浙東北聯(lián)盟2025屆高考沖刺押題（最后一卷）生物試卷含解析

浙東北聯(lián)盟2025屆高考沖刺押題（最后一卷）生物試卷考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫(xiě)在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請(qǐng)用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫(xiě)姓名和準(zhǔn)考證號(hào)。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下列關(guān)于種群、群落、生態(tài)系統(tǒng)的敘述，正確的是()A．當(dāng)種群的數(shù)量超過(guò)K/2時(shí)，易導(dǎo)致該種群的豐富度降低B．生態(tài)系統(tǒng)中，生產(chǎn)者的同化量可以用生產(chǎn)者的干重積累量表示C．標(biāo)志重捕法調(diào)查種群密度時(shí)，若標(biāo)志物部分脫落，則計(jì)算出的種群密度比實(shí)際值偏大D．捕食者的存在會(huì)降低物種的多樣性，外來(lái)物種入侵會(huì)破壞生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性2．在大腸桿菌的培養(yǎng)與分離實(shí)驗(yàn)中，下列相關(guān)操作正確的是（）A．在LB固體培養(yǎng)基配制過(guò)程中，為防止雜菌污染，需要利用無(wú)菌水進(jìn)行配制B．實(shí)驗(yàn)中所需的棉花應(yīng)使用脫脂棉，因?yàn)槊撝薏灰孜?，可以防止雜菌污染C．滅菌后，通常將實(shí)驗(yàn)用具放入40~50℃烘箱中烘干，以除去滅菌時(shí)的水分D．倒平板應(yīng)在無(wú)菌超凈臺(tái)進(jìn)行，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后先置于水平桌面上，再晃動(dòng)3．在一個(gè)較大的果蠅種群中，雌雄果蠅數(shù)量相等，且雌雄個(gè)體之間可以自由交配。若種群中B的基因頻率為80%，b的基因頻率為20%，則下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．若B、b位于常染色體上，則雄果蠅中出現(xiàn)基因型為bb的概率為4%B．若B、b位于常染色體上，則顯性個(gè)體中出現(xiàn)雜合雄果蠅的概率約為17%C．若B、b只位于X染色體上，則XbXb、XbY的基因型頻率分別為4%、20%D．若B、b的基因頻率發(fā)生定向改變，則說(shuō)明該果蠅種群一定發(fā)生了進(jìn)化4．生物膜將真核細(xì)胞內(nèi)的空間包圍分隔成不同區(qū)域，使細(xì)胞內(nèi)的不同代謝反應(yīng)在這些區(qū)域中高效有序進(jìn)行。下列關(guān)于這些區(qū)域的敘述，正確的是（）A．由雙層膜包圍成的區(qū)域均可產(chǎn)生ATP，也可消耗ATPB．口腔上皮細(xì)胞內(nèi)由單層膜包圍成的區(qū)域的種類(lèi)比葉肉細(xì)胞的少C．植物細(xì)胞的色素分子只儲(chǔ)存于雙層膜包圍成的區(qū)域中D．蛋白質(zhì)、核酸、糖類(lèi)、脂質(zhì)的合成均發(fā)生于由膜包圍成的區(qū)域中5．PEP是某油料作物細(xì)胞中的一種中間代謝產(chǎn)物，在兩對(duì)獨(dú)立遺傳的基因（A和a、B和b）的控制下，可轉(zhuǎn)化為油脂或蛋白質(zhì)。某科研小組通過(guò)RNA干擾的方式獲得了產(chǎn)油率更高的品種，基本原理如下圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．產(chǎn)油率高植株和產(chǎn)蛋白高植株的基因型分別為AAbb、aaBBB．圖示中過(guò)程①與過(guò)程②所需要的嘧啶堿基數(shù)量不一定相同C．該研究通過(guò)抑制基因B表達(dá)過(guò)程中的翻譯階段來(lái)提高產(chǎn)油率D．圖示表明基因是通過(guò)控制酶的合成來(lái)控制代謝，進(jìn)而控制性狀6．下圖是人體神經(jīng)元及信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程模式圖，相關(guān)分析正確的是（）A．④內(nèi)的物質(zhì)通過(guò)自由擴(kuò)散釋放到⑤處B．⑤屬于人體內(nèi)環(huán)境的組成成分之一C．抑制該細(xì)胞呼吸，神經(jīng)細(xì)胞功能正常D．靜息狀態(tài)下，圖B電流計(jì)指針會(huì)發(fā)生偏轉(zhuǎn)二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）[生物—選修3現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題]下圖為純種荷斯坦奶牛的繁殖過(guò)程，據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)克隆動(dòng)物培養(yǎng)過(guò)程與圖示繁殖過(guò)程相比特有的技術(shù)手段是________技術(shù)，這兩種繁殖動(dòng)物的方式相比，實(shí)質(zhì)性的區(qū)別為前者是___________生殖(填“無(wú)性生殖”或“有性生殖”)，后者是__________生殖(填“無(wú)性生殖”或“有性生殖”)。