《核酸檢測試劑盒質(zhì)量評價(jià)技術(shù)規(guī)范GBT+37871-2019》詳細(xì)解讀

《核酸檢測試劑盒質(zhì)量評價(jià)技術(shù)規(guī)范GB/T37871-2019》詳細(xì)解讀contents目錄1范圍2規(guī)范性引用文件3術(shù)語和定義、縮略語3.1術(shù)語和定義3.2縮略語4質(zhì)量評價(jià)要求5質(zhì)量評價(jià)指標(biāo)和方法contents目錄5.1質(zhì)量評價(jià)指標(biāo)5.2定量檢測試劑盒質(zhì)量評價(jià)方法5.3定性檢測試劑盒質(zhì)量評價(jià)方法6文件要求6.1包裝標(biāo)識(shí)6.2指導(dǎo)性文件6.3溯源性文件011范圍核酸檢測試劑盒的質(zhì)量評價(jià)本規(guī)范適用于核酸檢測試劑盒的質(zhì)量評價(jià)，確保試劑盒的性能指標(biāo)符合相關(guān)要求。研發(fā)、生產(chǎn)和應(yīng)用環(huán)節(jié)涵蓋核酸檢測試劑盒的研發(fā)、生產(chǎn)和應(yīng)用等各個(gè)環(huán)節(jié)，為各階段的質(zhì)量控制提供指導(dǎo)。適用范圍非核酸類檢測試劑盒本規(guī)范不適用于非核酸類檢測試劑盒的質(zhì)量評價(jià)。其他類型生物樣本檢測對于非核酸檢測方法或其他類型生物樣本的檢測，本規(guī)范可能不適用。不適用范圍022規(guī)范性引用文件體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性GB/T21415-2008核酸檢測試劑盒溯源性技術(shù)規(guī)范GB/T37868-2019主要引用的文件YY/T1182-2010核酸擴(kuò)增檢測系統(tǒng)用對照物質(zhì)YY/T1436-2016醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用注以上規(guī)范性引用文件是制定本標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)基礎(chǔ)和依據(jù)，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施過程中，應(yīng)密切關(guān)注相關(guān)引用文件的更新情況，以確保本標(biāo)準(zhǔn)的時(shí)效性和適用性。同時(shí)，對于輔助引用的文件，雖然在本標(biāo)準(zhǔn)的制定過程中起到了參考作用，但其具體條款并非必須強(qiáng)制執(zhí)行，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行選擇和適用。輔助引用的文件“033術(shù)語和定義、縮略語術(shù)語和定義溯源性通過一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使測量結(jié)果或測量標(biāo)準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)，通常是與國家測量標(biāo)準(zhǔn)或國際測量標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來的特性。標(biāo)示值在核酸檢測試劑盒上標(biāo)示的，用于描述試劑組分特性值或量值的信息。核酸檢測試劑盒用于檢測核酸的試劑盒，通常由核酸提取試劑、擴(kuò)增試劑和檢測試劑組成，用于定性或定量檢測特定病原體的核酸。030201國家標(biāo)準(zhǔn)推薦性標(biāo)準(zhǔn)。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，一種用于擴(kuò)增特定DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，一種在PCR反應(yīng)中通過熒光信號實(shí)時(shí)監(jiān)測DNA擴(kuò)增的技術(shù)。符合歐洲體外診斷醫(yī)療器械指令要求的標(biāo)志，表示產(chǎn)品符合相關(guān)法規(guī)要求，可以在歐洲市場銷售和使用。