【肺癌干細(xì)胞的研究現(xiàn)狀文獻(xiàn)綜述3000字】

肺癌干細(xì)胞的研究現(xiàn)狀文獻(xiàn)綜述目錄TOC\o"1-2"\h\u28934肺癌干細(xì)胞的研究現(xiàn)狀文獻(xiàn)綜述 1147411肺癌干細(xì)胞的來源與生物學(xué)特征 12222肺癌干細(xì)胞的分離純化保存等技術(shù) 282122.1SP細(xì)胞分選法 270242.2利用干細(xì)胞表面標(biāo)記分選法 2137772.3利用免疫磁珠分選法聯(lián)合無血清懸浮培養(yǎng)法 2151103肺癌干細(xì)胞的體外增值分化鑒定等技術(shù) 33343.1細(xì)胞增殖及分化能力鑒定 3296783.2耐放化療反應(yīng)鑒定 3138463.3致瘤能力鑒定 387573.4侵襲能力鑒定 310274肺癌干細(xì)胞的治療研究現(xiàn)狀 3292534.1免疫靶向治療 366354.2其他 4874結(jié)語 416008參考文獻(xiàn) 4肺癌的發(fā)病率和死亡率正逐年上升，放療和化療已被證明能夠改善肺癌患者預(yù)后，但隨即產(chǎn)生的腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性導(dǎo)致的肺癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等情況，目前尚未有較好的解決辦法。肺癌干細(xì)胞是肺癌組織內(nèi)一群具有干細(xì)胞特性的細(xì)胞，具有多向分化潛能、高度自我更新及成瘤能力。研究發(fā)現(xiàn)肺癌干細(xì)胞可能是肺癌轉(zhuǎn)移及耐藥的重要原因。1肺癌干細(xì)胞的來源與生物學(xué)特征CSC又稱腫瘤起始細(xì)胞（tumor-initiatingcells,TICs），是存在于腫瘤組織中的一類具有較強(qiáng)致瘤性、自我更新、無限增殖以及分化潛能的細(xì)胞，因其保持干細(xì)胞特性而又被稱為腫瘤干細(xì)胞[1]。CSC由正常組織干細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來。正常組織干細(xì)胞具有自我更新能力，且生存周期較長，分為細(xì)胞靜止期、增殖期和分化期。CSC是多種因素長期誘導(dǎo)、多步累積而產(chǎn)生的。正常情況下，大部分干細(xì)胞處于細(xì)胞靜止期，發(fā)生突變的可能性較小，但當(dāng)干細(xì)胞處于增殖期和分化期時(shí)將大大增加突變發(fā)生幾率。即使大部分突變的干細(xì)胞會被機(jī)體識別并清除，但仍有少部分可能會被保留并繼承下來。在全能干細(xì)胞分化過程中，每一階段的干細(xì)胞都可能積累了不同程度的基因突變，而這些基因突變的干細(xì)胞可能因?yàn)槲h(huán)境改變而發(fā)生細(xì)胞增殖和分化的失衡，最終轉(zhuǎn)變?yōu)槟[瘤干細(xì)胞[2]。2肺癌干細(xì)胞的分離純化保存等技術(shù)2.1SP細(xì)胞分選法側(cè)群細(xì)胞(sidepopulationcells，SP)亦稱邊緣細(xì)胞，起初應(yīng)用于分離骨髓的造血干細(xì)胞，其胞膜上含有ATP結(jié)合盒(ATPbindingcassette，ABC)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，可以向細(xì)胞外排出如毒物、藥物、染料等物質(zhì)。Ho等[3]利用腫瘤干細(xì)胞的這一特性，從6種肺癌細(xì)胞系(H23、H460、HTB-58、A549、H-2170及H441)中分選出占總細(xì)胞數(shù)1%~3%的SP細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后可以分化形成SP細(xì)胞及non-SP細(xì)胞，后者只能分化形成non-SP細(xì)胞[4]。2.2利用干細(xì)胞表面標(biāo)記分選法2.2.1CD133作為廣泛的腫瘤表面標(biāo)志，有研究[5]發(fā)現(xiàn)只需移植100個(gè)CD133+細(xì)胞即可在NOD/SCID小鼠皮下形成腫瘤，且CD133+細(xì)胞形成的腫瘤體積均明顯高于CD133?細(xì)胞。2.2.2ALDH醛脫氫酶(aldehydedehydrogenase，ALDH)為眾多細(xì)胞內(nèi)酶的統(tǒng)稱，已利用其進(jìn)行多種腫瘤細(xì)胞的分離富集，它與細(xì)胞分化、解毒、耐藥性等特性有密切聯(lián)系[6]。