實驗室生物安全管理手冊

醫(yī)院檢驗科管理制度生效日期：2017年3月12日主題內(nèi)容：生物安全管理程序文件第29頁共29頁序號主題內(nèi)容代號頁碼1總則EYJY22檢驗科生物安全管理組織結(jié)構(gòu)及職責EYJY33實驗室人員準入制度EYJY54員工健康管理制度EYJY65生物安全自查制度EYJY76生物安全資料管理制度EYJY87生物安全管理及實驗室人員培訓、考核制度EYJY98實驗室安全保衛(wèi)制度EYJY109實驗室廢物處置管理制度EYJY1110實驗室菌、毒株保存管理制度EYJY1211實驗室感染及突發(fā)事件預(yù)案EYJY1412意外事件處理及報告制度EYJY1613實驗室安全風險評估和控制程序EYJY1814實驗室消毒技術(shù)規(guī)范EYJY2215實驗室預(yù)防醫(yī)院感染管理制度EYJY2716生物安全責任制度EYJY2817實驗室生物安全要求目錄總則目的:為確保實驗室全體員工熟悉生物安全法律、法規(guī)，建立生物安全意識，保證相關(guān)工作人員掌握開展工作必需的生物安全知識和技術(shù)，避免實驗室感染，防止實驗室事故，特制定此手冊。

依據(jù):《病原微生物實驗室生物安全管理條例》《醫(yī)療廢物管理條例》《實驗室生物安全通用要求》《可感染人類的高致病性病原微生物菌毒種或樣本運輸管理規(guī)定》《實驗室生物安全手冊》《生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范》

適用范圍:適用于進入檢驗科實驗室所有工作人員。

修訂:國家及衛(wèi)生部門涉及生物安全的法律法規(guī)發(fā)生修訂更改時，本手冊應(yīng)相應(yīng)作出修訂。檢驗科生物安全管理組織結(jié)構(gòu)及職責一、醫(yī)院成立生物安全委員會，全面負責醫(yī)院生物安全工作。

責任人：時萍二、檢驗科成立生物安全三級管理組織。

一級生物安全管理：**

1.由科主任全面負責科內(nèi)生物安全管理文件的制定。

2.督促、檢查各個專業(yè)組遵守、落實生物安全情況。3.設(shè)立生物安全監(jiān)督員一名：**

4.組織全科定期、不定期的學習生物安全的相關(guān)法律、法規(guī)。

二級生物安全管理：********

1負責本專業(yè)組生物安全工作。

2全面落實生物安全管理有關(guān)本組的相關(guān)制度。

3對本組的生物安全工作要有管理、有檢查、有落實記錄。

4組內(nèi)監(jiān)督員：由本專業(yè)組長兼任本專業(yè)組的生物安全監(jiān)督員。

5全面?zhèn)鬟_相關(guān)會議內(nèi)容，在本組內(nèi)要達到知曉率100%。

三級生物安全管理：全體檢驗科成員

1認真執(zhí)行有關(guān)生物安全的各項法規(guī)、制度。

2服從本組長的工作安排。

3行為監(jiān)督員：每一位工作人員均是行為監(jiān)督員。均具有規(guī)范、遵守生物安全管理規(guī)范的責任和義務(wù)，不但要規(guī)范自己的行為，還具有隨時糾正不符合規(guī)范的行為的義務(wù)。

三、相關(guān)文件

3.1國務(wù)院《病原微生物實驗室生物安全管理條例》

3.2國務(wù)院《醫(yī)療廢物管理條例》及衛(wèi)生部《醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》