縮略語GB/TPCRqPCRCE-IVD043.1術(shù)語和定義核酸檢測試劑盒是指用于體外定性檢測人樣本中特定病原體的核酸序列的試劑組合，包括必要的檢測引物、探針、酶等組分。定義通過特定的核酸提取、擴(kuò)增和檢測流程，實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)病原體的快速、準(zhǔn)確檢測。功能核酸檢測試劑盒定義質(zhì)量評價(jià)是指對核酸檢測試劑盒的性能指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)的評估，以確保其符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和要求。目的通過對核酸檢測試劑盒的質(zhì)量評價(jià)，可以確保其準(zhǔn)確性、可靠性、穩(wěn)定性和安全性，從而為臨床診斷和治療提供有力支持。質(zhì)量評價(jià)技術(shù)規(guī)范作用技術(shù)規(guī)范為核酸檢測試劑盒的研發(fā)、生產(chǎn)和應(yīng)用提供了明確的指導(dǎo)和依據(jù)，有助于保障試劑盒的質(zhì)量和可靠性，促進(jìn)相關(guān)行業(yè)的健康發(fā)展。定義技術(shù)規(guī)范是指對核酸檢測試劑盒的研發(fā)、生產(chǎn)、質(zhì)量控制和應(yīng)用等方面所制定的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)和要求。053.2縮略語PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。qPCRPCR實(shí)時(shí)熒光定量PCR，通過在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程。0102RT-PCR逆轉(zhuǎn)錄PCR，是將RNA的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)和PCR反應(yīng)聯(lián)合應(yīng)用的一種技術(shù)，即首先以RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下合成cDNA，再以cDNA為模板通過PCR反應(yīng)來擴(kuò)增DNA片段。RT-PCRdNTPs脫氧核苷三磷酸，是合成DNA的原料，包括dATP、dTTP、dCTP和dGTP。dNTPsTaqDNA聚合酶TaqDNA聚合酶一種耐高溫的DNA聚合酶，從水生棲熱菌中分離得到，是PCR技術(shù)中的關(guān)鍵酶，用于催化DNA鏈的延伸。064質(zhì)量評價(jià)要求應(yīng)通過參考物質(zhì)或已知濃度的樣本對核酸檢測試劑盒的準(zhǔn)確性進(jìn)行驗(yàn)證。準(zhǔn)確性驗(yàn)證應(yīng)評估試劑盒與可能存在的交叉反應(yīng)物質(zhì)之間的反應(yīng)，以確保準(zhǔn)確性不受干擾。交叉反應(yīng)應(yīng)確定試劑盒的靈敏度和特異性，以評估其在實(shí)際應(yīng)用中的準(zhǔn)確性表現(xiàn)。靈敏度與特異性4.1準(zhǔn)確性評價(jià)010203在同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，使用同一批次試劑盒對同一樣本進(jìn)行多次檢測，評估結(jié)果的重復(fù)性。重復(fù)性在不同時(shí)間、不同實(shí)驗(yàn)人員、不同設(shè)備條件下，使用同一批次試劑盒對同一樣本進(jìn)行檢測，評估結(jié)果的中間精密度。中間精密度4.2精密性評價(jià)VS評估試劑盒在規(guī)定存儲(chǔ)條件下的穩(wěn)定性，包括長期穩(wěn)定性和開封穩(wěn)定性。樣本穩(wěn)定性評估樣本在不同存儲(chǔ)條件下的穩(wěn)定性，以確定樣本的有效期和保存方法。試劑盒穩(wěn)定性4.3穩(wěn)定性評價(jià)生物安全性評估試劑盒的生物安全性，包括對操作人員的潛在風(fēng)險(xiǎn)和防范措施。環(huán)保性評估試劑盒在使用和廢棄處理過程中對環(huán)境的影響，以及相應(yīng)的環(huán)保措施。