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文檔簡介

臨床慣用免疫學檢驗?zāi)暇┽t(yī)科大學第一從屬醫(yī)院7/12/20241臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第1頁臨床慣用免疫學檢驗免疫功效檢驗*血清免疫球蛋白檢測*血清補體檢測*細胞免疫檢測病毒肝炎血清標志物檢驗感染免疫檢驗

細菌感染免疫檢測病毒感染免疫檢測其它(寄生蟲感染、性病等)腫瘤標志物檢驗

蛋白質(zhì)類腫瘤標志物糖脂類腫瘤標志物酶類腫瘤標志物7/12/20242臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第2頁臨床慣用免疫學檢驗本身抗體檢驗*抗核抗體檢測*類風濕因子測定*抗心磷脂抗體測定*抗中性粒細胞胞漿抗體測定抗某種組織/細胞抗體檢測

移植免疫檢驗細胞因子檢驗*IL-2、6、8、10*TNFIFN

7/12/20243臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第3頁免疫功效檢驗*血清免疫球蛋白檢測

*血清補體檢測*細胞免疫檢測7/12/20244臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第4頁體液免疫檢驗(一)免疫球蛋白

(Immunoglobulin,Ig)

免疫球蛋白指含有活性抗體活性和抗體樣結(jié)構(gòu)球蛋白,由漿細胞產(chǎn)生,存在于體液,血液,外分泌液和一些細胞膜上。7/12/20245臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第5頁免疫球蛋白

用超速離心、免疫電泳方法可將免疫球蛋白分為五類:

IgG最多、占70%~80%抗體活性

IgA血清型和分泌型兩種

IgM是有效凝聚和溶解細胞因子

IgD功效尚不完全清楚IgE與變態(tài)反應(yīng)相關(guān)7/12/20246臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第6頁免疫球蛋白

7/12/20247臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第7頁

7/12/20248臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第8頁正常值:

單向免疫擴散法—IgG7.0~16.6g/LIgA0.7~3.5g/LIgM0.5~2.6g/L

ELISA法—IgE0.1~0.9mg/L7/12/20249臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第9頁

多克隆增高:IgGIgAIgM均增高單克隆增高:僅某一個Ig增高而其它種不增高

7/12/202410臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第10頁臨床意義

增高:多克隆性增高—慢性感染、慢性肝病、本身免疫性疾病單克隆性增高—免疫增殖性疾病

7/12/202411臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第11頁臨床意義

減低:

先天性—先天性無(低)丙種球蛋白血癥、重鏈病、輕鏈病

后天性—腎病綜合征、病毒感染、免疫抑制劑應(yīng)用

7/12/202412臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第12頁IgE測定

IgE為親細胞抗體,在Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)性疾病發(fā)病中起主要作用。臨床意義:IgE增高最多見于Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)性疾病,如支氣管哮喘、過敏性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、蕁麻疹等;非過敏性疾病如寄生蟲病、肝炎、SLE、類風濕關(guān)節(jié)炎及多發(fā)性骨髓瘤(IgE型)等。

7/12/202413臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第13頁M蛋白(Monocolonalprotein):

M蛋白是一個單克隆B淋巴細胞(漿細胞)異常增殖時產(chǎn)生免疫球蛋白分子或其片段(如輕鏈、重鏈等),它們與正常免疫球蛋白相同結(jié)構(gòu)和電泳遷移速度,但不含有抗體活性。臨床意義多發(fā)性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)巨球蛋白血癥(Waldenstrom癥)重鏈病、輕鏈病、半分子病其它:惡性淋巴瘤(lymphoma)、良性M蛋白血癥7/12/202414臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第14頁(二)血清補體(complement,C)

參加滅活病原體免疫反應(yīng)也可破壞本身組織或本身細胞造成免疫損傷7/12/202415臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第15頁

7/12/202416臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第16頁

總補體溶血活性檢測(totalhemolyticcomplementactivity,CH50)

正常值:50~100ku/L

臨床意義:減低—腎小球腎炎、本身免疫性疾?。ㄈ缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡Systemiclupuserythematosis,SLE)、感染性心內(nèi)膜炎(subacuteinfecitiveendocarditis,SBE)、肝病等

增高—急性炎癥、組織損傷、腫瘤等7/12/202417臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第17頁補體C3檢測:C3在補體系統(tǒng)各成份中含量最多,是傳統(tǒng)路徑和旁路路徑被激活關(guān)鍵物質(zhì)正常值:0.8~1.5g/L補體C4檢測:C4代表補體傳統(tǒng)活化路徑,在補體活化、促進吞噬、預(yù)防免疫復(fù)合物從容和中和病毒等方面發(fā)揮作用正常值:0.2~0.6g/L7/12/202418臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第18頁臨床意義:

