北京市朝陽(yáng)區(qū)2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期期末生物試題（解析版）

高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1北京市朝陽(yáng)區(qū)2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期期末試題第一部分選擇題本部分共15題，每題2分，共30分。在每題列出的四個(gè)選項(xiàng)中，選出最符合題目要求的一項(xiàng)。1.大腸桿菌是發(fā)酵工程和基因工程常用的生物材料。下列關(guān)于大腸桿菌的敘述，正確的是（）A.以DNA為遺傳物質(zhì) B.有成形的細(xì)胞核C.通過(guò)有絲分裂增殖 D.屬于自養(yǎng)型生物〖答案〗A〖祥解〗根據(jù)細(xì)胞內(nèi)有無(wú)以核膜為界限的細(xì)胞核，把細(xì)胞分為真核細(xì)胞和原核細(xì)胞兩大類，原核細(xì)胞是組成原核生物的細(xì)胞，這類細(xì)胞主要特征是沒有以核膜為界限的細(xì)胞核，同時(shí)也沒有核膜和核仁，只有擬核。常見的原核生物有藍(lán)細(xì)菌、大腸桿菌、放線菌、支原體等?！驹斘觥緼、大腸桿菌有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，遺傳物質(zhì)是DNA，A正確；B、大腸桿菌是原核生物，沒有成形的細(xì)胞核，B錯(cuò)誤；C、大腸桿菌是原核生物，以二分裂的方式進(jìn)行增殖，C錯(cuò)誤；D、大腸桿菌不能制造有機(jī)物，屬于異養(yǎng)型生物，D錯(cuò)誤。故選A。2.傳統(tǒng)發(fā)酵食品是我國(guó)飲食文化的重要組成部分。下表中發(fā)酵食品制作使用的主要菌種或制作條件有錯(cuò)誤的是（）選項(xiàng)食品名稱主要菌種制作條件A腐乳毛霉有氧B泡菜酵母菌無(wú)氧C酸奶乳酸菌無(wú)氧D果醋醋酸菌有氧A.A B.B C.C D.D〖答案〗B〖祥解〗傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次發(fā)酵保存下來(lái)的發(fā)酵物中的微生物進(jìn)行發(fā)酵、制作食品的技術(shù)?！驹斘觥緼、腐乳制作過(guò)程中起主要作用的微生物是毛霉，毛霉屬于異養(yǎng)需氧型微生物，故發(fā)酵過(guò)程中需要氧氣，A正確；B、泡菜制作過(guò)程中起主要作用的微生物是乳酸菌，而非酵母菌，B錯(cuò)誤；C、酸奶制作過(guò)程中起主要作用的微生物是乳酸菌，乳酸菌為異養(yǎng)厭氧型微生物，故發(fā)酵過(guò)程中要保證嚴(yán)格的無(wú)氧環(huán)境，C正確；D、果醋制作過(guò)程中起主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌屬于異養(yǎng)需氧型微生物，故發(fā)酵過(guò)程中需要氧氣，D正確。故選B。3.近年來(lái)，由于全球變暖，導(dǎo)致葡萄中糖的積累過(guò)多，造成葡萄酒中的平均乙醇含量升高，葡萄酒品質(zhì)下降。下圖①、②、③表示釀酒酵母中特定代謝途徑，相關(guān)敘述正確的是（）A.圖中①、②的發(fā)生場(chǎng)所是線粒體，③的發(fā)生場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)B.酵母菌通過(guò)②途徑能產(chǎn)生大量ATP，通過(guò)③途徑只能產(chǎn)生少量ATPC.在無(wú)氧條件下抑制③途徑會(huì)導(dǎo)致酵母細(xì)胞中[H]的產(chǎn)生和消耗失衡D.選育無(wú)法進(jìn)行①途徑的釀酒酵母新品種能降低葡萄酒中乙醇含量〖答案〗C〖祥解〗圖中①是有氧呼吸和無(wú)氧呼吸的第一階段，發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)；②是有氧呼吸的第二、三階段，分別在線粒體基質(zhì)和線粒體內(nèi)膜上進(jìn)行；③是無(wú)氧呼吸第二階段，場(chǎng)所是在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)?！