(2)一般用_________激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理。用孕激素處理受體牛以利于胚胎移植。(3)受精卵體外培養(yǎng)所需的培養(yǎng)液成分一般比較復(fù)雜，除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽類(lèi)外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及________等物質(zhì)。(4)純種荷斯坦奶牛繁殖成功原因之一是純種荷斯坦奶牛胚胎可與受體黃牛的子宮建立_____，但是移入受體的供體胚胎的_________在孕育過(guò)程中不受任何影響。(5)某研究所決定培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因荷斯坦奶牛，科研人員先構(gòu)建含藥用蛋白基因的表達(dá)載體；再將其導(dǎo)入受精卵中；然后還要采用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)_______________。8．（10分）人類(lèi)胰島素基因位于第11號(hào)染色體上，長(zhǎng)度8416bp，包含3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子，人類(lèi)胰島素的氨基酸序列已知?；卮鹣嚓P(guān)問(wèn)題：（1）上圖是利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因的方法，除了此方法外，還可以利用的方法是____________。（2）利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因，在緩沖液中除了要添加模板和引物外，還需要添加的物質(zhì)有_____________________________。（3）經(jīng)過(guò)______輪循環(huán)可以得到所需的目的基因，一個(gè)DNA分子經(jīng)過(guò)5輪循環(huán)，需要引物A_____個(gè)，從PCR的過(guò)程和DNA分子的特點(diǎn)，試著寫(xiě)出設(shè)計(jì)引物需要注意的問(wèn)題_____、_____（答出2點(diǎn)即可）。（4）利用SDS-凝膠電泳分離不同DNA分子，遷移速度取決于__________________。（5）利用圖示方法獲取的目的基因，直接構(gòu)建基因表達(dá)載體后導(dǎo)入大腸桿菌，（選能或不能）___________表達(dá)出人胰島素，理由是______________________________。9．（10分）中國(guó)科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物進(jìn)行克隆，獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過(guò)程，核移植是指_____________。哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度____（填“大于”或“小于”）體細(xì)胞核移植，其原因是_________________。（2）目前核移植技術(shù)中普通使用的去核方法是___________。如果不刺破透明帶或卵母細(xì)胞質(zhì)膜的情況下，還可以用___________________方法。（3）用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞，為什么？_____________。（4）如果用體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆猴—“中中”和“華華”是供體動(dòng)物100%的復(fù)制嗎？___（是/否），為什么？________________________________________。10．（10分）2018年！月25日，中科院神經(jīng)科學(xué)研究所研究團(tuán)隊(duì)利用類(lèi)似克隆羊“多莉”的體細(xì)胞克隆技術(shù)克隆的獼猴“中中”和“華華”，登，上了全球頂尖學(xué)術(shù)期刊《細(xì)胞》的封面，該成果標(biāo)志著中國(guó)率先開(kāi)啟了以體細(xì)胞克隆猴作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的新時(shí)代。下圖是體細(xì)胞克隆猴的技術(shù)流程圖，請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題。（1）圖中選擇獼猴胚胎期而非成年期的成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，其原因是_________。剛放入培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞沉降到瓶底部后首先會(huì)出現(xiàn)___________現(xiàn)象。每一次傳代培養(yǎng)時(shí)，常利用_________酶消化處理，制成細(xì)胞懸液后轉(zhuǎn)入到新的培養(yǎng)瓶中。