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馬鈴薯紡錘塊莖類(lèi)病毒檢測(cè)核酸斑點(diǎn)雜交法Detectionofpotatospindletuberviroid(PSTVd)—14.3抗地高辛-AP(Anti-Digoxigenin-AP)。調(diào)節(jié)pH至6.0。4.132×SSC/0.1%SDS。在35.6mL蒸餾水中加入20倍檸檬酸緩沖液儲(chǔ)備液(4.11)4mL,10%2NaOH調(diào)pH至7.5(20℃),定容至1L,5℃~25℃穩(wěn)定。4.175×檢測(cè)緩沖液。在80mL水中加3放在紫外交聯(lián)儀上正反面各交聯(lián)1min,能量為1200J。根據(jù)尼龍膜的大小取相應(yīng)體積的雜交液(大約4mL雜交液/100cm2尼龍膜),加入變性過(guò)的探針2次，每次5min;用鑷子將尼龍膜轉(zhuǎn)入0.1×SSC,0.1%SDS溶液(4.14)(先50℃預(yù)熱),55℃水浴振蕩洗滌2次，每次15min(也可以在雜交管中用最大轉(zhuǎn)速洗滌);將尼龍膜取出轉(zhuǎn)入裝有20mL洗滌緩沖液6.7孵育30mL洗滌緩沖液(4.16)中洗滌2次，每次1所有孵育過(guò)程應(yīng)在15℃~25℃下攪拌進(jìn)行。6.8信號(hào)檢測(cè)7結(jié)果判定X光片上對(duì)應(yīng)點(diǎn)樣位置出現(xiàn)斑點(diǎn)者為馬鈴薯紡錘塊莖類(lèi)病毒陽(yáng)性樣品，參見(jiàn)B.1。如果檢測(cè)結(jié)果5(資料性附錄)檢測(cè)結(jié)果判定參考圖B.1化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)結(jié)果化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖B.1。圖B.1化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)結(jié)果B.2

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