驹斘觥緼、①是有氧呼吸和無(wú)氧呼吸的第一階段，②是有氧呼吸的第二、三階段，③是無(wú)氧呼吸第二階段，圖中①、③發(fā)生的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，②的發(fā)生場(chǎng)所是線粒體，A錯(cuò)誤；B、細(xì)胞呼吸釋放的能量大部分以熱能形式散失，只有少部分用于合成ATP；無(wú)氧呼吸第二階段即③途徑不產(chǎn)生ATP，B錯(cuò)誤；C、無(wú)氧呼吸的第二階段丙酮酸和[H]反應(yīng)生成酒精和CO2，在無(wú)氧條件下抑制③途徑，[H]的產(chǎn)生不受影響而消耗受到抑制，所以失衡，C正確；D、選育無(wú)法進(jìn)行③途徑的釀酒酵母新品種能降低葡萄酒中乙醇含量，D錯(cuò)誤。故選C。4.某實(shí)驗(yàn)小組測(cè)定土壤中能分解尿素的活菌數(shù)，在實(shí)驗(yàn)組的每個(gè)平板上接種0.1mL稀釋105倍的土樣稀釋液，培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組4個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為17、68、69、75，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.用清水將土樣制成1×103～107倍稀釋的稀釋液后滅菌處理B.接種所用的培養(yǎng)基是濕熱滅菌處理后的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C.如果未接種的對(duì)照組平板上有菌落出現(xiàn)，應(yīng)重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)D.該實(shí)驗(yàn)所用每克土樣中能分解尿素的活菌數(shù)為5.7×107個(gè)〖答案〗C〖祥解〗稀釋涂布平板法除可以用于分離微生物外，也常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)單菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。除稀釋涂布平板法外，還可以利用顯微鏡進(jìn)行直接計(jì)數(shù)，該方法要利用特定的細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板?！驹斘觥緼、用無(wú)菌水（不是清水）將土樣制成1×103～107倍稀釋的稀釋液，然后將稀釋液涂布到制備好的培養(yǎng)基上，A錯(cuò)誤；B、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基為完全培養(yǎng)基，而實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菧y(cè)定土壤中能分解尿素的活菌數(shù)，應(yīng)使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；C、如果未接種的對(duì)照組平板上有菌落出現(xiàn)，可能是培養(yǎng)菌滅菌不徹底等原因?qū)е碌?，?yīng)重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，C正確；D、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，該實(shí)驗(yàn)所用每克土樣中能分解尿素的活菌數(shù)≈（68+69+75）/3÷0.1×105≈7.1×107，D錯(cuò)誤。故選C。5.聚谷氨酸（γ-PGA）是一種用途廣泛的大分子聚合物。研究人員嘗試以含還原糖的蘆葦水解液為原料，利用谷氨酸依賴型枯草芽孢桿菌發(fā)酵生產(chǎn)γ-PGA，發(fā)酵過(guò)程中分批向發(fā)酵罐中補(bǔ)充原料。發(fā)酵進(jìn)程中各項(xiàng)指標(biāo)變化如下圖所示，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.發(fā)酵所用培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌處理B.發(fā)酵過(guò)程中應(yīng)監(jiān)測(cè)控制溫度、pH、溶解氧和罐壓等條件C.分批補(bǔ)充原料利于控制發(fā)酵液中還原糖和谷氨酸鈉水平D.