福建省東山縣第二中學(xué)2025屆高三（最后沖刺）生物試卷含解析

福建省東山縣第二中學(xué)2025屆高三（最后沖刺）生物試卷注意事項(xiàng):1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)碼填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時(shí)請(qǐng)按要求用筆。3．請(qǐng)按照題號(hào)順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無(wú)效；在草稿紙、試卷上答題無(wú)效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．黃曲霉毒素是毒性極強(qiáng)的致癌物質(zhì)，有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，它能引起細(xì)胞中的核糖體不斷從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上脫落下來(lái)，這一結(jié)果直接導(dǎo)致（）A．核仁被破壞 B．染色體被破壞C．細(xì)胞膜被破壞 D．蛋白質(zhì)合成受到影響2．某種植物（2n=40）為XY型性別決定的生物，等位基因B和b位于X染色體上，分別控制闊葉（B）和細(xì)葉（b）。用闊葉雄株和雜合闊葉雌株進(jìn)行雜交得到子一代，再讓子一代相互雜交得到子二代，子二代的表現(xiàn)型及比例為：闊葉雌株：闊葉雄株：細(xì)葉雄株=2：3：1。根據(jù)上述雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果推斷，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．子二代中出現(xiàn)上述比例的原因可能是含有Xb的花粉不育B．子二代相互雜交得到的子三代中細(xì)葉植株所占比例為1/14C．若對(duì)該種植物基因組測(cè)序應(yīng)測(cè)定21條染色體上的堿基對(duì)序列D．該種植物與葉型有關(guān)的基因型共有5種3．下列關(guān)于“噬菌體侵染細(xì)菌”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．需分別用35S、32P對(duì)不同噬菌體進(jìn)行標(biāo)記B．?dāng)嚢枘康氖鞘辜?xì)菌外的噬菌體與細(xì)菌分離C．用35S標(biāo)記的噬菌體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，保溫時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使沉淀物中出現(xiàn)較強(qiáng)的放射性D．該實(shí)驗(yàn)?zāi)茏C明DNA是噬菌體的遺傳物質(zhì)，但不能直接證明蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)4．土壤微生物是反映土壤質(zhì)量狀況的重要指標(biāo)，常以磷脂脂肪酸總量來(lái)表示?？蒲腥藛T開展芒萁（蕨類植物）對(duì)馬尾松林植被恢復(fù)過程中土壤微生物群落影響的研究，測(cè)定結(jié)果如下圖。以下推測(cè)或結(jié)論不成立的是（）A．土壤微生物細(xì)胞中磷脂脂肪酸的含量比較穩(wěn)定B．測(cè)定中隨機(jī)設(shè)置取樣地且同一類型樣地要重復(fù)取樣C．在植被恢復(fù)初期，芒萁對(duì)土壤微生物的影響較小D．隨著植被的恢復(fù)，芒萁對(duì)土壤微生物的影響變?nèi)?．如果給人體注射滅活的甲型H1N1流感病毒，可預(yù)防甲型H1N1流感，那么滅活病毒在體內(nèi)引起的免疫反應(yīng)，正確的是A．B細(xì)胞接受刺激后形成效應(yīng)B細(xì)胞，能使靶細(xì)胞裂解B．吞噬細(xì)胞接受刺激后形成效應(yīng)細(xì)胞，能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體C．T細(xì)胞接受刺激后形成效應(yīng)T細(xì)胞，能釋放淋巴因子D．淋巴細(xì)胞吞噬該病毒后形成記憶細(xì)胞，能釋放白細(xì)胞介素6．下列關(guān)于生命活動(dòng)調(diào)節(jié)的敘述，正確的有：①嚴(yán)重腹瀉后只需補(bǔ)充水分就能維持細(xì)胞外液正常的滲透壓②刺激支配肌肉的神經(jīng)，引起該肌肉收縮的過程屬于非條件反射③垂體功能受損的幼犬會(huì)出現(xiàn)抗寒能力減弱等現(xiàn)象④突觸后膜上的受體與相應(yīng)神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合后,就會(huì)引起突觸后膜的電位變化為外負(fù)內(nèi)正⑤在寒冷環(huán)境中能促進(jìn)人體代謝產(chǎn)熱的激素主要是胰島素和腎上腺素⑥甲亢病人體內(nèi)促甲狀腺激素的含量低于正常值⑦細(xì)胞免疫的存在使得正常機(jī)體體內(nèi)無(wú)細(xì)胞癌變⑧糖尿病患者體內(nèi)細(xì)胞吸收利用血糖的速率加快A．