【完整版校完整版編卷】2020-2021學(xué)年北京市延慶區(qū)高二下學(xué)期期中生物試題

北京市延慶區(qū)20202021學(xué)年高二下學(xué)期期中生物試題學(xué)校:___________姓名：___________班級：___________考號：___________一、單選題1．果酒和果醋制作過程中，發(fā)酵條件的控制至關(guān)重要，下列相關(guān)措施正確的是（）A．葡萄汁要裝滿發(fā)酵瓶，營造無氧環(huán)境，以利于發(fā)酵B．在葡萄酒發(fā)酵過程中，每隔12h左右打開瓶蓋一次，放出C．果酒發(fā)酵過程中溫度控制在30℃，果醋發(fā)酵過程中溫度控制在20℃D．在果醋發(fā)酵過程中，要適時通過充氣口充氣，以利于醋酸菌的代謝2．禾草靈（FE）是一種現(xiàn)代農(nóng)業(yè)常用除草劑，大量使用后造成的環(huán)境污染日益嚴(yán)重，為獲得能高效降解FE的菌株，科學(xué)家通過實驗獲得W1菌株并利用紫外分光光度計檢測其對FE的降解效果（FE特征吸收峰在239nm處），以下說法不正確的是（）A．應(yīng)從大量使用除草劑的土壤中獲取菌株B．將土壤稀釋液滅菌后接種到選擇性培養(yǎng)基上C．應(yīng)使用以FE作為唯一碳源的培養(yǎng)基進行篩選D．據(jù)吸收光譜可知，W1菌株對FE有明顯降解能力3．微生物培養(yǎng)過程中，需通過選擇培養(yǎng)或鑒別培養(yǎng)來篩選目標(biāo)菌株。下列相關(guān)敘述不正確的是A．能夠在選擇培養(yǎng)基上生長出來的菌落一定是目標(biāo)菌株B．培養(yǎng)基中加入抗生素能夠篩選出具有相應(yīng)抗性的菌株C．尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘?，使酚紅指示劑變紅D．纖維素分解菌能夠分解纖維素，菌落周圍出現(xiàn)透明圈4．下圖為用取自基因型為AaBb的胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培育出胡蘿卜小苗的過程，下列敘述中不正確的是（）A．a(chǎn)→b過程是通過細(xì)胞有絲分裂完成的B．b→c→d過程發(fā)生了細(xì)胞分化C．a(chǎn)→b過程中使用的培養(yǎng)基中應(yīng)含有機碳源和氮源D．雜合植株經(jīng)上述過程獲得的幼苗會出現(xiàn)性狀分離5．下圖表示用草木樨狀黃芪（2n=32）和木本霸王（2n=22）培育抗鹽新品種過程，有關(guān)敘述正確的是A．①過程需在低滲溶液中用相應(yīng)的酶處理B．原生質(zhì)體A和原生質(zhì)體B的細(xì)胞器種類完全相同C．最終培養(yǎng)出的雜種植物應(yīng)具有雙親所有的性狀D．經(jīng)過④過程所得的愈傷組織細(xì)胞含有四個染色體組6．?dāng)M利用番茄表達人類凝血因子Ⅸ，操作步驟排序正確的是（）①制備工程農(nóng)桿菌②構(gòu)建植物表達載體③獲取人類凝血因子Ⅸ基因④番茄植株中凝血因子Ⅸ基因的檢測⑤用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化番茄植株并篩選⑥提取凝血因子Ⅸ并檢測活性A．③①②⑤⑥④ B．⑥③①②⑤④C．④③②①⑤⑥ D．③②①⑤④⑥7．某實驗室做了下圖所示的實驗研究。下列相關(guān)敘述中正確的是（）A．與纖維母細(xì)胞相比，過程①形成的誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較低B．利用該單克隆抗體與H1N1病毒外殼蛋白特異性結(jié)合的方法可以診斷該病毒感染體C．每個Y細(xì)胞只產(chǎn)生一種抗體，故過程④不需進行篩選D．過程②是誘導(dǎo)干細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程8．關(guān)于“克隆羊”與“試管羊”的敘述，錯誤的是（）A．克隆羊是無性生殖的產(chǎn)物，試管羊是有性生殖的產(chǎn)物B．培育克隆羊需要進行核移植，培育試管羊需要進行體外受精C．培育克隆羊是細(xì)胞水平的技術(shù)，培育試管羊是DNA分子水平的技術(shù)D．克隆羊的染色體來自提供細(xì)胞核的親本，試管羊的染色體來自雙親9．細(xì)胞工程中，選擇合適的生物材料是成功的關(guān)鍵。下列敘述不正確的是（）A．選擇高度分化的動物體細(xì)胞進行培養(yǎng)有利于獲得大量的細(xì)胞B．選擇去核的卵母細(xì)胞作為核受體進行核移植可提高克隆動物的成功率C．選擇植物的愈傷組織進行誘變處理可獲得有用的突變體D．選擇一定大小的植物莖尖進行組織培養(yǎng)可獲得脫毒苗10．利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑，用于降解某種農(nóng)藥的殘留，基本流程如圖。下列敘述正確的是（）A．過程①的反應(yīng)體系中需要加入逆轉(zhuǎn)錄酶和核糖核苷酸B．過程②需使用限制酶和DNA聚合酶，是基因工程的核心步驟C．過程③需要使用NaCl溶液制備感受態(tài)的大腸桿菌細(xì)胞D．過程④可利用DNA分子雜交技術(shù)鑒定CarE基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞11．科學(xué)家利用深海魚美洲擬鰈抗凍蛋白基因成功培育出了耐寒的番茄新品種（1~4號），并在低溫條件下進行了致死溫度的測定，結(jié)果如下。有關(guān)敘述不正確的是（）對照組新品種1號2號3號4號致死溫度（℃）5℃6℃6．5℃7℃7℃A．通常采用顯微注射法將抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞B．利用組織培養(yǎng)技術(shù)將轉(zhuǎn)基因番茄細(xì)胞培育成植株C．應(yīng)使用未轉(zhuǎn)入抗凍蛋白基因的番茄作為對照組D．