參見CH50減低和增高臨床意義C3增高在急性炎性反應(yīng)更敏感

C4對判斷免疫復(fù)合物形成時補體消耗性減低更有意義7/12/202419臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第19頁細胞免疫檢測T細胞免疫檢測B細胞免疫檢測自然殺傷細胞檢測中性粒細胞吞噬、殺菌功效檢測7/12/202420臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第20頁

T細胞分化抗原測定

(免疫熒光法)

CD3—總T細胞正常值:

61%~85%

CD4—T輔助細胞(TH)正常值:

28%~58%

CD8—T抑制細胞(TS)正常值:

19%~48%

CD4/CD81.66±0.33

(>1)7/12/202421臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第21頁臨床意義:CD3降低—本身免疫性疾病(SLE、類風濕關(guān)節(jié)炎)

CD4/CD8增高—本身免疫性疾病(如SLE、類風濕關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化癥等)及器官移植后排異反應(yīng)

CD4/CD8減低—見于艾滋病、惡性腫瘤、傳染性單核細胞增多癥、巨細胞病毒感染、血吸蟲病等。

CD3CD4CD8均增高—T細胞型淋巴細胞惡性疾病7/12/202422臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第22頁

B細胞分化抗原測定:

應(yīng)用CD19、CD20、CD21、CD22和CD40等單克隆抗體標識單個核細胞—B細胞,經(jīng)過免疫熒光或流式細胞術(shù)進行檢測。

CD19

為全部B細胞共有表面標志,B細胞活化后不消失,是最主要B細胞標識分子。

參考值:CD1911.74±3.73%

7/12/202423臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第23頁臨床意義升高—B細胞型急性淋巴細胞性白血病、慢性淋巴細胞白血病、Burkitt淋巴瘤等

減低—無丙種球蛋白血癥、長久免疫抑制劑應(yīng)用后7/12/202424臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第24頁

自然殺傷細胞免疫檢測它不依賴抗體和補體即能殺傷靶細胞自然殺傷細胞(NK)介導(dǎo)天然免疫應(yīng)答,自然殺傷細胞(NK)活性可作為判斷機體抗腫瘤和抗病毒感染指標之一

7/12/202425臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第25頁參考值:

NK細胞活性(自然殺傷)47.6%~76.8%

臨床意義:

升高:常見于病毒感染早期,Down綜合癥,器官移植后,使用免疫增強劑(如干擾素)治療后。

減低:常見于惡性腫瘤,重癥聯(lián)合免疫缺點病,AIDS和免疫抑制劑使用者等。7/12/202426臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第26頁三、腫瘤標志物檢測蛋白質(zhì)類腫瘤標志物、糖脂類腫瘤標志物、酶類腫瘤標志物7/12/202427臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第27頁臨床慣用腫瘤標志物7/12/202428臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第28頁AFP胎兒早期肝臟合成糖蛋白,當干細胞或生殖腺胚胎細胞惡變,基因激活,細胞合成AFP增加。參考值:<25ug/l意義:1:原發(fā)性肝癌,>300ug/l;10%陰性。2:生殖腺胚胎癌、胃癌、胰腺癌可升高。3:慢性肝炎、肝硬化可升高(<200ug/l)。4:孕婦可升高7/12/202429臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第29頁CEA胎兒早期消化管和一些組織合成,孕6月后降低,出生后極低。參考值:<15ug/l意義:1:90%胰腺癌、74%結(jié)腸癌、60%乳腺癌常超過60ug/l。2:胰腺炎、結(jié)腸炎、肝臟疾病、哮喘可升高。3:慢性肝炎、肝硬化可升高(<200ug/l)。4:動態(tài)觀察,疾病活動↑好轉(zhuǎn)↓7/12/202430臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第30頁7/12/202431臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第31頁本身抗體檢驗類風濕因子(rheumatoidfactor,RF)

RF是變性IgG刺激機體產(chǎn)生一個本身抗體,主要存在于類風濕關(guān)節(jié)炎患者血清和關(guān)節(jié)液內(nèi)。RF可分為IgM型、IgG型、IgA型等,用膠乳凝集法測出主要是IgM型,用ELISA法可深入檢出其它型7/12/202432臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第32頁RF-IgGRF-IgARF-IgM7/12/202433臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第33頁參考值:

陰性<30U/L臨床意義:

