細(xì)胞形態(tài)問(wèn)題盤點(diǎn)_第1頁(yè)
細(xì)胞形態(tài)問(wèn)題盤點(diǎn)_第2頁(yè)
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直播答疑|細(xì)胞形態(tài)問(wèn)題盤點(diǎn)Q1.懸浮細(xì)胞也要用TC處理的培養(yǎng)瓶嗎?A懸浮細(xì)胞對(duì)TC處理無(wú)要求,培養(yǎng)瓶無(wú)論是否TC處理都可以培養(yǎng)懸浮細(xì)胞。Q2.細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)顆粒狀物質(zhì)是什么情況?A細(xì)胞內(nèi)的黑色顆粒是細(xì)胞外分泌泡及細(xì)胞器折光,這個(gè)屬于細(xì)胞自身特性,無(wú)法清除也無(wú)法改變,大部分細(xì)胞都會(huì)有這種現(xiàn)象,只是不同細(xì)胞顆粒多少有區(qū)別,細(xì)胞培養(yǎng)體系不適應(yīng)、營(yíng)養(yǎng)缺乏、滲透壓異常等均可能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)顆粒增加,建議使用合適的培養(yǎng)條件。Q3.細(xì)胞上粘了一層圓的細(xì)胞,也是分裂細(xì)胞嗎?A有可能是分裂相的細(xì)胞,因細(xì)胞匯合度已經(jīng)到達(dá)100%,沒(méi)有空間生長(zhǎng),故呈現(xiàn)圓形。也有可能是該細(xì)胞本身形態(tài)為混合型,存在部分圓形細(xì)胞。Q4.感覺(jué)細(xì)胞形態(tài)變了,但是長(zhǎng)得還可以,還能繼續(xù)做實(shí)驗(yàn)嘛?A如果是更換培養(yǎng)條件(如培養(yǎng)基、血清等)導(dǎo)致細(xì)胞有少許改變,但生長(zhǎng)速度尚可,一般細(xì)胞功能是沒(méi)有改變的,可以繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。若細(xì)胞形態(tài)發(fā)生較大變化,生長(zhǎng)速度與之前相似,則需要考慮細(xì)胞是否為錯(cuò)誤細(xì)胞或者交叉污染,可通過(guò)STR鑒定等方法來(lái)確認(rèn)。Q5.怎么判斷細(xì)胞狀態(tài)好不好?A細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)速度正??梢哉J(rèn)為細(xì)胞狀態(tài)是好的。Q6.Raw264.7細(xì)胞一直分化怎么辦?A該細(xì)胞是對(duì)環(huán)境極其敏感的,首先需要排查是否有細(xì)菌、支原體等潛在污染刺激細(xì)胞分化;血清需要使用高質(zhì)量低內(nèi)毒素的;培養(yǎng)時(shí)注意規(guī)范操作,避免細(xì)胞受損而自發(fā)分化;傳代時(shí)不建議使用胰酶,胰酶將刺激細(xì)胞分化;建議控制在1-2天傳代一次,超過(guò)3天不傳代細(xì)胞容易分化。具體操作可查看推文《細(xì)

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