發(fā)酵液γ-PGA產(chǎn)量與枯草芽孢桿菌數(shù)量同步達(dá)到最大值〖答案〗D〖祥解〗發(fā)酵工程一般包括菌種的選育，擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配制、滅菌，接種，發(fā)酵，產(chǎn)品的分離、提純等方面。其中發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)?！驹斘觥緼、發(fā)酵過(guò)程中所用菌種為單一菌種，一旦有雜菌污染，會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品產(chǎn)量下降，發(fā)酵所用培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌處理，A正確；B、發(fā)酵過(guò)程中應(yīng)監(jiān)測(cè)控制溫度、pH、溶解氧和罐壓等條件，環(huán)境條件會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和代謝物的形成，B正確；C、通過(guò)分批補(bǔ)充原料的方式不斷補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可以使發(fā)酵環(huán)境得到優(yōu)化，有利于控制發(fā)酵液中還原糖和谷氨酸鈉水平，C正確；D、分析題圖可知，發(fā)酵液中枯草芽孢桿菌數(shù)量在12h左右達(dá)到最大值，而此時(shí)γ-PGA產(chǎn)量仍處于上升階段，故發(fā)酵液γ-PGA產(chǎn)量與枯草芽孢桿菌數(shù)量達(dá)到最大值的時(shí)間不同步，D錯(cuò)誤。故選D。6.科研人員以攜帶葡萄灰比諾病毒的“陽(yáng)光玫瑰”葡萄為材料，研究了外植體取材部位、光照處理和熱處理方式對(duì)脫除病毒的影響，結(jié)果如下表所示。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）組號(hào)溫度/光照+濕度/黑暗接種部位存活率/%株系脫毒率/%138℃/16h+38℃/8h莖尖50.00————2同上第1腋芽33.33————3同上第2腋芽0————438℃/8h+32℃/8h莖尖88.89100.005同上第1腋芽94.44100.006同上第2腋芽94.4483.33A.接種前不應(yīng)對(duì)外植體消毒，以免干擾各處理?xiàng)l件下的株系脫毒率B.莖尖和第1、2腋芽都含有頂端分生組織，因此可以作為脫毒材料C.研究人員未檢測(cè)1～3組脫毒率的原因可能是該條件下外植體存活率較低D.生產(chǎn)中應(yīng)選擇38℃/8h光照+32℃/8h黑暗，以第1腋芽為外植體脫毒〖答案〗A〖祥解〗植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)，其原理為植物細(xì)胞的全能性。植物組織培養(yǎng)中外植體發(fā)育為完整植株的條件為：離體、嚴(yán)格的無(wú)菌條件、適宜的培養(yǎng)條件及適宜濃度和比例的激素?！驹斘觥緼、植物組織培養(yǎng)中外植體發(fā)育為完整植株必須要有嚴(yán)格的無(wú)菌條件，故接種前應(yīng)對(duì)外植體消毒，A錯(cuò)誤；B、莖尖和第1、2腋芽都含有頂端分生組織，病毒極少甚至無(wú)病毒，可以作為脫毒材料，B正確；C、分析圖表可知，1～3組未檢測(cè)株系脫毒率，可能因?yàn)樵?8℃/16h光照+38℃/8h黑暗條件下外植體存活率低，C正確；D、分析圖表可知，38℃/8h光照+32℃/8h黑暗條件下，第1腋芽的存活率和株系脫毒率均較高，因此生產(chǎn)中應(yīng)選擇38℃/8h光照+32℃/8h黑暗，以第1腋芽為外植體脫毒，D正確。故選A。7.細(xì)胞周期的分裂間期分為3個(gè)時(shí)期：DNA復(fù)制前的時(shí)期為G1期，DNA復(fù)制期為S期，DNA復(fù)制完成后的時(shí)期為G2期。研究人員用血清濃度不同的培養(yǎng)基培養(yǎng)乳腺癌細(xì)胞24h后，檢測(cè)不同DNA含量的細(xì)胞數(shù)量，結(jié)果如圖所示，由此可知低濃度血清培養(yǎng)能使細(xì)胞周期同步化，大部分細(xì)胞停留的時(shí)期是（）A.G1期 B.S期 C.G2期 D.分裂期〖答案〗A〖祥解〗細(xì)胞增殖是重要的細(xì)胞生命活動(dòng)，是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖、遺傳的基礎(chǔ)。細(xì)胞增殖包括物質(zhì)準(zhǔn)備和細(xì)胞分裂兩個(gè)相連續(xù)的過(guò)程。分裂前的間期是細(xì)胞增殖的物質(zhì)準(zhǔn)備和積累階段，又人為地分為

