使用方法:1.試驗中所用的量瓶、移液管均應經(jīng)檢定校正、洗凈后使用。2.使用的石英吸取池必需干凈。用于盛裝樣品、參比及空內(nèi)溶液的吸取池,當裝入同一溶劑時,在規(guī)定波長測定吸取池的透光率,如透光率相差在0.3%以下者可配對使用,否則必需加以校正。3.取吸取池時,手指拿毛玻璃面的兩側。裝盛樣品溶液以池休積的4/5為度,使用揮發(fā)性溶液吋應加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應無殘留溶劑。為防止溶劑揮發(fā)后溶質(zhì)殘留在池子的透光面,可先用蘸有空白溶劑的擦鏡紙擦拭,然后再用干擦鏡紙拭凈。吸取池放入樣品室時應注意每次放入方向相同。使用后用洗液及水沖洗干凈,晾干防塵保存,吸取池發(fā)覺污染不易洗凈時可用硫酸發(fā)煙硝酸(3:1V/V)混合液稍加浸泡后,洗凈備用。如用重鉻酸鉀清潔液清洗時,吸取池不貧在清潔液中長時間浸泡,否則清潔液中的重鉻酸鉀結晶會損壞吸取池的光學表面,并應充分甩水沖洗,以防重鉻酸鉀吸附于吸取池表面。4.測定前應先檢查所用的溶劑在測定供試品所用的波長相近是否符合要求,可用lcm石英吸取池盛溶劑以空氣為空白(即參比光路中不放置任何物質(zhì))測定其吸取度,應符合規(guī)定。5.稱量應按藥典規(guī)定要求。配制測定溶液時稀釋轉(zhuǎn)移次數(shù)應盡可能少,轉(zhuǎn)移稀釋時所取容積一般應不少于5cm。含量測定供試品應稱取2份,如為對比品比較法,對照品一般也應稱取2份。吸取系數(shù)檢查也應稱取供試品2份,平行操作,每份結果對平均值的偏差應在±0.5%以內(nèi)。作辨別或檢查可取樣品1份。6.供試品測定溶液的濃度,除各該品種項下已有注明者外,供試品溶液的吸取度以在0.3~0.7之間為宜,吸取度讀數(shù)在此范圍誤差較小,并應結合所用儀器吸取度線性范圍,配制合適的讀數(shù)濃度。7.選用儀器的狹縫譜帶寬度應小于供試品吸取帶的半寬度,否則測得的吸取度值會偏低,狹縫寬度的選擇應以減小狹縫寬度吋供試品的吸取度不揮加添為準,對于紫外測定的部分品種,可以使用2nm縫寬,但對某些品種如盤尼西林鉀及鈉的吸取度檢查則需用lnm縫寬或更窄,否則其264nm的吸取度會偏低。8.測定時除另有規(guī)定者外,應在規(guī)定的吸取峰±2nm處,再測幾點的吸取度,以核對供試品的吸取峰位置是否正確,并以吸取度最大的波長作為測定波長,除另有規(guī)定外吸取度最大波長應在該品種項下規(guī)定的波長±lnm以內(nèi),否則應考慮試樣的同一性、純度以及儀器波長的精準度9.除另有規(guī)定外,比色法所用的空內(nèi)系指用同休積的溶劑代替對比品或供試品溶液,然后依次加入等量的相應試劑,并用同樣方法處理。10.當吸取度和濃度關系不呈線性關系時,應取數(shù)份梯度量的對比濃度,用
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