（2）圖示過(guò)程涉及的主要技術(shù)有_________（答出三點(diǎn)即可）。以體細(xì)胞克隆猴作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的顯著優(yōu)勢(shì)之一是同-批克隆猴群的遺傳背景相同，圖中克隆猴的遺傳物質(zhì)主要來(lái)自_______。（3）圖中步驟①是克隆猴的技術(shù)難點(diǎn)之一，需要將卵母細(xì)胞培養(yǎng)到_________后進(jìn)行去核操作，而后用_________方法激活受體細(xì)胞，使其完成分裂和發(fā)育。（4）體細(xì)胞克隆猴的另外一個(gè)技術(shù)難點(diǎn)是猴的體細(xì)胞克隆胚胎發(fā)育差?？茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)，胚胎發(fā)育障礙與克隆胚胎基因組上大量組蛋白的甲基化密切相關(guān)。由此推測(cè)，圖中Kdm4dmRNA翻譯產(chǎn)生的酶的作用是_____。11．（15分）乳腺炎和口蹄疫分別是由細(xì)菌和病毒引起的危害奶牛養(yǎng)殖業(yè)的兩種嚴(yán)重疾病。研究者利用生物技術(shù)培育出轉(zhuǎn)乳鐵蛋白肽(抗細(xì)菌)和人干擾素(抗病毒)基因的雙轉(zhuǎn)基因奶牛新品種。下圖1為基因表達(dá)載體，圖2為培育流程。(1)培育雙轉(zhuǎn)基因奶牛涉及的生物技術(shù)有_______________________________________________(至少2項(xiàng))。(2)牛乳鐵蛋白肽基因能在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)，人干擾素基因則可在全身細(xì)胞表達(dá)，這與構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)________的選擇有關(guān)。據(jù)圖可知，干擾素基因與____________基因可同時(shí)轉(zhuǎn)錄，基因工程過(guò)程中主要的工具酶有________________。(3)將基因?qū)肱Ｌ撼衫w維細(xì)胞前，需用________將其處理成單個(gè)細(xì)胞。成纖維細(xì)胞無(wú)法直接發(fā)育成個(gè)體，需要去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)誘導(dǎo)，以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞核的________。(4)研究者利用________________技術(shù)篩選出____________(填“牛乳鐵蛋白肽”或“干擾素”)基因成功表達(dá)的胚胎進(jìn)行移植。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、C【解析】

標(biāo)志重捕法誤差歸納：(1)統(tǒng)計(jì)值比實(shí)際值偏大的原因：①標(biāo)志物易脫落：可導(dǎo)致重捕個(gè)體中帶標(biāo)志的個(gè)體數(shù)據(jù)偏小，據(jù)計(jì)算公式N總＝初捕數(shù)×重捕數(shù)/重捕中標(biāo)記數(shù)推知，重捕中標(biāo)記數(shù)若減小則N總會(huì)比真實(shí)值偏大。②被捕獲一次后，難以被再次捕獲：可導(dǎo)致再次捕獲的個(gè)體中標(biāo)記數(shù)偏小，最終統(tǒng)計(jì)結(jié)果偏差應(yīng)與①相同，即比真實(shí)值偏大。(2)統(tǒng)計(jì)值比真實(shí)值偏小的原因：①標(biāo)志物影響了動(dòng)物活動(dòng)，導(dǎo)致更易被捕捉：可導(dǎo)致再次捕獲的個(gè)體中標(biāo)記數(shù)偏大，依據(jù)公式可推知，計(jì)算所得結(jié)果比真實(shí)值應(yīng)偏小。②調(diào)查期間有較多個(gè)體死亡或遷出，則統(tǒng)計(jì)值將偏小；反之則導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)值偏大。【詳解】A、當(dāng)種群的數(shù)量超過(guò)K/2時(shí)，種內(nèi)斗爭(zhēng)加劇，而物種豐富度是指群落中物種數(shù)目的多少稱(chēng)為豐富度，A錯(cuò)誤；B、生態(tài)系統(tǒng)中，生產(chǎn)者的同化量是生產(chǎn)者固定的太陽(yáng)能總量，B錯(cuò)誤；C、種群中的個(gè)體數(shù)=第一次捕獲數(shù)×第二次捕獲數(shù)÷重捕標(biāo)志個(gè)體數(shù)，標(biāo)志物部分脫落，則計(jì)算出的種群密度比實(shí)際值偏大，C正確；D、捕食者的存在會(huì)增加物種的多樣性，外來(lái)物種入侵或引種不當(dāng)（如引入我國(guó)的水葫蘆、食人魚(yú)等），則首先會(huì)減少當(dāng)?shù)氐奈锓N，從而破壞當(dāng)?shù)氐纳锒鄻有裕ㄖ饕ㄟ^(guò)破壞食物鏈的方式造成其他物種消失或者是瀕危），降低生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，D錯(cuò)誤。故選C2、D【解析】

