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文檔簡(jiǎn)介

檢驗(yàn)樣本采集手冊(cè)

第一章檢驗(yàn)標(biāo)本采集總則

1.目的

對(duì)檢驗(yàn)申請(qǐng)、患者的狀態(tài)、臨床標(biāo)本的采集與運(yùn)輸過(guò)程等各環(huán)節(jié)進(jìn)行控制以保證

分析前標(biāo)本的質(zhì)量。

2.范圍

適用于檢驗(yàn)科受理的標(biāo)本

3.職責(zé)

3.1臨床醫(yī)師負(fù)責(zé)檢驗(yàn)項(xiàng)目的申請(qǐng),醫(yī)護(hù)人員負(fù)責(zé)臨床標(biāo)本的采集以及指導(dǎo)患者

如何正確留取標(biāo)本。特殊標(biāo)本由臨床醫(yī)生采集。3.2檢驗(yàn)科工作人員負(fù)責(zé)部分標(biāo)

本采集,并提供標(biāo)本采集、運(yùn)送等的相關(guān)咨詢(xún)服務(wù)。

4.工作程序

4.1檢驗(yàn)申請(qǐng)

4.1.1檢驗(yàn)項(xiàng)目選擇臨床醫(yī)師根據(jù)患者病情需要和檢驗(yàn)項(xiàng)目的敏感度、特異性來(lái)

正確選擇檢驗(yàn)項(xiàng)目;檢驗(yàn)科人員可為臨床提供檢驗(yàn)項(xiàng)目的咨詢(xún),幫助合理選擇檢

驗(yàn)項(xiàng)目。

4.1.2檢驗(yàn)申請(qǐng)單

4.121紙質(zhì)申請(qǐng)單檢驗(yàn)申請(qǐng)單填寫(xiě)應(yīng)包括以下內(nèi)容:

a)患者的唯一性標(biāo)識(shí):包括患者的姓名、性別、年齡、住院的科別、床號(hào)、住院

號(hào)、初步診斷等;

b)樣本類(lèi)型;

c)申請(qǐng)檢驗(yàn)項(xiàng)目或項(xiàng)目的組合;

①申請(qǐng)日期;

e)申請(qǐng)者姓名。

4.1.2.2HIS申請(qǐng)

臨床醫(yī)生只需在HIS的檢驗(yàn)申請(qǐng)單中點(diǎn)擊相應(yīng)的組合項(xiàng)目即可自動(dòng)生成上述要

求的內(nèi)容。

4.1.3檢驗(yàn)申請(qǐng)單中的特別說(shuō)明:

a)對(duì)檢驗(yàn)項(xiàng)目的特別要求,如注意細(xì)胞形態(tài)等;

b)特殊傳染病病人標(biāo)本(如HIV、霍亂等)應(yīng)在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上注明。

4.2患者狀態(tài)

患者狀態(tài)是影響檢驗(yàn)結(jié)果的內(nèi)在的因素,包括固定因素和可變因素兩個(gè)方面。

4.2.1固定的因素如年齡、性別、民族等,他們的參考區(qū)間是不同的。分析前階

段的質(zhì)量保證工作考慮的主要不是這方面的因素。

4.2.2為了使檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠,臨床醫(yī)護(hù)人員和檢驗(yàn)人員應(yīng)了解標(biāo)本收集前影

響檢測(cè)結(jié)果的非病理性因素,如飲食、標(biāo)本采集時(shí)間、體位和體力活動(dòng)、情緒狀

態(tài)、病人用藥等對(duì)標(biāo)本采集的影響。要求患者予以配合的內(nèi)容,采取切實(shí)措施,

保證采集的標(biāo)本符合疾病的實(shí)際情況。原則上患者應(yīng)在平靜、休息狀態(tài)采集標(biāo)本,

尤其是血液標(biāo)本。

4.3臨床標(biāo)本采集程序

4.3.1采樣人員采樣人員必須經(jīng)過(guò)培訓(xùn)合格后,方可進(jìn)行采樣,對(duì)于患者自行收

取標(biāo)本,須接受專(zhuān)業(yè)人員的指導(dǎo)。

4.3.2采樣準(zhǔn)備在采樣前,采樣人員根據(jù)申請(qǐng)者申請(qǐng)的檢驗(yàn)項(xiàng)目的要求,在HIS

中打印檢驗(yàn)條碼綁定在相應(yīng)的容器上。要注意樣品標(biāo)識(shí)必須與檢驗(yàn)申請(qǐng)單相符合,

嚴(yán)防標(biāo)記錯(cuò)誤。

4.3.3采樣實(shí)施(靜脈血、動(dòng)脈血、末梢血、足跟血等)采樣人員必須根據(jù)檢驗(yàn)

項(xiàng)目的要求和計(jì)劃以及醫(yī)囑要求執(zhí)行的時(shí)間,選擇恰當(dāng)?shù)牟课唬聪鄳?yīng)標(biāo)本采集

的作業(yè)指導(dǎo)書(shū)采取適當(dāng)?shù)臉悠妨俊?/p>

4.4標(biāo)本收集、運(yùn)送與儲(chǔ)存

4.4.1每天早晨病房采集標(biāo)本后,按標(biāo)本的種類(lèi)分別放在指定的位置,標(biāo)本放置

處應(yīng)有明顯的標(biāo)識(shí)并符合生物安全的要求。

4.4.2實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)收集標(biāo)本的工人核對(duì)標(biāo)本后,將標(biāo)本轉(zhuǎn)入專(zhuān)用的、密閉無(wú)滲漏

的標(biāo)本運(yùn)輸箱內(nèi)。運(yùn)輸箱內(nèi)試管架應(yīng)可靠固定,以防盛裝體液的試管發(fā)生泄漏。

4.4.3檢查運(yùn)輸箱蓋是否已完全蓋好,確認(rèn)后將標(biāo)本運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室。按檢測(cè)項(xiàng)目

分別分送至各專(zhuān)業(yè)組。

4.4.4標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)途中如果發(fā)生泄漏,應(yīng)立即按生物安全應(yīng)急預(yù)案的相關(guān)條款進(jìn)行

處置并進(jìn)行書(shū)面記錄。

4.4.5定期對(duì)運(yùn)輸箱內(nèi)壁和表面進(jìn)行消毒處理。

4.4.6標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)送檢。

4.4.7本實(shí)驗(yàn)室主要對(duì)以下標(biāo)本進(jìn)行儲(chǔ)存:生化組檢測(cè)項(xiàng)目對(duì)不能及時(shí)完成檢測(cè)

的標(biāo)本放置2-8。(2冰箱保存,不超過(guò)二天;免疫組檢測(cè)項(xiàng)目對(duì)不能及時(shí)完成檢測(cè)

的標(biāo)本放置2-8。(:冰箱保存,不超過(guò)二天。生化組完成檢測(cè)的標(biāo)本放置標(biāo)本架上,

放入專(zhuān)用標(biāo)本存放冰箱(2-8P)保存3天,以備復(fù)查;免疫組完成檢測(cè)的標(biāo)本

放置標(biāo)本架上,放入專(zhuān)用標(biāo)本存放冰箱(2-8P)保存7天,以備復(fù)查;血液組

檢測(cè)標(biāo)本完成檢測(cè)后血型標(biāo)本室溫保存7天,其余項(xiàng)目室溫保存24h;分子生

物學(xué)標(biāo)本完成檢測(cè)后血液原始標(biāo)本置于2-8。(:冰箱保存7天,體液、組織原始樣

本置于-2CTC冰箱保存7天;HBV、HCV除保留原始樣本外還應(yīng)分離血清或血

漿樣本進(jìn)行唯一編號(hào)(采用樣本自身唯一編號(hào))后-20或-8CTC保存3個(gè)月,其他

樣本的DNA提取物置于-20或-8CTC冰箱凍存一個(gè)月,對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果有疑問(wèn)、或

有爭(zhēng)議、或被投訴時(shí),取用存放標(biāo)本進(jìn)行復(fù)檢。

4.5臨時(shí)申請(qǐng)附加或刪除檢驗(yàn)項(xiàng)目

臨床需要臨時(shí)申請(qǐng)附加或刪除檢驗(yàn)項(xiàng)目時(shí),應(yīng)與檢驗(yàn)科聯(lián)系并告之原因,經(jīng)同意

后實(shí)施。

4.6抗凝劑選擇

461含有K+、Na+的抗凝劑不能用于測(cè)定K+、Na+的標(biāo)本。

4.6.2EDTA、氟化物、草酸鹽等不能用于測(cè)定Ca2+的標(biāo)本,因?yàn)镃a2+可與它

們形成不溶性物質(zhì)。

4.6.3草酸鹽、氟化物不能用于測(cè)定酶和用酶法測(cè)定的標(biāo)本,因?yàn)樗鼈冇屑せ罨?/p>

抑制某些酶活性的作用,如草酸鹽可抑制AMY、ACP、LDH的活性,氟化物則

有激活尿素酶、AMY的作用。

4.6.4草酸鉀氟化鈉混合抗凝劑:專(zhuān)供葡萄糖測(cè)定用,氟化鈉1g,草酸鉀3g,混

合劑4mg抗凝1ml血。

4.6.5肝素:是一種粘多糖體,可抑制凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶,使纖維蛋白原不

能轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。以15±2.5IU抗凝血液1ml。肝素抗凝血不影響紅細(xì)胞體積,

可用于生化及血液學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本,但不可用于篩選DIC的3P和TT試驗(yàn),因肝素

與魚(yú)精蛋白作用,發(fā)生沉淀,使3P出現(xiàn)假陽(yáng)性以及肝素的抗凝血酶作用產(chǎn)生干

擾。

4.6.6EDTA與鈣離子絡(luò)合而抗凝通常血液學(xué)常規(guī)檢驗(yàn)應(yīng)用其鉀鹽EDTA-K2,

EDTA-K3。

4.6.7使用抗凝劑要注意血與抗凝劑的比,如血沉取106mmol/L的枸椽酸鈉

0.4ml抽1.6ml血;凝血象枸椽酸鈉0.2ml,抽1.8ml血;血常規(guī)用EDTA抗凝

管抽1.5ml血;血生化用肝素抗凝管抽3ml血等。

4.7警告:潛在的生物危害性

所有采集的標(biāo)本都應(yīng)視為具有潛在的生物危害性。對(duì)此類(lèi)標(biāo)本處理都應(yīng)遵循本科

室生物安全相關(guān)規(guī)定。

5.臨床檢驗(yàn)標(biāo)本拒收準(zhǔn)則

5.1標(biāo)本容器和/或檢驗(yàn)申請(qǐng)單上信息不符或缺失

5.1.1標(biāo)本容器無(wú)標(biāo)識(shí)、標(biāo)識(shí)不清、樣本與申請(qǐng)單上信息不符、申請(qǐng)單信息缺失

(包括患者唯一性標(biāo)識(shí)及檢測(cè)項(xiàng)目缺失)。

5.1.2檢驗(yàn)申請(qǐng)單送檢項(xiàng)目檢驗(yàn)科未開(kāi)展。

5.2標(biāo)本不合要求

5.2.1未使用合適標(biāo)本容器,標(biāo)本容器破損、滲漏,抗凝劑選擇不當(dāng),標(biāo)本類(lèi)型

不當(dāng),標(biāo)本采集后保存不當(dāng)?shù)取?/p>

5.2.2中度以上溶血、脂血,抗凝血中有凝塊,量不夠,距離檢驗(yàn)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等。

5.2.3體液不能用一次性注射器抽取后送檢,體液常規(guī)用紫色抗凝管,體液生化、

免疫用黃色促凝管,體液一般細(xì)菌涂片,結(jié)核桿菌涂片置于無(wú)菌杯中送檢。

6.讓步檢驗(yàn)

對(duì)極難獲得的標(biāo)本(如新生兒、重度燒傷病人、休克病人)所致的標(biāo)本質(zhì)量不符

合檢驗(yàn)要求(如量不夠、溶血等)時(shí),檢驗(yàn)科可以做讓步檢驗(yàn),提示所得結(jié)果僅

供臨床醫(yī)生參考。

第二章一般檢驗(yàn)標(biāo)本采集

(一)靜脈血采集

1.紫頭管標(biāo)本采集(血常規(guī)、腎素醛固酮、網(wǎng)織紅細(xì)胞、瘧原蟲(chóng)、微絲蝴ABO、

RH血型、糖化血紅蛋白、地中海貧血篩查及基因分型、人類(lèi)白細(xì)胞抗原B27測(cè)

定、血兒茶酚胺等)

1.1血常規(guī)

1.1.1標(biāo)本采集及量用帽蓋為紫色的真空負(fù)壓管(EDTA-K2抗凝)采集靜脈血至

2ml刻度,立即輕輕顛倒混勻5次,采集后盡快送檢。

1.1.2注意事項(xiàng)a)防止標(biāo)本溶血。b)應(yīng)與抗凝劑充分混合,應(yīng)避免劇烈振搖。c)

抽取標(biāo)本時(shí)不能從輸液管中或輸液部位的同側(cè)靜脈采血。d)標(biāo)本室溫保存不得大

于4小時(shí)。e)患者的活動(dòng)情況和精神狀態(tài)、藥物、年齡、性別、標(biāo)本采集時(shí)間等

會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。故采血前因使患者盡量減少運(yùn)動(dòng)以保持平靜。

1.2腎素醛固酮

1.2.1標(biāo)本采集及量用帽蓋為紫色的真空負(fù)壓管(EDTA-K2抗凝)采集靜脈血至

2ml刻度,立即輕輕顛倒混勻5次,記錄采血時(shí)間,采集后盡快送檢。

1.2.2注意事項(xiàng)a)臣M立:病人需在平靜狀態(tài)下平臥2小時(shí)采血。b)立位:病人需

在平靜狀態(tài)下站立2小時(shí)采血。c)切忌不能將標(biāo)本放于2-8。(2冰箱放置。

1.3ABO、RH血型

1.3.1標(biāo)本采集及量用帽蓋為紫色的真空負(fù)壓管(EDTA-K2抗凝)采集靜脈血至

2ml刻度,立即輕輕顛倒混勻5次,立即送檢。

1.3.2注意事項(xiàng)

a)采血部位皮膚應(yīng)完整,無(wú)燒傷、凍瘡、發(fā)絹、水腫或炎癥等。

b)穿刺皮膚要有一定深度,不要用力擠壓采血部位,避免組織液混入。c)由于采

血量較少,主要用于門(mén)診或/和急診病人的血常規(guī)檢測(cè)。

d)乙醇消毒皮膚待全干后方可采血,否則流出的血液不呈圓滴狀,可導(dǎo)致溶血。

1.4網(wǎng)織紅細(xì)胞、瘧原蟲(chóng)、微絲蜘檢查

1.4.1標(biāo)本采集及量用帽蓋為紫色的真空負(fù)壓管(EDTA-K2抗凝)采集靜脈血至

2ml刻度,立即混勻。

1.4.2標(biāo)本送檢要求記錄采血時(shí)間,采集后盡快送檢。

1.4.3標(biāo)本采集時(shí)機(jī)的特殊要求a)微絲蜘采血時(shí)間以新鮮全血抗凝血(推薦使用

EDTA抗凝),夜間9:00至次晨2:00時(shí)采血。b)瘧原蟲(chóng)分為間日瘧原蟲(chóng)、三日

瘧原蟲(chóng)、惡性瘧原蟲(chóng)、卵形瘧原蟲(chóng)四種,間日瘧宜在發(fā)作后數(shù)小時(shí)采血;惡性瘧

在發(fā)作初期可見(jiàn)大量環(huán)狀體,一周后可見(jiàn)配子體。

1.4.4注意事項(xiàng)靜脈血與抗凝劑應(yīng)充分混合,避免劇烈振搖。

1.5糖化血紅蛋白

1.5.1標(biāo)本采集及量用帽蓋為紫色的真空負(fù)壓管(EDTA-K2抗凝)采集靜脈血至

2ml刻度,立即輕輕顛倒混勻。

1.5.2標(biāo)本送檢要求采集后盡快送檢。

1.6地中海貧血基因分型

1.6.1標(biāo)本采集及量用帽蓋為紫色的真空負(fù)壓管(EDTA-K2抗凝)采集靜脈血至

2ml刻度,立即輕輕顛倒混勻。

1.7人類(lèi)白細(xì)胞抗原B27測(cè)定

1.7.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為紫色的真空負(fù)壓管(EDTA-K2抗凝)采集靜脈血至2ml刻度,立即輕

輕顛倒混勻。

2.藍(lán)頭管標(biāo)本采集(凝血四項(xiàng)及凝血全套、血小板相關(guān)抗體測(cè)定)

2.1凝血項(xiàng)

2.1.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為藍(lán)色的真空負(fù)壓管(枸椽酸鈉1:9)采集空腹靜脈血至2ml刻度,立

即輕輕顛倒混勻5次。

2.1.2標(biāo)本送檢要求記錄采血時(shí)間,采集后盡快送檢(凝血試驗(yàn)應(yīng)于4小時(shí)內(nèi)完

成),避免高溫下送檢。

2.1.3注意事項(xiàng)

a)抽血順利、不應(yīng)有溶血和凝血,血液與抗凝劑應(yīng)充分混勻,避免劇烈振搖,采

血后立即送檢不宜久置。

b)某些藥物(如抗凝類(lèi)藥物)會(huì)對(duì)凝血象檢測(cè)結(jié)果有影響。

3.黑頭管標(biāo)本采集(血沉)

3.1血沉

3.1.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為黑色的真空負(fù)壓管(枸椽酸鈉1:4)采集空腹靜脈血至2ml刻度,輕

輕顛倒混勻5次,室溫保存。

3.1.2注意事項(xiàng)

a)采集足夠量的血液標(biāo)本,采集量在兩個(gè)刻度線之間。

b)及時(shí)送檢,采血后3小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。

c)存放時(shí)間超過(guò)3小時(shí)的樣品,結(jié)果會(huì)有假性增加。

4.綠頭管標(biāo)本采集(微量元素、血流變等)

4.1微量元素

4.1.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為綠色的真空負(fù)壓管(專(zhuān)用耗材)采集空腹靜脈血至3-5ml刻度,輕輕顛

