GB∕T 39183-2020 消費(fèi)品中亞硝胺遷移量的測(cè)定 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

Y57中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)消費(fèi)品中亞硝胺遷移量的測(cè)定氣相色譜-G-國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)ⅠGB／T39183—2020本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任。本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)消費(fèi)品安全標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC/TC508)提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院、中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院、山東省產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院、青島海關(guān)技術(shù)中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：張慶、呂慶、王志娟、劉霞、高翠玲、李海玉、王婉、陳倩雯、羅忻、劉暉、李丕、GB／T39183—2020消費(fèi)品中亞硝胺遷移量的測(cè)定氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了消費(fèi)品中N-亞硝胺及可亞硝化物質(zhì)遷移量的氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于消費(fèi)品中可經(jīng)口接觸的乳膠、橡膠、PVC等彈性體材質(zhì)。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法試樣用人工唾液遷移提取，遷移溶液經(jīng)固相萃取凈化濃縮，氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀(GC-MS/MS)進(jìn)行測(cè)定，采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式(MRM)進(jìn)行定性和外標(biāo)法定量。4試劑或材料除另有規(guī)定外，僅使用分析純?cè)噭?，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。4.4亞硝酸鈉。4.5無(wú)水硫酸鈉。4.8N-亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)品：純度均大于95%,見附錄A。的氫氧化鈉溶液。的鹽酸溶液。人工唾液稱取亞硝酸鈉溶解于水中用調(diào)節(jié)pH為9.0,用水定容到1L。該人工唾液現(xiàn)用現(xiàn)配。4.121mol/L的氫氧化鈉溶液。的鹽酸溶液。4.14單標(biāo)儲(chǔ)備溶液：分別準(zhǔn)確稱取適量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(4.8),以甲醇(4.6)配制成濃度為500mg/L的單標(biāo)儲(chǔ)備溶液。將溶液于(-18±3)℃避光保存，有效期6個(gè)月。4.15混標(biāo)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確移取適量各標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于容量瓶中，以甲醇(4.6)配制成濃度為20mg/L的12GB／T39183—2020混標(biāo)儲(chǔ)備溶液。將溶液于(-18±3)℃避光保存，有效期3個(gè)月。4.16標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：準(zhǔn)確移取適量混標(biāo)儲(chǔ)備溶液，根據(jù)需要以乙酸乙酯(4.7)配制一系列質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，有效期1個(gè)月。注：由于N-亞硝胺類物質(zhì)易被紫外線分解，標(biāo)準(zhǔn)溶液避光以避免其暴露于日光或熒光燈等光源下。5儀器設(shè)備5.1氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜儀，配有電子轟擊電離源(EI源）。分析天平精度為5.4恒溫水浴鍋：溫度為(40±2)℃。5.5固相萃取裝置：配有真空泵。5.6固相萃取柱：多孔聚苯乙烯-二乙烯苯共聚物小柱（規(guī)格500mg,6mL),或相當(dāng)者。若采用其他固相萃取柱，應(yīng)保證目標(biāo)物質(zhì)具有良好的回收率。注：經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，多孔聚苯乙烯-二乙烯苯共聚物小柱類型固相萃取柱適合用于本標(biāo)準(zhǔn)中涉及的15種N-亞硝胺的富集凈化，僅做參考。棕色容量瓶容量為玻璃珠直徑為整個(gè)樣品處理及分析過(guò)程應(yīng)在避光條件下進(jìn)行，防止N-亞硝胺光降解。6.2樣品制備6.2.1經(jīng)口接觸時(shí)間較短的樣品對(duì)于經(jīng)口接觸時(shí)間較短的樣品（如氣球?qū)⒋郎y(cè)樣品剪切后稱取5g（精確至0.01g)于100mL具塞錐形瓶中，加入45mL人工唾液，玻璃珠若干，蓋上蓋子，輕輕搖勻，保證樣品完全被模擬唾液浸潤(rùn)，于(40±2)℃恒溫(60±3)min。其中人工唾液和玻璃珠(5.10)預(yù)先加熱到40℃。