大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)保持無(wú)菌，所有操作都應(yīng)注意無(wú)菌操作?！驹斀狻緼、LB培養(yǎng)基配置完成后需要滅菌，因此在配置過(guò)程中無(wú)需用無(wú)菌水，A錯(cuò)誤；B、脫脂棉易吸水，容易引起雜菌污染，實(shí)驗(yàn)中所需棉花不應(yīng)使用脫脂棉，B錯(cuò)誤；C、滅菌后，通常將實(shí)驗(yàn)用具放入60-80℃烘干箱中烘干，C錯(cuò)誤；D、倒平板應(yīng)在無(wú)菌超凈臺(tái)進(jìn)行，倒完平板應(yīng)先置于水平桌面上，再晃動(dòng)，D正確。故選D?！军c(diǎn)睛】本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分以及制備方法，識(shí)記無(wú)菌技術(shù)的主要內(nèi)容，同時(shí)要求考生具有一定的實(shí)驗(yàn)技能。3、C【解析】

分析題干可推出：運(yùn)用遺傳平衡定律計(jì)算，雌性果蠅XbXb的基因型頻率為Xb的平方，雄性果蠅只有一條X性染色體，雄果蠅的Xb基因頻率就是XbY的基因型頻率。同時(shí)，注意雌雄比例為1:1，因此理論上XbXb、XbY的基因型頻率占總的一半，據(jù)此答題?！驹斀狻緼、若該對(duì)等位基因位于常染色體上，則bb的基因型頻率為20%×20%×100%=4%，常染色體上基因控制性狀與性別無(wú)關(guān)，因此雄果蠅中出現(xiàn)基因型為bb的概率也為4%，A正確；B、根據(jù)B的基因頻率為80%，b的基因頻率為20%，可得BB的基因型頻率為64%，Bb的基因型頻率為32%，顯性個(gè)體中出現(xiàn)雜合雄果蠅的概率為[32%÷(64%+32%)]×1/2×100%≈17%，B正確；C、若該對(duì)等位基因只位于X染色體上，則雌果蠅中XBXB的基因型頻率為64%、XBXb的基因型頻率為32%、XbXb的基因型頻率為4%，雄果蠅中XBY的基因型頻率為80%，XbY的基因型頻率為20%，雌雄果蠅數(shù)量相等，因此XbXb、XbY的基因型頻率分別為2%、10%，C錯(cuò)誤；D、生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)是種群基因頻率的改變，所以B、b基因頻率改變一定會(huì)引起該果蠅種群的進(jìn)化，D正確。故選C?！军c(diǎn)睛】本題主要考查了遺傳平衡定律計(jì)算，考查了學(xué)生對(duì)所學(xué)生物學(xué)知識(shí)的運(yùn)用情況，對(duì)所給信息的思維和判斷能力，難度不是很大，但容易做錯(cuò)。4、B【解析】

1．生物膜系統(tǒng)：細(xì)胞中的細(xì)胞器膜、細(xì)胞膜和核膜等結(jié)構(gòu)共同構(gòu)成了細(xì)胞的生物膜系統(tǒng)。2．生物膜系統(tǒng)功能如下：（1）細(xì)胞膜不僅使細(xì)胞具有一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的內(nèi)部環(huán)境，同時(shí)，在細(xì)胞與外部環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)運(yùn)輸、能量轉(zhuǎn)換和信息傳遞的過(guò)程中起著決定性作用；（2）許多重要的化學(xué)反應(yīng)都在生物膜上進(jìn)行，這些化學(xué)反應(yīng)需要酶的參與，廣闊的膜面積為多種酶提供了大量的附著位點(diǎn)；（3）細(xì)胞內(nèi)的生物膜把各種細(xì)胞器分隔開(kāi)，如同一個(gè)小小的區(qū)室，這樣就使得細(xì)胞內(nèi)能夠同時(shí)進(jìn)行多種化學(xué)反應(yīng)，而不會(huì)互相干擾，保證了細(xì)胞生命活動(dòng)高效有序的進(jìn)行?！驹斀狻緼、由雙層膜包圍成的區(qū)域包括線粒體、葉綠體和細(xì)胞核，其中葉綠體和線粒體均可產(chǎn)生ATP，也可消耗ATP，但細(xì)胞核只能消耗ATP，A錯(cuò)誤；B、口腔上皮細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行的代謝比較簡(jiǎn)單，而葉肉細(xì)胞擔(dān)負(fù)著制造有機(jī)物的功能，根據(jù)結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的觀點(diǎn)推測(cè)口腔上皮細(xì)胞內(nèi)由單層膜包圍成的區(qū)域的種類(lèi)比葉肉細(xì)胞的少，B正確；C、植物細(xì)胞的色素分子存在于液泡和葉綠體中，但只有葉綠體是雙層膜包圍成的區(qū)域，C錯(cuò)誤；D、蛋白質(zhì)的合成發(fā)生在核糖體上，核糖體是無(wú)膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，D錯(cuò)誤；故選B。5、A【解析】