G1期、S期和G2期?！驹斘觥糠至亚暗拈g期是細(xì)胞增殖的物質(zhì)準(zhǔn)備和積累階段，又人為地分為

G1期、S期和G2期，DNA復(fù)制前的時(shí)期為

G1期，DNA復(fù)制期為S期，DNA復(fù)制完成后的時(shí)期為G2期，分析題圖可知，DNA含量在500~1000的細(xì)胞處于S期，即DNA復(fù)制期，DNA含量為500的細(xì)胞處于G1期，DNA含量為1000的細(xì)胞處于G2期或分裂期，與對(duì)照組相比，低濃度血清培養(yǎng)下，DNA含量為1000的細(xì)胞數(shù)量明顯減少，DNA含量為500的細(xì)胞數(shù)量增加，說(shuō)明低濃度血清培養(yǎng)能使大部分細(xì)胞停留的G1期，A正確，BCD錯(cuò)誤。故選A。8.我國(guó)科研工作者運(yùn)用生物打印技術(shù)將肌腱干細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞以分層方式分布在支架中，制備了下圖所示的可用于肌腱與骨組織界面再生的多細(xì)胞支架。相關(guān)敘述正確的是（）A.同一個(gè)體的肌腱細(xì)胞與骨細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能差異是基因選擇性缺失的結(jié)果B.肌腱干細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞能自我更新和分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種細(xì)胞C.體外培養(yǎng)兩種干細(xì)胞均需要無(wú)菌無(wú)毒、36.5℃左右、pH7.2～7.4和適宜滲透壓條件D.利用多細(xì)胞支架治療肌腱斷裂可保證異體來(lái)源的細(xì)胞移植不引起免疫排斥〖答案〗C〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：指從動(dòng)物細(xì)胞中取出相關(guān)的組織，將它們分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在適宜的條件下，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：①營(yíng)養(yǎng)：一般用液體培養(yǎng)基，要添加血清，以補(bǔ)充動(dòng)物細(xì)胞所需的未知營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；②無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境：培養(yǎng)液定期更換以清除代謝物，防止代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害；③溫度、PH和滲透壓：溫度為36.5±0.5℃、PH為7.2~7.4。④氣體環(huán)境：95%空氣和5%CO2?！驹斘觥緼、同一個(gè)體的肌腱細(xì)胞與骨細(xì)胞的遺傳物質(zhì)相同，但形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能存在差異，這是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果，A錯(cuò)誤；B、肌腱干細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有組織特異性，只能分化成特定的細(xì)胞或組織，不能分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、體外培養(yǎng)兩種干細(xì)胞均需要提供適宜的條件，如無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；適宜的溫度、pH和滲透壓：溫度為36.5±0.5℃、PH為7.2~7.4；適宜的氣體環(huán)境等，C正確；D、肌腱與骨組織界面再生的多細(xì)胞支架所利用的肌腱干細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可來(lái)源于病人本身，將它用于病人體內(nèi)，理論上可以避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，而不能保證異體來(lái)源的細(xì)胞移植不引起免疫排斥，D錯(cuò)誤。