表中數(shù)據(jù)表明番茄新品種的抗寒能力有所提高12．關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)的應(yīng)用敘述，不正確的是（）A．植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因植物的培育B．動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以克隆出動物個體C．單克隆抗體技術(shù)可用于制備“生物導(dǎo)彈”D．蛋白質(zhì)工程可以改造自然界現(xiàn)有的蛋白質(zhì)13．胚胎干細(xì)胞的發(fā)育和自我更新受多個基因調(diào)控（如下圖）。下列有關(guān)胚胎干細(xì)胞的敘述錯誤的是（）A．可分化為成年動物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞B．將干細(xì)胞用于疾病的臨床治療沒有任何風(fēng)險C．Nanog基因突變可能使胚胎干細(xì)胞自我更新受阻D．抑制Oct3/4表達會促進胚胎干細(xì)胞向滋養(yǎng)層分化14．在現(xiàn)代生物科技的應(yīng)用中不需要進行檢測與篩選的是（）A．利用雜交瘤細(xì)胞制備單克隆抗體B．利用基因工程培育具有抗蟲特性的新植株C．利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)工廠化繁育蘭花D．利用胚胎工程培育具有優(yōu)良性狀的試管動物15．關(guān)于生物技術(shù)的安全性和倫理問題，下列有關(guān)敘述不正確的是（）A．雖然生殖性克隆人存在倫理問題，但克隆技術(shù)已經(jīng)成熟B．載體的標(biāo)記基因（如抗生素抗性基因）可能指導(dǎo)合成有利于抗性進化的產(chǎn)物C．目的基因（如殺蟲基因）本身編碼的產(chǎn)物可能會對人體產(chǎn)生毒性D．目的基因通過花粉的散布轉(zhuǎn)移到其他植物體內(nèi)，從而可能打破生態(tài)平衡二、綜合題16．酸奶是牛奶經(jīng)過乳酸菌（主要是保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌）發(fā)酵制成的。乳酸菌可將牛奶中的乳糖轉(zhuǎn)化為乳酸，從而減輕某些人群的乳糖不耐受癥狀。請回答問題：（1）為鑒別市售酸奶中的菌種，應(yīng)該采用平板劃線法或_______法，在_______培養(yǎng)基上進行接種，觀察所獲單菌落的特征。還要對菌落中的菌種進行涂片，并用_______進行進一步的觀察和鑒定。（2）實驗前需要進行滅菌的是_______。（3）某同學(xué)在配制平板時加入CaCO3，從而成功篩選出高效產(chǎn)生乳酸的菌株，其篩選依據(jù)的原理是_________________。（4）抗生素在現(xiàn)代商牧業(yè)中的廣泛應(yīng)用，不可避免地造成牛奶中抗生素殘留。若長期飲用含有抗生素的牛奶，會對人體健康造成危害。利用嗜熱鏈球菌對抗生素的高敏感性，該生進行了如下實驗：將滅菌的濾紙圓片（直徑8mm），分別浸潤在不同處理的牛奶中一段時間后，放置在涂布了嗜熱鏈球菌的平板上（如左圖），在37℃下培養(yǎng)24h，測量結(jié)果如下表：組別牛奶處理方法抑菌圈寬度（mm）1含抗生素消毒鮮牛奶2不含抗生素消毒鮮牛奶03含抗生素鮮牛奶4不含抗生素鮮牛奶05待測奶樣注：消毒方法為80℃水浴加熱5min，然后冷卻至37℃通過3、4組實驗可得出的結(jié)論為____________________；通過1、3組實驗可得出的結(jié)論為：__________________；第5組的實驗結(jié)果表明，此待測奶樣是否適合用于制作酸奶？______________。17．草莓常用匍匐莖進行營養(yǎng)繁殖，植株若感染病毒易傳播給后代，病毒在作物體內(nèi)積累，會導(dǎo)致產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差。科研人員通過一系列的方法、步驟，建立了草莓脫毒快速繁殖體系。（1）外植體經(jīng)過_________________等過程能夠發(fā)育成完整植株，體現(xiàn)了植物細(xì)胞有______________。若培育脫毒組培苗，通常選取植株分生組織（如莖尖或根尖）作為外植體的主要原因是_________________________________。（2）在超凈工作臺上，先后用75%酒精和0．1%的氯化汞對草莓匍匐莖尖進行_________，每次處理后均需用_________沖洗3至5次，然后接種到經(jīng)_____________處理的培養(yǎng)基上。（3）圖是兩種植物激素不同濃度與形成芽、根、愈傷組織的關(guān)系，其中植物激素Y屬于_________________（生長素類、細(xì)胞分裂素類）激素。不同植物激素濃度與芽、根、愈傷組織的關(guān)系（4）科研人員進一步用不同濃度和比例的植物激素處理外植體，一段時間后觀察結(jié)果如下表（6BA是細(xì)胞分裂素類激素，IBA是生長素類激素）：處理組6BA（mg/L）IBA（mg/L）接種數(shù)（個）萌芽率（%）增殖系數(shù)10．501233．35．420．50．11283．36．630．50．21258．34．341．001250．03．951．00．11241．03．861．o0．21233．33．0萌芽率（%）=草莓外植體萌芽數(shù)/草莓外植體總接種數(shù)×100%增殖系數(shù)=草莓組培苗增殖腋芽數(shù)/草莓組培苗總接種數(shù)從表中可以看出，處理組___________草莓的萌芽率和增殖系數(shù)顯著高于其他組，該組激素配比可用于草莓的快速繁殖。若將組培苗移植到大田中種植，還需要誘導(dǎo)_________。結(jié)合圖1分析，此時6BA與IBA比值應(yīng)_________（大于1、等于1、小于1）。