分析題意和題圖：基因A控制合成酶a，使PEP轉(zhuǎn)化為油脂?；駼的鏈2正常表達(dá)出酶b，可使PEP轉(zhuǎn)化為蛋白質(zhì)。以基因B的鏈1誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄出的RNA可與鏈2正常轉(zhuǎn)錄出的mRNA形成雙鏈RNA，干擾酶b的合成，抑制PEP轉(zhuǎn)化為蛋白質(zhì)，從而提高油脂產(chǎn)量?！驹斀狻緼、根據(jù)題圖可知，產(chǎn)油高植株的基因型為Abb，產(chǎn)蛋白高植株的基因型為aaB，A錯(cuò)誤；B、由于過(guò)程①和過(guò)程②的模板鏈不同，所需的嘧啶堿基數(shù)量不一定相同，B正確；C、根據(jù)分析題圖可知，通過(guò)抑制基因B表達(dá)過(guò)程中的翻譯階段可提高產(chǎn)油率，C正確；D、圖示表明基因是通過(guò)控制酶的合成來(lái)控制代謝，進(jìn)而控制性狀，D正確。故選A。【點(diǎn)睛】解答本題需明確幾點(diǎn)：1.基因與性狀的關(guān)系：基因通過(guò)控制蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)來(lái)控制性狀；通過(guò)控制酶的合成控制代謝過(guò)程，從而影響生物性狀。2.分析題圖：油菜產(chǎn)油率高的原因是因?yàn)榛駼中1鏈轉(zhuǎn)錄形成的RNA能與2鏈轉(zhuǎn)錄形成的mRNA結(jié)合形成雙鏈RNA，從而抑制了合成酶b的翻譯過(guò)程。6、B【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：圖左側(cè)為神經(jīng)元的胞體，①②③分別為線粒體、高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)；圖右側(cè)為突觸結(jié)構(gòu)，④⑤分別為突觸小泡、突觸間隙?！驹斀狻緼、④是突觸小泡，④中的物質(zhì)釋放到⑤的方式是胞吐，A錯(cuò)誤；B、⑤屬于組織液，是人體內(nèi)環(huán)境的組成成分之一，B正確；C、若抑制該細(xì)胞的呼吸作用，發(fā)現(xiàn)神經(jīng)纖維在一次興奮后，其細(xì)胞膜很可能無(wú)法再恢復(fù)到外正內(nèi)負(fù)的靜息狀態(tài)，因而影響神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)，C錯(cuò)誤；D、靜息狀態(tài)下，圖B電流計(jì)兩側(cè)都為正電位，沒(méi)有電位差，指針不會(huì)發(fā)生偏轉(zhuǎn)，D錯(cuò)誤故選B。二、綜合題：本大題共4小題7、核移植無(wú)性生殖有性生殖促性腺血清正常的生理和組織聯(lián)系遺傳特性轉(zhuǎn)基因荷斯坦奶牛的DNA上是否插入了藥用蛋白基因【解析】

試題分析：(1)培育克隆動(dòng)物，采用的特有的技術(shù)手段是核移植技術(shù)，核移植技術(shù)為無(wú)性生殖。圖示繁殖過(guò)程采用了體外受精和早期胚胎培養(yǎng)等技術(shù)，屬于有性生殖。(2)一般使用促性腺激素對(duì)供體母牛進(jìn)行超數(shù)排卵處理。(3)受精卵在體外培養(yǎng)所用的發(fā)育培養(yǎng)液的成分，除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽類(lèi)外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等物質(zhì)。(4)胚胎移植成功的原因之一是：供體胚胎（純種荷斯坦奶牛的胚胎）可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但移入受體的供體胚胎的遺傳特性在孕育過(guò)程中不受任何影響。(5)在基因工程中，常采用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因荷斯坦奶牛的DNA上是否插入了藥用蛋白基因。8、從基因文庫(kù)獲取或人工合成四種脫氧核苷酸（dNTP）和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）331引物自身不能有互補(bǔ)序列引物之間不能有互補(bǔ)序列DNA分子的大小不能因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子，大腸桿菌無(wú)法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤【解析】

根據(jù)題干信息和圖形分析，基因工程的基本步驟包括目的基因的獲取、構(gòu)建基因表達(dá)載體、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與表達(dá)；圖示目的基因?yàn)槿祟?lèi)胰島素基因（位于11號(hào)常染色體上），其通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，需要A、B兩種引物；PCR擴(kuò)增目的基因的過(guò)程包括變性、退貨、延伸?！驹斀狻浚?）獲取目的基因的方法除了PCR技術(shù)，還有從基因文庫(kù)獲取或人工合成。（2）用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（人胰島素基因）時(shí)，所需的條件有引物、模板(目的基因或人胰島素基因)、原料(4種脫氧核糖核苷酸)和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）等。