3.3《實驗室生物安全通用要求》

3.4《生物安全試驗室建筑技術(shù)規(guī)范》

3.5《醫(yī)學實驗室安全要求》

3.6《可感染人類的稿致病性病原微生物（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》

3.7《人間傳染病的病原微生物名錄》

3.8《人間傳染病的病原微生物實驗室和實驗活動生物安全審批管理辦法》

3.9《微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則》

3.10WHO《實驗室生物安全手冊》第三版（2004）

實驗室人員準入制度1.檢驗科實驗室工作人員必須接受相關(guān)生物安全知識、法規(guī)制度培訓并考試合格。2.從事實驗室工作人員必須進行上崗前體檢，由單位生物安全領(lǐng)導小組組織實施。體檢指標除常規(guī)項目外還應(yīng)包括與準備從事工作有關(guān)的特異性抗原、抗體檢測。體檢合格后建立健康監(jiān)測檔案，不符合崗位健康要求不得從事相關(guān)工作。3.從事實驗室技術(shù)人員必須具備相關(guān)專業(yè)教育經(jīng)歷，相應(yīng)的專業(yè)技術(shù)知識及工作經(jīng)驗，熟練掌握自己工作范圍的技術(shù)標準、方法和設(shè)備技術(shù)性能。4.從事實驗室技術(shù)人員應(yīng)熟練掌握與崗位工作有關(guān)的臨床意義和檢驗技術(shù)方法，能獨立進行日常診斷和檢驗技術(shù)工作，有效保證所承擔環(huán)節(jié)的工作質(zhì)量。5.從事實驗室技術(shù)人員應(yīng)熟練掌握常規(guī)消毒原則和技術(shù)，掌握意外事件和生物安全事故的應(yīng)急處置原則和上報程序。6.在滿足上述基本原則的前提下，必須是自愿從事相關(guān)實驗活動，了解所從事工作的生物安全風險，必要時在生物安全知情書上簽字。并經(jīng)實驗室負責人批準后，才能上崗工作。7.實驗活動輔助人員（廢棄物管理人員、保潔人員等）應(yīng)掌握責任區(qū)內(nèi)生物安全基本情況，了解所從事工作的生物安全風險，接受與所承擔職責有關(guān)的生物安全知識和技術(shù)，個體防護方法等內(nèi)容的培訓，熟悉崗位所需消毒知識和技術(shù)，了解意外事件和生物安全事故的應(yīng)急處置原則和上報程序。8.外單位來檢驗科參觀、學習、工作人員進入實驗室控制區(qū)域應(yīng)有相關(guān)領(lǐng)導批準并遵守實驗室的生物安全相關(guān)規(guī)章制度。進入實驗室的一般申請由實驗室負責人的批準，一個月及以上的準入需到醫(yī)務(wù)處備案。員工健康管理制度1.醫(yī)院對新從事臨床檢驗技術(shù)人員必須進行的上崗前體檢。體檢指標除常規(guī)項目外還應(yīng)包括與準備從事工作有關(guān)的特異性抗原、抗體檢測。體檢合格后建立健康監(jiān)測檔案并在上崗證上蓋章確認，不符合崗位健康要求不得從事相關(guān)工作。2.從事高致病性病原微生物操作的人員，在連續(xù)工作后進行必要的醫(yī)學觀察，臨時調(diào)離崗位的人員在重新上崗前必須進行體檢，體檢結(jié)果達到崗位健康要求后方可上崗。3.實驗室人員應(yīng)注意個人身體健康情況，出現(xiàn)不適及時報告。4.發(fā)生實驗室意外事件或生物安全事故后應(yīng)對可疑感染人員進行針對性體檢，體檢結(jié)果記入健康監(jiān)護檔案。5.實驗室技術(shù)人員要在身體狀況良好的情況下從事相關(guān)工作，發(fā)生發(fā)熱、呼吸道感染、開放性損傷、懷孕等或因工作造成疲勞狀態(tài)免疫耐受及使用免疫抑制劑等情況時，需由實驗室負責人同意從事相關(guān)工作，但不宜再從事高致病性病原微生物的相關(guān)工作。生物安全自查制度1、實驗室生物安全小組每月組織一次生物安全檢查，檢查內(nèi)容包括：生物安全管理體系運行情況、生物安全管理制度是否完善、是否落實、實驗室設(shè)施、設(shè)備和人員的狀態(tài)、應(yīng)急裝備、報警體系和撤離程序功能及狀態(tài)是否正常、可燃易燃性、傳染性以及有毒物質(zhì)的防護、控制情況、廢物處置情況等。2、科室負責人負責實驗室生物安全的全面管理，檢查、督促生物安全監(jiān)督員工作，每周進行科室生物安全工作檢查，檢查內(nèi)容包括：生物安全監(jiān)督員工作記錄、樣本的運輸、保存、使用、銷毀情況、生物安全實驗室的消毒和滅菌情況以及感染性廢物的處理情況、生物安全設(shè)備的運行、維護情況、防護物資的儲備情況。3、生物安全監(jiān)督員負責實驗室日常工作的生物安全監(jiān)督、檢查，內(nèi)容包括生物安全管理制度執(zhí)行情況、個人防護要求執(zhí)行情況、實驗室人員的生物安全操作是否規(guī)范等，及時發(fā)現(xiàn)、糾正違規(guī)行為，避免生物安全事故發(fā)生。4、對于檢查中發(fā)現(xiàn)的問題及時糾正，必要時制定糾正措施或?qū)嵤┱?，并進行跟蹤驗證。5、按照資料、檔案管理制度保存所有檢查記錄，及時歸檔。6、將自查發(fā)現(xiàn)的問題作為實驗室生物安全培訓計劃輸出。7、將自查結(jié)果上報醫(yī)院相關(guān)部門。8、為確保實驗室生物安全制度、措施落實到位，避免生物安全事故，特制訂本制度。生物安全資料管理制度1.與生物安全相關(guān)的各類活動的記錄均應(yīng)按照本制度執(zhí)行。2.生物安全實驗室的記錄、資料保存不得少于20年。3.生物安全實驗室記錄、資料應(yīng)至少包括：生物安全手冊、生物安全管理制度、人員培訓考核記錄、生物安全檢查記錄、健康監(jiān)護檔案、事故報告、分析處理記錄、廢物處置記錄、實驗記錄、樣本收集、運輸、保存、領(lǐng)用、銷毀等記錄、生物危害評估記錄、生物安全柜現(xiàn)場檢測記錄、消毒、滅菌效果監(jiān)測記錄等。4.生物安全實驗室資料檔案原則上不外借。5.因工作需要復制檔案資料者需經(jīng)批準。6.超過保存期限的檔案資料、記錄，應(yīng)通過醫(yī)院生物安全領(lǐng)導小組的討論、鑒定，批準是否實施銷毀，銷毀應(yīng)至少兩人實施，做好銷毀記錄。生物安全管理及實驗室人員培訓、考核制度1、培訓：培訓范圍：實驗室的全體工作人員。培訓內(nèi)容：①國家、鄭州市及醫(yī)院的相關(guān)法規(guī)、條例及辦法。②實驗室生物安全等相關(guān)文件。③實驗室生物安全的相關(guān)專業(yè)知識。④各種相關(guān)應(yīng)急處理程序。⑤其他涉及實驗室生物安全的有關(guān)知識。2、考核：①由《新鄭市第二人民醫(yī)院生物安全管理委員會》制定培訓考核計劃，安排具有師資資格的專家進行授課及考試。②實驗室全體人員每年至少接受1次培訓，并經(jīng)考核合格后方可上崗工作，認真做好培訓相關(guān)記錄，留存試卷。③對考試不合格的人員進行再培訓，經(jīng)考試合格后方可持證上崗工作。實驗室安全保衛(wèi)制度目的