18．牛支原體是嚴(yán)重危害牛養(yǎng)殖業(yè)的一種病原菌，它能引起肺炎、關(guān)節(jié)炎等多種疾病。VspX蛋白是牛支原體表面的一種脂蛋白，在牛支原體感染宿主細(xì)胞時起黏附作用?？蒲腥藛T制備抗VspX單克隆抗體，并進行相關(guān)研究。（1）將等量的純化VspX蛋白作為_________分別注射到5只小鼠體內(nèi)，經(jīng)過二次免疫后測定小鼠抗VspX抗體的免疫效果，取其中免疫效果最好的1號小鼠用于后面的融合實驗。（2）在融合前三天，對1號小鼠加強免疫一次，目的是_________________。然后取小鼠的脾臟細(xì)胞用_________試劑誘導(dǎo)與骨髓瘤細(xì)胞融合，用選擇培養(yǎng)基進行篩選得到_____________。（3）一段時間后，將（2）所得細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，進行抗體陽性檢測，檢測原理如下圖。①在檢測時需要將VspX蛋白固定于固相載體表面制成固相抗原，并加入多孔板培養(yǎng)槽中的_________（細(xì)胞、上清液），即待測樣本。②加入酶標(biāo)抗體后一段時間，需要用洗滌劑將未與________結(jié)合的酶標(biāo)抗體洗去。③加入相應(yīng)酶促反應(yīng)底物顯色后，顏色的深淺可代表_______________________。（4）將上述細(xì)胞經(jīng)___________酶處理，制成細(xì)胞懸液，除添加一般營養(yǎng)物質(zhì)外，還需加入__________，并置于________培養(yǎng)箱中進行擴大培養(yǎng)，提取抗VspX單克隆抗體與不同抗原進行雜交檢測，結(jié)果如下圖（5）依據(jù)（4）的實驗結(jié)果表明抗VspX單克隆抗體不能與3、4結(jié)合，具有很強的________，可用于后續(xù)關(guān)于牛支原體所引發(fā)相關(guān)疾病的____________________等方面的研究。19．蘇云金芽孢桿菌產(chǎn)生的Bt毒蛋白具有良好的殺蟲效果，且具有高效、安全的優(yōu)點，Bt基因也因此成為應(yīng)用最為廣泛的殺蟲基因。Bt基因位于蘇云金芽孢桿菌的質(zhì)粒A上，為了了解Bt基因的序列信息首先要得到完整的Bt基因，科學(xué)家們進行了如下實驗：（1）首先用限制酶HindIII處理質(zhì)粒A，得到多個DNA片段，分別與質(zhì)粒B連接，獲得重組DNA分子，并將這些重組DNA分子導(dǎo)入經(jīng)_____________處理的大腸桿菌中，由此構(gòu)建了蘇云金芽孢桿菌的部分基因組文庫。（2）研究人員利用抗Bt毒蛋白的抗體，進行_____________，并通過電泳檢測上述文庫中不同大腸桿菌菌株的Bt毒蛋白表達情況，結(jié)果如圖1所示。根據(jù)電泳結(jié)果推測菌株3中僅插入了Bt基因的一部分序列，并非完整基因，研究人員作出這一推測的依據(jù)是_____________。對菌株3中插入的DNA片段序列進行測序（計為Bt1序列），并根據(jù)序列制成了DNA探針X。（3）為了獲得完整的Bt基因，研究人員又使用限制酶PstI切割質(zhì)粒A，得到多個DNA片段。利用探針X通過_____________方法可確定其中含有Bt基因序列的DNA片段，進行測序（計為Bt2序列）。如圖2，為了將Bt1和Bt2兩段DNA分子連接起來，研究人員用限制酶_____________和DNA連接酶處理兩段序列，獲得的重組DNA分子計為Bt3。（4）為了進一步驗證Bt3中包含完整的Bt基因，請寫出簡要的實驗步驟和檢測指標(biāo)。_____________________________________________________________________20．新型冠狀病毒是一種單鏈RNA病毒，新型冠狀病毒感染的常規(guī)檢測方法是通過實時熒光PCR鑒定。（1）首先，從樣本中提取病毒RNA，經(jīng)________酶作用生成cDNA。然后以cDNA為模板進行實時熒光PCR擴增，測定樣品中病毒核酸量。（2）通過實時熒光PCR擴增目的基因，需額外添加熒光標(biāo)記探針（一小段單鏈DNA，可與目的基因中部序列特異性結(jié)合）。當(dāng)探針完整時，不產(chǎn)生熒光。在PCR過程中，與目的基因結(jié)合的探針被TaqDNA聚合酶水解，R與Q分離后，R發(fā)出的熒光可被檢測到（如圖1）。①當(dāng)樣本中有目的基因時，引物和探針與目的基因退火時，通過________原則而特異性結(jié)合。②在PCR循環(huán)的延伸階段，TaqDNA聚合酶催化子鏈的合成并水解探針。檢測到的熒光強度與反應(yīng)體系中DNA分子數(shù)呈_________（正相關(guān)或反相關(guān)反）關(guān)系。（3）通過實時熒光PCR檢測新型冠狀病毒感染時，檢測到的熒光強度變化如圖2所示。①與指數(shù)增長期相比，線性增長期目的基因數(shù)量的增長率下降，原因有_________。②Ct值的含義：在PCR擴增過程中，每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號達到設(shè)定的熒光閾值時所經(jīng)歷的擴增循環(huán)數(shù)。因此，當(dāng)樣本中初始模板越多時，Ct值就_________。③某新型冠狀病毒核酸檢測說明書標(biāo)明，Ct≤37判定為陽性，Ct>40或無Ct值判定為陰性。圖2所示新型冠狀病毒核酸檢測結(jié)果應(yīng)判定為_________。（4）陰性結(jié)果也不能排除新型冠狀病毒感染?？赡墚a(chǎn)生假陰性的因素有________。a．取樣太早，樣本中病毒量少，達不到實時熒光PCR檢測閾值b．樣本被污染，RNA酶將病毒RNA降解c．病毒發(fā)生變異21．閱讀下面的材料，回答問題胰島素的應(yīng)用是糖尿病治療歷史上的一個里程碑。