一項(xiàng) B．兩項(xiàng)C．三項(xiàng) D．四項(xiàng)二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每毫升鮮奶產(chǎn)品中大腸桿菌數(shù)不得超過個(gè)，鮮奶中大腸桿菌的數(shù)目可用濾膜法來(lái)測(cè)定，流程為：用濾膜過濾1ml待測(cè)牛奶→牛奶中的細(xì)菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）上培養(yǎng)→統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目。（1）制備培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中能夠同時(shí)提供氮源和碳源的是_____________（填“蛋白胨”“乳糖”或“”），從培養(yǎng)基功能上劃分，EMB培養(yǎng)基屬于_____________。（2）為檢測(cè)該培養(yǎng)基滅菌是否徹底，對(duì)于該培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_____________。（3）培養(yǎng)與統(tǒng)計(jì)：在適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，應(yīng)選擇顏色為_____________的菌落數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果如下：培養(yǎng)時(shí)間12h24h平板對(duì)照組123對(duì)照組123大腸桿菌菌落數(shù)（個(gè)）01321211450132121145其他細(xì)菌菌落數(shù)（個(gè)）112253222244112253222244（4）培養(yǎng)12h和24h的大腸桿菌菌落特征有何差異？_____________。（5）根據(jù)表中的數(shù)據(jù)不能判斷該鮮奶樣品中的大腸桿菌數(shù)是否超標(biāo)，請(qǐng)說(shuō)明理由：_____________。8．（10分）我國(guó)科學(xué)家從長(zhǎng)白豬胎兒皮膚中分離出成纖維細(xì)胞，通過體外培養(yǎng)，然后將水母熒光蛋白基因?qū)氤衫w維細(xì)胞，并培育出轉(zhuǎn)基因克隆豬。請(qǐng)回答下列問題。（1）科學(xué)家依據(jù)_______原理，應(yīng)用PCR技術(shù)______水母熒光蛋白基因。（2）為確保水母熒光蛋白基因在成纖維細(xì)胞中表達(dá)，須在水母熒光蛋白基因的______添加啟動(dòng)子。（3）體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞時(shí)，會(huì)出現(xiàn)接觸_________________現(xiàn)象，為解決該問題，可用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理，然后繼續(xù)_______________。（4）科學(xué)家將水母熒光蛋白基因?qū)氤衫w維細(xì)胞，但其不能直接發(fā)育成豬。請(qǐng)以轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞為材料，設(shè)計(jì)培育轉(zhuǎn)基因克隆豬的一種簡(jiǎn)要思路___________________________________________________。9．（10分）如圖是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)干擾素的簡(jiǎn)化流程?；卮鹣铝袉栴}：（1）進(jìn)行過程I的前提是要根據(jù)干擾素基因的____________設(shè)計(jì)引物。（2）過程I需加熱至90~95℃，然后冷卻至55~60℃，如此操作的目的是____________。據(jù)圖可知欲獲得干擾素基因，至少需要復(fù)制____________次。（3）圖中A的名稱是___________，A上與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位稱為___________。（4）為檢測(cè)干擾素基因在酵母菌細(xì)胞中是否轉(zhuǎn)錄，可用_____________作探針，與從細(xì)胞中提取的____________進(jìn)行分子雜交。10．