液相串聯(lián)質(zhì)譜

液相串聯(lián)質(zhì)譜液相部分的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)1質(zhì)譜的基礎(chǔ)知識(shí)2如何提高檢測(cè)器的靈敏度3

1.液相部分的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

LC-20A

液相色譜泵脫氣機(jī)進(jìn)樣器色譜柱洗脫液檢測(cè)器廢液信號(hào)數(shù)據(jù)系統(tǒng)液相色譜連接管路材料不銹鋼、Teflon、PEEK(聚醚醚酮)尺寸

液相色譜連接管路不銹鋼(可用于所有連接)能承受幾百M(fèi)Pa壓力酸性或高濃度鹽環(huán)境中易腐蝕(尤其在pH小于2時(shí))PEEK(可用于所有連接)能承受高達(dá)25MPa壓力

可在整個(gè)pH范圍(pH1-14)內(nèi)使用

不適用于高溶解性溶劑如氯仿、丙酮、THF等Teflon(用于柱后阻尼管、反應(yīng)管和排液管)化學(xué)惰性大能承受0.5MPa壓力LC-20AD的概要單向閥泵頭排液閥LC-20AD單向閥馬達(dá)和凸輪柱塞桿柱塞桿密封圈泵頭柱塞往復(fù)泵單向閥工作原理單向閥結(jié)構(gòu)拋光面球座寶石球吸液沖程排液沖程出口單向閥進(jìn)口單向閥泵頭色譜柱

較小的流量可獲得較高的離子化效率，所以在條件允許的情況下最好采用內(nèi)徑較小的色譜柱不同色譜柱保證良好分離的流量

0.3mmi.d.10μL/min1.0mmi.d.30-60μL/min2.0mmi.d.200-500μL/min4.6mmi.d.＞700μL/min色譜柱2.質(zhì)譜基礎(chǔ)知識(shí)

質(zhì)譜是什么？特殊的天平：稱量離子的質(zhì)量。質(zhì)質(zhì)譜能做什么？定性：化合物的分子量和結(jié)構(gòu)定量：混合物中目標(biāo)組分的含量領(lǐng)域：化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、環(huán)境、物理、材料、能源等

分子離子

分子離子是樣品分子失去或得到一個(gè)電子而形成的。分子離子代表完整的樣品分子，是其所有碎片離子的終極前體。由分子離子的m/z值可得到該化合物的相對(duì)分子量。分子離子如為陽(yáng)離子則以M＋·表示，“+”代表該離子具有一個(gè)正電荷，“·”代表游離基，故此離子為游離基陽(yáng)離子。如為陰離子則以M－·表示，為游離基陰離子。M＋·及M－·均含未成對(duì)電子，又稱奇電子（oddelectron）離子。分子離子提供了最有價(jià)值的質(zhì)譜信息，包括相對(duì)分子量、元素組成與碎片離子相關(guān)的結(jié)構(gòu)信息。準(zhǔn)分子離子

取決于化合物的性質(zhì)和質(zhì)譜離子化方法及條件，可生成質(zhì)子化或去質(zhì)子的分子，即[M+H]+、[M-H]－及加合物離子，如[M+Na]+、[M+Cl]－等，這些均為偶電子（evenelectron）離子。目前國(guó)際上有將兩種離子統(tǒng)稱分子離子的趨勢(shì)。經(jīng)常觀測(cè)到的加合離子(M+H)+(M+NH4)+(M+Na)+(M+K)+(M+H+CH3CN)+(M+H+H2O)++1+18+23(M+Na+H2O)+(M+Na+CH3CN)++39+19+41+42+64正離子模式負(fù)離子模式(M-H)-(M+35Cl)-(M+37Cl)-(M+HCOO)-(M+CH3COO)-(M+CF3COO)--1+35+45+59+113+37～～(M-H)-(M+35Cl)-(M+37Cl)-(M+HCOO)-(M+CH3COO)-(M+CF3COO)--1+35+45+59+113+37～～分子離子準(zhǔn)分子離子