為了做好實驗室的安全管理，做到預(yù)防為主，防患于未然，特制定本制度。

二、范圍

實驗室全體人員三、內(nèi)容

3.1

實驗室實驗室安全保衛(wèi)工作實行責任制，并制定應(yīng)急預(yù)案。

3.2

實驗室的實驗活動應(yīng)與其生物安全防護等級相適應(yīng)。

3.3

非工作人員進入實驗室須經(jīng)實驗室負責人批準。

3.4

定期對實驗室高壓蒸汽滅菌器進行校驗，確保消毒效果、計量檢定符合國家壓力容器管理的有關(guān)規(guī)定。

3.5

確保消防器材位于固定位置并能正常使用。

3.6

實驗室工作人員應(yīng)定期對重點防火部位、易燃易爆化學品使用情況進行檢查，及時消除隱患，并定期進行火災(zāi)緊急事件處置的培訓和演練。

3.7實驗室實驗室內(nèi)禁止亂拉臨時電源線。3.8

定期對實驗室電氣安全、儀器設(shè)備等進行檢查，及時發(fā)現(xiàn)、排除安全隱患。

3.9

實驗室應(yīng)配備常用工具。

實驗室廢物處置管理制度一、目的：對實驗室所有的廢棄物進行規(guī)范處理，避免污染環(huán)境二、適用范圍：本科室三、廢棄物的消毒及處理：（1）醫(yī)用垃圾與生活垃圾嚴格分開，黑色垃圾袋裝生活垃圾，黃色垃圾袋裝醫(yī)用垃圾；（2）裝盛垃圾的垃圾桶應(yīng)用腳踏式，或加蓋兒。（3）固體醫(yī)療垃圾套雙層垃圾袋，防止泄露，定時或在裝滿3/4時及時清理，每日由科室工作人員負責收集、分類、運送（出科前由科室工作人員與保潔人員、一起核實并填寫《醫(yī)療廢物轉(zhuǎn)交登記表》，送至醫(yī)院醫(yī)療廢物暫存地（保潔人員負責管理），經(jīng)專用醫(yī)療轉(zhuǎn)運車運送到指定地點，集中焚燒，轉(zhuǎn)運時應(yīng)有防止鋒利物刺破垃圾袋遺灑的防護措施。實驗室菌、毒株保存管理制度1目的為了加強菌（毒）種庫的規(guī)范化管理，確保菌（毒）種安全保存。2適用范圍適用于實驗室集中保存菌（毒）種的菌（毒）種庫和生物樣本管理。3職責3.1細菌室負責菌（毒）種庫和生物樣本日常安全管理；3.2生物安全管理小組負責菌（毒）種庫和生物樣本保管所需的安全硬件設(shè)施與設(shè)備及電源的正常供電以及相關(guān)設(shè)備的維護并落實實施，并負責菌（毒）種庫管理的督查。4工作內(nèi)容4.1菌（毒）種庫和生物樣本是保存病原性微生物的重要場所，應(yīng)符合安全可靠，陰涼通風的要求，應(yīng)確保電源的正常供電。4.2菌（毒）種庫和某些生物樣本保管必須配備安全所需的防盜門窗等設(shè)施及足夠的低溫冷凍設(shè)備如超低溫冰箱等。4.3菌（毒）種庫和生物樣本保管必須由專人負責管理，實行雙人雙鎖，取、存毒種應(yīng)有2人或以上人員同時在場進行，并做好記錄。4.4菌（毒）種庫和生物樣本保管處除管理人員外其他人員不得入內(nèi)，菌（毒）種庫不得存放與菌（毒）種工作無關(guān)的物品。4.5菌（毒）種庫和生物樣本保管處冰箱運行情況應(yīng)定時進行觀察記錄，并定期進行設(shè)備維護，確保設(shè)備的正常運行，每次進入毒種庫的人員應(yīng)簽名登記。4.6菌（毒）種庫入口處應(yīng)有明顯的標識，標明安全等級要求。4.7菌（毒）種庫保存的菌（毒）種生物樣本保管處應(yīng)有詳細的檔案資料，做到賬物相符。4.8菌（毒）種庫和生物樣本保管處應(yīng)定期進行清理，對沒有保存價值或失活的毒種應(yīng)及時按要求進行處理，處理時應(yīng)在生物安全管理小組監(jiān)督下進行。5記錄

