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T/CVMA158—2024牛分枝桿菌抗體熒光偏振檢測方法FluorescencepolarizationassayfordetectionofantibodiesagainstMycobacteriumbovis2024-5-8發(fā)布2024-5-8實施中國獸醫(yī)協(xié)會發(fā)布I本文件起草單位：上海市動物疫病預(yù)防控制中心、山東生科尚儀生物技術(shù)有12規(guī)范性引用文件GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運輸技術(shù)規(guī)范振光，用熒光偏振儀檢測待檢血清的偏振光增加值即可判斷血清中是否存在牛分枝桿5試劑和材料5.1試劑5.1.4樣品稀釋緩沖液配制方法見附錄5.1.5結(jié)合物：用硫氰熒光素（FITC）標(biāo)記牛分5.2材料25.2.196孔黑色平板微孔板。5.2.2移液器吸頭。6儀器和設(shè)備8.4取180μL樣品稀釋緩沖液加入到98.7將96孔黑色平板微孔板置室溫孵育2min～3min，置熒光偏振儀上讀取最終偏振值。9結(jié)果判定FP=A-B（1）FP——對照或樣品的偏振值，mP；當(dāng)陽性對照的偏振值在120mP～250mP之間，陰性對照的偏振值在70mP～90mP之間時，方可進3△=FP-C..（2）△——樣品的偏振值與陰性對照平均值的差值，mP；FP——對照或樣品的偏振值，mP；C——陰性對照平均偏振值，mP。當(dāng)被檢樣品△＜10mP，樣品判為陰性；10mP≤△≤20mP，樣品判為可疑；△>20mP，樣品可疑樣品應(yīng)重新檢測兩次。如果兩次復(fù)檢的結(jié)果△均小于10mP，則樣品判為陰性；若兩次重檢
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