陜西省西安市一中年2025屆高三二診模擬考試生物試卷含解析

陜西省西安市一中年2025屆高三二診模擬考試生物試卷考生請注意：1．答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內(nèi)，不得在試卷上作任何標記。2．第一部分選擇題每小題選出答案后，需將答案寫在試卷指定的括號內(nèi)，第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3．考生必須保證答題卡的整潔?？荚嚱Y(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．如圖為某反射弧的部分結(jié)構(gòu)示意圖，虛線內(nèi)代表神經(jīng)中樞，下列敘述正確的是()A．a(chǎn)端與效應器相連接，b端與感受器相連B．c處的液體是組織液，其理化性質(zhì)的改變會影響興奮的傳遞C．在d、e點之間連接了靈敏電流計，刺激F點和G點都能使電流計發(fā)生相同的偏轉(zhuǎn)D．把某藥物放在c處，刺激e點，d處無電位變化，說明該藥物能阻斷神經(jīng)元之間的興奮傳遞2．下列有關(guān)基因工程的說法正確的是（）A．如果某種生物的cDNA文庫中的某個基因與該生物的基因組文庫中的某個基因控制的性狀相同，則這兩個基因的結(jié)構(gòu)也完全相同B．一個基因表達載體的組成，除了目的基因外，還必須有啟動子、終止密碼子和標記基因C．目的基因進入受體細胞，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化D．將目的基因?qū)胫参锛毎蛣游锛毎某Ｓ梅椒ㄊ秋@微注射法3．細胞分化是活細胞的正常生命活動，下列有關(guān)細胞分化的敘述，不正確的是（）A．細胞分化是生物個體發(fā)育的基礎(chǔ)B．細胞分化使細胞DNA發(fā)生了改變C．細胞分化使細胞功能趨向?qū)ｉT化D．細胞分化使細胞器數(shù)目發(fā)生改變4．科學家發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)癌細胞的線粒體缺少嵴，因此即使在有氧情況下，癌細胞也主要依賴無氧呼吸提供能量?下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．癌細胞中的乳酸含量比正常細胞中的多B．癌細胞消耗的葡萄糖量比正常細胞的多C．癌細胞的線粒體缺陷主要影響有氧呼吸的第三階段D．癌細胞的線粒體功能缺陷是由原癌基因突變導致的5．瘧原蟲是一類寄生性的單細胞動物，是瘧疾的病原體，在人體內(nèi)寄生于肝細胞和紅細胞中。瘧原蟲的寄生會使紅細胞膜發(fā)生變化，它在細胞內(nèi)的大量增殖可使紅細胞裂解死亡。相關(guān)研究表明，未感染和感染瘧原蟲的紅細胞中葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白GLUT1表達量無明顯差異，而其磷酸化水平可能存在差異。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．瘧原蟲會通過減少紅細胞膜葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白的數(shù)量，減弱其細胞代謝B．瘧原蟲通過引發(fā)肝細胞、紅細胞的細胞膜流動變形而進入宿主細胞C．鐮狀細胞貧血癥患者不易感染瘧原蟲，可能與細胞表面糖蛋白變化有關(guān)D．瘧原蟲形態(tài)的維持與蛋白質(zhì)纖維形成的細胞骨架有關(guān)6．下列有關(guān)生物進化理論的敘述。錯誤的是（）A．與自然選擇學說相比，現(xiàn)代生物進化理論解釋了遺傳和變異的本質(zhì)B．現(xiàn)代生物進化理論認為生物進化以種群為單位、以可遺傳變異為基礎(chǔ)C．新物種的形成一般離不開變異、選擇和隔離三個基本環(huán)節(jié)D．生物變異和進化的不定向性，導致生物具有多樣性和適應性二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）世界衛(wèi)生組織將每年12月1日定為世界艾滋病日。2019年的世界艾滋病日，我國宣傳活動主題是“社區(qū)動員同防艾，健康中國我行動”。該主題意在強調(diào)包括參與艾滋病防治工作的社會組織、基層醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)、居民委員會、村民委員會等社區(qū)的優(yōu)勢和作用，強調(diào)個人健康責任意識，與政府、部門和其他社會力量一起，共同防控艾滋病和推進“健康中國行動”，為遏制艾滋病流行和健康中國建設(shè)做出貢獻。