菌（毒）種庫工作記錄、菌（毒）種保存清單和菌（毒）種取用記錄表。實驗室感染及突發(fā)事件預(yù)案1.目的：意外事故現(xiàn)場處理方法：工作人員發(fā)生意外事故時，如針刺損傷、感染性標本濺及體表或口鼻眼內(nèi)，或污染實驗臺面等均視為安全事故，應(yīng)立即進行緊急醫(yī)學處置(根據(jù)事故情況采用相應(yīng)的處理方法)。根據(jù)生物安全危害度和暴露程度，現(xiàn)場初步評估職業(yè)暴露危害程度和選擇處理方式。（一）、化學污染1.立即用流動清水沖洗被污染部位。2.立即到急診室就診，根據(jù)造成污染的化學物質(zhì)的不同性質(zhì)用藥。3.在發(fā)生事件后的48小時內(nèi)向有關(guān)部門匯報（醫(yī)生報告醫(yī)務(wù)處，護士報告護理部），并報告感染管理科。（二）、針刺傷1.被血液、體液污染的針頭或其他銳器刺傷后，應(yīng)立即用力捏住受傷部位，向離心方向擠出傷口的血液，不可來回擠壓，同時用流動水沖洗傷口；2.用75%酒精或安爾碘消毒傷口，并用防水敷料覆蓋；3.意外受傷后必須在48小時內(nèi)報告有關(guān)部門（醫(yī)生報告醫(yī)務(wù)處，護士報告護理部），并報告感染管理科、領(lǐng)取并填寫《醫(yī)療銳器傷登記表》，必須在72小時內(nèi)作HIV、HBV等的基礎(chǔ)水平檢查；4.可疑被HBV感染的銳器刺傷時，應(yīng)盡快注射抗乙肝病毒高效價抗體和乙肝疫苗；5.可疑被HCV感染的銳器刺傷時，應(yīng)盡快于被刺傷后做HCV抗體檢查，并于4－6周后檢測HCV的RNA；6.可疑被HIV感染的銳器刺傷時，應(yīng)及時找相關(guān)專家就診，根據(jù)專家意見預(yù)防性用藥，并盡快檢測HIV抗體，然后根據(jù)?？漆t(yī)生建議行周期性復查（如6周、12周、6個月等）。在跟蹤期間，特別是在最初的6－12周，絕大部分感染者不會出現(xiàn)癥狀，因此在此期間必須注意不要獻血、捐贈器官及母乳喂養(yǎng)，過性生活時要用避孕套。（三）、皮膚、粘膜、角膜被污染1.皮膚若意外接觸到血液或體液或其他化學物質(zhì)時，應(yīng)立即用肥皂和流動水沖洗；2.若患者的血液、體液意外進入眼睛、口腔，立即用大量清水或生理鹽水沖洗；3.及時到急診室就診，請?？漆t(yī)生診治；48小時內(nèi)向有關(guān)部門報告（醫(yī)生報告醫(yī)務(wù)處，護士報告護理部），并報告感染管理科領(lǐng)取并填寫相關(guān)登記表。（四）、標本污染1.棉質(zhì)工作服、衣物有明顯污染時，可隨時用有效氯500mg/l的消毒液，浸泡30-60分鐘，然后沖洗干凈。2.各種表面若被明顯污染，用1000-2000mg/l有效氯溶液撒于污染表面，并使消毒液浸過污染表面，保持30-60分鐘，再擦除，拖把或抹布用后浸于上述消毒液內(nèi)1小時。3.儀器污染應(yīng)考慮消毒方法對儀器的損傷，和對檢測項目的影響，選用適當?shù)姆椒ā?.支持性文件：5.1病原微生物實驗室職業(yè)暴露登記表5.2消毒技術(shù)規(guī)范5.3職業(yè)暴露危害評估表意外事件處理及報告制度一、實驗室發(fā)生職業(yè)暴露后按照既往進行的該種污染物的生物安全危害度評估結(jié)果，快速有效的對意外暴露人員進行緊急醫(yī)學處置；對污染區(qū)域進行有效的控制，最大限度的清除和控制污染物對周圍環(huán)境的污染和擴散；進行流行病學調(diào)查和暴露人員的醫(yī)學觀察等原則和步驟進行處理；1、根據(jù)既往進行的生物安全危害度的評估和暴露的程度即時進行現(xiàn)場緊急醫(yī)學處置，消除或最大程度降低病原微生物對暴露人員的傷害；同時，有效的污染區(qū)域進行防控，最大限度的防止污染物對周圍人員和環(huán)境的污染。2、一般性的事故可在緊急醫(yī)學處置后，要立即向?qū)嶒炇邑撠熑藞蟾媸鹿是闆r和處理方法，以及時發(fā)現(xiàn)處理中的疏漏之處。3、當重大事故發(fā)生時，在進行緊急醫(yī)學處置的同時，要立即向?qū)嶒炇邑撠熑藞蟾媲闆r；立即協(xié)調(diào)現(xiàn)場緊急處理和周圍環(huán)境污染防控；協(xié)調(diào)評估職業(yè)暴露的危害性和對暴露人員的傷害程度；對藥物可以治療和預(yù)防該污染物感染的，力爭在暴露后最短時間內(nèi)開始預(yù)防性用藥；留取暴露人員相應(yīng)的標本備檢，并同時進行醫(yī)學觀察。4、建立意外事故登記，詳細記錄事故發(fā)生的時間、地點及經(jīng)過；暴露方式；損傷的具體部位、程度；接觸物種類（培養(yǎng)液、血液或其他體液）的情況；處理方法及處理經(jīng)過；是否采用藥物預(yù)防療法；定期檢測的日期、檢測項目和結(jié)果。二、意外事故現(xiàn)場處理方法：工作人員發(fā)生意外事故時，如針刺損傷、感染性標本濺及體表或口鼻眼內(nèi)，或污染實驗臺面等均視為安全事故，應(yīng)立即進行緊急醫(yī)學處置(根據(jù)事故情況采用相應(yīng)的處理方法)。根據(jù)生物安全危害度和暴露程度，現(xiàn)場初步評估職業(yè)暴露危害程度和選擇處理方式。1、化學污染：立即用流動清水沖洗被污染部位；根據(jù)造成污染的化學物質(zhì)的不同性質(zhì)用藥；在發(fā)生事件后的48小時內(nèi)向有關(guān)部門匯報，并報告感染管理科。2、銳器刺傷：（1）被血液、體液污染的針頭或其他銳器刺傷后，應(yīng)立即采用相應(yīng)保護措施，清創(chuàng)，對創(chuàng)面進行嚴格消毒處理，并進行血源性傳播疾病的檢查和隨訪。（2）意外受傷后必須在48小時內(nèi)報告有關(guān)部門，并報告感染管理科。（3）可疑被HBV感染的銳器刺傷時，應(yīng)盡快注射抗乙肝病毒高效價抗體和乙肝疫苗；（4）可疑被HIV感染的銳器刺傷時，應(yīng)及時找相關(guān)專家就診，根據(jù)專家意見預(yù)防性用藥，并盡快檢測HIV抗體，然后根據(jù)?？漆t(yī)生建議行周期性復查（如6周、12周、6個月等）。3、皮膚、粘膜、角膜被污染（1）皮膚若意外接觸到血液或體液或其他化學物質(zhì)時，應(yīng)立即用肥皂和流動水沖洗；（2）若患者的血液、體液意外進入眼睛、口腔，立即用大量清水或生理鹽水沖洗；（3）及時就診，請?？漆t(yī)生診治；48小時內(nèi)向有關(guān)部門報告，并報告感染管理科。4、標本污染（1）棉質(zhì)工作服、衣物有明顯污染時，可隨時用有效氯500mg/l的消毒液，浸泡30-60分鐘，然后沖洗干凈。（2）各種表面若被明顯污染，用1000-2000mg/l有效氯溶液撒于污染表面，并使消毒液浸過污染表面，保持30-60分鐘，再擦除，拖把或抹布用后浸于上述消毒液內(nèi)1小時。（3）儀器污染應(yīng)考慮消毒方法對儀器的損傷，和對檢測項目的影響，選用適當?shù)姆椒ā嶒炇野踩L險評估和控制程序檢驗職業(yè)感染的現(xiàn)狀