類風濕關(guān)節(jié)炎(陽性率70%)其它本身免疫性疾?。⊿LE、干燥綜合癥等)可陽性

慢性活動性肝炎、一些感染性疾?。▊魅拘詥魏思毎龆喟Y、結(jié)核病感染性心內(nèi)膜炎等)也可出現(xiàn)陽性7/12/202434臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第34頁(二)抗核抗體檢測

1.抗核抗體(antinuclearantibody,ANA)

抗核抗體是一個泛指抗各種細胞核成份本身抗體總稱(ANAS),這種抗體無器官和種族特異性7/12/202435臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第35頁

免疫熒光法

以鼠肝細胞核或人喉癌細胞(Hep-2細胞)作抗原時該抗體(1抗)可與之結(jié)合,再加入熒光標識抗人IgG(2抗)后可產(chǎn)生黃綠色熒光7/12/202436臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第36頁依據(jù)細胞核著染熒光圖像可分為:均質(zhì)型DNP核蛋白邊緣型DNA顆粒型ENA核仁型RNA

7/12/202437臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第37頁

參考值:

免疫熒光法為陰性血清滴度>1:40為陽性

7/12/202438臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第38頁

臨床意義:

ANA陽性最多見于未治療SLE,陽性率達80%—100%(活動期幾乎100%陽性)

ANA陽性是結(jié)締組織病標志,如:混合性結(jié)締組織?。╩ixedconnectivetissuedisease,MCTD)100%陽性

系統(tǒng)性硬化?。╯ystemicsclerosis,SSc)85%—95%陽性、多發(fā)性肌炎(polymyositis,PM)30%—50%陽性,

另外,類風濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoidarthritis,RA)、干燥綜合癥(SjogrenSyndrom,SS)等可出現(xiàn)陽性

其它疾病,如原發(fā)性膽汁性肝硬化、慢性肝病、慢性感染、腫瘤等也可出現(xiàn)陽性7/12/202439臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第39頁2.抗脫氧核糖核酸抗體(anti-DNAantibody,抗DNA)

其中抗雙鏈DNA(doublestranded-DNA,ds-DNA)抗體靶抗原是細胞核中DNA雙螺旋結(jié)構(gòu),它檢測有臨床主要性

正常結(jié)果:陰性

臨床意義:抗ds-DNA抗體陽性見于活動期SLE,陽性率70%—90%,為SLE特異性抗體,尤其在并發(fā)狼瘡性腎炎時起主要作用,其它風濕病中抗ds-DNA抗體也可陽性7/12/202440臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第40頁

3.可提取性核抗原多肽抗體譜

ENA(extractableantinuclearantigen)由各種相對分子質(zhì)量不一樣多肽組成,利用免疫印跡試驗可對這些抗原本身抗體進行檢測

7/12/202441臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第41頁ENA多肽7項是當前臨床最多應(yīng)用于風濕病檢驗項目7/12/202442臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第42頁抗心磷脂抗體(anticardiolipinantibody,ACA)

抗磷脂抗體是一組針對各種帶負電荷磷脂本身抗體,其中以ACA可作為代表。

正常參考:陰性ELISA法測定≥2.1為陽性

臨床意義:ACA陽性見于SLE、類風濕關(guān)節(jié)炎、干燥綜合癥等風濕病,抗磷脂綜合癥,以及腫瘤、感染等。7/12/202443臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第43頁抗中性粒細胞胞漿抗體(ANCA)(anti-neutrophilcytoplasmicantibody)ANCA是存在于系統(tǒng)性血管炎患者血清中一個本身抗體,可分為胞漿型(C-ANCA)和核周型(P-ANCA)7/12/202444臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第44頁7/12/202445臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第45頁7/12/202446臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第46頁臨床意義:

C-ANCA(+)---韋格納肉芽腫(WG)

P-ANCA(+)---血管炎性腎炎多動脈炎變應(yīng)性肉芽腫血管炎(Churg-Strauss綜合癥)本身免疫性肝病…

7/12/202447臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第47頁抗組織和細胞抗體檢測

抗線粒體抗體(anti-mitochondriaantibody,AMA)抗甲狀腺球蛋白抗體(anti-thyroglobulinantibody,TG)抗甲狀腺微粒體抗體(anti-thyroidmivrosomentibody,TM)抗平滑肌抗體(antismoothmuscleantibody,ASMA)

如AMA、ASMA在原發(fā)性膽汁性肝硬化、慢性肝病、本身免疫性肝炎中常為陽性……7/12/202448臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查醫(yī)學知識講座第48頁細胞因子檢測細胞因子(cytokine)是由活化免疫細胞和一些基質(zhì)細胞分泌,介

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