（10分）為了研究手機(jī)屏幕上的細(xì)菌數(shù)量和種類，有人做了下圖所示的實(shí)驗(yàn)?；卮鹣铝袉栴}：（1）在培養(yǎng)基的制備過程中，培養(yǎng)基中必須含有滿足微生物生長(zhǎng)、繁殖所需的水、無(wú)機(jī)鹽、碳源和________等成分；在倒平板時(shí)，需待培養(yǎng)基冷卻至51℃左右時(shí)，在__________附近倒平板，待平板冷卻后需倒置，其原因是_______________________________________。（2）圖中采取的接種方法是________________，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，所用的培養(yǎng)基必須經(jīng)過滅菌處理后才能倒掉的原因是_______________。（3）若按圖中方法取樣，測(cè)定某手機(jī)屏幕上的細(xì)菌數(shù)量，制成11mL菌懸液中，在3個(gè)平板上分別接入1．1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為38、41和42，則該手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)為__________個(gè)/cm2。該方法計(jì)數(shù)的結(jié)果往往比實(shí)際結(jié)果偏__________（填“高”或“低”），原因是_____________________________________。11．（15分）果蠅（2N=8）卷翅基因A是2號(hào)常染色體上的顯性基因，其等位基因a控制野生型翅型。（1）摩爾根用果蠅做實(shí)驗(yàn)材料證明了基因位于染色體上，其研究方法是__________，因?yàn)楣売衉________優(yōu)點(diǎn)因此常用來(lái)作為遺傳學(xué)研究的材料（至少答2點(diǎn)）。（2）卷翅基因A純合時(shí)致死，研究者發(fā)現(xiàn)2號(hào)染色體上的另一純合致死基因B，從而得到“平衡致死系”果蠅，其基因與染色體關(guān)系如圖。該品系的雌雄果蠅互交（不考慮交叉互換和基因突變），其子代中雜合子的概率是________。子代與親代相比，子代A基因的頻率________（上升/下降/不變）。（3）欲利用“平衡致死系”果蠅來(lái)檢測(cè)野生型果蠅的一條2號(hào)染色體上是否出現(xiàn)決定新性狀的隱性突變基因d，DD和Dd不影響翅型，dd決定新性狀翅型?？勺鱿铝须s交實(shí)驗(yàn)（不考慮雜交過程中的交叉互換及新的基因突變）：實(shí)驗(yàn)步驟：預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果并得出結(jié)論：若F2代的表現(xiàn)型及比例為_________，說(shuō)明待檢野生型果蠅的2號(hào)染色體有決定新性狀的隱性突變基因。若F2代的表現(xiàn)型及比例為_________，說(shuō)明待檢野生型果蠅的2號(hào)染色體沒有決定新性狀的隱性突變基因。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、D【解析】

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成和加工，以及脂質(zhì)合成的“車間”。核糖體有的附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，有的游離分布在細(xì)胞質(zhì)中，是“生產(chǎn)蛋白質(zhì)的機(jī)器”。分泌蛋白最初是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體中由氨基酸形成肽鏈，肽鏈進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行初步的加工后，進(jìn)入高爾基體經(jīng)過進(jìn)一步的加工形成分泌小泡與細(xì)胞膜融合，分泌到細(xì)胞外?！驹斀狻扛鶕?jù)題意分析可知：黃曲霉毒素能引起細(xì)胞中的核糖體不斷從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上脫落下來(lái)，由于粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上附著的核糖體不斷從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上脫落下來(lái)，核糖體合成的多肽不能進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行初加工，從而阻斷了分泌蛋白的合成，這一結(jié)果直接導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成受到影響。綜上分析，D正確，ABC錯(cuò)誤。