CyclohexaneC6H12ExactMass:84.0939NominalMass:84EI質(zhì)譜圖m/zDiketometribuzinC7H12N4O2ExactMass:184.0960NominalMass:184質(zhì)譜常用概念－同位素同位素具有相同質(zhì)子數(shù)，不同中子數(shù)（或不同質(zhì)量數(shù)）同一元素的不同核素互為同位素。單同位素峰單同位素質(zhì)量：最輕的穩(wěn)定同位素的質(zhì)量（也有說(shuō)自然界中豐度最大的同位素的質(zhì)量）。單同位素峰：質(zhì)譜圖上單同位素質(zhì)量所對(duì)應(yīng)的峰。同位素峰質(zhì)譜圖中的一個(gè)峰，其元素組成中含有一個(gè)或多個(gè)非最高天然豐度的同位素。

化學(xué)上：氯的原子量是35.5。質(zhì)譜上：對(duì)于含有一個(gè)氯原子的離子，在A和A+2處各出一個(gè)峰，且相對(duì)強(qiáng)度為3:1。這是因?yàn)镃l35:Cl37≈3:1，質(zhì)譜測(cè)定的是微觀離子，不是宏觀上的平均的概念。元素分類情況：A:H,F,P,IA+1:C,NA+2:O,S,Si,Cl,Br質(zhì)譜常用概念－同位素質(zhì)譜常用概念－同位素例1：79Br100%,81Br98%≈100%MM+2M+4M+6Br,n=1:11Br2,n=2:121Br3,n=3:1331

例2：35Cl100%,37Cl32.5%MM+2M+4M+6Cl,n=1:10.325Cl2,n=2:10.6500.106Cl3,n=3:10.9750.3170.034質(zhì)譜常用概念－同位素p-ChlorophenolC6H5ClOExactMass:128.0029NominalMass:128m/z2,6-DichlorophenolC6H4Cl2OExactMass:161.9639NominalMass:162m/z單同位素質(zhì)量、名義（整數(shù)）質(zhì)量、平均質(zhì)量、準(zhǔn)確質(zhì)量質(zhì)譜圖(MassSpectrum)

質(zhì)譜儀產(chǎn)生的信息是離子的質(zhì)量及其強(qiáng)度，這些數(shù)據(jù)可以列成表。最常用的是以質(zhì)荷比(m/z)為橫座標(biāo)，強(qiáng)度為縱座標(biāo)制成的質(zhì)譜圖。50100150200250300350400450m/z0e350e3100e3150e3200e3250e3300e3350e3Int.185197207227391105295167257142268317425280369128155243404341497668246945357482正離子模式三重四極桿質(zhì)譜議

最常用的MS/MS實(shí)驗(yàn)中，第一級(jí)質(zhì)量分析器用于選擇一個(gè)前體離子（precursorion），或稱為母離子（parention）,然后，用適當(dāng)?shù)幕罨椒?，常用碰撞誘導(dǎo)解離（collision-induceddissociation,CID）使這一離子裂解生成產(chǎn)物離子（productions）或稱為子離子（daughterions）及中性碎片：

mp+→mf++mn

式中，mp+

為前體離子，mf+

為產(chǎn)物離子，mn為中性碎片。SIM：SelectedIonMonitoring選擇性離子監(jiān)測(cè)模式Scan：掃描模式MRM:MultipleReactionMonitoring多反應(yīng)監(jiān)測(cè)子離子掃描(ProductIonScan)母離子掃描(PrecursorIonScan)中性丟失掃描(NeutralLossScan)3.如何提高檢測(cè)的靈敏度如何提高檢測(cè)靈敏度（1）——質(zhì)譜霧化氣流速干燥氣流速脫溶劑管溫度加熱模塊溫度離子源電壓噴霧針的位置影響離子化效果的因素

除噴霧針的位置外，其他參數(shù)均可以通過(guò)軟件反控，因此可以使用批處理的方法進(jìn)行優(yōu)化。

如何提高檢測(cè)靈敏度（2）——液相色譜柱樣品濃度流動(dòng)相（種類和比例）與流速液相分離情況溶劑、樣品純度、系統(tǒng)的清潔度pH（甲酸—正離子模式，乙酸