經(jīng)血、呼吸道、粘膜傳播疾病直接危害著檢驗工作者身體健康。我國是HBV感染的高發(fā)區(qū),約有1.3億人攜帶HBV,HBV表面抗原(HBsAg)的攜帶率為8%-20%;自90年代以來HCV感染也呈上升趨勢,其感染率為3%。目前艾滋病感染在我國的流行已進入增長期。在無償獻血人群中檢出乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒、艾滋病等病毒感染占有一定的比例。經(jīng)調(diào)查顯示,針頭和玻璃碎片是主要銳器致傷因子,經(jīng)常接觸針頭者發(fā)生銳器傷的危險是不經(jīng)常接觸者的23倍。多種傳染病是通過血液傳染的,而血液檢驗中的職業(yè)暴露大多數(shù)來自實驗室工作人員在實驗操作和標本采集過程中,意外被帶病原體的血液污染破損的皮膚或被病原體感染的針頭、血常規(guī)采血針、采血玻璃管、吸頭等銳器刺破皮膚，呼吸道吸入氣溶膠也是傳播方式之一。因此,檢驗人員面臨著嚴峻的職業(yè)暴露危險。1.傳播途徑檢驗人員感染疾病的一般傳染途徑有:

（1）皮膚破損:帶有HIV、HBV、HCV、梅毒等病原體的血液,長時間接觸小傷口、潰瘍、擦傷等破損皮膚,將會造成機體的感染。

（2）穿刺:由于針頭、刀片等對皮膚的意外損傷,使帶有病毒的全血、血清或血漿進入皮下或循環(huán)系統(tǒng),造成感染。這種針頭意外損傷是職業(yè)性HBV和HIV感染最重要的原因。帶有HIV的針頭意外穿刺皮膚后,HIV感染的可能性在0--0.9%之間,平均為0.4%。而對于HBV,這個可能性在6%-30%之間,平均為18%。有學者進行了相應(yīng)的統(tǒng)計推算,每1000個艾滋病病人,每年會產(chǎn)生1例由于針頭意外造成的職業(yè)性HIV感染;而每1000個乙肝患者,每年會產(chǎn)生45例類似職業(yè)性HBV感染。由于HBV在人群中的感染率比HIV高得多,在一定人群中,每年產(chǎn)生的因針頭意外造成的職業(yè)性HBV感染比HIV多得多。（3）粘膜:由于試管未封閉、離心意外等造成的血液飛濺,帶有病原體的血液與口腔、鼻腔黏膜或眼結(jié)膜等接觸,可以造成感染。還有被HIV、HBV、HCV、梅毒等病原體污染的電話、儀器、工作臺面等接觸,也可以造成感染。（4）吸入含病原體的氣溶膠引起感染:在采血窗口或發(fā)放化驗單時,直接與病人面對面接觸交談,易感染呼吸道疾病。此外,能引起氣溶膠的操作或事故有離心、溢出或濺灑、混合、混旋、研磨、超聲以及開瓶時兩個界面的分離等。2.危害因素

（1）血源性危害:調(diào)查研究發(fā)現(xiàn),檢驗人員被針刺傷占第2位。最常見危害較大的職業(yè)傳染病有以下3種：

1）乙型肝炎:HBV是檢驗人員面臨傳播危險性最大的血源性疾病,HBV在血液中的濃度可以高達108-109拷貝/ml,檢驗人員感染率較高。HBV主要傳播途徑是經(jīng)血液的傳播,病毒攜帶者血液中HBV的濃度很高,針刺傷時,只需0.004ml，帶有HBV的血液足以使受傷者感染HBV。