Jiang等[7]研究發(fā)現(xiàn)ALDH+較ALDH-細(xì)胞群致瘤能力更強(qiáng)，表面含有更高比例的CD133+細(xì)胞及Oct4和Sox2。另有研究表明，在NSCLC患者中ALDH+的高表達(dá)與患者生存率的降低密切相關(guān)，預(yù)示著ALDH可能是肺癌干細(xì)胞表面標(biāo)志之一。2.2.3ABCG2ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G2(ATPbindingcassettetransporterG2，ABCG2)是ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族中的一員，同時(shí)也是SP細(xì)胞分選法利用的主要機(jī)制。因?yàn)樗型馀潘幬?、毒素等功能，所以化療藥物無法對腫瘤干細(xì)胞發(fā)揮作用，因此被認(rèn)為是包括肺癌在內(nèi)的腫瘤干細(xì)胞耐藥的主要原因[8]。Ho等[3]發(fā)現(xiàn)，富含肺癌干細(xì)胞的SP細(xì)胞高表達(dá)ABCG2，后者被視為非小細(xì)胞肺癌干細(xì)胞表面標(biāo)志，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)它與腫瘤的預(yù)后及惡性程度密切相關(guān)。2.3利用免疫磁珠分選法聯(lián)合無血清懸浮培養(yǎng)法免疫磁珠分選法和無血清懸浮培養(yǎng)法是常用的肺癌干細(xì)胞分選方法，其中無血清培養(yǎng)法[9]是添加一些細(xì)胞生長因子于不含血清的培養(yǎng)基中，使瘤細(xì)胞呈立體懸浮生長，可粗略的篩選出腫瘤干細(xì)胞，其最大優(yōu)點(diǎn)是不需要特異性的表面標(biāo)志，此方法已被用于分離培養(yǎng)多種腫瘤干細(xì)胞，但其缺點(diǎn)是，只能對腫瘤干細(xì)胞實(shí)現(xiàn)初步濃縮，且不能排除存在其他亞SP細(xì)胞，而且其培養(yǎng)時(shí)間周期長。3肺癌干細(xì)胞的體外增值分化鑒定等技術(shù)3.1細(xì)胞增殖及分化能力鑒定腫瘤干細(xì)胞具有自我更新、無限增殖能力以及多向分化潛能，而普通腫瘤細(xì)胞不具有以上特性。利用其較強(qiáng)增殖能力可以通過對腫瘤細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)，普通腫瘤細(xì)胞便逐漸自行消亡，能進(jìn)行傳代培養(yǎng)的則是干細(xì)胞；在分化方面，利用腫瘤干細(xì)胞分化時(shí)其表面標(biāo)志的改變，通過檢測可以達(dá)到對干細(xì)胞進(jìn)行鑒定的目的。3.2耐放化療反應(yīng)鑒定目前研究表明，由于處于低分化狀態(tài)以及其含有外排物質(zhì)功能的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，肺癌干細(xì)胞具有較強(qiáng)的耐受化療藥物[10]和放射治療的特性，而普通腫瘤細(xì)胞則不具有，通過多次照射或化療后，普通腫瘤細(xì)胞會被消滅，而干細(xì)胞則受影響不大，利用這點(diǎn)區(qū)別可以初步鑒定其是否為腫瘤干細(xì)胞。3.3致瘤能力鑒定肺癌干細(xì)胞鑒定方法中說服力最強(qiáng)的是致瘤能力的鑒定，被認(rèn)為是鑒定腫瘤干細(xì)胞的金標(biāo)準(zhǔn)，較強(qiáng)的致瘤能力也是腫瘤干細(xì)胞的最明顯特點(diǎn)和對患者最大的威脅。Yoo等[11]將普通腫瘤細(xì)胞進(jìn)行隨機(jī)分組并接種到裸鼠體內(nèi)的實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)絕大多數(shù)癌細(xì)胞均具有致瘤能力，甚至有些比腫瘤干細(xì)胞有著更強(qiáng)的致瘤性。3.4侵襲能力鑒定主要方法是Transwell小室試驗(yàn)，對比肺癌成球細(xì)胞與貼壁細(xì)胞同等條件下穿過基質(zhì)膠的細(xì)胞數(shù)來比較侵襲能力，結(jié)果發(fā)現(xiàn)前者明顯多于后者，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[12]，表明成球細(xì)胞較親代細(xì)胞具有更強(qiáng)的侵襲能力。