醫(yī)學微生物學-247

MedicalMicrobiology醫(yī)學微生物學病原生物學醫(yī)學微生物學各論第二篇病毒學各論第24章人類皰疹病毒病毒亞科潛伏細胞單純皰疹病毒Ⅰ型(HSV-1)α神經元細胞單純皰疹病毒Ⅱ型(HSV-2)α神經元細胞水痘－帶狀皰疹病毒(VSV)α神經元細胞EB病毒(EBV)γB淋巴細胞巨細胞病毒(CMV)β單核吞噬細胞，淋巴細胞人皰疹病毒6，7型β淋巴組織人皰疹病毒8型γ病毒種類HHV-1HHV-2HHV-3HHV-4HHV-5HHV-6HHV-7HHV-8共同特點

1.形態(tài)、結構：球形，有包膜，dsDNA病毒，直徑120-200nm，162個殼粒組成，20面體立體對稱；2.復制：除EBV及HHV－6和HHV－7外，均可在2倍體細胞增殖；產生明顯CPE；核內有嗜酸性包涵體；病毒可通過細胞間橋直接擴散；感染C、未感染C融合成多核巨C。3.多種感染方式：

顯性感染、潛伏感染、整合感染和先天性感染第一節(jié)單純皰疹病毒Herpessimplexvirus典型的皰疹病毒科病毒的形態(tài)學特征球形，120-150nm，雙鏈線狀DNA，衣殼是20面立體對稱分型：2個血清型：HSV-1、HSV-2包膜：多種糖蛋白：至少11種：

gB，gD—

吸附有關；

gD—

誘導中和Ab作用最強；

gG—HSV-2型特異；

gC—HSV-1型特異；培養(yǎng)：易感動物：家兔、豚鼠、小鼠、雞胚；易感細胞：兔腎、人胚肺、人胚腎、人羊膜細胞一、生物學性狀

二、致病性與免疫性1、傳染源：患者、健康帶毒者2、傳播途徑：

HSV-1：密切接觸、呼吸道、胎盤

HSV-2：性接觸、產道、皮膚、口腔、呼吸道、破損皮膚

3、感染方式：機體絕大多數(shù)：隱性感染；少數(shù)：皮膚粘膜局部皰疹；極少數(shù)：全身性感染，死亡；

4、感染類型：HSV1：皰疹性齦口炎、濕疹、甲溝炎、角膜結膜炎、腦炎潛伏：三叉神經節(jié)、頸上神經節(jié)

HSV2：生殖器皰疹潛伏：骶神經節(jié)潛伏（1）原發(fā)感染：多見隱性感染

（2）潛伏感染和復發(fā):

HSV-1,2→神經節(jié)→病毒激活→神經纖維 ↓復發(fā)性局部皰疹←皮膚粘膜 ↓

HSV-1：最多見口唇部皰疹

HSV-2：最多見生殖器皰疹（3）先天性感染：

HSV-1：胎盤→胎兒流產，早產，死胎，先天畸形

HSV-2：產道感染→新生兒皰疹HSV-2感染與子宮頸癌的發(fā)生有密切關系。其根據(jù)是：

①患過生殖器皰疹的婦女，宮頸癌的發(fā)病率高；

②宮頸癌患者抗HSV-2抗體陽性率高，效價也高；

③用免疫熒光檢查子宮頸癌脫落細胞涂片可在細胞中查到

HSV-2抗原；

④HSV-2作用于地鼠胚成纖維細胞培養(yǎng)可引起細胞轉化，將轉化細胞注射地鼠可誘生腫瘤；

⑤宮頸皰疹與宮頸癌好發(fā)部位相似，都在鱗狀上皮和柱狀上皮交界處；

⑥分子雜交試驗證明宮頸癌細胞中有HSV-2的基因片斷并有特異性mRNA存在。

（4）HSV-2與子宮頸癌的關系

（5）免疫性原發(fā)感染后1周左右血中可出現(xiàn)中和抗體3-4周達高峰，可持續(xù)多年細胞免疫起更重要作用

病毒的分離與鑒定

三、微生物學檢查

分離HSV較易成功。采取水皰液、唾液、角膜試子或刮取物、陰道棉拭子等接種于兔腎、人胚腎等易感細胞進行培養(yǎng)。一般2－3d即出現(xiàn)CPE，特點是細胞腫脹、變圓、相互融合等，據(jù)此可初步判定。單克隆抗體間接免疫熒光染色法以及DNA酶切分析等方法進行鑒定或分析。微生物學檢查用電鏡直接檢查水皰液中的病毒顆粒;用免疫熒光技術、免疫酶染色等觀察細胞內特異性抗原。在標本接種細胞后，在出現(xiàn)細胞病變之前，做免疫熒光或免疫酶染色進行快速診斷;用核酸雜交或PCR方法檢測標本中HSV病毒核酸進行診斷。