故選D。2、D【解析】

根據(jù)題意分析可知：用闊葉雄株（XBY）與雜合闊葉雌株（XBXb）雜交得到子一代，子一代的基因型有XBXB、XBXb、XBY和XbY，子二代沒有出現(xiàn)細(xì)葉雌株（XbXb），但有細(xì)葉雄株（XbY），可能是含有Xb的花粉不育，使子二代中闊葉雌株（XBXB、XBXb）：闊葉雄株（XBY）：細(xì)葉雄株（XbY）=（3/4×1/3+1/4×1/3）：（3/4×2/3）：（1/4×2/3）=2：3：1，據(jù)此答題?！驹斀狻緼、據(jù)上分析可知，子二代中出現(xiàn)上述比例的原因可能是含有Xb的花粉不育，A正確；B、據(jù)上分析可知，子二代中雌：雄=1：2，雌配子中XB：Xb=3：1，雄配子中XB：Xb（不育）：Y=3：1：4，故子三代中細(xì)葉植株（XbY）所占比例=1/2×1/4×4/7=1/14，B正確。C、若對(duì)該種植物基因組測(cè)序應(yīng)測(cè)定19條常染色體+X+Y=21條染色體上的堿基對(duì)序列，C正確；D、因含有Xb的花粉不育，故不存在XbXb基因型，該種植物與葉型有關(guān)的基因型有XBXB、XBXb、XBY和XbY共4種，D錯(cuò)誤。故選D。3、C【解析】

噬菌體侵染細(xì)菌的過程：吸附→注入（注入噬菌體的DNA）→合成（控制者：噬菌體的DNA；原料：細(xì)菌的化學(xué)成分）→組裝→釋放。噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)步驟：分別用35S或32P標(biāo)記噬菌體→噬菌體與大腸桿菌混合培養(yǎng)→噬菌體侵染未被標(biāo)記的細(xì)菌→在攪拌器中攪拌，然后離心，檢測(cè)上清液和沉淀物中的放射性物質(zhì)?！驹斀狻緼、分別用35S、32P對(duì)不同噬菌體進(jìn)行標(biāo)記，其中35S標(biāo)記的是噬菌體的蛋白質(zhì)，32P標(biāo)記的是噬菌體的DNA，A正確；B、攪拌的目的是使細(xì)菌外的噬菌體蛋白質(zhì)外殼與細(xì)菌分離，B正確；C、35S標(biāo)記的是噬菌體的蛋白質(zhì)外殼，經(jīng)過攪拌離心后，蛋白質(zhì)外殼分布在上清液中，因此用35S標(biāo)記的噬菌體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，保溫時(shí)間過長(zhǎng)不會(huì)影響沉淀物中放射性的強(qiáng)弱，C錯(cuò)誤；D、噬菌體侵染細(xì)菌時(shí)只有DNA進(jìn)入細(xì)菌，蛋白質(zhì)外殼留在細(xì)菌外，因此該實(shí)驗(yàn)?zāi)茏C明DNA是遺傳物質(zhì)，不能直接證明蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)，D正確。故選C?！军c(diǎn)睛】本題考查噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)，對(duì)于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的方法、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)論等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中注意積累。4、C【解析】

分析圖示：自變量是恢復(fù)年限，因變量是磷脂脂肪酸總量，隨著恢復(fù)年限增長(zhǎng)，磷脂脂肪酸總量含量增加，在植被恢復(fù)的初期芒萁對(duì)土壤微生物活體總量的影響較大，而隨著生態(tài)系統(tǒng)逐漸成熟，芒萁覆蓋對(duì)土壤微山物總量的影響減弱，有無(wú)芒萁覆蓋的差距變小。【詳解】A、土壤微生物細(xì)胞中磷脂脂肪酸的含量比較穩(wěn)定，故土壤微生物總量常以磷脂脂肪酸總量來(lái)表示，A正確；B、為排除偶然性影響，測(cè)定中隨機(jī)設(shè)置取樣地且同一類型樣地要重復(fù)取樣，B正確；C、在植被恢復(fù)初期，芒萁對(duì)土壤微生物的影響較大，C錯(cuò)誤；D、隨著植被的恢復(fù)，芒萁覆蓋對(duì)土壤微山物總量的影響減弱，有無(wú)芒萁覆蓋的差距變小，D正確。故選C。5、C【解析】

第三道防線的“作戰(zhàn)部隊(duì)”主要是眾多的淋巴細(xì)胞。其中B細(xì)胞主要靠產(chǎn)生“抗體”作戰(zhàn)，這種方式稱為體液免疫；T細(xì)胞主要靠直接接觸靶細(xì)胞“作戰(zhàn)”，這種方式稱為細(xì)胞免疫。【詳解】A、B細(xì)胞受到抗原刺激，產(chǎn)生效應(yīng)B細(xì)胞核記憶細(xì)胞，效應(yīng)B細(xì)胞分泌抗體，不能使靶細(xì)胞裂解，A錯(cuò)誤；B、吞噬細(xì)胞在特異性免疫中起到攝取、處理和呈遞抗原的作用，B錯(cuò)誤；C、T細(xì)胞接受刺激后形成效應(yīng)T細(xì)胞，能釋放淋巴因子，C正確；D、吞噬細(xì)胞接受刺激后，攝取處理抗原，使其抗原決定簇暴露出來(lái)，呈遞給T細(xì)胞，T細(xì)胞識(shí)別抗原后增殖分化形成記憶細(xì)胞和效應(yīng)T細(xì)胞，D錯(cuò)誤。故選C。6、B【解析】

