GB∕ T 40175.2-2021 紡織品 生物化學(xué)分析方法 第2部分：擬除蟲菊酯類農(nóng)藥（酶聯(lián)免疫法）（正式版）

ICS59.080.01CCSW04GB/T40175.2—2021紡織品生物化學(xué)分析方法國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)IGB/T40175.2—2021本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件是GB/T40175《紡織品生物化學(xué)分析方法》的第2部分。GB/T40175已經(jīng)發(fā)布了以下部分：——第2部分：擬除蟲菊酯類農(nóng)藥(酶聯(lián)免疫法);——第3部分：有機(jī)磷類農(nóng)藥(酶聯(lián)免疫法)。本文件由中國(guó)紡織工業(yè)聯(lián)合會(huì)提出。本文件由全國(guó)紡織品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC/TC209)歸口。1GB/T40175.2—2021紡織品生物化學(xué)分析方法第2部分：擬除蟲菊酯類農(nóng)藥(酶聯(lián)免疫法)警示：使用本文件的人員應(yīng)有正規(guī)實(shí)驗(yàn)室工作的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。本文件并未指出所有可能的安全問題。使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國(guó)家有關(guān)法規(guī)規(guī)定的條件。氰菊酯七種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法。本文件適用于各種紡織品。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3術(shù)語(yǔ)和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。4原理試樣中的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥與試劑盒中已包被在微孔板上的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合擬除蟲菊酯類農(nóng)藥抗體，再加入酶標(biāo)二抗，在微孔板上形成抗原-一抗-酶標(biāo)二抗復(fù)合物。復(fù)合物與顯色劑發(fā)生反應(yīng)，用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度值。吸光度值與試樣中的農(nóng)藥殘留量呈負(fù)相關(guān)。5試劑與材料所用試劑應(yīng)均為分析純，水為符合GB/T6682規(guī)定的三級(jí)水。5.1擬除蟲菊酯類農(nóng)藥測(cè)定酶聯(lián)免疫試劑盒：附錄A給出了一種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥測(cè)定酶聯(lián)免疫試a)酶標(biāo)板。b)擬除蟲菊酯類抗體工作溶液。d)甲氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：可使用試劑盒中提供的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，也可按如下方法配制。準(zhǔn)確稱取50.0mg甲氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(CAS號(hào)：64257-84-7,純度≥99%)于100mL容量瓶中，加入少量甲醇(5.6)溶解后，用甲醇定容至刻度，濃度為500.0mg/L,然后根據(jù)需要的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液工作濃度進(jìn)行稀釋。過氧化氫(30%)的水溶液。2GB/T40175.2—2021吐溫——20的水溶液。按照體積比1:9加水稀釋(1份濃縮洗滌液+9份水)。5.3顯色液：將底物A液5.1)和底物B液5.1f)使用前按體積比1:1混合。7試驗(yàn)步驟7.2.1測(cè)試前需要將所有試劑放置至室7.2.2取系列甲氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)工作溶液5.1d)和待測(cè)樣品溶液(7.1)各50μL分別加入至相應(yīng)的酶標(biāo)板3GB/T40175.2—20218結(jié)果計(jì)算與表達(dá)8.1相對(duì)吸光度值的計(jì)算分別計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液的平均吸光度值。按公式(1)計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣品溶液的相對(duì)吸光度值。式中：A——相對(duì)吸光度值；…………B——系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液或樣品溶液的平均吸光度值；B?——0μg/L標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的平均吸光度值。8.2繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線以相對(duì)吸光度值為縱坐標(biāo)(%),標(biāo)準(zhǔn)工作溶液濃度(μg/L)的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。每次試驗(yàn)均應(yīng)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。8.3結(jié)果計(jì)算從7.2繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣品溶液相對(duì)吸光度值所對(duì)應(yīng)的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥濃度。按公式(2)計(jì)算試樣中的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的含量。…………(2)式中：X——試樣中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的含量，單位為微克每千克(pμg/kg);c——從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線上得到的試樣中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥濃度，單位為微克每升(μg/L);V——復(fù)溶后樣品溶液體積，單位為毫升(mL);m——試樣質(zhì)量，單位為克(g)。計(jì)算結(jié)果應(yīng)扣除空白，精確至一位小數(shù)。如被測(cè)試樣中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥含量小于10μg/kg,則結(jié)果表示為未檢出；如含量超過或等于10μg/kg,則結(jié)果為實(shí)測(cè)值，宜使用GB/T18412.4中規(guī)定的方法或其他儀器分析方法再進(jìn)行檢測(cè)。以甲氰菊酯計(jì)，檢出限為10μg/kg。10試驗(yàn)報(bào)告試驗(yàn)報(bào)告至少應(yīng)給出下述內(nèi)容：a)本文件的編號(hào)；b)樣品來源及描述；c)測(cè)試結(jié)果；d)試驗(yàn)日期；e)任何偏離本文件的細(xì)節(jié)。4(資料性)A.1試劑盒組成試劑盒組成如下：——酶標(biāo)板96孔40mLA.2試劑盒的保存本試劑盒在-2℃~8℃的溫度下儲(chǔ)存，有效期為1年。如果超過3個(gè)月不使用試劑盒，將一抗和A.3試劑盒交叉反應(yīng)性見表A.1。農(nóng)藥名稱交叉反應(yīng)率/%甲氰菊酯64257-84-7溴氰菊酯52918-63-5氯氰菊酯52315-07-8高效氯氰菊酯65731-84-2