2）丙型肝炎:丙肝病毒(HCV)在血液中的濃度在102-103/ml左右,主要經(jīng)血液傳播,因此通過注射、針刺、含HCV血液污染的傷口和其他密切接觸傳播。丙型肝炎大多數(shù)患者的癥狀不明顯,往往不容易被發(fā)現(xiàn),可表現(xiàn)為流感樣癥狀,有時會造成比HBV更嚴重的后果。

3）艾滋病(AIDS):近年來我國AIDS的流行對檢驗人員造成了日益嚴峻的職業(yè)性感染威脅。HIV在血液中的濃度通常在100-104拷貝/ml,被HIV污染的銳器刺傷而感染的比率為0.3%。美國疾病控制中心最新資料顯示,截止到2000年底美國醫(yī)護人員中已有57人被確診感染了HIV,其中實驗室技術(shù)人員19人。

（2）呼吸道、接觸及節(jié)肢動物叮咬危害因素病原微生物感染：病原微生物實驗室、特別是高致病性病原微生物實驗室內(nèi)操作的任何疏忽、失誤都可能造成難以彌補的損失。常見感染：結(jié)核分枝桿菌、腸道致病菌等。

3．防護措施

（1）增強檢驗工作人員的防護意識及防護行為：為了最大限度地減少危害,檢驗工作人員應(yīng)主動地從多方面了解關(guān)于HBV、HCV、HIV等相關(guān)的知識,了解各種病毒的傳播方式,使自己知道采取什么樣的防護措施。醫(yī)院和檢驗科應(yīng)高度重視,定期加強教育,讓檢驗工作人員都意識到自我防護的重要性,自覺地養(yǎng)成良好的習慣。

（2）規(guī)范操作程序：各類醫(yī)療廢物、垃圾必須分類放置,及時消毒后,再由衛(wèi)生清潔人員取走。特別注意對損傷性醫(yī)療廢物的及時處理。嚴格防止感染或致病因子外泄而污染環(huán)境。要嚴格規(guī)章制度,養(yǎng)成良好的工作習慣。檢驗科應(yīng)制定一套有關(guān)衛(wèi)生防護的規(guī)章制度,人人都應(yīng)自覺遵守。如在實驗室內(nèi)禁止吸煙、吃東西、接聽手機;在免疫學檢驗室和細菌室工作,要戴口罩和手套。防止各種液體飛濺,必需避免手或皮膚直接接觸,若有意外污染應(yīng)及時消毒、沖洗并擦干飛濺出的液體。在離心機停止轉(zhuǎn)動前時,不要打開頂蓋,以減少氣溶膠的產(chǎn)生。更不要用手去使離心機減速,避免機械損傷的發(fā)生。

（3）避免銳器損傷,熟練掌握銳利器械的使用：感染性的各種針管、吸管、吸頭、試管、玻片等用后及時放在專用容器內(nèi);用過的針頭不要套回針帽,避免刺傷。銳器損傷后立即擠出傷口處的血液,用肥皂水和流水清洗傷口,2%碘伏消毒后紗布包扎,可套橡皮指套(或橡皮手套),下班前洗手再重新消毒包扎,并準確記錄上報,確認損傷器械是否來自有傳染性疾病的患者,以使受傷者及時得到監(jiān)測和治療。

（4）重視手部清潔：院內(nèi)感染病原體傳播最主要媒介是污染的手。戴醫(yī)用乳膠手套可以為醫(yī)務(wù)人員提供很好的保護。乳膠手套盡管不能避免針頭造成的機械損傷,但可以在很大程度上減少皮膚與血液的接觸。而且,當針頭造成意外損傷后,乳膠手套還可以起到一種阻擋、封閉作用,減少進入傷口的血量,從而降低感染。正確的洗手方法可使手表面的暫居菌減少1000倍,用普通肥皂和清水擦揉15s以上,可清除暫居菌或降低其在皮膚上的密度,搓洗15s,手表面的金黃色葡萄球菌可下降77%,洗2分鐘可降低85%;對銅綠假單胞菌效果更好,搓洗12s便可去除92%,洗2分鐘可去除97.8%。