4.4安全性評價(jià)075質(zhì)量評價(jià)指標(biāo)和方法同一樣品在相同條件下重復(fù)檢測時(shí)，結(jié)果的變異程度。精密性試劑盒能夠檢測到的最低病毒載量或濃度。靈敏度01020304核酸檢測試劑盒的檢測結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)品或參考方法的符合程度。準(zhǔn)確性試劑盒能夠正確區(qū)分目標(biāo)病毒與其他病原體的能力。特異性5.1質(zhì)量評價(jià)指標(biāo)對比試驗(yàn)將核酸檢測試劑盒的檢測結(jié)果與已知的標(biāo)準(zhǔn)品或參考方法進(jìn)行對比，以評估其準(zhǔn)確性。重復(fù)性試驗(yàn)對同一樣品進(jìn)行多次重復(fù)檢測，以評估試劑盒的精密性。最低檢測限試驗(yàn)通過稀釋病毒樣品，確定試劑盒能夠檢測到的最低病毒載量或濃度，以評估其靈敏度。交叉反應(yīng)試驗(yàn)使用其他相關(guān)病原體樣品進(jìn)行測試，以評估試劑盒的特異性。5.2質(zhì)量評價(jià)方法085.1質(zhì)量評價(jià)指標(biāo)準(zhǔn)確性是指核酸檢測試劑盒檢測結(jié)果與被檢測樣本真實(shí)情況的一致性程度。準(zhǔn)確性定義通過對比核酸檢測試劑盒檢測結(jié)果與已知真實(shí)結(jié)果的樣本，計(jì)算檢測結(jié)果的符合率或誤差率來評價(jià)準(zhǔn)確性。準(zhǔn)確性評價(jià)方法5.1.1準(zhǔn)確性靈敏度是指核酸檢測試劑盒在檢測低濃度或微量目標(biāo)核酸時(shí)的能力。靈敏度定義通常采用不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或臨床樣本，評估核酸檢測試劑盒在最低檢測限附近的檢測性能。靈敏度評價(jià)方法5.1.2靈敏度特異性定義特異性是指核酸檢測試劑盒在檢測過程中對非目標(biāo)核酸的識(shí)別能力，即不產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的程度。特異性評價(jià)方法通過檢測含有非目標(biāo)核酸的樣本，觀察核酸檢測試劑盒是否產(chǎn)生假陽性反應(yīng)，以評估其特異性。5.1.3特異性穩(wěn)定性定義穩(wěn)定性是指核酸檢測試劑盒在規(guī)定條件下保存和運(yùn)輸過程中，其性能保持不變的能力。015.1.4穩(wěn)定性穩(wěn)定性評價(jià)方法通過對不同保存條件和運(yùn)輸方式下的核酸檢測試劑盒進(jìn)行定期檢測，觀察其性能變化，以評估穩(wěn)定性。02095.2定量檢測試劑盒質(zhì)量評價(jià)方法絕對準(zhǔn)確度指檢測結(jié)果與真實(shí)值或參考值之間的接近程度，可通過與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行比較來評估。相對準(zhǔn)確度指不同濃度樣品檢測結(jié)果之間的相對誤差，可通過檢測一系列不同濃度的樣品并計(jì)算其回收率來評估。準(zhǔn)確度精密度中間精密度在同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，不同時(shí)間由不同操作者使用不同設(shè)備，按相同的測試方法，對同一被測對象進(jìn)行測試獲得的兩次獨(dú)立測試結(jié)果的絕對差值不應(yīng)超過一定限值。重復(fù)性在同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，由同一操作者使用相同設(shè)備，按相同的測試方法，并在短時(shí)間內(nèi)對同一被測對象相互獨(dú)立進(jìn)行測試獲得的兩次獨(dú)立測試結(jié)果的絕對差值不應(yīng)超過一定限值。線性范圍與可報(bào)告范圍指實(shí)驗(yàn)室在保證準(zhǔn)確度、精密度和可重復(fù)性的前提下，能夠定量報(bào)告的被測物濃度范圍?？蓤?bào)告范圍指檢測結(jié)果與樣品中被測物的濃度呈線性關(guān)系的范圍，應(yīng)在此范圍內(nèi)選擇適當(dāng)?shù)臐舛赛c(diǎn)進(jìn)行測試，以評估線性關(guān)系是否符合要求。