故選C。9.克隆技術(shù)可用于生殖性克隆和治療性克隆，相關(guān)敘述正確的是（）A.生殖性克隆動(dòng)物與其供核親本的遺傳物質(zhì)組成和性狀完全相同B.生殖性克隆人嚴(yán)重地違反了人類倫理道德，是克隆技術(shù)的濫用C.生殖性克隆和治療性克隆都應(yīng)用了體細(xì)胞核移植和胚胎移植技術(shù)D.取自體的細(xì)胞核進(jìn)行治療性克隆，可治療鐮狀細(xì)胞貧血等遺傳病〖答案〗B〖祥解〗治療性克?。褐咐每寺〖夹g(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織用于治療性移植。生殖性克隆:指將克隆技術(shù)用于生育，即用于產(chǎn)生人類個(gè)體?！驹斘觥緼、生殖性克隆動(dòng)物的部分遺傳物質(zhì)來(lái)自供細(xì)胞質(zhì)的親本，A錯(cuò)誤；B、生殖性克隆人嚴(yán)重地違反了人類倫理道德，是克隆技術(shù)的濫用，所以我國(guó)禁止生殖性克隆，B正確；C、治療性克隆不需要進(jìn)行胚胎移植，C錯(cuò)誤；D、自體的細(xì)胞核含有與鐮狀細(xì)胞貧血有關(guān)的基因，不能取自體的細(xì)胞核進(jìn)行治療性克隆來(lái)治療鐮狀細(xì)胞貧血等遺傳病，D錯(cuò)誤。故選B。10.我國(guó)科研工作者將可表達(dá)綠色熒光蛋白的供體獼猴的胚胎干細(xì)胞（簡(jiǎn)稱4CL干細(xì)胞）注射至與其遺傳信息不同的獼猴胚胎中，形成嵌合胚胎，并最終得到嵌合體猴，過(guò)程如下圖所示。相關(guān)敘述正確的是（）A.桑葚胚階段注入的4CL干細(xì)胞會(huì)與其他胚胎細(xì)胞發(fā)生融合B.嵌合胚胎中的滋養(yǎng)層細(xì)胞將發(fā)育為嵌合體猴的各種組織C.嵌合胚胎移植前，需要對(duì)代孕母猴進(jìn)行超數(shù)排卵和同期發(fā)情處理D.嵌合體猴可能通過(guò)有性生殖將4CL干細(xì)胞的遺傳信息遺傳給后代〖答案〗D〖祥解〗胚胎干細(xì)胞來(lái)源于早期胚胎或原始性腺分離出來(lái)的一類細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞，是高度未分化的細(xì)胞。如果進(jìn)行體外培養(yǎng)，能夠無(wú)限的增殖和分化。胚胎肝細(xì)胞還可以分化成多功能的細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞具有多能性，可以分化成多種組織的能力但是無(wú)法獨(dú)自發(fā)育成一個(gè)個(gè)體細(xì)胞。胚胎里的干細(xì)胞被稱為一種“全能”細(xì)胞，可以分化成所有類型的細(xì)胞，并且攜帶生物體的全套遺傳信息?！驹斘觥緼、4CL干細(xì)胞不會(huì)與其他胚胎細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞融合，A錯(cuò)誤；B、嵌合胚胎中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞將發(fā)育為嵌合體猴的各種組織，B錯(cuò)誤；C、嵌合胚胎移植前，需要對(duì)代孕母猴進(jìn)行同期發(fā)情處理，C錯(cuò)誤；D、若嵌合體猴的原始生殖細(xì)胞中含有4CL干細(xì)胞的遺傳信息，可以通過(guò)有性生殖將4CL干細(xì)胞的遺傳信息遺傳給后代，D正確。故選D。11.關(guān)于化合物分離或鑒定的高中生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)，敘述錯(cuò)誤的是（）A.利用加熱后與斐林試劑生成磚紅色沉淀的反應(yīng)鑒定還原糖B.利用常溫條件下與二苯胺試劑呈現(xiàn)紫色的反應(yīng)來(lái)鑒定DNAC.利用不同光合色素在層析液中溶解度的差異分離光合色素D.