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《發(fā)酵工程問(wèn)題清單》2.1微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)什么是微生物?微生物是難以用肉眼觀察的微小生物的統(tǒng)稱,包括細(xì)菌、真菌、病毒及一些原生生物等。實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的兩個(gè)條件是什么?①為人們需要的微生物提供適宜的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件,②確保其他微生物無(wú)法混入,并將需要的微生物分離出來(lái)。什么是培養(yǎng)基?人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)-培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝產(chǎn)物。按照物理性質(zhì),培養(yǎng)基分為哪些類(lèi)型?特點(diǎn)與作用分別是什么?按照物理性質(zhì),培養(yǎng)基分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基含凝固劑(如瓊脂),呈固體狀體,常用于微生物的分離與鑒定、活菌計(jì)數(shù)、菌種保藏。液體培養(yǎng)基不含凝固劑,呈液體狀態(tài),常用于工業(yè)產(chǎn)生。在液體培養(yǎng)基加入瓊脂后制成的瓊脂固體培養(yǎng)基,是實(shí)驗(yàn)室最常用的培養(yǎng)基之一。培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成是什么?培養(yǎng)基的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):水、碳源(提供碳元素的物質(zhì))、氮源(提供氮元素的物質(zhì))、無(wú)機(jī)鹽。在提供上述幾種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上,培養(yǎng)基還需要滿足微生物對(duì)PH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及氧氣的需求。例如,在培養(yǎng)乳酸菌時(shí),需要在培養(yǎng)基中添加維生素;在培養(yǎng)霉菌時(shí),需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性;在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí),需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性;在培養(yǎng)厭氧微生物時(shí),需要提供無(wú)氧條件。獲得純凈的微生物的關(guān)鍵是什么?防止雜菌污染無(wú)菌技術(shù)主要包括什么?消毒和滅菌什么是消毒?消毒的主要方法是什么?應(yīng)用范圍是?①消毒是指用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物。②消毒的主要方法有:煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥物消毒、紫外線消毒。煮沸消毒:在100℃煮沸5-6分鐘;家庭餐具等生活用品可以使用煮沸消毒巴氏消毒:在62-65℃消毒30min或80-90℃處理30s-1min,可以殺死牛奶中絕大多數(shù)微生物,并且不破壞牛奶的營(yíng)養(yǎng)成分;牛奶、果汁、醬油等不耐高溫的液體可以使用巴氏消毒化學(xué)藥物消毒:如使用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精來(lái)擦拭實(shí)驗(yàn)者雙手;用氯氣消毒水源;紫外線消毒前,適量噴灑石炭酸或煤酚皂等消毒液,可加強(qiáng)消毒效果紫外線消毒:用紫外線消毒30min;殺死物體表面或空氣中的微生物。什么是滅菌?什么是芽孢和孢子?滅菌則是指用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。芽孢是某些細(xì)菌在一定條件下,在細(xì)胞里面形成的休眠體,當(dāng)環(huán)境適宜,芽孢可以萌發(fā)形成一個(gè)細(xì)菌;孢子是一種繁殖體,可以直接長(zhǎng)成新個(gè)體。10.滅菌的主要方法是什么?應(yīng)用范圍是?滅菌的主要方法有:濕熱滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌濕熱滅菌:濕熱滅菌中,高壓蒸汽滅菌的效果最好,實(shí)驗(yàn)室常用的高壓蒸汽滅菌鍋是在100kPa、121℃的條件下,維持15-30min來(lái)滅菌的;培養(yǎng)基等利用這種方法來(lái)滅菌干熱滅菌:將滅菌物體放在密閉容器如干熱滅菌箱,在160-170℃的熱空氣中維持2-3h;耐高溫和需要保持干燥的物品,如玻璃器皿、金屬用具,可以采用這種方法滅菌灼燒滅菌:直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒,可以迅速?gòu)氐椎販缇蝗缥⑸锏慕臃N工具,如涂布器、接種環(huán)、接種針或其他金屬用具。11.什么是培養(yǎng)物?在微生物學(xué)中,將接種于培養(yǎng)基內(nèi),在合適條件下形成的含特定種類(lèi)微生物的群體稱為培養(yǎng)物。12.什么是純培養(yǎng)物?由單一體繁殖所獲得的微生物的群體稱為純培養(yǎng)物,獲得純培養(yǎng)物的過(guò)程就是純培養(yǎng)。13.微生物的純培養(yǎng)包括哪些步驟?制備培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。什么是菌落?分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見(jiàn)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體,這就是菌落。獲得單菌落的方法?平板劃線法或稀釋涂布平板法酵母菌純凈培養(yǎng)的步驟是?制備培養(yǎng)基→接種和分離酵母菌→培養(yǎng)酵母菌制備培養(yǎng)基的要點(diǎn):①步驟:配制培養(yǎng)基→滅菌→倒平板②倒平板注意事項(xiàng):溫度在50℃左右;在酒精燈火焰附近操作;冷凝后將平板倒置接種和分離酵母菌:通過(guò)接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面平板冷凝后,為什么將平板倒置?防止皿蓋上冷凝水落入培養(yǎng)基,避免培養(yǎng)皿中的水分過(guò)快揮發(fā)平板劃線操作時(shí),取菌種前、每次劃線前、接種結(jié)束后灼燒接種環(huán)的目的是什么?取菌種前:殺死接種環(huán)上原有的微生物每次劃線前:殺死上次殘留的菌種,使下一次劃線的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端,從而使每次劃線時(shí)菌種數(shù)目逐漸減少,直至得到單個(gè)細(xì)胞接種結(jié)束后:殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者為什么劃線時(shí),最后
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