4肺癌干細(xì)胞的治療研究現(xiàn)狀4.1免疫靶向治療目前研究較熱的生物靶向治療具有很廣闊的前景，眾所周知，腫瘤細(xì)胞因?yàn)槿狈泊碳ば盘?、MHC分子表達(dá)異常、低免疫原性等易形成免疫逃逸，而樹突狀細(xì)胞(DC)高表達(dá)B7、MHC類、CD80、CD40分子及多種粘附分子，是迄今發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)抗原提呈細(xì)胞，因此腫瘤干細(xì)胞與DC融合制備DC疫苗可以精確、有效的打擊腫瘤干細(xì)胞，并且避免了常規(guī)放化療甚至手術(shù)對正常組織的無謂損傷。4.2其他關(guān)于腫瘤干細(xì)胞干預(yù)或治療的方法研究有很多。例如，轉(zhuǎn)錄酶激活劑YAP-1通過調(diào)節(jié)Oct4和Sox2的表達(dá)來促進(jìn)腫瘤干細(xì)胞的自我更新和血管生成，抑制YAP-1基因的表達(dá)可阻止腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移[13]；缺氧誘導(dǎo)因子(hypoxia-induciblefactor，HIF)抑制劑LW6可以抑制乏氧條件下HIF-1的表達(dá)和活性，通過抑制其活性而減少腫瘤血管的生成，抑制腫瘤的發(fā)展[14]；李鐵鵬等[15]成功從具有肺癌干細(xì)胞特性的CD44high亞群細(xì)胞中提取特異表達(dá)的mciroRNA，針對其進(jìn)行干預(yù)治療也可能會取得一定成果。結(jié)語在臨床應(yīng)用方面，肺癌干細(xì)胞的分離有助于肺癌的早期臨床檢出，可能會在一定程度上提高患者5年生存率及生活質(zhì)量，對于治療方案的選擇也更為主動，也為實(shí)現(xiàn)靶向治療、基因療法及藥物干預(yù)等打下基礎(chǔ)，為治療肺癌甚至徹底根除肺帶來了新的希望。參考文獻(xiàn)[1]李思佳,宋新宇,李文新.肺癌干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J].巴楚醫(yī)學(xué),2020,3(01):100-103+111.[2]楊棟,張培彤.肺癌干細(xì)胞研究進(jìn)展[J].中國腫瘤,2015,24(07):574-580.[3]HoMM，NgAV，LamS，etal．Sidepopulationinhumanlungcancercelllinesandtumorsisenrichedwithstem-likecancercells[J].CancerRes，2007，67(10)：4827-4833．[4]SinghS，Bora-SinghalN，KroegerJ，etal.βArrestin-1andMcl-1modulateself-renewalgrowthofcancerstem-likeside-populationcellsinnon-smallcelllungcancer[J]．PLoSOne，2013，8(2)：e55982.[5]江進(jìn).穩(wěn)定表達(dá)GFP的Lewis肺癌干細(xì)胞的提取與初步鑒定[D].重慶：重慶醫(yī)科大學(xué)，2014.[6]ChuteJP，MuramotoGG，WhitesidesJ，etal.Inhibitionofaldehydedehydrogenaseandretinoidsignalinginducestheexpansionofhumanhematopoieticstemcells[J].ProcNatlAcadSciUSA，2006，103(31)：11707-11712.[7]JiangF，QiuQ，KhannaA，etal.Aldehydedehydrogenase1isatumorstemcell-associatedmarkerinlungcancer[J].MolCancerRes，2009，7(3)：330-338.[8]SullivanJP，SpinolaM，DodgeM，etal.Aldehydedehydrogenaseactivityselectsforlungadenocarcinomastemcellsdependentonnotchsignaling[J].CancerRes，2010，70(23)：9937-9948.[9]NaL，YuY，MiaoD，etal.GFPstabletransfectionfacilitatedthecha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