（3）根據(jù)PCR過(guò)程和DNA分子半保留復(fù)制特點(diǎn)可知，前兩輪循環(huán)產(chǎn)生的四個(gè)DNA分子的兩條鏈均不等長(zhǎng)，第三輪循環(huán)產(chǎn)生的DNA分子存在等長(zhǎng)的兩條核苷酸鏈，即僅含引物之間的序列，因此，經(jīng)過(guò)三輪循環(huán)可以得到所需的目的基因；一個(gè)DNA分子經(jīng)過(guò)5輪循環(huán)，理論上至少需要26-2=62個(gè)引物，其中A引物31個(gè)。引物設(shè)計(jì)時(shí)需要注意以下幾點(diǎn)：引物自身不能有互補(bǔ)序列；引物之間不能有互補(bǔ)序列；引物長(zhǎng)度適當(dāng)；引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合；避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過(guò)多互補(bǔ)的序列。（4）SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)中分子的遷移速率主要取決于分子的大小，因此利用SDS-凝膠電泳分離不同DNA分子，遷移速度取決于DNA分子的大小。（5）題干信息顯示，圖示獲取的目的基因含有外顯子和內(nèi)含子，因此直接將含有此目的基因的表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌并不能表達(dá)出胰島素，原因是大腸桿菌無(wú)法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤。【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握基因工程的基本步驟、PCR技術(shù)等相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，弄清楚PCR技術(shù)的過(guò)程和原理，能夠利用公式計(jì)算PCR技術(shù)過(guò)程中需要的引物的數(shù)量，并能夠分析大腸桿菌不能表達(dá)出該目的基因產(chǎn)物的原因。9、將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核，移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞小于胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易顯微操作去核法梯度離心、紫外光短時(shí)間照射、化學(xué)物質(zhì)處理等10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型否“中中”和“華華”絕大部分的DNA來(lái)自于供體細(xì)胞，但其核外線粒體中還有少量的DNA是來(lái)自受體卵母細(xì)胞。另外即使遺傳基礎(chǔ)完全相同，但動(dòng)物一些行為、習(xí)性等與環(huán)境有關(guān)【解析】

動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體，用核移植方法得到的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物；哺乳動(dòng)物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，因此，動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，核移植主要用于細(xì)胞移植和異種器官移植。目前核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作去核法。還有人采用其他方法，如梯度離心、紫外光短時(shí)間照射、化學(xué)物質(zhì)處理等。這些方法是在沒(méi)有刺破透明帶或卵母細(xì)胞質(zhì)膜的情況下，去除細(xì)胞核或使卵細(xì)胞核DNA變性，從而達(dá)到去核目的?！驹斀狻浚?）核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核，移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞。根據(jù)供核細(xì)胞的種類(lèi)不同，哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，由于胚胎細(xì)胞分化程度低，全能性高，故胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度小于體細(xì)胞核移植。（2）由分析可知，目前核移植技術(shù)中普通使用的去核方法是顯微操作去核法。如果不刺破透明帶或卵母細(xì)胞質(zhì)膜的情況下，還可以用梯度離心、紫外光短時(shí)間照射、化學(xué)物質(zhì)處理等方法。（3）由于細(xì)胞傳代培養(yǎng)10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型，為了保證所提供的細(xì)胞核具有正常的二倍體核型，所以通常選用傳代10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞提供細(xì)胞核。（4）“中中”和“華華”絕大部分的DMA來(lái)自于供體細(xì)胞，但其核外線粒體中還有少量的DNA是來(lái)自受體卵母細(xì)胞。