線性范圍交叉反應(yīng)應(yīng)評估試劑盒與可能干擾物質(zhì)之間的交叉反應(yīng)，以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。干擾實(shí)驗(yàn)應(yīng)通過實(shí)驗(yàn)確定可能干擾檢測的物質(zhì)，并在產(chǎn)品說明書中注明。對于已知的干擾物質(zhì)，應(yīng)評估其干擾程度并給出相應(yīng)的處理建議。特異性105.3定性檢測試劑盒質(zhì)量評價(jià)方法準(zhǔn)確性評價(jià)陽性參考品符合率使用國家參考品或經(jīng)標(biāo)化的陽性參考品進(jìn)行檢測，要求陽性參考品符合率≥95%。若存在不符合的情況，應(yīng)明確原因并采取措施進(jìn)行改進(jìn)。陰性參考品符合率使用國家參考品或經(jīng)標(biāo)化的陰性參考品進(jìn)行檢測，要求陰性參考品符合率≥95%。對于不符合的陰性參考品，應(yīng)進(jìn)行深入分析，以避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。靈敏度評價(jià)通過對陽性參考品進(jìn)行梯度稀釋，檢測試劑盒在不同濃度下的檢測效果。這有助于評估試劑盒的靈敏度和動(dòng)態(tài)范圍。梯度稀釋檢測應(yīng)確定試劑盒的最低檢測限，即能夠可靠檢測出目標(biāo)核酸的最低濃度。這有助于了解試劑盒對于低濃度樣本的檢測能力。最低檢測限應(yīng)評估試劑盒與可能引起非特異性反應(yīng)的物質(zhì)的交叉反應(yīng)性。這些物質(zhì)可能包括其他病原體、人類基因組DNA等。通過交叉反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，可以了解試劑盒的特異性程度。交叉反應(yīng)應(yīng)評估常見干擾物質(zhì)對試劑盒檢測結(jié)果的影響。這些干擾物質(zhì)可能包括血液、血清、血漿等樣本中的常見成分，以及可能用于治療的藥物等。了解這些干擾物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響，有助于提高試劑盒的準(zhǔn)確性和可靠性。干擾物質(zhì)特異性評價(jià)116文件要求質(zhì)量管理體系文件應(yīng)建立并維護(hù)一套完整的質(zhì)量管理體系文件，包括質(zhì)量手冊、程序文件、作業(yè)指導(dǎo)書等，以確保核酸檢測試劑盒的質(zhì)量可控。技術(shù)文件應(yīng)提供與核酸檢測試劑盒相關(guān)的詳細(xì)技術(shù)文件，如產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)、設(shè)計(jì)文檔、驗(yàn)證報(bào)告等，以支持產(chǎn)品的安全性和有效性。6.1文件體系可追溯性文件中應(yīng)明確記錄核酸檢測試劑盒的研發(fā)、生產(chǎn)、檢驗(yàn)等過程的信息，以確保產(chǎn)品的可追溯性。準(zhǔn)確性文件內(nèi)容應(yīng)準(zhǔn)確反映核酸檢測試劑盒的實(shí)際情況，包括產(chǎn)品組成、性能指標(biāo)、生產(chǎn)工藝等，不得有誤導(dǎo)性信息。完整性文件應(yīng)包含所有必要的信息，以便用戶能夠正確理解和使用核酸檢測試劑盒，同時(shí)便于監(jiān)管部門進(jìn)行審查。6.2文件內(nèi)容要求應(yīng)對文件進(jìn)行版本控制，確保文件的變更得到有效管理和追蹤。版本控制涉及商業(yè)機(jī)密或技術(shù)秘密的文件應(yīng)得到妥善保管，防止泄露。保密性文件應(yīng)按照規(guī)定的保存期限進(jìn)行保存，以便在需要時(shí)能夠提供相關(guān)證據(jù)。保存期限6.3文件管理要求126.1包裝標(biāo)識(shí)6.1.1標(biāo)識(shí)內(nèi)容產(chǎn)品名稱應(yīng)清晰標(biāo)示核酸檢測試劑盒的產(chǎn)品名稱。