倒混勻5次,采集后盡快送檢。

4.1.2注意事項(xiàng)

用肝素抗凝管(綠帽),嚴(yán)格防止標(biāo)本有凝集,及時(shí)送檢。

4.2血流變

4.2.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為綠色的真空負(fù)壓管(肝素抗凝)采集空腹靜脈血至4ml刻度,輕輕顛

倒混勻5次,室溫保存。

4.2.2注意事項(xiàng)

用肝素抗凝管(綠帽),嚴(yán)格防止標(biāo)本有凝集,及時(shí)送檢。

5.黃/紅頭管標(biāo)本采集

5.1生化項(xiàng)目(肝功、腎功、血脂、血糖、電解質(zhì)、血淀粉酶、心肌酶譜、風(fēng)濕全

套、補(bǔ)體抗體、降鈣素原等)

5.1.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為黃色的真空負(fù)壓管(促凝劑)采集空腹靜脈血至3-5ml刻度.輕輕顛倒

混勻5次,采集后盡快送檢。

5.1.2注意事項(xiàng)

a)標(biāo)本避免溶血、脂血,壓脈帶壓迫時(shí)間不得超過(guò)一分鐘,混勻時(shí)避免劇烈振遙,

避免全血直接低溫凍存及反復(fù)凍融,避免室溫長(zhǎng)時(shí)間放置。

b)多種藥物,如抗癲癇藥、某些抗生素可使某些酶的活力升高。

c)飲食的方式、年齡、性別等生理性因素對(duì)TG水平影響均較大,不同年齡血清

的堿性磷酸酶活性差異大,劇烈運(yùn)動(dòng)或妊娠使堿性磷酸酶活性升高。

d)空腹采血

e)糖耐量實(shí)驗(yàn)需空腹10-16小時(shí)后,抽取靜脈血,測(cè)定血葡萄糖濃度,將75g

無(wú)水葡萄糖溶于250-300ml水中,5分鐘之內(nèi)飲完,期間不可喝咖啡、濃茶、

吸煙或進(jìn)食,兒童按1.75g/kg體重計(jì)算口服葡萄糖用量,總量不超過(guò)乃g,服糖

后,每隔30分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)、3小時(shí)分別采集一次靜脈血。

5.2免疫項(xiàng)目(HIV、梅毒、甲肝、乙肝、丙肝、丁肝、戊肝、結(jié)核抗體、幽門(mén)

螺旋桿菌、優(yōu)生優(yōu)育、自身抗體類(lèi)等)

5.2.1標(biāo)本采集及量

帽蓋為紅色的真空負(fù)壓管(促凝劑)采集靜脈血至3-5ml刻度,輕輕顛倒混勻5

次,采集后盡快送檢。

5.2.2注意事項(xiàng)

a)標(biāo)本避免溶血、脂血、反復(fù)凍融。

b)結(jié)果為陽(yáng)性或可疑時(shí)應(yīng)進(jìn)行隨訪。

c)HIV初篩結(jié)果:HIV抗體待復(fù)查,通知患者復(fù)印身份證及聯(lián)系方式,現(xiàn)場(chǎng)核對(duì)

身份信息后,采集第二次血樣,若檢測(cè)結(jié)果為HIV抗體待復(fù)查,送第二次血樣

到疾控中心做確診實(shí)驗(yàn);結(jié)果回報(bào)日期為10個(gè)工作日。

d)標(biāo)本要求:血清標(biāo)本應(yīng)新鮮,血清分離后置于2-8T須在48小時(shí)內(nèi)使用,超

過(guò)48小時(shí)應(yīng)置于-2CTC保存,盡快送檢。

5.3化學(xué)發(fā)光項(xiàng)目(腫瘤標(biāo)志物、性激素、唐氏篩查、甲功、C肽、皮質(zhì)醇、BNP、

PTH等)

5.3.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為紅色的真空負(fù)壓管(促凝劑)采集空腹靜脈血至3-5ml刻度,輕輕顛

倒混勻5次,采集后盡快送檢。

5.3.2注意事項(xiàng)

a)標(biāo)本避免溶血、脂血、反復(fù)凍融。

b)標(biāo)本要求:血清標(biāo)本應(yīng)新鮮,血清分離后置于2-8。(:須在48小時(shí)內(nèi)使用,超

過(guò)48小時(shí)應(yīng)置于-20。(:保存,盡快送檢。

c)接受生物素或者鏈霉親和素治療的患者對(duì)本檢測(cè)結(jié)果有較大的影響

5.4EB病毒4項(xiàng)

5.4.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為紅色的真空負(fù)壓管(促凝劑)采集空腹靜脈血至3-5ml刻度,各項(xiàng)不

單獨(dú)檢測(cè)。

6.特殊類(lèi)真菌G實(shí)驗(yàn)、內(nèi)毒素、結(jié)核T細(xì)胞、胎兒染色體非整倍儂T21/T18/T13)

篩查)

6.1真菌G實(shí)驗(yàn)、內(nèi)毒素、結(jié)核T細(xì)胞

6.1.1標(biāo)本采集及量真菌G實(shí)驗(yàn)和內(nèi)毒素檢測(cè)用帽蓋為紅色的真菌G專(zhuān)用管采集

空腹靜脈血至3-5ml刻度,結(jié)核T細(xì)胞檢測(cè)用綠色T細(xì)胞BD專(zhuān)用管采集空腹

靜脈血至4ml刻度,輕輕顛倒混勻5次,采集后盡快送檢。

6.1.2注意事項(xiàng)

a)標(biāo)本避免溶血、脂血、反復(fù)凍融。

b)標(biāo)本要求:血清標(biāo)本應(yīng)新鮮,置于2-8。(:須在48小時(shí)內(nèi)使用,超過(guò)48小時(shí)

應(yīng)置于-2(TC保存,盡快送檢。

6.2胎兒染色體非整倍體(T21/T18/T13)篩查

6.2.1標(biāo)本采集及量

EDTA抗凝管5ml或StreckCell-FreeDNABCT采血管5ml。

6.2.2注意事項(xiàng)

a)標(biāo)本避免溶血、脂血、反復(fù)凍融。

b)采血管需在產(chǎn)科醫(yī)生處領(lǐng)取,周一至周六采集標(biāo)本。

c)要用專(zhuān)科專(zhuān)用申請(qǐng)單,信息填寫(xiě)全面,以便診斷和留檔。

e)在采集標(biāo)本時(shí)詢(xún)問(wèn)患者是否正在服用抗生素過(guò)程中,是否大量飲酒或有酗酒習(xí)

慣等對(duì)外周血培養(yǎng)效果會(huì)產(chǎn)生較大影響的因素,盡量避免此類(lèi)因素。

6.3骨代謝、登革熱、高血壓檢查

6.3.1標(biāo)本采集及量

骨代謝、登革熱檢查用帽蓋為紅色的真空負(fù)壓管(促凝劑)采集空腹靜脈血至

3-5ml刻度,采兩管送檢;高血壓檢查患者采集兩管紫管(EDTA抗凝),記錄

患者采血姿勢(shì)(立/臥位)。

(二)動(dòng)脈血采集

1.血?dú)夥治?/p>

1.1標(biāo)本采集及量

皮膚嚴(yán)格消毒后,穿刺股動(dòng)脈、肱動(dòng)脈或模動(dòng)脈,用2ml專(zhuān)用血?dú)庾⑸淦靼礋o(wú)

菌手術(shù)原則抽取l-2ml,動(dòng)脈血壓力推動(dòng)空針活塞,不能有氣泡。抽出后取下針

頭蓋好,隔絕空氣。將注射器放在手中,來(lái)回搓動(dòng),立即送檢。

1.2注意事項(xiàng)

1.2.1填寫(xiě)血?dú)夥治錾暾?qǐng)單時(shí)要求寫(xiě)出病史、診斷、用藥情況、抽血時(shí)的體溫、

是否用氧及其流量,為分析檢測(cè)結(jié)果提供依據(jù)。

1.2.2每管l-2ml。由醫(yī)護(hù)人員采集,及時(shí)送檢,如不能及時(shí)送檢應(yīng)放入冰水中

保存(一般可保存2小時(shí)),注意切勿用冰塊,以避免破壞紅細(xì)胞而溶血。

(三)末梢血采集

1.血常規(guī)+CRP

1.1標(biāo)本采集及量

用75%的酒精消毒手指端或耳垂部位,待消毒液干后用一次性采血針刺入皮膚,

將第一滴血拭去,輕輕擠壓采血部位,用一次性微量吸管采集血液少許(^120

3)注入裝有抗凝劑的PE管中,輕輕吹打混勻,蓋緊管蓋,水平放置10分鐘

后進(jìn)行檢測(cè)。特殊患者(如燒傷、嬰幼兒)必要時(shí)可從足跟部?jī)蓚?cè)的中部或后部

或大拇指采血,針刺深度不應(yīng)超過(guò)2mm。

2.微量元素

2.1標(biāo)本采集及量

用75%的酒精消毒手指末端或耳垂部位,待消毒液干后用一次性采血針刺入皮

膚,將第一滴血拭去,輕輕擠壓采血部位,用一次性微量吸管采集血液少許(準(zhǔn)