胰島素自1922年用于臨床以來，就成為治療糖尿病的特效藥物。目前全世界糖尿病患者已超過四億，為臨床提供充足、質(zhì)量可靠的胰島素制劑是現(xiàn)代生物制藥領(lǐng)域的一項重要工程。人胰島素由胰島β細(xì)胞合成，核糖體上最初形成的是前胰島素原單鏈多肽，進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔后，信號肽被切除，形成胰島素原。高爾基體內(nèi)的特異性肽酶將胰島素原的C肽區(qū)域切除，A鏈和B鏈通過二硫鍵形成共價交聯(lián)的活性胰島素（如圖）。最初用于臨床的胰島素幾乎都是從豬、牛胰臟中提取的。豬、牛胰島素與人胰島素生理功能相似，但氨基酸序列有微小差異。接受動物胰島素治療的患者有5％～10％出現(xiàn)不同程度的過敏反應(yīng)，抗動物胰島素抗體還可能對患者的胰島β細(xì)胞功能產(chǎn)生負(fù)面影響。隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展，重組人胰島素逐漸取代動物胰島素。早期的重組人胰島素生產(chǎn)，采用A、B鏈分別表達法。后來該方法被胰島素原表達法取代，即由大腸桿菌合成胰島素原，然后經(jīng)細(xì)胞外酶切獲得胰島素。1987年用酵母菌生產(chǎn)重組人胰島素的方法出現(xiàn)。重組人胰島素的結(jié)構(gòu)與人體自身分泌的胰島素結(jié)構(gòu)完全相同，但無法完全模擬生理胰島素曲線，容易導(dǎo)致血糖波動，甚至導(dǎo)致低血糖發(fā)生。上世紀(jì)90年代，科學(xué)家通過改變胰島素的氨基酸序列和結(jié)構(gòu)，研制出能更好模擬生理胰島素分泌特點的胰島素類似物，包括速效胰島素和長效胰島素類似物。例如，將人胰島素B鏈第28位的脯氨酸替換為天門冬氨酸，可有效抑制胰島素單體的聚合，皮下注射這種速效胰島素類似物后，起效快（1020分鐘起效）、血藥濃度峰值高、藥效消失快，已經(jīng)在臨床上廣泛應(yīng)用。（1）用豬胰島素進行治療，易誘導(dǎo)人體產(chǎn)生抗豬胰島素抗體，原因是____________。（2）人胰島素基因有2個內(nèi)含子。利用大腸桿菌通過胰島素原法生產(chǎn)重組人胰島素，獲取目的基因時，不宜采用的方法是________a．直接從細(xì)胞內(nèi)總DNA中分離目的基因b．用化學(xué)方法直接人工合成目的基因c．以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成目的基因d．利用PCR擴增人胰島素原基因的編碼序列（3）與大腸桿菌相比，利用酵母菌生產(chǎn)胰島素的優(yōu)勢有_____________________。（4）重組人胰島素工程菌構(gòu)建完成后，還需要通過________工程技術(shù)進行胰島素的生產(chǎn)。（5）正常人胰島素的生理性分泌，可分為基礎(chǔ)胰島素分泌（24小時持續(xù)脈沖式分泌微量胰島素，維持空腹?fàn)顟B(tài)下血糖穩(wěn)定）和進餐后的胰島素分泌。能更好地模擬餐時生理胰島素曲線的是________（選填“速效”或“長效”）胰島素類似物。參考答案1．D【分析】1.果酒制作菌種是酵母菌，代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型真菌，屬于真核細(xì)胞，條件是18～25℃、前期需氧，后期不需氧。2.果醋制作菌種是醋酸菌，屬于原核細(xì)胞，適宜溫度為30～35℃，需要持續(xù)通入氧氣?！驹斀狻緼、葡萄汁裝瓶時需要留1/3的空間，以利于酵母菌前期有氧呼吸過程，通過出芽生殖大量，以利于后期發(fā)酵，A錯誤；B、在葡萄酒發(fā)酵過程中，每隔12h左右將瓶蓋擰松一次，避免雜菌污染，放出CO2，而不是打開，B錯誤；C、果酒發(fā)酵過程中溫度控制在18~25℃，果醋發(fā)酵過程中溫度控制在30℃左右，C錯誤；D、在果醋發(fā)酵過程中，要適時通過充氣口充氣，以利于醋酸菌的代謝，因為醋酸菌是需要性微生物，D正確。故選D。【點睛】2．B【分析】選擇培養(yǎng)基：允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基的制作（1）利用培養(yǎng)基的特定化學(xué)成分分離特定微生物。如以石油是唯一碳源，篩選出能利用石油的微生物生長。（2）通過改變培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分達到分離微生物的目的。如培養(yǎng)基中缺乏氮源時，可篩選出固氮微生物。（3）通過某些特殊環(huán)境分離微生物。如在高溫環(huán)境中可分離得到耐高溫的微生物。（4）依據(jù)某些微生物對某種物質(zhì)的抗性，在培養(yǎng)基中加入此種物質(zhì)，以抑制對該物質(zhì)不具抗性的微生物生長，而不影響對該物質(zhì)具有抗性的微生物生長。如培養(yǎng)基中加入青霉素，可篩選出酵母菌和霉菌。【詳解】A、由于只有被除草劑嚴(yán)重污染過的土壤才可能含有高效降解該除草劑的分解菌，所以為了獲取能高效降解該除草劑的菌株，應(yīng)從大量使用除草劑的土壤采集土壤樣品，A正確；BC、為了淘汰不能分解FE的微生物，而僅保留能分解FE的菌種，則在配制選擇培養(yǎng)基時應(yīng)以FE作為唯一碳源，應(yīng)將土壤稀釋液接種到以FE為唯一碳源的選擇性培養(yǎng)基上進行篩選，B錯誤，C正確；D、據(jù)吸收光譜可知，經(jīng)W1菌株降解后在239nm處的特征吸收峰明顯減弱，說明W1菌株對FE有明顯降解能力，D正確。故選B?！军c睛】理解目的菌株的篩選、接種方法和培養(yǎng)基的配制等相關(guān)知識是解答本題的關(guān)鍵。3．A【分析】尿素分解菌能夠產(chǎn)生脲酶，在脲酶的作用下能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘?，使pH升高與酚紅指示劑反應(yīng)呈紅色；剛果紅染液可以與纖維素反.應(yīng)呈紅色，纖維素分解菌能夠?qū)⒗w維素分解而出現(xiàn)無色的透明圈?！驹斀狻緼.能夠在選擇培養(yǎng)基上生長出來的菌落不一定是目標(biāo)菌株，有可能是能夠利用分解纖維素的菌株產(chǎn)生的葡萄糖，這樣的假陽性目的菌株，A錯誤；B、在培養(yǎng)基中加入抗生素能夠篩選出具有相應(yīng)抗性的菌株，B正確；C、尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘?，使培養(yǎng)基呈堿性,從而通使酚紅指示劑變紅，C正確；D、纖維素分解菌能夠分解纖維素，在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，D正確。故選A。4．D【分析】離體的胡蘿卜韌皮部細(xì)胞，在培養(yǎng)一段時間后，脫分化，通過細(xì)胞分裂，形成愈傷組織；脫分化的愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng)，又可重新分化成根或芽等器官；再分化形成的試管苗，移栽到地里，可以發(fā)育成完整的植物體，說明高度分化的植物細(xì)胞具有全能性。【詳解】A、a→b過程是脫分化過程形成愈傷組織，該過程的細(xì)胞分裂方式是有絲分裂，A正確；B、b→c→d過程為再分化過程，形成根或芽等器官，發(fā)生了細(xì)胞分化，B正確；C、a→b過程植物不能進行光合作用，所需的營養(yǎng)來自培養(yǎng)基，培養(yǎng)基應(yīng)含有機碳源和氮源，C正確；D、圖中植物組織培養(yǎng)過程的細(xì)胞分裂方式是有絲分裂，雜合植株經(jīng)上述過程獲得的幼苗的基因型與親本相同，仍然為雜合子，不會出現(xiàn)性狀分離，D錯誤。故選D。【點睛】5．D【分析】分析圖解：圖中①過程是用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞壁，②過程是原生質(zhì)體的融合過程，③過程是融合細(xì)胞再生出細(xì)胞壁，④過程是植物組織培養(yǎng)的脫分化形成愈傷組織?！驹斀狻緼、①過程去除植物細(xì)胞壁后，原生質(zhì)體失去細(xì)胞壁的保護，所以需要在等滲溶液中進行，以防止原生質(zhì)體吸水漲破或失去活性，A錯誤；B、葉肉細(xì)胞內(nèi)有葉綠體，而胚軸細(xì)胞沒有，原生質(zhì)體A和原生質(zhì)體B的細(xì)胞器種類不完全相同，B錯誤；C、理論上，融合后得到的雜種細(xì)胞含兩種植物的遺傳物質(zhì)，但因為基因之間的相互作用，導(dǎo)致部分基因并不能表達，所以一般都不能表現(xiàn)出雙親的所有性狀，C錯誤；D、該題中的兩個植物細(xì)胞，各有兩個染色體組，并且兩個植物細(xì)胞體內(nèi)的染色體組不相同，故兩細(xì)胞融合形成的細(xì)胞內(nèi)含四個染色體組，D正確。故選D?！军c睛】6．D【分析】利用番茄表達人凝血因子屬于基因工程的技術(shù)范疇?！驹斀狻炕蚬こ痰幕静襟E：獲取目的基因，構(gòu)架表達載體，受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，目的基因的表達及檢測。

對植物細(xì)胞進行轉(zhuǎn)化通常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。

綜合可知正確的排序應(yīng)為：③②①⑤④⑥，故選D。7．B【分析】據(jù)圖分析，過程①類似于植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化，過程②表示細(xì)胞分裂和分化，過程③表示動物細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，過程④是動物細(xì)胞培養(yǎng)?！驹斀狻緼、過程①是通過誘導(dǎo)基因作用使纖維母細(xì)胞脫分化為干細(xì)胞（保留分裂和分化能力），與纖維母細(xì)胞（體細(xì)胞）相比，干細(xì)胞的全能性較高，A錯誤；B、單克隆抗體作為診斷試劑，與該病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合，具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點，因此利用該單克隆抗體與H1N1病毒外殼蛋白特異性結(jié)合的方法可以診斷該病毒感染體，B正確；C、雖然每個Y細(xì)胞只產(chǎn)生一種抗體，但不一定是所需的抗體，因此④需要用抗原抗體雜交的方法篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，C錯誤；D、過程②是干細(xì)胞再分化為其他組織器官細(xì)胞，細(xì)胞分化過程中遺傳物質(zhì)沒有改變，D錯誤。故選B。8．C【分析】克隆羊是經(jīng)過動物核移植技術(shù)得到的，試管羊是經(jīng)過體外受精，再將胚胎移植后發(fā)育得到的。【詳解】A、克隆羊沒有精子核卵細(xì)胞結(jié)合過程，直接通過核移植技術(shù)得到，是無性生殖的產(chǎn)物，試管羊通過體外精子和卵細(xì)胞結(jié)合形成受精卵發(fā)育而來，是有性生殖的產(chǎn)物，A正確；B、培育克隆羊需要進行核移植，移入去核的卵母細(xì)胞發(fā)育而來，培育試管羊需要進行體外受精，進行胚胎移植發(fā)育而來，B正確；C、培育克隆羊和培育試管羊都是在細(xì)胞水平上操作，都屬于細(xì)胞水平的技術(shù)，C錯誤；D、克隆羊經(jīng)過完整的細(xì)胞核移植，染色體來自提供細(xì)胞核的親本，試管羊經(jīng)過體外受精，染色體來自雙親，D正確。故選C。9．C【分析】1、動物細(xì)胞核移植是指將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為克隆個體。