艾滋病是由人類免疫缺陷病毒（HIV）引起的，死亡率極高。下圖為HIV的結(jié)構(gòu)模式圖，其外膜是類脂包膜，來自宿主細胞的細胞膜。請回答下列問題：（1）HIV外膜的化學成分主要是________________________。HIV專一性攻擊人體的T淋巴細胞，從細胞膜結(jié)構(gòu)角度分析，其原因最可能是________________________。（2）HIV感染T淋巴細胞后，以_____________為模板合成DNA，然后再表達出膜蛋白等蛋白質(zhì)，整個過程中遺傳信息的流動方向是___________________________（用圖解表示）。（3）人體的免疫系統(tǒng)能夠成功地抵御大多數(shù)病毒，卻不能抵御HIV，其原因是__________________________________________。8．（10分）VNN1基因（1542bp）與炎癥相關(guān)性疾病有關(guān)，GFP基因（4735bp）控制綠色熒光蛋白的合成，該蛋白可在相應波長的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。某研究小組進行鼠源GFP-VNNI重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其功能研究，回答下列問題：（l）為構(gòu)建重組質(zhì)粒，研究小組從數(shù)據(jù)庫查找到VNNl的DNA序列，并設(shè)計引物。上游引物：5?-AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC-3?下劃線為HindⅢ酶切位點），下游引物：5?-GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA-3?（下劃線為BamHI酶切位點），之后進行PCR擴增，PCR的原理是________。擴增后的VNNI基因要與含GFP基因的載體連接，需用________（填具體酶）切割VNNI基因和含GFP基因的載體，再用________酶處理，構(gòu)建重組質(zhì)粒。（2）GFP基因在重組質(zhì)粒中可作為________________，其作用是________。用之前相同的限制酶對GFP-VNNI重組質(zhì)粒切割后，進行電泳鑒定時得到如圖1所示的部分條帶，結(jié)果表明________。（3）IL-6為體內(nèi)重要的炎癥因子，能與相應的受體結(jié)合，激活炎癥反應。圖2為GFP-VNNI重組質(zhì)粒對細胞分泌IL-6的影響，由此說明________________，同時發(fā)現(xiàn)與正常組比較，空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組IL-6的表達有輕微升高，造成這種現(xiàn)象的可能原因是________________________。9．（10分）已知果蠅的長翅和短翅、紅眼和棕眼分別由兩對獨立遺傳的等位基因（A和a、B和b）控制，這兩對基因不在Y染色體上。為了確定這兩對相對性狀的顯隱性關(guān)系，以及這兩對等位基因的位置，研究小組讓一只雌性長翅紅眼果蠅與一只雄性長翅棕眼果蠅雜交，所得F1的表現(xiàn)型及比例為長翅紅眼：長翅棕眼：短翅紅眼：短翅棕眼=3:3:1:1。請回答：（1）翅形和眼色這兩對基因的遺傳遵循________________定律。（2）分析上述結(jié)果，可以得出的結(jié)論是________________。對性狀的顯隱性關(guān)系以及基因的位置還可作出________________種合理的假設(shè)，若理論上分析F1代長翅紅眼果蠅中雌性個體所占的比例為0，F(xiàn)1代短翅紅眼果蠅中雄性個體所占的比例為1，則所作的假設(shè)為________________。（3）用帶熒光標記的B、b基因共有的特有序列作探針，與親代雄果蠅細胞裝片中各細胞內(nèi)染色體上的B、b基因雜交，通過觀察熒光點的個數(shù)可以判斷眼色基因的位置。在一個處于有絲分裂后期的細胞中，若觀察到________________個熒光點，則眼色基因位于常染色體上；若觀察到________________個熒光點，則眼色基因位于X染色體上。（4）果蠅一種突變體的X染色體上存在ClD區(qū)段（用XClD表示）：D基因表現(xiàn)顯性棒眼性狀，l基因的純合子在胚胎期死亡（即XClDXClD與XClDY不能存活），正常果蠅的X染色體無ClD區(qū)段（用X+表示）。讓突變體雌果蠅與正常眼雄果蠅雜交，F(xiàn)1代棒眼果蠅所占的比例為________________，寫出遺傳圖解________________。