確采集至40|jl刻度),輕輕打入采集微量元素專(zhuān)用的子彈頭內(nèi),顛倒混勻5次,

采集后盡快送檢。

(四)體液標(biāo)本采集

1.尿液理化檢查

1.1標(biāo)本留取時(shí)間

1.1.1收集常規(guī)尿液分析的尿標(biāo)本:應(yīng)留取新鮮尿,以清晨第一次尿?yàn)橐耍^濃

縮,條件恒定,易檢出異常,便于對(duì)比。

1.1.2收集急診患者尿液分析的尿標(biāo)本:可隨時(shí)留?。S機(jī)尿)。

1.1.3收集特殊檢驗(yàn)?zāi)蛞悍治龅哪驑?biāo)本

a)收集計(jì)時(shí)尿標(biāo)本:應(yīng)告知患者留尿起始和終止時(shí)間;留取前應(yīng)將尿液排空,

然后收集該時(shí)段內(nèi)(含終止時(shí)間點(diǎn))排出的所有尿液。

b)收集使用防腐劑的尿標(biāo)本:應(yīng)建議患者先將尿液收集于未加防腐劑的干凈容

器內(nèi),然后小心地將尿液倒入實(shí)驗(yàn)室提供的含防腐劑容器中。

c)收集多項(xiàng)檢測(cè)尿標(biāo)本:應(yīng)針對(duì)不同檢測(cè)項(xiàng)目分別留取尿標(biāo)本(可分次留取,

也可一次留取分裝至不同容器中)。

d)收集特定時(shí)段內(nèi)尿標(biāo)本:尿液應(yīng)保存于2-8。(2條件下。

e)收集時(shí)段尿尿標(biāo)本:如總尿量超過(guò)單個(gè)容器的容器時(shí),須用兩個(gè)容器,檢測(cè)

前必須充分混勻兩個(gè)容器內(nèi)的尿液,最常用的方法是在兩個(gè)尿容器之間來(lái)回相互

傾倒尿標(biāo)本;第二個(gè)容器收集的尿量一般較少,故注意加入防腐劑的量相應(yīng)減少。

f)收集臥床導(dǎo)尿患者的尿標(biāo)本:將尿袋置于冰袋上;如患者可走動(dòng),應(yīng)定期排

空尿袋,將尿液存放在2-8T條件下。

1.1.4尿液防腐與保存

1.1.4.1通常,尿標(biāo)本采集后應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)完成檢驗(yàn),避免使用防腐劑;如尿標(biāo)

本不能及時(shí)完成檢測(cè),則宜置于2-8攝氏度條件下保存,但不能超過(guò)6小時(shí),

(微生物學(xué)檢查標(biāo)本在24小時(shí)內(nèi)仍可進(jìn)行培養(yǎng))。根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目特點(diǎn),尿標(biāo)本

可采用相應(yīng)的防腐劑防腐,而無(wú)需置冰箱保存。

1.2各種尿標(biāo)本采集與量

1.2.1晨尿:以首次晨尿或第2次晨尿?yàn)橐耍捎糜谀蛞盒螒B(tài)學(xué)和化學(xué)成分分析

(尿常規(guī)、尿HCG等),采集量10ml,急診和門(mén)診病人可留取隨機(jī)中段尿送

檢。

1.2.2餐后尿:通常收集餐后2h的尿液,這種標(biāo)本有利于檢出病理性糖尿、蛋

白尿或尿膽原,主要用于了解葡萄糖代謝情況。

1.2.324h尿:患者上午8時(shí)排尿一次,排空膀胱,此后收集各次排出的尿液,

直至次日上午8時(shí)最后一次排尿的所有尿液,記錄總尿量,取第一次尿后加入防

腐劑(濃鹽酸)混勻后取適量送檢。主要用于分析如肌酊、兒茶酚胺、17-羥、

17-酮、總蛋白、電解質(zhì),尿結(jié)核菌等檢查。

1.2.4尿三杯:多用于男性下尿路及生殖系統(tǒng)疾病定位初步判斷。

1.3標(biāo)本送檢要求

用清潔的一次性容器隨時(shí)留取中段尿液,收集于尿液試管中,容器應(yīng)清潔有蓋,

明確標(biāo)記,記錄留取時(shí)間及時(shí)送檢。

1.4注意事項(xiàng)

1.4.1避免經(jīng)血、白帶、精液、糞便等混入。

1.4.2采集后立即送檢,避免細(xì)菌繁殖、細(xì)胞溶解等。

1.5標(biāo)本送檢要求

采集后盡快送檢。

2.24小時(shí)尿蛋白定量

2.1標(biāo)本采集及量

2.1.1患者可留取晨尿或隨機(jī)中段尿5-10ml,收集于清潔有蓋容器內(nèi)。

2.1.2留取24h尿,記錄總體積,混勻后取5—10ml于清潔容器中并注明尿量。

注意在收集24小時(shí)尿時(shí)需加入防腐劑(1000ml尿中加5ml甲苯)。

2.2標(biāo)本送檢要求

采集后盡快送檢。

2.3注意事項(xiàng)

a)在整個(gè)留尿過(guò)程中,按平時(shí)正常飲水,停用利尿劑。

b)避免劇烈運(yùn)動(dòng)。

c)在整個(gè)留尿過(guò)程中,留尿容器須放置在冰箱內(nèi)。

3尿微量白蛋白/尿肌肝

3.1標(biāo)本采集及量

3.1.1患者可留取晨尿或隨機(jī)中段尿5-lOml,收集于清潔有蓋容器內(nèi)。

3.2標(biāo)本送檢要求

采集后盡快送檢。

3.3注意事項(xiàng)

a)避免劇烈運(yùn)動(dòng)。

4糞便標(biāo)本采集與處理

4.1常規(guī)檢驗(yàn)采集及量

采集糞便的方法因檢查目的不同而有差別,如常規(guī)檢驗(yàn)留取新鮮指頭大?。s

5g)即可,放入干燥、清潔、無(wú)吸水性的有蓋容器內(nèi)送檢。不應(yīng)采取尿壺、便

盆中的糞便標(biāo)本,應(yīng)標(biāo)本中混入尿液和消毒劑等,可破壞糞便的有形成分,糞便

標(biāo)本檢測(cè)時(shí),應(yīng)選擇其中膿血粘液等病理成分,若無(wú)病理成分可多部位取材,采

集后應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)完成檢查,否則可因PH及消化酶等影響,使糞便中細(xì)胞成分

破壞分解。

4.2寄生蟲(chóng)檢驗(yàn)采集及量

糞便必須新鮮,送檢時(shí)間一般不宜超過(guò)24小時(shí),如檢查腸內(nèi)原蟲(chóng)滋養(yǎng)體,應(yīng)于

排便后立即送檢,立即檢食冬季需采取保溫(35-37攝氏度)措施。血吸蟲(chóng)毛

物孵化應(yīng)留新鮮便,不少于30g。檢查寄生蟲(chóng)體及蟲(chóng)卵計(jì)數(shù),須用潔凈、干燥的

容器,并防止污染;糞便不可混入尿液及其他體液等,以免影響檢查結(jié)果。

4.3化學(xué)檢驗(yàn)采集及量

采用化學(xué)法做隱血試驗(yàn)應(yīng)囑患者于收集標(biāo)本前3天氣禁食動(dòng)物性和含過(guò)氧化物

酶類(lèi)食物(如蘿卜、西紅柿、韭菜、木耳、花菜、黃瓜、蘋(píng)果、柑橘、香蕉等),

并禁服鐵劑和維生素c等,以免假陽(yáng)性反應(yīng),連續(xù)檢查3天,并選取外表及內(nèi)

層糞便;收集標(biāo)本后須迅速送檢,以免因長(zhǎng)時(shí)間放置使隱血反應(yīng)的敏感度降低。

5其它體液標(biāo)本留取與采集

5.1前列腺液標(biāo)本

5.1.1標(biāo)本采集前禁欲3天:若一次采集失敗或檢查結(jié)果為陰性但臨床指征明確

者,可于3-5天后復(fù)查。

5.1.2采集方式:由臨床醫(yī)生行前列腺按摩術(shù)采集。一般用于慢性前列腺炎癥;

疑有前列腺急性炎癥、膿腫、結(jié)核或腫瘤且壓痛明顯者,應(yīng)慎重采集標(biāo)本。按摩

時(shí)用力要均勻適當(dāng),并按一定方向進(jìn)行,避免因反復(fù)強(qiáng)力按壓造成不必要的損傷。

5.1.3所用容器:采集于清潔玻片上或無(wú)菌廣口容器內(nèi)。采集時(shí)應(yīng)棄去流出的第

一滴前列腺液,并立即送檢。

5.2精液標(biāo)本

5.2.1在臨床醫(yī)生指導(dǎo)下患者自行采集。采集前禁欲時(shí)間:2—7天;如需多次采

集標(biāo)本,每次禁欲時(shí)間天數(shù)均應(yīng)盡可能一致。3個(gè)月內(nèi)至少應(yīng)檢杳2次,2次間

隔時(shí)間>7天,但不能超過(guò)3周。

5.2.2采集方式:手淫法(最為理想的方法);應(yīng)將一次射精精液全部送檢。如

標(biāo)本不完整,應(yīng)在檢驗(yàn)報(bào)告中注明。

5.2.3所用容器:使用專(zhuān)用或指定清潔干燥廣口帶刻度容器;