2、選用去核卵（母）細(xì)胞的原因：卵（母）細(xì)胞大，容易操作；卵（母）細(xì)胞質(zhì)多，營養(yǎng)豐富；含有促使細(xì)胞全能性表達的物質(zhì)。3、植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斀狻緼、高度分化的動物體細(xì)胞不能繼續(xù)分裂，無法獲得大量的細(xì)胞，A錯誤；B、選擇去核的卵細(xì)胞能夠激發(fā)體細(xì)胞核全能性，而且含有細(xì)胞發(fā)育需要的早期營養(yǎng)物質(zhì)，因此選擇去核的卵母細(xì)胞作為核受體進行核移植可提高克隆動物的成功率，B正確；C、選擇植物的愈傷組織還沒有分化，進行誘變處理，再進行人工選擇，可獲得優(yōu)質(zhì)的突變體，C正確；D、莖尖等分生區(qū)組織幾乎不含病毒，因此選擇一定大小的植物莖尖進行組織培養(yǎng)可獲得脫毒苗，D正確。故選A【點睛】10．D【分析】分析圖解：圖中過程①表示利用mRNA通過反轉(zhuǎn)錄法合成相應(yīng)的DNA；過程②表示構(gòu)建基因表達載體（基因工程核心步驟）；過程③表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；過程④表示通過篩選獲得工程菌?！驹斀狻緼、過程①表示通過反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因，該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶和脫氧核糖核苷酸，A錯誤；B、過程②需使用限制酶和DNA連接酶構(gòu)建基因表達載體，是基因工程的核心步驟，B錯誤；C、過程③常用Ca2+處理大腸桿菌使其成為易于吸收DNA的感受態(tài)細(xì)胞，C錯誤；D、過程④可利用DNA分子雜交技術(shù)鑒定CarE基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞，D正確。故選D。11．A【分析】表格分析：與對照組相比，轉(zhuǎn)基因新品種番茄的耐寒能力都提高了，其中3號和4號最抗凍。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法。【詳解】A、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，A錯誤；B、植物細(xì)胞具有全能性，可利用組織培養(yǎng)技術(shù)將轉(zhuǎn)基因番茄細(xì)胞培育成植株，B正確；C、應(yīng)使用未轉(zhuǎn)入抗凍蛋白基因的番茄作為對照組進行比較，C正確；D、表中數(shù)據(jù)表明，與對照組相比，轉(zhuǎn)基因番茄新品種的抗寒能力都提高了，D正確。故選A。12．B【詳解】試題分析：植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因植物的培育，A正確；由于動物細(xì)胞的全能性難以表達，動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)不能克隆出動物個體，B錯誤；將抗癌細(xì)胞的單克隆抗體跟放射性同位素、化學(xué)藥物相結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”，可以將藥物定向帶到癌細(xì)胞部位殺死癌細(xì)胞，C正確；蛋白質(zhì)工程可以改造自然界現(xiàn)有的蛋白質(zhì)，D正確?？键c：本題考查細(xì)胞工程和蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)的能力。13．B【分析】如圖Nanog基因促進胚胎干細(xì)胞的自我更新，Stat3基因抑制胚胎干細(xì)胞自我更新，兩基因均抑制其發(fā)育為原始內(nèi)胚層的過程；Oct3/4基因抑制胚胎干細(xì)胞發(fā)育為滋養(yǎng)層?！驹斀狻緼、胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育全能性，能發(fā)育為成年動物體內(nèi)任何一種類型的細(xì)胞，A正確；

B、干細(xì)胞用于疾病的臨床治療可能會引起免疫排斥，干細(xì)胞腫瘤化等風(fēng)險，B錯誤。

C、Nanog基因促進胚胎干細(xì)胞自我更新，突變可能使細(xì)胞自我更新受阻，C正確；

D、Oct3/4基因抑制胚胎干細(xì)胞發(fā)育為滋養(yǎng)層，抑制該基因表達會促進胚胎干細(xì)胞向滋養(yǎng)層分化，D正確。

故選B。14．C【分析】現(xiàn)代生物技術(shù)的應(yīng)用中，有許多技術(shù)是需要篩選和檢測的，如制備單克隆抗體時，需要用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，還需要進行抗體陽性檢測得到能產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞；植物體細(xì)胞雜交過程中，需要篩選出雜種細(xì)胞進行組織培養(yǎng)；轉(zhuǎn)基因技術(shù)中，需要篩選重組子和檢測目的基因是否導(dǎo)入和表達?！驹斀狻緼、利用雜交瘤細(xì)胞制備單克隆抗體，需進行抗體陽性檢測，篩選出出能產(chǎn)生特異抗體的雜交瘤細(xì)胞，A錯誤；B、將抗蟲基因?qū)胫参锛?xì)胞時，需要檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞和目的基因是否表達，B錯誤；C、利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)工廠化繁育蘭花因通過無性繁殖保持親本的優(yōu)良性狀，故不需檢測或篩選，C正確；D、利用胚胎工程培育具有優(yōu)良性狀的試管動物需要檢測是否出現(xiàn)優(yōu)良性狀，D錯誤。