嚴(yán)重腹瀉會(huì)流失大量水分和無(wú)機(jī)鹽，需補(bǔ)充水分和鹽分才能維持細(xì)胞外液正常的滲透壓，①錯(cuò)誤；刺激支配肌肉的神經(jīng)、引起該肌肉收縮的過程，沒有經(jīng)過完整的反射弧，因此不屬于反射，②錯(cuò)誤；垂體通過分泌促甲狀腺激素來(lái)促進(jìn)甲狀腺激素的合成和分泌，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞代謝、增加產(chǎn)熱，所以垂體功能受損的幼犬會(huì)出現(xiàn)抗寒能力減弱等現(xiàn)象，③正確；突觸后膜上的受體，若與相應(yīng)的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合，則會(huì)引起突觸后膜的電位變化為外負(fù)內(nèi)正，若與相應(yīng)的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合，則會(huì)使突觸后膜的電位仍然維持外正內(nèi)負(fù)的靜息電位，④錯(cuò)誤；在寒冷環(huán)境中能促進(jìn)人體代謝產(chǎn)熱的激素主要是甲狀腺激素和腎上腺素，⑤錯(cuò)誤；甲亢病人體內(nèi)甲狀腺激素的含量高于正常水平，由于甲狀腺激素分泌的分級(jí)調(diào)節(jié)中存在著負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制，因此甲亢病人體內(nèi)促甲狀腺激素的含量低于正常值，⑥正確；在環(huán)境中的致癌因子影響下，可能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變，因此正常機(jī)體內(nèi)也會(huì)存在細(xì)胞癌變，⑦錯(cuò)誤；糖尿病患者，因胰島B細(xì)胞受損導(dǎo)致體內(nèi)胰島素分泌不足，所以體內(nèi)細(xì)胞吸收利用血糖的速率減慢，⑧錯(cuò)誤。綜上所述，供選答案組合，B項(xiàng)正確，A、C、D三項(xiàng)均錯(cuò)誤。【定位】神經(jīng)調(diào)節(jié)、體液調(diào)節(jié)、免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞癌變。二、綜合題：本大題共4小題7、蛋白胨鑒別培養(yǎng)基將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中培養(yǎng)1~2d黑色培養(yǎng)24h的菌落較大（或培養(yǎng)12h的菌落較?。?duì)照組有其他細(xì)菌菌落，說(shuō)明培養(yǎng)基制作不合格或無(wú)菌操作存在問題，需重做實(shí)驗(yàn)【解析】

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，蛋白胨可以提供碳源、氮源和維生素。添加了伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基上，大腸桿菌可以和伊紅美藍(lán)發(fā)生反應(yīng)形成黑色菌落，從而鑒別大腸桿菌。整個(gè)微生物培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)中需要防止其它雜菌的干擾，否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)?！驹斀狻浚?）蛋白胨可以同時(shí)提供碳源和氮源，乳糖只能提供碳源，氯化鈉只能提供無(wú)機(jī)鹽；按功能分，EMB培養(yǎng)基可以通過伊紅美藍(lán)鑒別大腸桿菌的有無(wú)，屬于鑒別培養(yǎng)基；（2）為檢測(cè)該培養(yǎng)基滅菌是否徹底，一般常常使用將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中培養(yǎng)1~2d，觀察是否有菌落產(chǎn)生；（3）伊紅美藍(lán)和大腸桿菌反應(yīng)產(chǎn)生黑色；（4）培養(yǎng)時(shí)間越長(zhǎng)，細(xì)菌的繁殖數(shù)量就越多，因此培養(yǎng)24h的菌落較大；（5）分析表格數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組有其他細(xì)菌菌落，說(shuō)明培養(yǎng)基制作不合格或無(wú)菌操作存在問題，需重做實(shí)驗(yàn)。