另外即使遺傳基礎(chǔ)完全相同，但動(dòng)物一些行為、習(xí)性等與環(huán)境有關(guān)，所以用體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆猴—“中中”和“華華”并不是供體動(dòng)物100%的復(fù)制?！军c(diǎn)睛】熟知核移植技術(shù)的操作流程是解答本題的關(guān)鍵！掌握核移植的原理是解答本題的另一關(guān)鍵！第2小題是學(xué)生的失分點(diǎn)，因?yàn)樵撝R(shí)點(diǎn)處于旁欄資料卡中，提醒學(xué)生關(guān)注旁欄內(nèi)容。10、胚胎成纖維細(xì)胞增殖能力更強(qiáng)，更易于培養(yǎng)細(xì)胞貼壁胰蛋白動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)（或體細(xì)胞核移植技術(shù)）、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)（或動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)）、胚胎移植技術(shù)成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核減數(shù)第二次分裂中期（MⅡ中期）物理或化學(xué)催化組蛋白的去甲基化【解析】

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程取動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物器官、組織。將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個(gè)細(xì)胞，將處理后的細(xì)胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱(chēng)為細(xì)胞貼壁。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到互相接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制。此時(shí)需要將出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。2.胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)，這是胚胎工程的最后一道工序，胚胎分割時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育?！驹斀狻浚?）由于胚胎成纖維細(xì)胞增殖能力更強(qiáng)，更易于培養(yǎng)，因此在進(jìn)行核移植時(shí)，通常選擇胚胎期的成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中常出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制的特點(diǎn)，因此剛放入培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞沉降到瓶底部后首先會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁現(xiàn)象。進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，常利用胰蛋白酶消化處理，制成細(xì)胞懸液后轉(zhuǎn)入到新的培養(yǎng)瓶中。（2）圖示過(guò)程涉及的主要技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)（或動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)）、胚胎移植技術(shù)。圖中克隆猴是成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核移入卵母細(xì)胞，獲得重組細(xì)胞，經(jīng)過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)獲得早期胚胎，然后經(jīng)過(guò)胚胎移植獲得的，因此其遺傳物質(zhì)主要來(lái)自成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核。（3）圖中步驟①體細(xì)胞核移植是克隆猴的技術(shù)難點(diǎn)之一，其具體操作為，首先需要將卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期（MⅡ中期）后進(jìn)行去核操作，而后用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，使其完成分裂和發(fā)育。（4）由于胚胎發(fā)育障礙與克隆胚胎基因組上大量組蛋白的甲基化密切相關(guān)，為了使胚胎順利發(fā)育，需要對(duì)組蛋白進(jìn)行去甲基化操作，因此可推知圖中Kdm4dmRNA翻譯產(chǎn)生的酶的作用是催化組蛋白去甲基化的。【點(diǎn)睛】熟知克隆動(dòng)物的流程以及相關(guān)的技術(shù)手段是解答本題的關(guān)鍵，能夠從題干中獲得有用的信息進(jìn)行合理的推測(cè)是解答本題的另