（5）職業(yè)暴露的局部處理：工作中職業(yè)暴露后現(xiàn)場急救處理非常重要,若黏膜暴露應(yīng)用生理鹽水或清水反復沖洗干凈;皮膚意外接觸到血液等污染物,應(yīng)立即以肥皂和清水沖洗;若被血液污染的針頭或儀器等銳器刺傷,對傷口進行輕輕擠壓,盡可能擠出損傷處的血液,用肥皂和流水清洗傷口,用70%酒精、0.2%-0.5%過氧乙酸、0.5%碘伏等浸泡或涂抹消毒,并包扎傷口、帶手套等,發(fā)生意外傷害暴露后要立即進行傷口局部處理,并立即報告預(yù)防保健部門,受傷者及患者進行HBV、HCV、HIV和梅毒等檢測。依據(jù)檢測結(jié)果盡快采取相應(yīng)的補救措施,減少職業(yè)感染率的發(fā)生。實驗室消毒技術(shù)規(guī)范一.適用范圍：本規(guī)范適用于實驗室器材、檢驗單、廢棄標本及相關(guān)人員的消毒。檢驗科的工作場所分為清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)。清潔區(qū)包括辦公室、會議室、休息室、儲藏室、培養(yǎng)基室和試劑室；半污染區(qū)指衛(wèi)生通道、更衣室、緩沖間；污染區(qū)包括標本收集、存放、處理室、檢測室。二.消毒原則：清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)應(yīng)分別進行常規(guī)清潔、消毒處理。清潔區(qū)和污染區(qū)的消毒要求、方法和重點有所不同，若清潔區(qū)和污染區(qū)無明顯界限，按污染區(qū)處理。清潔區(qū)若無明顯污染，應(yīng)每天開窗通風換氣數(shù)次，濕式清潔臺面、地面1次；污染區(qū)在每天開始工作前及結(jié)束工作后，臺面、地面應(yīng)用含有效氯500mg/L的含氯消毒液各擦拭1次，空氣選用循環(huán)風動態(tài)消毒法消毒處理，廢棄標本應(yīng)分類進行消毒處理后排放。半污染區(qū)環(huán)境消毒同污染區(qū)，工作衣、帽每周換洗2次，拖鞋每天用含有效溴或有效氯500mg/L的二溴海因或含氯消毒劑浸泡或擦拭1次。所以清潔消毒器材（抹布、拖把、容器）不得與污染區(qū)或半污染區(qū)共用。工作人員每次下班前應(yīng)用肥皂流水洗手1min-2min。結(jié)核病專業(yè)檢驗室工作人員，每次連續(xù)佩戴口罩不得超過4h，工作衣若有明顯致病菌污染或從事烈性菌標本檢驗后，應(yīng)隨時更換，及時進行消毒滅菌。三.檢驗單的消毒：污染檢驗單送出前用便攜式高強度紫外線消毒器距檢驗單面不高于3.0cm緩慢移動，照射3s-5s，必須兩面照射；也可用經(jīng)衛(wèi)生部批準的專用甲醛消毒器薰蒸消毒。四.空氣的消毒：對污染區(qū)內(nèi)明顯產(chǎn)生傳染性氣溶膠的操作（攪拌、研磨、離心等），特別是可通過呼吸道傳播又含有高度傳染性微生物（炭疽桿菌、分枝桿菌、球孢子菌、組織胞漿菌、軍團菌、流行性感冒病毒等）的操作，應(yīng)在生物安全柜（負壓）內(nèi)進行，使空氣經(jīng)細菌濾器或熱力殺菌通道排出室外，柜內(nèi)形成負壓。要求嚴格無菌的操作如傾倒培養(yǎng)基、菌種轉(zhuǎn)種和細胞轉(zhuǎn)瓶等，應(yīng)在100級潔凈間或100級生物安全柜內(nèi)進行，使空氣經(jīng)初效、中效及高效濾器進入室（柜）內(nèi)，形成正壓，極大限度地減少污染。但應(yīng)注意及時更換濾器，定時檢測濾效。五.器材消毒：除已知無傳染性器材外，凡直接接觸或間接接觸過臨床檢驗標本的器材均視為具有傳染性，應(yīng)進行消毒處理。1.金屬器材①小的金屬器材如接種環(huán)，用酒精燈燒灼滅菌。當接種環(huán)上有較多污染物時，應(yīng)先在火焰上方，把接種環(huán)烤干后再緩慢伸入火焰灼燒，以免發(fā)生爆裂或濺潑而污染環(huán)境；②較大的金屬器材或銳利的刀剪受污染后不宜燒灼滅菌，可用2%堿性/中性戊二醛溶液浸泡2h后，潔凈水沖洗、瀝干，再用干熱或壓力蒸汽滅菌。2.玻璃器材①采集標本的器材如玻片、吸管、玻瓶要做到一人一份一用一消毒。污染的吸管、試管、滴管、離心管、玻片、玻棒、玻瓶、平皿等，應(yīng)立即浸入含有效氯1000mg/L含氯消毒劑中浸泡4h，再清洗干凈、烘干。也可浸入洗滌劑或肥皂液中煮沸15min-30min，反復洗刷，瀝干，37℃-60℃烘干；②接種培養(yǎng)過的瓊脂平板應(yīng)壓力蒸汽滅菌30min，趁熱將瓊脂倒棄，再刷洗；③用于生化檢驗或免疫學檢驗者，洗刷后浸泡于重絡(luò)酸鉀-濃硫酸清潔液內(nèi)24h，徹底沖洗，最后用蒸餾水沖洗3遍，瀝干，烘干；④用于微生物檢驗者，吸管一端應(yīng)塞少量棉花，管或瓶應(yīng)有塞，再用牛皮紙包好，可用于熱160℃2h滅菌，待冷至40℃以下才能開烤箱的門，以免玻璃炸裂；若箱內(nèi)易燃物品冒煙或發(fā)生焦味，應(yīng)立即切斷電源并關(guān)閉氣孔，切勿開啟箱門以免導致燃燒；也可用壓力蒸汽121℃，102.9kPa(1.05kg/cm2)滅菌15min-30min，吸管應(yīng)直放，空吸管和空瓶口應(yīng)朝下，且不能密閉，帶螺旋帽的管瓶，滅菌時應(yīng)將螺旋帽放松。