保健食品中總黃酮、總皂甙、粗多糖的測定

保健食品中總黃酮、總皂甙、粗多糖的測定保健食品中總黃酮、總皂甙、粗多糖的測定/保健食品中總黃酮、總皂甙、粗多糖的測定保健食品中總黃酮、總皂甙、粗多糖的測定（規(guī)范性的附錄）保健食品中總黃酮的測定試劑聚酰胺粉蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取5.0g蘆丁，加甲醇溶解并定容至100mL，即得50μg/mL。乙醇分析純。甲醇分析純。分析步驟試樣處理：稱取一定量的試樣，加乙醇定容至25mL，搖勻后，超聲提取20min，放置，吸取上清液1.0mL，于蒸發(fā)皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于水浴上揮去乙醇，然后轉(zhuǎn)入層析柱。先用20mL苯洗，苯液棄去，然后用甲醇洗脫黃酮，定容至25mL。此液于波長360nm測定吸收值。同時以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，測定標(biāo)準(zhǔn)曲線，求回歸方程，計算試樣中的總黃酮含量。蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線：吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL比色管中，加甲醛至刻度，搖勻，于波長360nm比色。求回歸方程，計算試樣中總黃酮含量。計算和結(jié)果表示：式中：X：試樣中總黃酮的含量，mg/100g；A：由標(biāo)準(zhǔn)曲線算得被測液中總黃酮量，μgM：試樣質(zhì)量，gV1：測定用試樣體積，mL

V2：試樣定容總體積，mL計算結(jié)果保留二位有效數(shù)字。此方法選自《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》（2003年版）（規(guī)范性的附錄）保健食品中總皂甙的測定試劑Amberlite-XAD-2大孔樹脂，Sigma化學(xué)公司、U.S.A正丁醇分析純。乙醇分析純。中性氧化鋁層析用，100-200目。高氯酸分析純。冰乙酸分析純。香草醛溶液稱取5g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至100mL。人參皂甙Re購自中國藥品生物制品檢定所。人參皂甙Re標(biāo)準(zhǔn)溶液：精確稱取人參皂甙Re標(biāo)準(zhǔn)品0.020g，用甲醇溶解并定容至10.0mL，即每毫升人參皂甙Re2.0mg。儀器比色劑層析柱實驗步驟試樣處理固體試樣：稱取1.000g左右的試樣（根據(jù)試樣含人參量定），置于100mL容量瓶中，加少量水，超聲30min，再用水定容至100mL，搖勻，放置，吸取上清液1.0mL進(jìn)行柱層析。液體試樣：含乙醇的補酒類保健食品，吸取1.0mL試樣（假如濃度高、或顏色深，需稀釋一定體積后再取1.0mL）進(jìn)行柱層析。柱層析：用10mL注射器做層析管，內(nèi)裝3cmAmberlite-XAD-2大孔樹脂，上加1cm中性氧化鋁。先用25mL70%乙醇洗柱，棄去洗脫液，再用25mL水洗柱，棄去洗脫液，精確加入1.0mL已處理好的試樣溶液（見B.3.1），用25mL水洗柱，棄去洗脫液，用25mL70%乙醇洗脫人參皂甙，收集洗脫液于蒸發(fā)皿中，置于60℃水浴揮干。以此作顯色用。顯色：在上述已揮干的蒸發(fā)皿中準(zhǔn)確加入0.2mL5%香草醛冰乙酸溶液，轉(zhuǎn)動蒸發(fā)皿，使殘渣都溶解，再加0.8mL高氯酸，均勻后移入5mL帶塞刻度離心管中，60℃水浴加熱10min，取出，冰浴冷卻后，準(zhǔn)確加入冰乙酸5.0mL，搖勻后，以1cm比色池與560nm波長處與標(biāo)準(zhǔn)管一起進(jìn)行比色測定。標(biāo)準(zhǔn)管：吸取人參皂甙Re標(biāo)準(zhǔn)溶液（2.0mg/mL）100μl放蒸發(fā)皿中，放在水浴揮干（低于60℃），或熱風(fēng)吹干（勿使過熱），以下操作從“B.3.2柱層析…”起，與試樣相同。測定吸光度值。計算：式中：X：試樣中總皂甙量（以人參皂甙Re計），g/100g；A1：被測液的吸光度值；A2：標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度值；C：標(biāo)準(zhǔn)管人參皂甙Re的量，μg

V：試樣稀釋體積，mLm：試樣質(zhì)量，g計算結(jié)果保留二位有效數(shù)字。此方法選自《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》（2003年版）粗多糖的測定試劑濃硫酸無水乙醇5%本分溶液80%乙醇溶液分析步驟試樣處理：取本品50.0mL，加熱濃縮至約10.0mL，放冷，加入40mL無水乙醇，3000轉(zhuǎn)/分離心5min，棄去上清液，殘渣用80%乙醇洗滌，離心（重復(fù)此過程2次），用水溶解殘渣，定容20mL。此液即為樣品處理液。標(biāo)準(zhǔn)曲線：取葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：0、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50mL，用水定容為1.0mL，加入0.5mL苯酚溶液，10mL濃硫酸，混勻，放置至室溫，于L=1cm，波長=485nm測定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。C.2.3樣品測定取樣品處理液0.5mL于具塞比色管中，