10．（10分）癌細胞表面蛋白“PDL-1”與T細胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后，可抑制T細胞活性并啟動其凋亡，導致腫瘤細胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進行克隆、表達及生物學活性鑒定，為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板；設(shè)計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物，通過____________________技術(shù)擴增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建表達載體。該表達載體的組成，除了目的基因、標記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴增重組DNA。（4）將擴增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達外源基因的原代293T細胞。一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，檢測細胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學活性和功能，則可裂解293T細胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細胞，其目的是_________________________。11．（15分）2018年！月25日，中科院神經(jīng)科學研究所研究團隊利用類似克隆羊“多莉”的體細胞克隆技術(shù)克隆的獼猴“中中”和“華華”，登，上了全球頂尖學術(shù)期刊《細胞》的封面，該成果標志著中國率先開啟了以體細胞克隆猴作為實驗動物模型的新時代。下圖是體細胞克隆猴的技術(shù)流程圖，請據(jù)圖回答問題。（1）圖中選擇獼猴胚胎期而非成年期的成纖維細胞進行培養(yǎng)，其原因是_________。剛放入培養(yǎng)瓶中的細胞沉降到瓶底部后首先會出現(xiàn)___________現(xiàn)象。每一次傳代培養(yǎng)時，常利用_________酶消化處理，制成細胞懸液后轉(zhuǎn)入到新的培養(yǎng)瓶中。（2）圖示過程涉及的主要技術(shù)有_________（答出三點即可）。以體細胞克隆猴作為實驗動物模型的顯著優(yōu)勢之一是同-批克隆猴群的遺傳背景相同，圖中克隆猴的遺傳物質(zhì)主要來自_______。（3）圖中步驟①是克隆猴的技術(shù)難點之一，需要將卵母細胞培養(yǎng)到_________后進行去核操作，而后用_________方法激活受體細胞，使其完成分裂和發(fā)育。（4）體細胞克隆猴的另外一個技術(shù)難點是猴的體細胞克隆胚胎發(fā)育差。科學家發(fā)現(xiàn)，胚胎發(fā)育障礙與克隆胚胎基因組上大量組蛋白的甲基化密切相關(guān)。由此推測，圖中Kdm4dmRNA翻譯產(chǎn)生的酶的作用是_____。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

分析題圖，該圖的神經(jīng)傳導方向應該是a→d→c→e，所以a連接感受器，c連接效應器?！驹斀狻緼.分析反射弧的結(jié)構(gòu)示意圖可知，a連接感受器，c連接效應器，A錯誤；B.c處為組織液，如果理化性質(zhì)改變很容易影響神經(jīng)遞質(zhì)在兩神經(jīng)間的傳遞，B正確；C.在d、e點之間連接了靈敏電流計，神經(jīng)沖動只能由d點傳到e，刺激F點，神經(jīng)沖動先傳至d，再傳至e，故電流計會有2次偏轉(zhuǎn)，刺激G點神經(jīng)沖動只能傳至e，故電流計會有1次偏轉(zhuǎn)，故電流計的偏轉(zhuǎn)不相同，C錯誤；D.神經(jīng)沖動是單向傳導的，只能由d點傳到e，所以即使不放藥物，刺激e點d點也不會有電位變化，D錯誤。2、C【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；(2)基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻緼、如果某種生物的cDNA文庫中的某個基因與該生物的基因組文庫中的某個基因控制的性狀相同，但這兩個基因的結(jié)構(gòu)不完全相同，因為基因組文庫中的基因中含有內(nèi)含子、啟動子等結(jié)構(gòu)，而cDNA文庫中的基因中不含這些結(jié)構(gòu)，A錯誤；B、一個基因表達載體的組成，除了目的基因外，還必須有啟動子、終止子和標記基因，終止密碼子位于mRNA上，B錯誤；C、目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化，C正確；D、將目的基因?qū)胫参锛毎某Ｓ梅椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，導入動物細胞的常用方法是顯微注射法，D錯誤；故選C。3、B【解析】