故選C?！军c睛】15．A【分析】1、生殖性克隆就是以產(chǎn)生新個體為目的克隆。即用生殖技術(shù)制造完整的克隆人，目的是產(chǎn)生一個獨立生存的個體。于此相對的是研究性克隆或醫(yī)學(xué)性克隆，指的是產(chǎn)生研究所用的克隆細(xì)胞。不產(chǎn)生可獨立生存的個體。2、克隆技術(shù)的倫理問題：（1）克隆人是對人權(quán)和人的尊嚴(yán)的挑戰(zhàn)。（2）克隆人違反生物進化的自然發(fā)展規(guī)律。（3）克隆人將擾亂社會家庭的正常倫理定位。（4）克隆人的安全性在倫理上也難以確認(rèn)。【詳解】A、生殖性克隆人存在倫理問題，且克隆技術(shù)也不成熟，A錯誤；B、運載標(biāo)記基因（如抗生素基因）多為抗生素基因，可能指導(dǎo)合成有利于抗性進化的產(chǎn)物，如抗除草劑的雜草，需要擔(dān)心，B正確；C、目的基因（如殺蟲基因）本身編碼的產(chǎn)物可能會對人體產(chǎn)生毒性，需要擔(dān)心，C正確；D、目的基因通過花粉的散布轉(zhuǎn)移到其他植物體內(nèi)，造成基因污染，從而可能打破生態(tài)平衡，D正確。故選A。【點睛】16．稀釋涂布平板固體顯微鏡ab乳酸會與CaCO3反應(yīng)形成透明圈，透明圈直徑越大，產(chǎn)生乳酸能力越強?？股啬軌驓⑺朗葻徭溓蚓纬梢志?0℃水浴加熱5min的消毒方法不會使牛奶中的抗生素減少或消除不適合【分析】微生物常見的接種方法：①平板劃線法：將已熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，然后接種，劃線，在恒溫箱中培養(yǎng)。在最初劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延續(xù)，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，取適量均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。無菌技術(shù)：①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒；②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌；③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行；④實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸?！驹斀狻浚?）菌落特征是區(qū)別不同微生物的重要依據(jù)。為鑒別市售酸奶中的菌種，應(yīng)該采用平板劃線法或稀釋涂布平板法，在固體培養(yǎng)基上進行接種，觀察所獲單菌落的特征。還要對菌落中的菌種進行涂片，并用顯微鏡進行進一步的觀察和鑒定。（2）消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）；滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)所有的微生物，包括芽孢和孢子。培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿使用前需要滅菌。恒溫培養(yǎng)箱和實驗者的雙手需要消毒。酸奶中含有菌種，不能進行消毒和滅菌，故選ab。（3）某同學(xué)在配制平板時加入CaCO3，從而成功篩選出高效產(chǎn)生乳酸的菌株，其篩選依據(jù)的原理是乳酸會與CaCO3反應(yīng)形成透明圈，透明圈直徑越大，菌株產(chǎn)生乳酸的能力越強。（4）由表格信息可知，3、4組實驗的自變量是有無抗生素，實驗結(jié)果顯示含抗生素鮮牛奶有抑菌圈，不含抗生素鮮牛奶沒有抑菌圈，說明抗生素能夠殺死嗜熱鏈球菌，形成抑菌圈。1、3組實驗的自變量是鮮牛奶是否消毒，實驗結(jié)果顯示不管鮮牛奶是否消毒，其抑菌圈都存在，且大小無明顯差異，說明80℃水浴加熱5min的消毒方法不會使牛奶中的抗生素減少或消除。第5組待測奶樣抑菌圈寬度為5.8mm，說明該奶樣含有抗生素，故不適合用于制作酸奶?！军c睛】本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)相關(guān)知識，要求考生能夠掌握微生物接種、分離與鑒定的方法，明確消毒和滅菌的區(qū)別以及使用范圍等，再結(jié)合表格信息明確實驗變量，并能對比得出正確的實驗結(jié)論。17．（1）脫分化、再分化全能性分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無病毒（2）消毒無菌水（高壓蒸汽）滅菌（3）生長素類（4）2生根小于1【分析】分析題圖：在植物組織培養(yǎng)時，通過調(diào)節(jié)生長素和細(xì)胞分裂素的比值能影響愈傷組織分化出根或芽。生長素用量比細(xì)胞分裂素用量，比值高時，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值適中時，促進愈傷組織的生長。所以圖中激素Y是生長素，激素X是細(xì)胞分裂素。（1）外植體經(jīng)過脫分化、再分化等過程能夠發(fā)育成完整植株，體現(xiàn)了植物細(xì)胞有全能性。若培育脫毒組培苗，由于分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無病毒，因此通常選取植株分生組織（如莖尖或根尖）作為外植體。（2）在超凈工作臺上，先后用75%酒精和0.1%的氯化汞對草莓匍匐莖尖進行消毒，每次處理后均需用無菌水沖洗3至5次，然后接種到經(jīng)滅菌的培養(yǎng)基上。（3）據(jù)題圖分析可知，生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值高時（大于1），有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時（小于1），有利于芽的分化、抑制根的形成；比值適中時（等于1），促進愈傷組織的生長。