利用能被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色的特性鑒定細(xì)胞中的脂肪〖答案〗B〖祥解〗生物組織中化合物的鑒定：（1）斐林試劑可用于鑒定還原糖，在水浴加熱的條件下，溶液的顏色變化為磚紅色；（2）蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑反應(yīng)呈紫色；（3）脂肪可被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色。【詳析】A、在水浴加熱的條件下，還原糖和斐林試劑反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀，A正確；B、在水浴加熱的條件下，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，B錯(cuò)誤；C、光合色素分離的原理是色素在層析液中的溶解度不同，隨著層析液擴(kuò)散的速度不同，C正確；D、脂肪可被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色，利用此特性可用蘇丹Ⅲ染液鑒定細(xì)胞中的脂肪，D正確。故選B。12.PCR中子鏈合成的原料是4種脫氧核苷三磷酸（dNTP），包括dATP、dGTP、dCTP和dTTP。dNTP是高能磷酸化合物，可以為子鏈合成提供能量。如果要利用含32P的dNTP合成具有放射性的DNA，32P應(yīng)位于（）A.遠(yuǎn)離脫氧核糖的磷酸基團(tuán) B.中間磷酸基團(tuán)C.靠近脫氧核糖的磷酸基團(tuán) D.任意磷酸基團(tuán)〖答案〗C【詳析】dNTP由含氮堿基、脫氧核糖和3個(gè)磷酸基團(tuán)連接而成，DNA的基本組成單位脫氧核苷酸含有一個(gè)磷酸基團(tuán)。dNTP若要合成DNA，需要將遠(yuǎn)離脫氧核糖和中間部位的兩個(gè)磷酸基團(tuán)脫去轉(zhuǎn)化成脫氧核苷酸，故如果要利用含32P的dNTP合成具有放射性的DNA，32P應(yīng)位于靠近脫氧核糖的磷酸基團(tuán)，C正確，ABD錯(cuò)誤。故選C。13.酵母人工染色體pYAC2是以酵母菌為受體細(xì)胞構(gòu)建基因文庫(kù)時(shí)的常用載體。下圖為pYAC2的結(jié)構(gòu)示意圖，導(dǎo)入受體細(xì)胞前用限制酶BamHⅠ切割可使其成為線性的染色體。pYAC2適配的受體菌菌落呈紅色，sup4基因表達(dá)能夠抑制其性狀表現(xiàn)，使菌落呈白色。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.導(dǎo)入pYAC2的受體菌能夠在不含色氨酸的培養(yǎng)基中生存B.用BamHⅠ切割pYAC2后，TEL端粒序列位于染色體的兩端C.著絲粒序列CEN4的存在可防止pYAC2在細(xì)胞分裂中丟失D.將帶有目的基因的重組pYAC2導(dǎo)入受體菌后應(yīng)挑選白色菌落〖答案〗D〖祥解〗載體：除質(zhì)粒外，還有噬菌體和動(dòng)植物病毒等。質(zhì)粒作為載體的條件：①有一個(gè)至多個(gè)限制酶酶切位點(diǎn)；②進(jìn)入受體細(xì)胞后能自我復(fù)制或整合到宿主細(xì)胞DNA上進(jìn)行同步復(fù)制；③有特殊的標(biāo)記基因，便于重組DNA分子的篩選?！驹斘觥緼、pYAC2上含有TRP1（色氨酸合成酶基因），導(dǎo)入pYAC2的受體菌能夠合成色氨酸，能夠在不含色氨酸的培養(yǎng)基中生存，A正確；B、pYAC2上有兩個(gè)BamHⅠ切割位點(diǎn)，用BamHⅠ切割后，pYAC2成為線性的染色體，TEL端粒序列位于染色體的兩端，B正確；C、著絲粒是確保細(xì)胞分裂時(shí)染色體正確分離的重要結(jié)構(gòu)，pYAC2上的CEN4（著絲粒序列）可防止pYAC2在細(xì)胞分裂中丟失，C正確；D、分析題圖可知，目的基因插入會(huì)破壞sup4基因，導(dǎo)致sup4基因不能表達(dá)，故pYAC2適配的受體菌菌落仍呈紅色，將帶有目的基因的重組pYAC2導(dǎo)入受體菌后應(yīng)挑選紅色菌落，D錯(cuò)誤。故選D。14.油菜是我國(guó)的重要油料作物，其生長(zhǎng)受到核盤菌引起的菌核病威脅?？蒲腥藛T試圖培育抗菌核病的轉(zhuǎn)基因油菜新品種，其抗性機(jī)理如下圖所示，相關(guān)敘述正確的是（）A.將含防御基因的基因表達(dá)載體導(dǎo)入核盤菌后，侵染油菜獲得轉(zhuǎn)基因植株B.核盤菌侵染轉(zhuǎn)基因油菜后，啟動(dòng)防御基因表達(dá)出相應(yīng)蛋白質(zhì)抵御核盤菌侵染C.