5.2.4室溫保存:20℃—37℃O采集后應(yīng)立即保溫送檢,送檢時(shí)間不超過(guò)30分

鐘。

5.3陰道分泌物標(biāo)本

5.3.1采集方式:由臨床醫(yī)生負(fù)責(zé)采集,一般采用生理鹽水浸濕的棉拭子于陰道

深部或陰道后穹隆、宮頸口等處取材,標(biāo)記采集部位,采取標(biāo)本后應(yīng)立即送檢。

5.3.2所用容器:使用專(zhuān)用采集管或一次性棉拭子。

5.3.3注意事項(xiàng):檢測(cè)滴蟲(chóng)應(yīng)立即送檢,冬季需采取保溫措施。月經(jīng)期不宜進(jìn)行

陰道分泌物檢驗(yàn)。

5.4腦脊液標(biāo)本

5.4.1采集方式:由臨床醫(yī)生嚴(yán)格無(wú)菌操作采集,一般行腰椎穿刺。必要時(shí)從小

腦延髓或側(cè)腦室穿刺采集。

采集容器:分別收集每管腦脊液培養(yǎng):第一管先收集于廣口

5.4.2l-2mloCSF

無(wú)菌培養(yǎng)杯中,對(duì)兒童瓶蓋嚴(yán)格無(wú)菌消毒后,用注射器抽取無(wú)菌杯中CSF打入

兒童瓶中,及時(shí)送檢。腦脊液生化及免疫:第二管CSF收集于黃頭管中,立即

送檢。腦脊液常規(guī)檢查:第三管CSF收集供細(xì)胞學(xué)檢查,置于帽蓋為紫色的抗

凝試管中,記錄留取時(shí)間立即送檢,不超過(guò)1小時(shí)。

5.5漿膜腔積液標(biāo)本

5.5.1包括胸腔積液、腹腔積液、心包積液、關(guān)節(jié)腔積液,由臨床相關(guān)科室醫(yī)生

穿刺獲取。采集標(biāo)本分三管留取,每管漿膜腔積液培養(yǎng):第一管供細(xì)菌

l-2mlo

學(xué)檢查,穿刺后的液體注入到瓶蓋消毒后的兒童瓶中。漿膜腔積液生化:第二管

供生化及免疫學(xué)檢查,置于黃頭管中。漿膜腔積液常規(guī)檢查:第三管供細(xì)胞學(xué)檢

查,置于帽蓋為紫色的抗凝試管中。

5.5.2注意事項(xiàng):若無(wú)法及時(shí)送檢,可加入10%乙醇置于2-4。(:保存,不宜超過(guò)

2小時(shí)。

5.6胃液標(biāo)本

標(biāo)本采集:由臨床醫(yī)生采集。取胃液于廣口無(wú)菌培養(yǎng)杯中立即送檢。

5.7支氣管肺泡灌洗液

標(biāo)本采集:由臨床醫(yī)生行纖維支氣管鏡檢時(shí)采集。采集后置于無(wú)菌專(zhuān)用容器中立

即送檢。

5.8痰液標(biāo)本

5.8.1標(biāo)本采集:囑患者晨起用0.9%生理鹽水漱口后用力咳出1-2口痰液(咳

出深部痰液)。

5.8.2標(biāo)本容器:置于廣口無(wú)菌容器內(nèi),及時(shí)送檢。

5.8.3注意事項(xiàng):痰液標(biāo)本收集法因檢驗(yàn)?zāi)康牟煌悾饕米匀豢忍捣ā?/p>

a)一般收集新鮮痰,以清晨第一口痰為宜。用力咳出氣管深處呼吸道分泌物,勿

混入唾液、鼻咽分泌物和漱口水,及時(shí)送檢。適用于常規(guī)檢驗(yàn)、一般細(xì)菌檢驗(yàn)、

結(jié)核菌檢查。

b)細(xì)胞學(xué)檢查用深咳痰液及時(shí)送檢,應(yīng)盡量送含血痰液。

c)濃縮法找抗酸桿菌應(yīng)留24小時(shí)痰(量不少于5ml),細(xì)菌檢驗(yàn)應(yīng)避免口腔、鼻

咽分泌物污染。

d)幼兒痰液收集困難時(shí),可用消毒拭子刺激喉部引起咳嗽反射,用棉拭子采集標(biāo)

本。

e)對(duì)無(wú)痰或少痰患者可用生理鹽水霧化吸入,促使痰液咳出;對(duì)小兒可清壓胸骨

柄上方,誘導(dǎo)咳痰;昏迷患者可清潔口腔后用負(fù)壓吸引法吸取痰液。

f)標(biāo)本不能及時(shí)送檢,可暫時(shí)冷藏保存,但不能超過(guò)24小時(shí)。

第三章分子生物學(xué)標(biāo)本采集

1.乙型肝炎病毒核酸定量檢測(cè)(HBV-DNA)

1.1標(biāo)本類(lèi)型:血漿、血清、乳汁(禁用肝素抗凝劑)

1.2標(biāo)本采集:

1.2.1血清-用一次性無(wú)菌注射器抽取受檢者靜脈血2毫升,注入無(wú)菌的干燥管,

室溫(22-25。。放置30—60分鐘,血標(biāo)本可自發(fā)完全凝集析出血清,或直接使用

水平離心機(jī),1500rpm離心5分鐘,吸取上層血清,轉(zhuǎn)移至L5ml滅菌離心管。

1.2.2血漿-用一次性無(wú)菌注射器抽取受檢者靜脈血2毫升,注入含EDTA-2Na

(乙二胺四乙酸二鈉)或枸椽酸鈉抗凝劑的玻璃管,立即輕輕顛倒混勻,5—10

分鐘后即可分離出血漿,轉(zhuǎn)移至1.5ml滅菌離心管。

1.3標(biāo)本儲(chǔ)存和運(yùn)輸

室溫放置不超過(guò)8小時(shí),4-8T不超過(guò)72小時(shí),-20T保存期6個(gè)月,長(zhǎng)期保存

于-7CTC.應(yīng)避免反復(fù)凍融。8小時(shí)內(nèi)室溫運(yùn)輸,超過(guò)8小時(shí)冷藏運(yùn)輸。

1.4拒收標(biāo)本:

1.4.1污染、嚴(yán)重溶血或脂血標(biāo)本不能作測(cè)定。

1.4.2未按規(guī)定時(shí)間和溫度放置。

1.4.3采血量不足。

1.4.4標(biāo)本無(wú)信息。

145信息與申請(qǐng)單不符。

1.4.6肝素抗凝標(biāo)本。

2.人乳頭瘤病毒基因分型檢測(cè)(HPV-DNA)

2.1標(biāo)本類(lèi)型:宮頸脫落細(xì)胞樣本和生殖泌尿道分泌物。

2.2標(biāo)本采集:

2.2.1宮頸脫落細(xì)胞將宮頸刷中間細(xì)長(zhǎng)的部分伸入宮頸管,外側(cè)部分抵住宮頸外

口,同一方向360。旋轉(zhuǎn)3-5圈,進(jìn)行取材。

2.2.2生殖泌尿道分泌物男性一用細(xì)小棉拭子伸入尿道約2~4厘米,捻動(dòng)拭子

采集分泌物,將棉拭子置無(wú)菌管,密閉送檢(采集分泌物前2小時(shí)禁小便)。女性

生殖道一用無(wú)菌生理鹽水棉球洗去宮頸外分泌物,再用無(wú)菌棉拭子插入宮頸內(nèi),

停5秒鐘后旋動(dòng)棉拭子采集宮頸分泌物,將棉拭子置入無(wú)菌玻璃管,密閉送檢。

女性尿道一用無(wú)菌生理鹽水棉球洗凈尿道口,再用無(wú)菌棉拭子插入尿道約2厘

米,捻動(dòng)拭子采集分泌物,將棉拭子置入無(wú)菌玻璃管,密閉送檢。

2.3標(biāo)本儲(chǔ)存和運(yùn)輸:標(biāo)本可立即用于測(cè)試,也可保存于-2CTC待測(cè),保存期為6

個(gè)月。標(biāo)本運(yùn)送時(shí)應(yīng)采用0℃冰壺。

2.4拒收標(biāo)本:

2.4.1污染標(biāo)本不能作測(cè)定。

2.4.2未按規(guī)定時(shí)間和溫度放置。

2.4.3標(biāo)本無(wú)信息。

244信息與申請(qǐng)單不符。

3.其他標(biāo)本類(lèi)型的采集

3.1痰標(biāo)本:用帶蓋的無(wú)菌一次性塑料瓶收集清晨第一口痰標(biāo)本送檢。(對(duì)于無(wú)

痰或少痰的患者,(生理鹽水)可用45。(:加溫的100g/LNaCL水溶液霧化吸入

或改變體位以使痰液易于咳出;對(duì)于小兒可以輕壓胸骨柄上方以誘導(dǎo)咳痰,用無(wú)