由圖可知，當(dāng)植物激素Y用量越高時，有利于根的分化，而當(dāng)植物激素X用量越高時，有利于芽的分化，所以圖中激素Y是生長素，激素X是細(xì)胞分裂素。（4）從表中可以看出，處理組2草莓的萌芽率和增殖系數(shù)顯著高于其他組，該組激素配比可用于草莓的快速繁殖。若將組培苗移植到大田中種植，還需要誘導(dǎo)生根。結(jié)合圖1分析，生長素用量大于細(xì)胞分裂素用量時，有利于根的分化，因此6BA與IBA比值應(yīng)小于1，這樣有利于根的分化?！军c睛】本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查考生的識圖能力和理解所學(xué)知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運用所學(xué)知識，對生物學(xué)問題作出準(zhǔn)確的判斷。18．（1）抗原（2）刺激機體產(chǎn)生更多的漿細(xì)胞PEG（或滅活的病毒）雜交瘤細(xì)胞（3）上清液抗VspX抗體抗VspX抗體的量（4）胰蛋白血清二氧化碳培養(yǎng)箱（5）特異性診斷、治療【分析】單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合。單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞(A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞)，不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞；第二次篩選：利用多孔板法和抗原抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。間接法測抗體，其基本原理：將特異性抗原包被在固相載體上，形成固相抗原，加入待測樣本（含相應(yīng)抗體），其中抗體與固相抗原形成抗原抗體復(fù)合物，再加入酶標(biāo)記的抗抗體（抗人免疫球蛋白抗體，亦稱二抗），與上述抗原抗體復(fù)合物結(jié)合。此時加入底物，復(fù)合物上的酶則催化底物而顯色。（1）VspX蛋白作為抗原注射到小鼠體內(nèi)，使小鼠產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答。（2）為了使刺激機體產(chǎn)生更多的漿細(xì)胞，對1號小鼠加強免疫一次。然后用PEG（聚乙二醇）使小鼠的脾臟細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再通過選擇培養(yǎng)基進行篩選得到雜交瘤細(xì)胞。（3）①將特異性抗原包被在固相載體上，故將VspX蛋白固定于固相載體表面制成固相抗原，由于抗體主要存在于上清液中，并加入多孔板培養(yǎng)槽中的上清液，即待測樣本（含相應(yīng)抗體）。②加入酶標(biāo)抗體與上述抗原抗體復(fù)合物結(jié)合，同時需要用洗滌劑將未與抗VspX抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗體洗去。③加入相應(yīng)酶促反應(yīng)底物，復(fù)合物上的酶則催化底物而顯色，顏色的深淺可代表抗VspX抗體的量。（4）加入胰蛋白酶使細(xì)胞分散開，制成細(xì)胞懸液，培養(yǎng)動物細(xì)胞，除添加一般營養(yǎng)物質(zhì)外，還需加入血清（天然成分），并置于二氧化碳培養(yǎng)箱中（二氧化碳能維持pH穩(wěn)定）進行擴大培養(yǎng)。（5）實驗結(jié)果表明抗VspX單克隆抗體不能與3、4結(jié)合，具有很強的特異性，VspX單克隆抗體能與1、2結(jié)合可用于后續(xù)關(guān)于牛支原體所引發(fā)相關(guān)疾病診斷、治療等方面的研究。【點睛】本題考查單克隆抗體的制備和檢測等有關(guān)知識，要求考生能夠掌握單克隆抗體制備的過程；明確其中存在兩個重要的篩選步驟；識記動物細(xì)胞融合的手段等，具有一定難度。19．Ca2+抗原抗體雜交菌株3中Bt基因表達的蛋白質(zhì)的分子量小于Bt毒蛋白的分子量DNA分子雜交HindIII或PstI將Bt3與質(zhì)粒B連接構(gòu)建重組DNA后，導(dǎo)入大腸桿菌，用抗Bt毒蛋白的抗體進行抗原抗體雜交，并通過電泳檢測該大腸桿菌菌株的Bt毒蛋白表達情況【分析】1、DNA分子雜交的基礎(chǔ)是，具有互補堿基序列的DNA分子，可以通過堿基對之間形成氫鍵等，形成穩(wěn)定的雙鏈區(qū)。其基本原理就是應(yīng)用核酸分子的變性和復(fù)性的性質(zhì)，使來源不同的DNA(或RNA)片段，按堿基互補關(guān)系形成雜交雙鏈分子。DNA分子雜交技術(shù)常用于基因工程中檢測目標(biāo)基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。2、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）用Ca2+處理大腸桿菌，使大腸桿菌處于感受態(tài)，有利于重組DNA分子的導(dǎo)入。（2）檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)常采用抗原抗體雜交的方法。分析電泳圖1可知，菌株3中Bt基因表達的蛋白質(zhì)的分子量小于Bt毒蛋白的分子量，因此可推測菌株3中僅插入了Bt基因的一部分序列，并非完整基因。（3）利用DNA分子雜交技術(shù)，能與探針X形成雜交雙鏈的DNA片段，即可確定其中含有Bt基因序列。分析圖2可知，Bt1和Bt2具有部分相同序列，若用限制酶HindIII處理兩段序列，可以將Bt2切開，獲得相同序列和不同序列兩部分，再用DNA連接酶連接Bt1和Bt2的不同序列