3.塑料制品①一次性使用的塑料制品如一次性注射器用后及時進行毀形、消毒，薄膜手套用后放污物袋內(nèi)集中進行無害化處理；②耐熱的塑料如聚丙烯、聚碳酸酯、尼龍及聚四氟乙烯制的器材，可用肥皂或洗滌劑溶液煮沸15min-30min，洗凈后，用壓力蒸汽121℃，102.9kPa滅菌20min-30min；③不耐熱的聚乙烯、聚苯乙烯，可用0.5%過氧乙酸或1000mg/L有效氯的溶液浸泡30min-60min，再洗凈，晾干；也可用環(huán)氧乙烷滅菌器滅菌，800mg/L于37℃-68℃和相對濕度40%-80%，作用6h；若為薄膜或板也可用高強度紫外線消毒器照射1s-3s。④一般血清學反應(yīng)使用過的塑料板可直接浸入1%鹽酸溶液內(nèi)2h以上或過夜；對肝炎檢驗的反應(yīng)板可用0.5%過氧乙酸或1%過氧戊二酸溶液或2000mg/L有效氯或有效溴消毒液浸泡2h-4h后，洗凈再用。4.橡膠制品橡膠制品如手套、吸液管（球）受污染后可用肥皂或0.5%洗滌劑溶液煮沸15min-30min，煮時吸液管（球）應(yīng)全部浸入水內(nèi)，清洗后晾干；必要時再用壓力蒸汽，115℃滅菌40min。5.紡織品無紡布帽子、工作衣、口罩等用后放污物袋內(nèi)集中進行無害化處理；棉質(zhì)工作服、帽子、口罩、鞋套等放專用污物袋內(nèi)，送洗衣房清洗，每周2次，有明顯污染時，可隨時用有效氯或有效溴500mg/L的消毒液，作用30min-60min，或壓力蒸汽121℃20min.6.貴重儀器①顯微鏡、分光光度計、離心機、天平、酶標檢測儀、細胞計數(shù)器械、積壓液系列化分析儀、氣相色譜儀、冰箱、培養(yǎng)箱等局部輕度污染，可用2%堿性或中性戊二醛溶液或0.5%醋酸氯己定-乙醇溶液擦拭；污染嚴重時，可用環(huán)氧乙烷消毒。②若離心時離心管未密閉，試管破裂，液體外溢，應(yīng)消毒離心機內(nèi)部，特別是有可能受肝炎病毒或分枝桿菌污染時，宜戴上手套用2%堿性或中性戊二醛溶液擦拭消毒，作用30min-60min；或整機用環(huán)氧乙烷消毒。六.手的消毒工作前、工作后、或檢驗同類標本后再檢驗另一類標本前，均須用肥皂流水洗手2min-3min，搓手使泡沫布滿手掌手背及指間至少10s，再用流水沖洗，若手上有傷口，應(yīng)戴手套接觸標本。水龍頭應(yīng)用非手觸式開關(guān)；肥皂應(yīng)保持干燥或用瓶裝液體肥皂，每次使用時壓出；洗手后采用紅外線自動干手機將手吹干或消毒紙巾、紗布或毛巾擦干，不宜設(shè)置公用擦手布；肝炎或結(jié)核專業(yè)檢驗室工作人員應(yīng)戴手套，當明顯受致病菌污染，或從事有強傳染性病菌如霍亂、炭疽等檢驗后，應(yīng)立即用0.2%過氧乙酸溶液或1000mg/L有效氯或有效溴消毒液浸泡3min，然后用清水沖洗。七.廢棄標本及其容器的消毒處理①采集檢驗標本或接觸裝有檢驗標本的容器，特別是裝有肝炎和結(jié)核的檢驗標本者，應(yīng)帶手套，一次性使用的手套用后放收集袋內(nèi)，集中燒毀；可反復使用者用后放消毒液內(nèi)集中消毒；無手套可用指套使皮膚不直接與容器表面接觸，用后將紙放入污物袋內(nèi)燒毀；②夾取標本的工具，如鉗、鑷、接種環(huán)、吸管等用后均應(yīng)消毒清潔，進行微生物檢驗時，應(yīng)重新滅菌，金屬工具可燒灼滅菌或消毒液浸泡；玻璃制品可干熱或壓力蒸汽滅菌；③廢棄標本如尿、胸水、腹水、腦脊液、唾液、胃液、腸液、關(guān)節(jié)腔液等每100mL加漂白粉5g或二氯異氰尿酸鈉2g，攪勻后作用2h-4h倒入廁所或糞池內(nèi)；痰、膿、血、糞（包括動物糞便）及其它固形標本，焚燒或加2倍量漂白粉溶液或二氯異氰尿酸鈉溶液，拌勻后作用2h-4h；若為肝炎或結(jié)核病者則作用時間應(yīng)延長至6h后倒入廁所或化糞池；④盛標本的容器，若為一次性使用紙質(zhì)容器及其外面包被的廢紙，應(yīng)焚毀；對可再次使用的玻璃、塑料或陶瓷容器，可煮沸15min，可用1000mg/L有效氯的漂白粉澄清液或二氯異氰尿酸鈉溶液浸泡2h-6h，消毒液每日更換，消毒后用水洗凈或流水刷洗，瀝干；用于微生物培養(yǎng)采樣者，用壓力蒸汽滅菌后備用；⑤廢棄標本及其容器應(yīng)有專門密閉不漏水的污物袋（箱）存放，專用集中、燒毀或消毒，每天至少處理一次。八．實驗室污染區(qū)的消毒實驗室污染區(qū)的各種表面消毒包括：①桌椅等表面的消毒：每天開始工作前用濕布抹擦1次，地面用濕拖把擦1次，禁用干抹干掃，抹布和拖把等清潔工具各室專用，不得混用，用后洗凈晾干。下班前用500mg/L有效含氯消毒劑。地面的消毒：用上述消毒劑拖擦。②各種表面也可用便攜式高強度紫外線消毒器近距離表面照射消毒。③若被明顯污染，如具傳染性的標本或培養(yǎng)物外溢、濺潑或