菌棉拭子刺激喉嚨部引起咳嗽反射,用無(wú)菌棉拭子采集標(biāo)本。)

3.2生殖道拭子:尿道或陰道分泌物由醫(yī)生用專(zhuān)用的取樣拭子(滅菌,一次性)

采集樣本,及時(shí)送檢。采集生殖道拭子標(biāo)本,要求病人在采樣前2小時(shí)內(nèi)不能排

尿,采樣時(shí),將棉拭子伸入男性尿道及女性宮頸口2-3cm,轉(zhuǎn)動(dòng)一周以獲得上

皮細(xì)胞,將取樣后的棉拭子放入1.0ml無(wú)菌生理鹽水中漂洗片刻,在壁上擠干

后丟棄,避免采集過(guò)多富含白細(xì)胞的膿液標(biāo)本。

3.3咽拭子:由醫(yī)生用專(zhuān)用的取樣拭子(滅菌,一次性),適度用力拭抹咽后壁

和兩側(cè)扁桃體部位,應(yīng)避免觸及舌部;迅速將棉拭子放入裝有1ml生理鹽水的

采樣管中,在靠近頂端處折斷棉簽桿,旋緊管蓋并密封。

3.4皰疹液:先用75%酒精對(duì)皰疹周?chē)钠つw進(jìn)行消毒,待干后,用消毒針刺破

皰疹,用棉簽蘸取皰疹液后,迅速將棉拭子放入裝有1ml生理鹽水的采樣管中,

在靠近頂端處折斷棉簽桿,旋緊管蓋并密封。

3.5尿液:由病人自行留取中段尿液于無(wú)菌封閉的杯中送檢。

3.6乳汁:按無(wú)菌取材要求留取乳汁3-4ml于無(wú)菌試管或無(wú)菌瓶中送檢。

3.7其他體液及組織標(biāo)本:由臨床醫(yī)生采集后放入消毒的容器中及時(shí)送檢。

第四章臨床微生物標(biāo)本采集

1.目的

采集標(biāo)本以做臨床微生物檢驗(yàn)。

2.適用范圍

適用于本科做臨床微生物項(xiàng)目所需標(biāo)本的采集。

3.物品準(zhǔn)備

無(wú)菌培養(yǎng)容器、血培養(yǎng)瓶、一次性無(wú)菌拭子等。

4.檢驗(yàn)申請(qǐng)單填寫(xiě)要求

4.1檢驗(yàn)申請(qǐng)單采用電子申請(qǐng)或化驗(yàn)單申請(qǐng),化驗(yàn)單申請(qǐng)用鋼筆填寫(xiě),使用正楷

字,字跡清楚,填寫(xiě)完整。

4.2電子申請(qǐng)LIS條碼或申請(qǐng)的化驗(yàn)單上包括內(nèi)容:受檢者姓名、性別、年齡、

臨床診斷、送檢標(biāo)本、檢驗(yàn)項(xiàng)目、標(biāo)本采集年月日時(shí)、申請(qǐng)醫(yī)生及采樣者簽名。

5.常見(jiàn)微生物培養(yǎng)標(biāo)本的采集

5.1血培養(yǎng)或骨髓培養(yǎng)標(biāo)本的采集

5.1.1采血指征患者出現(xiàn)以下一種或同時(shí)具備幾種臨床表現(xiàn)時(shí)可作為血培養(yǎng)的重

要指征:①發(fā)熱(>38℃)或低溫(<36℃),以間歇馳張型多見(jiàn),革蘭陰性桿

菌,如大腸埃希菌引起的感染可見(jiàn)雙峰熱;②寒戰(zhàn);③白細(xì)胞增多(>10.0xl09/L,

特別是有“核左移"時(shí));④粒細(xì)胞減少(<L0X109/L);⑤血小板減少;⑥

皮膚、黏膜出血,常見(jiàn)于溶血性鏈球菌感染的菌血癥,傷寒病人第4-10天可出

現(xiàn)玫瑰疹,斑疹傷寒第4-6天可出現(xiàn)暗紅色斑丘血疹;⑦昏迷;⑧多器官衰竭;

⑨血壓降低;⑩呼吸加快(呼吸率>20/分或CO2分壓<32mmHg);以及肝

脾腫大;關(guān)節(jié)疼痛;C反應(yīng)蛋白、內(nèi)毒素、降鈣素原升高等。對(duì)新生兒可疑菌血

癥,還應(yīng)同時(shí)做尿液和腦脊液培養(yǎng)。

5.1.2血培養(yǎng)采集時(shí)間:只要懷疑患者有血流感染的可能,在考慮使用抗菌藥物

之前,都應(yīng)立即采集血培養(yǎng)標(biāo)本。若患者已行抗菌藥物治療,則應(yīng)選擇含有抗菌

藥物吸附物的培養(yǎng)瓶,并在下一次抗菌藥物應(yīng)用前或者血藥濃度最低時(shí)采血培養(yǎng)。

患者寒戰(zhàn)或者發(fā)熱初期采血,超過(guò)發(fā)熱峰值之后,病原菌會(huì)逐漸被機(jī)體免疫系清

除,從而降低檢出率。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明細(xì)菌入血后約1小時(shí),寒戰(zhàn)和發(fā)燒開(kāi)始出現(xiàn)

2小時(shí)內(nèi),此時(shí)為采集血培養(yǎng)標(biāo)本進(jìn)行病原菌培養(yǎng)的最佳時(shí)機(jī)。在不同的時(shí)間點(diǎn)

采血只有以下情況才有必要:疑似感染性心內(nèi)膜炎或其他血管內(nèi)(如導(dǎo)管相關(guān)性

感染)感染患者的連續(xù)性菌血癥。要求:對(duì)懷疑菌血癥、真菌血癥的患者,在考

慮使用抗菌藥物之前,應(yīng)立即采集血培養(yǎng)標(biāo)本。

5.1.3血培養(yǎng)采集次數(shù):

5.1.3.1對(duì)懷疑血流感染患者應(yīng)至少?gòu)?個(gè)部位分2次采集血液標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng),

以提高陽(yáng)性培養(yǎng)率

5.1.3.2可疑急性心內(nèi)膜炎患者要立即取血作血培養(yǎng),應(yīng)在1-2小時(shí)內(nèi)完成3套

血培養(yǎng)的采集,采集后立即進(jìn)行抗菌藥的經(jīng)驗(yàn)治療。如果24小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰性,

則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。

5.1.3.3可疑的亞急性心內(nèi)膜炎患者每間隔30分鐘至lh采集1套,連續(xù)采集3

套標(biāo)本。如果24小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰性,則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。說(shuō)明:血培養(yǎng)不能

在二至五天內(nèi)進(jìn)行重復(fù),因?yàn)樵诳股刂委熼_(kāi)始后血液中的細(xì)菌不會(huì)立即清除。

研究[1]表明,只做1套血培養(yǎng),病原菌的檢出率僅為65%,兩套血培養(yǎng)為80%,

三套血培養(yǎng)為96%。單瓶或單套血培養(yǎng)不僅檢出率不高,而且難以區(qū)分污染導(dǎo)

致的假陽(yáng)性,結(jié)果很難做出臨床解釋。通常情況菌血癥或真菌血癥的患者可通過(guò)

臨床表現(xiàn)來(lái)判斷療效,無(wú)需復(fù)查血培養(yǎng)或者連續(xù)續(xù)監(jiān)測(cè)血培養(yǎng)。然而有兩個(gè)例外:

第一是感染性心內(nèi)膜炎病人,對(duì)于他們的菌血癥或真菌血癥是否被清除可被用于

評(píng)估和指導(dǎo)治療:第二是與感染性心內(nèi)膜炎無(wú)關(guān)的金黃色葡萄球菌血癥,對(duì)其陽(yáng)

性血培養(yǎng)的48小時(shí)至96小時(shí)追蹤可以很好地預(yù)測(cè)復(fù)雜的金黃色葡萄球菌血癥

[2]0

5.1.4血、骨髓培養(yǎng)的采集量:

5.1.4.1成人采血量8-10ml/瓶最少5ml,如果采血量不足5ml或者大于10ml,

在報(bào)告單上備注:采血量不足5ml/大于10ml,對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果有影響。

5.1.4.2兒童的采血量不能超過(guò)其總血容量的1%,可按年齡或體重分別采足夠的

血量:

對(duì)于新生兒敗血癥,最低的采血量不確定,通常0.75-1.0ml的血量是推薦的。

說(shuō)明:血標(biāo)本采集的量是影響病原菌檢出率的重要的因素[3,4,5,6],病原菌

檢出率與采血量成正比例增長(zhǎng)[3,4,6],每瓶力口1ml的血液,病原菌的檢出率

就會(huì)相應(yīng)增加。兒童患者同樣有數(shù)據(jù)表明檢出率與血容量成正比相關(guān)[7]。

5.1.4.3骨髓標(biāo)本:用骨髓穿刺針一般從骼骨采集;骨髓采集量:l-2ml即可。

5.1.4.4成人一份血培養(yǎng)為2瓶,即1個(gè)需氧瓶和1個(gè)厭氧瓶,一次穿刺采血即為

一份標(biāo)本。采集第二份應(yīng)從另外一個(gè)穿刺點(diǎn)獲得。成人采血要求采集左右雙側(cè)各

一份標(biāo)本,總共4瓶,注明采集部位。兒童一般只做需氧培養(yǎng),只采集一個(gè)兒童

專(zhuān)用血培養(yǎng)瓶即可。采血量不足時(shí)應(yīng)優(yōu)先保證需氧瓶,90%以上的感染為需氧菌

或兼性厭氧菌。

5.1.5血培養(yǎng)皮膚及培養(yǎng)瓶消毒

5.1.5.1皮膚消毒:消毒重點(diǎn)是足夠量的消毒劑、足夠的消毒面積和作用時(shí)間。a)