細胞分化的概念：在個體發(fā)育中，由一個或一種細胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細胞分化的實質(zhì)：遺傳信息的執(zhí)行情況不同。細胞分化的意義：是生物個體發(fā)育的基礎(chǔ)；使多細胞生物中的細胞趨向?qū)ｉT化，有利于提高各種生理功能的效率。在細胞分化過程中，細胞的遺傳信息和細胞的數(shù)量不變?！驹斀狻緼、細胞分化發(fā)生在生物體的整個生命過程中，是生物個體發(fā)育的基礎(chǔ)，A正確；B、細胞分化的實質(zhì)是基因選擇性的表達，細胞DNA不變，B錯誤；C、細胞分化使多細胞生物的細胞趨向?qū)ｉT化，有利于提高各種生理功能的效率，C正確；D、由于細胞分化使細胞功能趨向?qū)ｉT化，細胞器的數(shù)目發(fā)生改變，D正確。故選B?！军c睛】本題主要考查細胞分化有關(guān)知識，答題關(guān)鍵在于掌握細胞分化的概念、實質(zhì)和意義。4、D【解析】

有氧呼吸和無氧呼吸的過程：（1）有氧呼吸可以分為三個階段：第一階段：在細胞質(zhì)的基質(zhì)中：1分子葡萄糖被分解為2分子丙酮酸和少量的還原型氫，釋放少量能量；第二階段：在線粒體基質(zhì)中進行，丙酮酸和水在線粒體基質(zhì)中被徹底分解成二氧化碳和還原型氫；釋放少量能量；第三階段：在線粒體的內(nèi)膜上，前兩個階段產(chǎn)生的還原型氫和氧氣發(fā)生反應生成水并釋放大量的能量。（2）無氧呼吸過程：第一階段：和有氧呼吸第一階段相同。第二階段：在細胞質(zhì)基質(zhì)中丙酮酸重新生成乳酸，一般植物細胞內(nèi)生成酒精和二氧化碳?！驹斀狻緼、由于癌細胞在有氧情況下也主要依賴無氧呼吸提供能量，所以癌細胞中乳酸含量比正常細胞中的多，A正確；B、無氧呼吸提供的能量較少，所以癌細胞消耗的葡萄糖量比正常細胞的多，B正確；C、癌細胞的線粒體缺少嵴，所以主要影響了有氧呼吸第三階段，C正確；D、原癌基因調(diào)控細胞周期，如果該基因突變則使細胞周期紊亂，而不是影響線粒體的結(jié)構(gòu)，D錯誤。故選D?！军c睛】本題需要抓住題干中“大多數(shù)癌細胞的線粒體缺少嵴”，結(jié)合有氧呼吸的過程進行解答。5、A【解析】

由題意“未感染和感染瘧原蟲的紅細胞中葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白GLUT1表達量無明顯差異，而其磷酸化水平可能存在差異”，說明瘧原蟲的感染不影響基因的表達，通過影響葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白GLUT1的磷酸化影響葡萄糖的運輸?！驹斀狻緼、由“未感染和感染瘧原蟲的紅細胞中葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白GLUT1表達量無明顯差異”可知，感染瘧原蟲不會減少紅細胞膜葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白的數(shù)量，A錯誤；B、瘧原蟲是單細胞動物，通過其細胞膜與肝細胞、紅細胞的膜融合進入宿主細胞，該過程依賴細胞膜的流動性，B正確；C、糖蛋白具有識別作用，鐮狀細胞貧血癥患者不易感染瘧原蟲，可能與細胞表面糖蛋白變化有關(guān)，C正確；D、蛋白質(zhì)纖維形成的細胞骨架與細胞形態(tài)的維持有關(guān)，D正確。故選A。6、D【解析】