快速診斷血清學診斷：

可用于HSV血清學診斷的試驗有IFA及ELISA等。IgG抗體在體內持續(xù)時間長，不宜作為臨床診斷，而主要用于血清流行病學調查，以了解HSV在人群中的感染率。IFA的優(yōu)點在于可測出IgM、IgG或IgA型抗體。

ELISA測HSV抗體敏感性可達95%。微生物學檢查尚無特殊方法。因HSV與癌癥的發(fā)生可能有關，故一般不主張使用活疫苗或含有皰疹病毒DNA的疫苗。用gD制備亞單位疫苗正在研究中。如孕婦圍產期產道有HSV-2感染，可進行剖腹產或對新生兒注射丙種球蛋白做應急預防。

四、防治原則（一）預防用5-碘脫氧尿嘧啶核苷(皰疹凈)、阿糖胞苷(Ara-A)等治療皰疹性角結膜炎有一定療效。此外，近年發(fā)現(xiàn)無環(huán)鳥苷(acyclovir,ACV)

及其衍生物脫氧鳥苷(VACV)可選擇地抑制HSV的復制，能縮短病程、減輕病狀，且毒性較低，臨床已用于治療口唇皰疹、皰疹性腦炎、生殖器皰疹等。但不能防止?jié)摲腥驹侔l(fā)。單獨使用IFN對樹枝狀皰疹性角膜炎也有治療效果，如與上述藥物合用則效果更為顯著。防治原則（二）治療第二節(jié)水痘帶狀皰疹病毒

Varicella-zostvirusVZV概述人是VZV的唯一自然宿主。皮膚是病毒的主要靶細胞?？捎赏环N病毒引起兩種不同的病癥。兒童初次感染引起水痘。潛伏體內的病毒受到某些刺激后復發(fā)引起帶狀皰疹，多見于成年人和老年人。一、生物學性狀似HSV只一個血清型對一般實驗動物不敏感，在人胚成纖維細胞中增殖，并緩慢產生細胞病變

二、致病性傳染源：患者（唯一天然宿主）患者急性期水皰內容物及上呼吸道分泌物帶狀皰疹水皰內容物傳播途徑：呼吸道傳播接觸傳播（一）原發(fā)感染：水痘(ChickenPox)病毒經呼吸道、結膜、皮膚等處侵入人體先在局部淋巴結增殖進入血液散布到各個內臟繼續(xù)大量增殖2～3周潛伏期，再次入血皮膚廣泛發(fā)生丘疹，水皰疹和膿皰疹

兒童：斑丘疹,水皰疹,膿皰疹，偶見并發(fā)癥

孕婦：較嚴重重,可致胎兒畸形,流產,死產免疫低下患者：重癥水痘（二）潛伏感染和再發(fā)感染：帶狀皰疹

兒童時期患過水痘愈合病毒潛伏在脊髓后根神經節(jié)或腦感染神經節(jié)中機體免疫力下降等條件刺激病毒沿感覺神經軸索下行該神經所支配的皮膚細胞內增殖在皮膚上沿著感覺神經的通路發(fā)生串聯(lián)的水皰疹，形似帶狀免疫力低下的成人和老人多見

zoster三、微生物檢查及防治水痘一帶狀皰疹的臨床癥狀典型，一般不需作微生物學診斷。VZV減毒活疫苗預防水痘感染和傳播有良好效果。治療可用無環(huán)鳥苷、阿糖腺苷和高劑量干擾素。第三節(jié)巨細胞病毒（Cytomegalovirus，CMV）概述感染的細胞腫大，并具有巨大的核內包涵體，故名。CMV具有典型的皰疹病毒形態(tài)，其DNA結構也與HSV相似。一、生物學性狀：

有三種顆粒：典型顆粒、致密顆粒、包膜顆粒具備典型的皰疹病毒的形態(tài)結構直徑180-250nm，有包膜線狀雙股DNA種屬特異性高：只感染人復制周期長，增殖緩慢