三步法:75%酒精擦拭靜脈穿刺部位,自然待干30秒以上,1%-2%碘酊作用

30秒或10%碘酊作用60秒,從穿刺點(diǎn)向外劃圈消毒至消毒區(qū)域直徑達(dá)3cm以

上,75%酒精脫碘,待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后采血。對(duì)碘過(guò)敏的患者,采用

70%異丙醇或者70%乙醇消毒60秒,待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后采血。b)其

他皮膚消毒方法:洗必泰一步法:0.5%葡萄糖酸洗必素作用30s或者70%酒精

消毒后自然干燥30秒鐘。嚴(yán)格按照皮膚消毒步驟操作消毒外周靜脈穿刺部位,

消毒劑至少作用1分鐘以上(推薦使用氯乙口定或2%碘酊2月齡兒童不推薦氯乙

咤)o安爾碘使用方法:原液均勻涂擦二遍,或用原液直接噴于消毒部位二次。

作用1-2分鐘。

5.1.6培養(yǎng)瓶消毒:去掉培養(yǎng)瓶口的塑料瓶蓋,75%酒精用力擦拭血培養(yǎng)瓶橡皮

塞子表面60秒,自然待干,將標(biāo)本注入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),輕輕顛倒混勻標(biāo)本,以避免

血液凝集。在懷疑炭疽芽胞桿菌或絲狀真菌時(shí)使用碘液消毒瓶塞。注意:兒童采

血量少,更應(yīng)注意顛倒混勻。

5.1.7采集部位要求:推薦從外周靜脈采集血液標(biāo)本。說(shuō)明:不建議采集動(dòng)脈血,

因其診斷價(jià)值沒(méi)有比靜脈血更大。盡量避免從靜脈留置導(dǎo)管采血培養(yǎng),因其常伴

有高污染率[8,9,10]。如果必須從留置導(dǎo)管內(nèi)采血,也應(yīng)同時(shí)從外周靜脈采集

另外一個(gè)血培養(yǎng)標(biāo)本以幫助陽(yáng)性結(jié)果的判讀。

5.1.8采集方法要求:a)在采血之前,血培養(yǎng)瓶的橡皮塞需使用75%酒精消毒

并干燥,然后再?lài)?yán)格按照皮膚消毒步驟操作進(jìn)行穿刺部位的皮膚消毒。并等待足

夠的消毒時(shí)間。b)嚴(yán)格無(wú)菌操作,不允許在皮膚消毒后用手接觸靜脈,除非帶

有無(wú)菌手套。c)不推薦采血和接種血培養(yǎng)瓶更換注射器針頭,采用真空采血裝

置能降低污染率。說(shuō)明:無(wú)論采用何種采血方法,血培養(yǎng)可接受的污染率通常是

<3%[ll]o

5.1.9血培養(yǎng)標(biāo)本的運(yùn)送要求:采血后應(yīng)該立即送檢。如不能立即送檢,需室溫

保存,切勿冷藏。標(biāo)本接種到培養(yǎng)瓶后,需輕輕顛倒混勻以防血液凝固。說(shuō)明:

血培養(yǎng)瓶在接種前、接種后均不得冷藏或冷凍,否則會(huì)導(dǎo)致某些病原微生物死亡。

接種后的培養(yǎng)瓶最好立即送到實(shí)驗(yàn)室,最遲不能超過(guò)2小時(shí)

5.1.10血培養(yǎng)標(biāo)本的拒收標(biāo)準(zhǔn)

a)血培養(yǎng)瓶上無(wú)條碼,無(wú)信息。

b)用過(guò)期培養(yǎng)瓶采集標(biāo)本,采血量不足。

c)血培養(yǎng)瓶破裂、滲漏、明顯污染、血液凝固等。

d)血標(biāo)本采集后放置12小時(shí)以上,冷藏保存的標(biāo)本。

注:(1)導(dǎo)管尖端培養(yǎng)應(yīng)該與外周靜脈血培養(yǎng)配套送檢。

(2)血培養(yǎng)宜同時(shí)做尿液和腦脊液培養(yǎng)。

5.1.11幾種特殊要求的血培養(yǎng)

5.1.11.1導(dǎo)管相關(guān)的性血流感染(CRBSI)

5.1.11.1.1短期外周導(dǎo)管要求:通過(guò)靜脈穿刺獲得病人的2份(套)外周血培養(yǎng)

(不同點(diǎn))。無(wú)菌操作拔去導(dǎo)管并用Maki半定量方法[14]培養(yǎng)。

說(shuō)明:Maki半定量法是先用75%酒精清潔導(dǎo)管周?chē)つw,然后無(wú)菌移動(dòng)導(dǎo)管,

剪取導(dǎo)管末端5cm置于無(wú)菌容器中,立即送至實(shí)驗(yàn)室(為防止干燥,常規(guī)培養(yǎng)

送檢時(shí)間不得超過(guò)15min,4。(:保存不得超過(guò)2小時(shí))。實(shí)驗(yàn)室人員用無(wú)菌銀子

將導(dǎo)管在血瓊脂平板上交叉滾動(dòng)4次,然后棄之,將接種后的培養(yǎng)基置C02孵

箱35P過(guò)夜培養(yǎng),平板上菌落數(shù)不少于15個(gè)為陽(yáng)性。

培養(yǎng)結(jié)果的解釋?zhuān)?/p>

—假如一套或多套血培養(yǎng)陽(yáng)性,而且導(dǎo)管片段也是陽(yáng)性(半定量N15個(gè)菌落)

并且為同一菌:提示CRBSL

——假如一套或多套血培養(yǎng)陽(yáng)性,而且導(dǎo)管片段陰性:不可以下定論;但是如果

結(jié)果是金黃色葡萄球菌或念珠菌屬,而且排除其他任何可鑒別來(lái)源的感染則提示

CRBSI。

——假如血培養(yǎng)陰性,而且導(dǎo)管片段陽(yáng)性,盡管有菌落計(jì)數(shù),仍然提示導(dǎo)管定

植而非CRBSL

一假如血培養(yǎng)陽(yáng)性,而且導(dǎo)管片段也是陰性,則不可能是CRBSL

5.1.11.1.2中心靜脈導(dǎo)管及靜脈留置口(VAP)有兩種方法,其中方法一適用于

想保留導(dǎo)管的患者,如果已經(jīng)決定要拔除導(dǎo)管,則方法二更合適。

a)方法一

要求:對(duì)懷疑患CRBSI的病人采集至少兩套血培養(yǎng),其中至少一套采集來(lái)自外

周血靜脈穿刺并做好標(biāo)記,另一套應(yīng)該同時(shí)或短時(shí)間間隔內(nèi)從導(dǎo)管口或VAP隔

膜無(wú)菌采集,采集時(shí)間應(yīng)與外周血血培養(yǎng)相近,并做好標(biāo)記。

培養(yǎng)結(jié)果的解釋?zhuān)?/p>

——如果兩套血培養(yǎng)陽(yáng)性且為同一種細(xì)菌,并排除其它任何來(lái)源的感染,提示

為CRBSL

——如果兩套血培養(yǎng)陽(yáng)性且為同一種細(xì)菌,而且來(lái)自導(dǎo)管的血培養(yǎng)報(bào)陽(yáng)時(shí)間比

外周靜脈血培養(yǎng)早120分鐘,提示為CRBSIO如果排除其他任何來(lái)源的感染,

兩套血培養(yǎng)報(bào)陽(yáng)差異時(shí)間小于120分鐘,并且為同一種細(xì)菌,耐藥譜也一致,

也提示可能為CRBSL

如果兩套血培養(yǎng)陽(yáng)性,而且來(lái)自導(dǎo)管的血培養(yǎng)細(xì)菌數(shù)量至少5倍于外周靜

脈血培養(yǎng)的CFUs/ml,如果排除其他任何來(lái)源的感染,也提示可能為CRBSK適

用于手工定量血培養(yǎng)系統(tǒng),比如溶解/離心濃縮方法)。

——如果僅有來(lái)自外周靜脈的血培養(yǎng)為陽(yáng)性,不能確定為CRBSI,但是如果培

養(yǎng)出的微生物是金黃色葡萄球菌或假絲酵母菌,并且缺乏其他感染的證據(jù),則提

示可能為CRBSL確定為CRBSI還需要定量或半定量導(dǎo)管片段培養(yǎng)出相同微生

物。

一假如只有從導(dǎo)管抽血的那套是陽(yáng)性的:不能得出CRBSI的結(jié)論,提示導(dǎo)管

定植菌或者是血培養(yǎng)采集過(guò)程中的污染。

——如果兩套血培養(yǎng)均為陰性,不是CRBSL

b)方法二

要求:通過(guò)獨(dú)立的外周靜脈穿刺無(wú)菌采集兩套血培養(yǎng);拔出可疑導(dǎo)管,剪取5cm

的導(dǎo)管遠(yuǎn)端的片段送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行Maki's半定量培養(yǎng)或振蕩/超聲后定量培養(yǎng)。