現(xiàn)代生物進化理論的基本觀點：種群是生物進化的基本單位，生物進化的實質(zhì)在于種群基因頻率的改變；突變和基因重組產(chǎn)生生物進化的原材料；自然選擇使種群的基因頻率發(fā)生定向的改變并決定生物進化的方向；隔離是新物種形成的必要條件?！驹斀狻緼、達爾文的自然選擇學說是在拉馬克的用進廢退和獲得性遺傳的觀點基礎(chǔ)上形成的，但不能科學地解釋遺傳和變異的本質(zhì)，現(xiàn)代生物進化理論能夠解釋遺傳和變異的本質(zhì)，A正確；B、現(xiàn)代生物進化理論認為種群是生物進化的基本單位，可遺傳變異（突變和基因重組）為生物進化提供原材料，是進化的基礎(chǔ)，B正確；C、突變和基因重組、自然選擇及隔離是物種形成過程的三個基本環(huán)節(jié)，通過它們的綜合作用，種群產(chǎn)生分化，最終導致新物種形成，C正確；D、變異為進化提供基礎(chǔ)，生物的變異是不定向性的，進化的方向是定向的，D錯誤。故選D?！军c睛】解答此題要求考生識記現(xiàn)代生物進化理論的主要內(nèi)容，能結(jié)合所學的知識準確判斷各選項。二、綜合題：本大題共4小題7、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)（以及少量糖類）T淋巴細胞具有HIV的特異性受體，其他細胞缺乏H1V的特異性受體自身的RNARNA→DNA→RNA→蛋白質(zhì)HIV可殺死在免疫系統(tǒng)中起重要作用的T淋巴細胞，當T淋巴細胞被殺死后，免疫系統(tǒng)幾乎處于癱瘓狀態(tài)，因而不能抵御HIV【解析】

1、細胞膜的主要成分是脂質(zhì)（約占）50%和蛋白質(zhì)（約占40%），此外還有少量的糖類（占2%～10%），組成細胞膜的脂質(zhì)中，磷脂最豐富，磷脂構(gòu)成了細胞膜的基本骨架。2、HIV的增殖過程：其遺傳物質(zhì)RNA，首先逆轉(zhuǎn)錄形成DNA并整合到宿主細胞DNA上，再轉(zhuǎn)錄形成RNA，進而翻譯形成蛋白質(zhì)，RNA和蛋白質(zhì)組裝形成子代病毒。【詳解】（1）根據(jù)題意，HIV外膜是類脂包膜，來自宿主細胞的細胞膜，則其化學成分主要是脂質(zhì)和蛋白質(zhì)（以及少量糖類）；HIV專一性攻擊人體的T淋巴細胞，從細胞膜結(jié)構(gòu)角度分析，其原因最可能是T淋巴細胞具有HIV的特異性受體，其他細胞缺乏HIV的特異性受體。（2）HIV感染T淋巴細胞后，以自身的RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成DNA，然后再表達出膜蛋白等蛋白質(zhì)，該過程中遺傳信息的流動方向是RNA→DNA→RNA→蛋白質(zhì)。（3）人體的免疫系統(tǒng)能夠成功地抵御大多數(shù)病毒，卻不能抵御HIV是因為HIV可殺死在免疫系統(tǒng)中起重要作用的T淋巴細胞，當T淋巴細胞被殺死后，免疫系統(tǒng)幾乎處于癱瘓狀態(tài)。【點睛】本題圍繞HIV考查細胞膜的成分、免疫調(diào)節(jié)以及中心法則等相關(guān)知識，意在考查考生的應用能力和理解所學知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)的能力；能運用所學知識，準確判斷問題的能力。8、DNA雙鏈復制HindⅢ酶和BamHⅠ酶DNA連接標記基因鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含目的基因的細胞篩選出來VNN1基因已插入到含GFP基因的載體中（合理即可）VNN1基因表達產(chǎn)物能促進細胞分泌炎癥因子IL-6操作過程中對細胞的損傷（或用到的化學試劑對細胞具有一定的毒性作用），可以激活相應細胞分泌炎癥因子IL-6【解析】

基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲?。涸嘶虿扇≈苯臃蛛x獲得，真核基因是人工合成，人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學合成法。第二步：基因表達載體的構(gòu)建第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ秋@微注射技術(shù)；將目的基因?qū)胛⑸锛毎合扔肅a2+處理細胞，使其成為感受態(tài)細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。第四步：目的基因的檢測和表達。【詳解】（1）PCR的原理是DNA雙鏈復制，為防止切割的質(zhì)粒環(huán)化，通常選擇兩種的限制酶進行切割，同時需要用相同的限制酶對目的基因進行處理，所以選擇HindⅢ酶和BamHI切割VNNI基因和含GFP基因的載體，再用DNA連接酶處理形成重組質(zhì)粒。（2）GFP基因（4735bp）控制綠色熒光蛋白的合成，該蛋白可在相應波長的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光，所以在重組質(zhì)粒中可以作為標記基因；鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含目的基因的細胞篩選出來；電泳條帶顯示分子量增加表明VNN1基因已插入到含GFP基因的載體中。（3）從柱狀圖中看出VNN1組中IL-6的濃度增加，說明了VNN1基因表達產(chǎn)物能促進細胞分泌炎癥因子IL-6；空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組IL-6的表達有輕微升高，可能原因是操作過程中對細胞的損傷（或用到的化學試劑對細胞具有一定的毒性作用），可以激活相應細胞分泌炎癥因子IL-6?！军c睛】本題重點考查了基因工程的操作知識，考生需要數(shù)量掌握其操作步驟。9、自由組合長翅對短翅顯性6種翅形基因位于常染色體上；眼色基因位于X染色體上，棕眼對紅眼顯性421/3【解析】