【點(diǎn)睛】本題的易錯(cuò)點(diǎn)為菌落數(shù)目統(tǒng)計(jì)的可用性的判斷，在菌落的計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)中都要求很嚴(yán)格的無(wú)菌技術(shù)，以防止為實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的干擾。因此空白對(duì)照組中生長(zhǎng)出菌落就是無(wú)菌技術(shù)不合格的證明，則在實(shí)驗(yàn)組中的所有數(shù)據(jù)均存在明顯的誤差，因此該實(shí)驗(yàn)需要重做。8、DNA雙鏈復(fù)制擴(kuò)增首端抑制分瓶培養(yǎng)將轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核導(dǎo)入去核卵母細(xì)胞，并進(jìn)行體外培養(yǎng)和胚胎移植【解析】

PCR的含義：是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。原理：DNA雙鏈復(fù)制。胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)，這是胚胎工程的最后一道工序?！驹斀狻浚?）由分析可知，PCR技術(shù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制，應(yīng)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增水母熒光蛋白基因的目的。（2）因?yàn)閱?dòng)子是位于基因首端的一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，所以，為確保水母熒光蛋白基因在成纖維細(xì)胞中表達(dá)，須在水母熒光蛋白基因的首端添加啟動(dòng)子。（3）體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)、接觸抑制的現(xiàn)象，為解決接觸抑制的問題，可用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理制成單細(xì)胞懸液，然后繼續(xù)分瓶培養(yǎng)。（4）要獲得含水母熒光蛋白基因的轉(zhuǎn)基因豬，現(xiàn)在已經(jīng)獲得了轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞，接下來(lái)需要將轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核導(dǎo)入去核卵母細(xì)胞（處于減數(shù)第二次分裂中期），并設(shè)法促進(jìn)重組細(xì)胞的核質(zhì)融合，并進(jìn)行體外培養(yǎng)獲得早期胚胎，然后通過胚胎移植將早期胚胎轉(zhuǎn)入同期發(fā)情的受體豬的子宮內(nèi)完成轉(zhuǎn)基因豬的培育過程?！军c(diǎn)睛】熟知PCR技術(shù)的原理和應(yīng)用是解答本題的關(guān)鍵！掌握核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植的操作程序是解答本題的另一關(guān)鍵，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中呈現(xiàn)的特征以及培養(yǎng)過程也是解答本題的必備知識(shí)。9、核苷酸序列使DNA解鏈，然后使引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上3重組質(zhì)粒啟動(dòng)子放射性同位素、生物素或熒光染料等標(biāo)記的干擾素（目的）基因mRNA【解析】

1.基因工程的基本操作程序：第一步：目的基因的獲取；第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建；第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；第四步：目的基因的檢測(cè)和表達(dá)。2.PCR的過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開。3.題圖分析：Ⅰ是利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，Ⅱ是構(gòu)建基因表達(dá)載體，Ⅲ是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到酵母菌細(xì)胞中?！驹斀狻浚?）PCR的前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對(duì)引物，因此進(jìn)行過程Ⅰ的前提是要根據(jù)干擾素基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)引物。