培養(yǎng)結(jié)果的解釋?zhuān)?/p>

——如果一套或多套血培養(yǎng)陽(yáng)性,同時(shí)導(dǎo)管末端培養(yǎng)陽(yáng)性,而且通過(guò)菌種鑒定

和藥敏試驗(yàn)結(jié)果比對(duì)確定為同一株微生物,貝II很可能是CRBSI。

——如果一套或多套血培養(yǎng)陽(yáng)性,而導(dǎo)管末端培養(yǎng)為陰性,如果培養(yǎng)出的微生

物是金黃色葡萄球菌或假絲酵母菌,并且缺乏其他感染的證據(jù),則提示可能為

CRBSI。確定為CRBSI還需其他結(jié)果支持。

——如果血培養(yǎng)陽(yáng)性而導(dǎo)管末端培養(yǎng)陽(yáng)性,提示為導(dǎo)管定植菌,不是CRBSL

——如果血培養(yǎng)和導(dǎo)管末端培養(yǎng)均為陰性,則不會(huì)是CRBSL

5.1.11.2感染性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎

5.1.11.2.1血培養(yǎng)的采集時(shí)間要求:對(duì)于可能的心內(nèi)膜炎患者,起初采集3套血

培養(yǎng),如果在24小時(shí)仍報(bào)告為陰性,則繼續(xù)連續(xù)采集2套血培養(yǎng),一共采集5

套血培養(yǎng)。

a)急性感染性心內(nèi)膜炎:

要求:在經(jīng)驗(yàn)性抗生素治療前30min之內(nèi)采血培養(yǎng)(1?2小時(shí)內(nèi)操作完畢)。

說(shuō)明:對(duì)于疑似或已知高毒力病原菌(如金黃色葡萄球菌)所致感染性心內(nèi)膜炎

患者,需要在第一時(shí)間立即采血培養(yǎng)以避免治療上不必要的延誤。

b)亞急性感染性心內(nèi)膜炎:

要求:每隔15min左右收集血液,采集數(shù)套血培養(yǎng)。

說(shuō)明:適當(dāng)?shù)臅r(shí)間間隔有助于證明為持續(xù)性菌血癥,尤其是當(dāng)心電圖正?;蚰@?/p>

兩可時(shí)具有更高的臨床價(jià)值。

c)對(duì)疑似亞急性感染性心內(nèi)膜炎的患者,不一定必須在經(jīng)驗(yàn)性抗生素治療前采血

培養(yǎng),對(duì)這些患者,嘗試確定微生物學(xué)診斷更為重要。由于大多數(shù)感染性心內(nèi)膜

炎患者菌血癥持續(xù)存在,使血培養(yǎng)的時(shí)間選擇相對(duì)不是那么重要。

5.1.11.2.2需要的血培養(yǎng)數(shù)量

要求:先采集3套血培養(yǎng)。如果這些血培養(yǎng)在24小時(shí)內(nèi)均為陰性,則需再采集

2套血培養(yǎng),總共需采集5套血培養(yǎng)。

說(shuō)明:在采集懷疑有感染性心內(nèi)膜炎病人血培養(yǎng)時(shí)皮膚消毒是相當(dāng)重要的。在具

有亞急性感染性心內(nèi)膜炎或人工心臟瓣膜的病人,主要的病原菌是皮膚菌群,比

如凝血酶陰性的葡萄球菌,因此,特別重要的是血培養(yǎng)需要通過(guò)靜脈穿刺獲得,

而不是通過(guò)留置于血管內(nèi)的裝置。來(lái)源于導(dǎo)管的血培養(yǎng)增加了的污染的危險(xiǎn)因素,

從而導(dǎo)致感染性心內(nèi)膜炎的錯(cuò)誤結(jié)論。

有研究表明:造成感染性心內(nèi)膜炎"培養(yǎng)陰性”的另一個(gè)可能原因是被稱(chēng)為:營(yíng)

養(yǎng)變異的鏈球菌"(NVS)的存在。它們生長(zhǎng)需要維生素B6或半胱氨酸。目前

商品化血培養(yǎng)瓶中都已經(jīng)添加了這些物質(zhì)。如果血培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)種時(shí)發(fā)現(xiàn)有鏈狀排列

的革蘭陽(yáng)性球菌,符合鏈球菌的特征,但在羊血瓊脂平板上不生長(zhǎng),則可能存在

營(yíng)養(yǎng)變異鏈球菌。據(jù)估計(jì),5~6%的心內(nèi)膜炎患者存在營(yíng)養(yǎng)變異鏈球菌[14]。

52尿液培養(yǎng)標(biāo)本采集

5.2.1采集方法:注意盡量采集晨尿標(biāo)本,應(yīng)保證尿液在膀胱內(nèi)停留4h以上。

留尿前,盡可能減少因液體攝入稀釋尿液所指的尿細(xì)菌計(jì)數(shù)偏低。

5.2.2清潔中段尿:最好留取早晨清潔中段尿標(biāo)本,囑咐患者睡前少飲水,清晨

起床后,女性用肥皂水清洗會(huì)陰部,男性應(yīng)翻上包皮,仔細(xì)清洗,再用清水沖洗

尿道口周?chē)?;自然排?讓尿液不間斷,將前段尿排去,中段尿約10ml直接排

入專(zhuān)用的無(wú)菌培養(yǎng)杯中,立即送檢,2h內(nèi)接種。該方法簡(jiǎn)單、易行,是最常用

的尿培養(yǎng)標(biāo)本收集方法,但很容易受到會(huì)陰部細(xì)菌污染,應(yīng)由醫(yī)護(hù)人員采集或在

醫(yī)護(hù)人員指導(dǎo)下由患者正確留取。

5.2.3直接導(dǎo)尿:按常規(guī)方法對(duì)會(huì)陰局部進(jìn)行消毒后,用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插人

膀胱,棄去剛開(kāi)始導(dǎo)出的15ml尿液后再收集培養(yǎng)的尿液,可減少尿液標(biāo)本污染,

準(zhǔn)確地反映膀胱感染情況。但有可能將下尿道細(xì)菌引入膀胱,導(dǎo)致繼發(fā)感染,一

般不提倡使用。

5.2.4留置導(dǎo)尿管收集尿液:利用留置導(dǎo)尿管采集標(biāo)本時(shí),應(yīng)先用75%乙醇消毒

導(dǎo)口及尿管外部,待干后,夾住導(dǎo)管口10-20分鐘,按無(wú)菌操作方法用注射器

從導(dǎo)管口抽取5-10ml尿液,穿刺導(dǎo)尿管吸取尿液,操作時(shí)應(yīng)防止混入消毒劑,

注意不能從尿液收集袋中采集尿液。

5.2.5恥骨上聯(lián)合穿刺法:使用無(wú)菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮膚消毒穿入膀胱吸

取尿液,是評(píng)估膀胱內(nèi)細(xì)菌感染的"金標(biāo)準(zhǔn)”方法,但有一定的痛苦?;颊唠y以

接受。主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰兒尿標(biāo)本的采集。

標(biāo)本采集量、收集容器及運(yùn)送:標(biāo)本采集量用無(wú)菌痰杯收集尿

5.2.65-10mlo

標(biāo)本。標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)送檢、及時(shí)接種,室溫下保存時(shí)間不得超過(guò)2h(夏季

保存時(shí)間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏保存),4(冷藏保存時(shí)間不得超過(guò)24h,但應(yīng)注意

冷藏保存的標(biāo)本不能用于淋病奈瑟菌培養(yǎng)。

5.3糞便培養(yǎng)標(biāo)本采集

5.3.1送檢指征:當(dāng)腹瀉患者出現(xiàn)以下任何一種情況時(shí)建議采集糞便標(biāo)本,進(jìn)行

細(xì)菌培養(yǎng):

5.3.2糞便涂片鏡檢白細(xì)胞>5/HP;

5.3.3重癥腹瀉;

5.3.4體溫大于38.5℃;

5.3.5血便;

5.3.6便中有膿液;

5.3.7未經(jīng)抗菌藥物治療的持續(xù)性腹瀉患者;

5.3.8來(lái)自疫區(qū)的患者。

5.3.9標(biāo)本采集

5.3.10標(biāo)本采集盡可能在發(fā)病早期和使用抗菌藥物治療之前。在不同的時(shí)間采集

2~3個(gè)標(biāo)本可以提高致病菌的分離率。

5.3.11自然排便采集糞便標(biāo)本時(shí)取有膿血、粘液、組織碎片部分的糞便3g。

液體糞便則取絮狀物,一般取l~3ml,裝入無(wú)菌培養(yǎng)杯內(nèi)送檢。如需培養(yǎng)志賀

菌應(yīng)于獲取糞便標(biāo)本后30分鐘內(nèi)送檢

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