型號規(guī)格應(yīng)明確標(biāo)示產(chǎn)品的型號和規(guī)格，以便用戶和醫(yī)療機(jī)構(gòu)選擇和采購。生產(chǎn)廠家應(yīng)標(biāo)示出生產(chǎn)廠家的名稱、地址和聯(lián)系方式，以便在需要時(shí)進(jìn)行聯(lián)系和咨詢。批號和生產(chǎn)日期每個(gè)批次的核酸檢測試劑盒都應(yīng)有唯一的批號和生產(chǎn)日期，以便進(jìn)行質(zhì)量追蹤和管理。外包裝標(biāo)識(shí)如試劑盒內(nèi)有多個(gè)組件或試劑，則內(nèi)包裝上也應(yīng)相應(yīng)標(biāo)示各組件或試劑的名稱、規(guī)格和數(shù)量等信息。內(nèi)包裝標(biāo)識(shí)標(biāo)識(shí)清晰度所有標(biāo)識(shí)內(nèi)容應(yīng)清晰、易讀，不得有模糊、涂改等現(xiàn)象。產(chǎn)品外包裝上應(yīng)清晰印刷或粘貼上述標(biāo)識(shí)內(nèi)容，確保在運(yùn)輸和儲(chǔ)存過程中不易脫落或模糊。6.1.2標(biāo)識(shí)位置和要求6.1.3特殊要求如試劑盒包含有毒或有害物質(zhì)，應(yīng)在包裝上明確標(biāo)示，并提供相應(yīng)的安全警示和使用說明。對于有潛在生物安全風(fēng)險(xiǎn)的試劑，應(yīng)在包裝上標(biāo)示相應(yīng)的生物安全警示標(biāo)志和使用注意事項(xiàng)。對于需要在特定條件下儲(chǔ)存的試劑，如需要冷藏或冷凍保存的試劑，應(yīng)在包裝上明確標(biāo)示儲(chǔ)存條件和有效期。010203136.2指導(dǎo)性文件溯源性定義溯源性是指通過一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使測量結(jié)果或測量標(biāo)準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來的一種特性。核酸檢測試劑盒溯源性標(biāo)準(zhǔn)為確保核酸檢測試劑盒的準(zhǔn)確性，需建立相應(yīng)的溯源性標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)范試劑盒的研發(fā)、生產(chǎn)、應(yīng)用等過程，確保試劑組分的標(biāo)稱特性值和量值可追溯。核酸檢測試劑盒溯源性相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)國內(nèi)外相關(guān)技術(shù)規(guī)范國外技術(shù)規(guī)范國際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ISO）也發(fā)布了與核酸檢測試劑盒溯源性相關(guān)的技術(shù)規(guī)范，如ISO17511等，為試劑盒的國際化應(yīng)用提供了參考。國內(nèi)技術(shù)規(guī)范《核酸檢測試劑盒溯源性技術(shù)規(guī)范》（GB/T37868-2019）是中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定了核酸檢測試劑盒溯源性的術(shù)語和定義、技術(shù)要求、溯源性建立等內(nèi)容。核酸檢測試劑盒中的試劑組分，如引物、探針、酶等，其標(biāo)稱特性值和量值應(yīng)具有溯源性，以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。試劑組分溯源通過建立完善的溯源性體系，可對核酸檢測結(jié)果進(jìn)行溯源，查找可能存在的誤差來源，提高檢測的可靠性和準(zhǔn)確性。檢測結(jié)果溯源溯源性在核酸檢測中的應(yīng)用隨著科技的不斷進(jìn)步，溯源性技術(shù)將更加完善，為核酸檢測試劑盒的研發(fā)、生產(chǎn)、應(yīng)用等提供更加有力的支持。溯源性技術(shù)不斷完善國內(nèi)外在核酸檢測試劑盒溯源性方面的合作將進(jìn)一步加強(qiáng)，推動(dòng)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的國際化和統(tǒng)一化，提高試劑盒的國際化應(yīng)用水