一只雌性長翅紅眼果蠅與一只雄性長翅棕眼果蠅雜交，所得F1的表現(xiàn)型及比例為長翅紅眼：長翅棕眼：短翅紅眼：短翅棕眼=3:3:1:1，F(xiàn)1長翅∶短翅=3∶1，紅眼∶棕眼=1∶1，可知長翅和短翅的基因（A和a）位于常染色體上，且長翅為顯性，紅眼和棕眼的顯隱性及基因（B和b）的位置未知，可能有6種情況，親本的基因型為（關(guān)于紅眼和棕眼）：①翅形常染色體、眼色X染色體且紅眼為顯性：長翅紅眼雌性（AaXBXb）×長翅棕眼雄性（AaXbY）；②翅形常染色體、眼色X染色體且紅眼為隱性：長翅紅眼雌性（AaXbXb）×長翅棕眼雄性（AaXBY）；③翅形X染色體、眼色常染色體且紅眼為顯性：長翅紅眼雌性（BbXAXa）×長翅棕眼雄性（bbXAY）；④翅形X染色體、眼色常染色體且紅眼為隱性：長翅紅眼雌性（bbXAXa）×長翅棕眼雄性（BbXAY）；⑤翅形常染色體、眼色常染色體且紅眼為顯性：長翅紅眼雌性（AaBb）×長翅棕眼雄性（Aabb）；⑥翅形常染色體、眼色常染色體且紅眼為隱性：長翅紅眼雌性（Aabb）×長翅棕眼雄性（AaBb）?！驹斀狻浚?）果蠅的長翅和短翅、紅眼和棕眼分別由兩對獨立遺傳的等位基因（A和a、B和b）控制，因此翅形和眼色這兩對基因的遺傳遵循自由組合定律。（2）親本均為長翅，F(xiàn)1出現(xiàn)短翅，長翅為顯性，短翅為隱性。對性狀的顯隱性關(guān)系以及基因的位置還可作出6種合理的假設(shè)。若理論上分析F1代長翅紅眼果蠅中雌性個體所占的比例為0，則控制紅眼和棕眼的基因位于X染色體上，且棕眼為顯性，親本的基因型為：長翅紅眼（AaXbXb）×長翅棕眼（AaXBY），F(xiàn)1代短翅紅眼果蠅中雄性個體（aaXbY）所占的比例為1。（3）用帶熒光標記的B、b基因共有的特有序列作探針，與親代雄果蠅細胞裝片中各細胞內(nèi)染色體上的B、b基因雜交，親代棕眼雄果蠅細胞的基因型為XBY或XbY或Bb或bb，有絲分裂后期細胞中的基因數(shù)量是體細胞的兩倍，若眼色基因位于常染色體上，則觀察到4個熒光點（BBbb或bbbb），則；若眼色基因位于X染色體上，則復制后會觀察到2個熒光點。（4）讓突變體雌果蠅（XClDX+）與正常眼雄果蠅（X+Y）雜交，F(xiàn)1代果蠅為：XClDX+（棒眼雌性）、XClDY（致死）、X+X+（正常眼雌性）、X+Y（正常眼雄性），棒眼果蠅所占的比例為1/3。遺傳圖解如下，注意表現(xiàn)型中要有性別，各種符號需正確。【點睛】熟悉顯隱性的判斷及基因位置的判斷，要學會從子代的表現(xiàn)型推測親本的基因型，還有注意遺傳中的致死問題。10、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（cDNA）。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA；由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復制的原理，所以用該cDNA進行PCR技術(shù)擴增短時間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建基因表達載體?；虮磉_載體的組成包括目的基因、標記基因、啟動子、終止子、復制原點等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達載體上的標記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。（4）基因表達的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，可以檢測細胞膜表面是否具有PD-1基因表達的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學活性和功能，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)，即從裂解293T細胞中，提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與