CPE：細胞腫脹，核變大，形成巨細胞，核內/胞漿內嗜酸性包涵體，“貓頭鷹眼”狀包涵體。

嗜酸性包涵體“貓頭鷹眼”狀包涵體二、致病性與免疫性傳染源：患者無癥狀的隱形感染者傳播途徑：密切接觸：日常接觸、性接觸、早期哺乳等輸血器官轉移等感染類型原發(fā)感染：2歲以下常隱性感染（成人60-90%有抗體）潛伏感染：唾液腺、乳腺、腎臟、白細胞及其它腺體，與其它皰疹病毒不同之處——始終排毒（以上分泌物中）感染類型先天性感染：胎盤→先天感染→先天畸形重者流產，死產

圍產期感染：產道→新生兒感染，哺乳免疫功能低下者感染：再發(fā)感染→嚴重感染（致死性疾?。╅g質肺炎、視網膜炎、食管炎、結腸炎、腦膜腦炎等輸血感染：輸血后單核細胞增多癥，肝炎接觸感染：接吻、性接觸、哺乳與腫瘤關系：宮頸癌前列腺癌結腸癌Kaposi肉瘤三、微生物學檢查細胞學檢查：多核巨細胞典型的包涵體病毒分離：接種到人胚肺成纖維細胞查核酸：PCR、雜交血清學ELISA查IgM抗體，宮內感染四、治療與預防治療：丙氧鳥苷（ganciclovirGCV）有防止CMV擴散作用耐丙氧鳥苷的CMV感染可選用磷甲酸，但效果比前者差預防：CMV病毒活疫苗致癌潛能的問題有待解決CMV包膜糖蛋白的亞單位疫苗是研究的方向第四節(jié)EB病毒

（Epstein-Barrvirus，EBV

）概述Epstein和Barr于1964年首次成功地將Burkitt非洲兒童淋巴瘤細胞時發(fā)現(xiàn)，故名。為一種嗜B淋巴細胞的皰疹病毒，結構與其它皰疹病毒相似。不能用常規(guī)方法培養(yǎng)。主要侵犯B細胞。一、生物學性狀形態(tài)結構與其他皰疹病毒相似。病毒直徑150-180nm。核心為雙鏈線狀DNA，長約173kb。衣殼由162個殼粒排列成二十面體構成。有包膜。EBV特異性抗原

1、潛伏感染：EBV核抗原（EBNA）：有6種，感染和轉化的B細胞核內均可檢出潛伏感染膜蛋白（LMP）：潛伏感染B細胞的表面抗原

LMP1LMP22、增殖性感染：

早期抗原（EA）：非結構蛋白，具DNA多聚酶活性衣殼抗原（VCA）：與病毒DNA組成EBV的核衣殼膜抗原（MA）：EBV的中和抗原（gp320）二、致病性與免疫性EB病毒在人群中廣泛感染。我國3～5歲兒童感染率達90%以上。主要通過唾液傳播，也可經輸血傳染。EB病毒在口咽部上皮細胞內增殖，然后感染B淋巴細胞。感染B細胞進入血循環(huán)可造成全身性感染。病毒可長期潛伏。

傳染源：患者、隱性感染者傳播途徑：唾液傳播，偶爾輸血感染感染類型：增殖性感染：

初次感染：幼兒隱性感染多見。青春期原發(fā)性感染：50%引起傳染性單核C增多癥

非增殖性感染：潛伏感染→引起細胞轉化→惡性轉化1、傳染性單核細胞增多癥一種急性淋巴組織增生性疾病，多見于青春期初次感染EBV后發(fā)病。三個典型癥狀為發(fā)熱、咽炎和頸淋巴結腫大。隨病情發(fā)展可出現(xiàn)肝脾腫大、肝功能異常，外周血單核細胞增多，并出現(xiàn)異型淋巴細胞（可殺傷表面有EBV抗原表達的B細胞）

所致疾病2、非洲兒童淋巴瘤（即Burkitt淋巴瘤）于中非、新幾內亞和美洲溫熱帶地區(qū)呈地方性流行。多見于5～12歲兒童。好發(fā)部位為顏面、腭部。所有BL病人血清均含EBV抗體，其中80%以上滴度高于正常人。在腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)EBV基因組。3、鼻咽癌我國南方（廣東、廣西）及東南亞是鼻咽癌高發(fā)區(qū)。多發(fā)生于40歲以上中老年人。EBV與鼻咽癌

在所有病例的癌組織中有EBV基因組存在和表達。病人血清中有高效價EBV抗原（主要VCA和EA）的lgG和lgA抗體病情好轉后，這些抗體的滴度也隨之下降。三、微生物學檢查EBV分離培養(yǎng)困難可用核酸雜交和PCR等方法檢測細胞內EBV基因組及其表達產物血清學診斷

EBV特異性抗體的檢測檢測病毒VCA－IgA或EA－IgA抗體，滴度≥1：5～1：10有