（2）PCR過程中需加熱至90?95℃，然后冷卻至55?60℃，如此操作的目的是使DNA解旋，然后使引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上。根據(jù)PCR復(fù)制的特點(diǎn)，結(jié)合圖示可知，圖示中干擾素基因的兩條鏈應(yīng)是第二次復(fù)制才能形成的子鏈，所以至少需要復(fù)制三次才能形成圖中的干擾素基因。（3）圖中A是干擾素基因和質(zhì)粒連接形成的重組質(zhì)粒（基因表達(dá)載體），A上與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位稱為啟動(dòng)子。（4）基因轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物為mRNA，由于轉(zhuǎn)錄過程中遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，所以為檢測(cè)干擾素基因在酵母菌細(xì)胞中是否轉(zhuǎn)錄，可用放射性同位素、生物素或熒光染料等標(biāo)記的干擾素（目的）基因作探針，與從細(xì)胞中提取的mRNA進(jìn)行分子雜交?！军c(diǎn)睛】本題結(jié)合利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)干擾素的簡(jiǎn)化流程，考查基因工程的技術(shù)及原理、應(yīng)用，要求考生識(shí)記基因工程的原理及技術(shù)，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確判斷各題。10、氮源酒精燈火焰既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染稀釋涂布平板法防止污染環(huán)境或感染其他生物161低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落【解析】

測(cè)定培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目，可采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)(或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù))法對(duì)培養(yǎng)液中的微生物直接計(jì)數(shù)，也可用稀釋涂布平板法將微生物接種于滅菌后的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，通過計(jì)數(shù)菌落數(shù)目計(jì)算培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目。由于采用第一種方法計(jì)數(shù)時(shí)不能剔除死菌，采用第二種方法計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以第一種方法統(tǒng)計(jì)的數(shù)目比實(shí)際活菌數(shù)目高，第二種方法統(tǒng)計(jì)的數(shù)目比實(shí)際活菌數(shù)目低。【詳解】（1）培養(yǎng)基中必須含有滿足微生物生長(zhǎng)、繁殖所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，包括四類的水、無(wú)機(jī)鹽、碳源和氮源等成分；在倒平板時(shí)，需待培養(yǎng)基冷卻至51℃左右時(shí)，酒精燈火焰旁是無(wú)菌區(qū)，所以，倒平板操作通常在在酒精燈火焰附近進(jìn)行，待平板冷卻后，需將平板倒置，這樣既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。（2）根據(jù)圖中菌落的分布情況可知，接種時(shí)采取的是稀釋涂布平板法，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，為防止污染環(huán)境或感染其他生物，所用的培養(yǎng)基必須經(jīng)過滅菌處理后才能倒掉。（3）用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，首先統(tǒng)計(jì)平板中的菌落數(shù)，然后求均值，再計(jì)算，（38+41+42）/3=41，41/1.1=411個(gè)/mL，則手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)為411×11/25=161個(gè)/cm2。該方法計(jì)數(shù)的結(jié)果往往比實(shí)際結(jié)果偏低，因?yàn)樵谙♂屚坎紩r(shí)，可能會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起的情況，此時(shí)平板上觀察