遷移完成后，立即將錐形瓶中的遷移溶液轉(zhuǎn)移至50mL棕色容量瓶，用適量人工唾液洗滌樣品，與上述遷移溶液合并，以人工唾液定容至50mL。該遷移溶液分別用于N-亞硝胺及可亞硝化物質(zhì)的測(cè)定。準(zhǔn)確移取10mL遷移溶液進(jìn)行亞硝化反應(yīng)(7.1),用于可亞硝化物質(zhì)的測(cè)定；剩余40mL遷移溶液加入1mL的1mol/L氫氧化鈉溶液(4.12),記作溶液A,用于N-亞硝胺的測(cè)定。6.2.2經(jīng)口接觸時(shí)間較長(zhǎng)的樣品對(duì)于經(jīng)口接觸時(shí)間較長(zhǎng)的樣品（如嬰兒奶嘴、牙膠選取彈性體樣品的表面部分，盡量減少剪切邊緣，并使剪切邊緣平滑。取樣面積(10±1)cm2,稱重（精確至0.01g)。若彈性體部分表面積不足10cm2,或剪切步驟會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，該樣品不需要剪切，直接進(jìn)行遷移提取。于(40±2)℃恒溫其余步驟同3GB／T39183—20207分析步驟將恒溫遷移后定容得到的50mL遷移溶液，準(zhǔn)確移取10mL至50mL具塞錐形瓶，加入1mol/L鹽酸溶液1mL(4.13),混勻，于(40±2)℃下避光反應(yīng)(30±1)min。反應(yīng)結(jié)束后，加入1mol/L氫氧化鈉溶液2mL(4.12),此為溶液B,用于可亞硝化物質(zhì)的測(cè)定。注：可亞硝化物質(zhì)包括亞硝酸鹽、氮氧化物、胺類物質(zhì)等，難以直接測(cè)定。本標(biāo)準(zhǔn)使遷移溶液中的可亞硝化物質(zhì)在一定條件下發(fā)生亞硝化反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的亞硝胺，以亞硝胺測(cè)定結(jié)果間接表示可亞硝化物質(zhì)的含量。7.2固相萃取濃縮將固相萃取柱依次用6mL乙酸乙酯(4.7)、6mL甲醇(4.6)活化，用10mL水平衡。溶液A（或溶液B)以1mL/min左右的流速過(guò)柱。上樣完成后，抽干5min。用6mL乙酸乙酯(4.7)分兩次洗脫（每次3mL),收集洗脫液，用無(wú)水硫酸鈉(4.5)除去洗脫液中水分，將上清液用緩慢的氮?dú)饬鞔抵两?，以乙酸乙?4.7)定容至1mL,樣液搖勻后經(jīng)0.22μm有機(jī)濾膜(5.7)過(guò)濾，裝入棕色進(jìn)樣小瓶，立即上機(jī)檢測(cè)。如不能及時(shí)檢測(cè)，應(yīng)于冷凍避光條件下保存，并于兩天內(nèi)盡快測(cè)試完成。7.3氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定條件測(cè)試結(jié)果取決于所使用的儀器，不可能給出色譜分析的通用參數(shù)。下列給出的參數(shù)已被證明是可行的：a)色譜柱：5%苯基和95%二甲基聚硅氧烷的低流失石英毛細(xì)管柱(30m×0.25mm×0.25μm),或相當(dāng)者。柱溫柱初溫為保持的速率升溫至并保持的速率升溫至的速率升溫至以的速率升溫至并保持5min。載氣氦氣純度流速g)電離方式：EI電離。h)電離能量：70eV。i)進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣。j)進(jìn)樣量：1μL。k)碰撞氣：氬氣（純度≥99.999%)。l)數(shù)據(jù)采集模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM),各物質(zhì)的分析參數(shù)見附錄A。7.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制將標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(4.16)按照上述分析條件(7.3)進(jìn)行測(cè)定，以定量離子的峰面積為縱坐標(biāo)，與其對(duì)應(yīng)的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。在上述分析條件下各標(biāo)準(zhǔn)物的MRM色譜圖參見附錄B。7.5定性分析將樣品溶液(7.2)按照上述分析條件(7.3)進(jìn)行測(cè)定，如果檢出的色譜峰的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)樣品相4GB／T39183—2020一致（允差±0.5%并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，所有選擇離子對(duì)均出現(xiàn)，且所選擇的定性離子相對(duì)豐度與濃度相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的定性離子的相對(duì)豐度進(jìn)行比較時(shí)，偏差不超過(guò)規(guī)定允許范圍，見表1，則可判定樣品中存在該物質(zhì)。表1定性確定時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差相對(duì)離子豐度允許相對(duì)偏差>50%±20%>20%~50%±25%>10%~20%±30%≤10%±50%7.6定量分析采用外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量，將樣品溶液中待測(cè)物的色譜峰面積代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到待測(cè)物的濃度。樣液中待測(cè)物的響應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)，超過(guò)線性范圍則應(yīng)稀釋后再進(jìn)樣分析。除了不加樣品外，采用與樣品測(cè)試相同的測(cè)試程序?？瞻自囼?yàn)的結(jié)果可用來(lái)評(píng)估測(cè)試過(guò)程受到的污染?？瞻自囼?yàn)結(jié)果應(yīng)小于方法定量限（見第9章）。8數(shù)據(jù)處理樣品中每種N-亞硝胺的含量，按式（1）計(jì)算：式中：—樣品中N-亞硝胺的質(zhì)量濃度，單位為微克每千克（μg／kgcA—溶液A最終得到的上樣溶液（7.2）中N-亞硝胺的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升（mg／Lc0—空白試驗(yàn)中溶液A最終得到的樣品溶液（7.2）中N-亞硝胺的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升VA—溶液A最終得到的樣品溶液（7.2）體積0.001，單位為升（Lf—稀釋倍數(shù)；計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后一位，當(dāng)結(jié)果超過(guò)100μg／kg時(shí)，表示到個(gè)位。樣品中可亞硝化物質(zhì)的含量，按式（2）計(jì)算：式中：—樣品中可亞硝化物質(zhì)的質(zhì)量濃度，單位為微克每千克（μg／kgcB—溶液B最終得到的樣品溶液（7.2）中N-亞硝胺的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升（mg／L0c—空白試驗(yàn)中溶液A最終得到的樣品溶液（7.2）中N-亞硝胺的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升05GB／T39183—2020VB—溶液B最終得到的樣品溶液(7.2)體積0.001,單位為升(L);f—稀釋倍數(shù)；m—樣品稱樣量(6.2),單位為克(g);—樣品中N-亞硝胺的質(zhì)量濃度［式(1)],單位為微克每千克(μg/kg)。計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后一位，當(dāng)結(jié)果超過(guò)100μg/kg時(shí)，表示到個(gè)位。9方法定量限本方法對(duì)N-亞硝基甲基乙基胺和N-亞硝基二異丙胺的定量限為0.025μg/kg,對(duì)N-亞硝基-N-甲基苯胺、N-亞硝基二異丁基胺、N-亞硝基二環(huán)己胺和N-亞硝基二芐基胺的定量限為0.125μg/kg,對(duì)其余待測(cè)物的定量限均為0.05μg/kg。10回收率和精密度在添加濃度0.1μg/kg~50μg/kg內(nèi)，對(duì)N-亞硝基二甲基胺的回收率為55%~85%,對(duì)其余N-亞硝胺回收率為80%~110%。在不同的實(shí)驗(yàn)室，由不同的操作者使用不同的設(shè)備，按照相同的測(cè)試方法，對(duì)同一個(gè)樣品進(jìn)行相互獨(dú)立的測(cè)試，獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值應(yīng)不大于這兩個(gè)測(cè)定值的算術(shù)平均值的15%,以大于這兩個(gè)測(cè)定值的算術(shù)平均值的15%的情況不超過(guò)5%為前提。從實(shí)驗(yàn)室得到的精密度試驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)參見附錄C。試驗(yàn)報(bào)告至少應(yīng)給出以下內(nèi)容：a)試樣描述；b)使用的標(biāo)準(zhǔn)（包括發(fā)布或出版年號(hào)）；c)試驗(yàn)結(jié)果；d)與規(guī)定的分析步驟的差異；e)在試驗(yàn)中觀察到的異?，F(xiàn)象；f)試驗(yàn)日期。6GB／T39183—2020附錄A（規(guī)范性附錄）N-亞硝胺的色譜質(zhì)譜分析參數(shù)15種N-亞硝胺的色譜質(zhì)譜分析參數(shù)見表A.1。表A.115種N-亞硝胺的色譜質(zhì)譜分析參數(shù)序號(hào)化合物英文名稱及縮寫CAS號(hào)保留時(shí)間min監(jiān)測(cè)離子對(duì)，m/≈碰撞能量/eV1N-亞硝基二甲基胺N-nitrosodimethylamineNDMA62-75-92N-亞硝基甲基乙基胺N-Nitroso-methyl-ethylamineNEMA10595-95-63N-亞硝基二乙基胺N-nitrosodiethylamineNDEA55-18-54N-亞硝基二異丙胺N-nitrosodiisopropylamineNDiPA601-77-45N-亞硝基-N-甲基苯胺N-nitroso-N-methyl-N-phenylamineNMPhA614-00-66N-亞硝基嗎啉N-nitrosomorpholineNMOR59-89-27N-亞硝基二丙基胺N-nitrosodipropylamineNDPA621-64-78N-亞硝基哌啶N-nitropiperidineNPIP100-75-49N-亞硝基-N-乙基苯胺N-nitroso-N-ethyl-N-phenylamineNEPhA612-64-6N-亞硝基二異丁基胺N-nitrosodiisobutylamineNDiBA997-95-5N-亞硝基二丁基胺N-nitrosodibutylamineNDBA924-16-3N-亞硝基二苯基胺N-nitrosodiphenylamineNDPhA86-30-6N-亞硝基二環(huán)己胺N-NitrosodicyclohexylamineNDCHA947-92-2N-亞硝基二芐基胺N-nitrosodibenzylamineNDBzA5336-53-8N-亞硝基二異壬胺N-nitrosodiisononylamineNDiNA1207995-62-7注：帶*為定量離子對(duì)。GB／T39183—2020附錄B（資料性附錄）N-亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的MRM色譜圖15種N-亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的MRM色譜見圖B.1。說(shuō)明：1—N-亞硝基二甲基胺；2—N-亞硝基甲基乙基胺；3—N-亞硝基二乙基胺；4—N-亞硝基二異丙胺；5—N-亞硝基-N-甲基苯胺；6—N-