未受到核盤菌侵染時(shí)，油菜細(xì)胞不能合成轉(zhuǎn)錄因子B，不啟動(dòng)防御基因表達(dá)D.轉(zhuǎn)基因油菜中的啟動(dòng)子pB屬于誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，能夠精確調(diào)控防御基因的表達(dá)〖答案〗D〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定?！驹斘觥緼、將含防御基因的基因表達(dá)載體導(dǎo)入核盤菌后，侵染油菜，之后還需要對(duì)防御基因進(jìn)行檢測(cè)和鑒定，A錯(cuò)誤；B、分析題圖可知，核盤菌侵染轉(zhuǎn)基因油菜后，啟動(dòng)防御基因轉(zhuǎn)錄出小干擾RNA抵御核盤菌侵染，而非表達(dá)出蛋白質(zhì)，B錯(cuò)誤；C、未受到核盤菌侵染時(shí)，油菜細(xì)胞不能激活細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子B，導(dǎo)致防御基因不能表達(dá)，C錯(cuò)誤；D、轉(zhuǎn)基因油菜中的啟動(dòng)子pB只有在核盤菌侵染時(shí)才能激活目的基因的表達(dá)，屬于誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，能夠精確調(diào)控防御基因的表達(dá)，D正確。故選D。15.生物安全是國(guó)家安全的重要組成部分。以下選項(xiàng)中不符合相關(guān)法律法規(guī)，可能給我國(guó)帶來(lái)生物安全風(fēng)險(xiǎn)的是（）A.從事生物醫(yī)學(xué)新技術(shù)臨床研究，應(yīng)當(dāng)通過(guò)倫理審查B.病原微生物實(shí)驗(yàn)室將使用后的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物釋放到野外環(huán)境中C.任何單位和個(gè)人未經(jīng)批準(zhǔn)，不得擅自引進(jìn)、釋放或者丟棄外來(lái)物種D.禁止開發(fā)、制造或者以其他方式獲取、儲(chǔ)存、持有和使用生物武器〖答案〗B〖祥解〗生物武器：包括治病菌類、病毒類和生物毒劑類，它可以直接或者通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，也能大量損害植物?！驹斘觥緼、從事生物醫(yī)學(xué)新技術(shù)臨床研究，應(yīng)當(dāng)通過(guò)倫理審查，嚴(yán)格遵守我國(guó)法規(guī)和倫理準(zhǔn)則，A不符合題意；B、病原微生物實(shí)驗(yàn)室將使用后的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不能直接釋放到野外環(huán)境中，可能會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，B符合題意；C、任何單位和個(gè)人未經(jīng)批準(zhǔn)，不得擅自引進(jìn)、釋放或者丟棄外來(lái)物種，可能會(huì)引起物種入侵，C不符合題意；D、生物武器造成人、畜大規(guī)模傷亡，也能大量損害植物，禁止開發(fā)、制造或者以其他方式獲取、儲(chǔ)存、持有和使用生物武器，D不符合題意。故選B。第二部分本部分共6題，共70分。16.豆瓣醬是我國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵食品，發(fā)酵過(guò)程中利用了多種天然菌種。研究人員嘗試分離這些菌種，進(jìn)而研究它們?cè)诎l(fā)酵中的作用。（1）研究人員用_________稀釋豆瓣醬醬醅，得到菌液，然后用________法將菌液接種在固體培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)一段時(shí)間后，根據(jù)菌落特征初步選擇出幾種微生物：葡萄球菌S、解淀粉芽孢桿菌Ba、嗜鹽四聯(lián)球菌T和融合魏斯氏菌W。（2）為了檢測(cè)抗生素對(duì)上述菌種的抑菌率，分別將這些菌種接種在含有不同種類、不同濃度抗生素的液體培養(yǎng)基內(nèi)，并設(shè)置對(duì)照菌液和不接種菌的空白培養(yǎng)體系，在適宜條件下培養(yǎng)，定期檢測(cè)菌液的吸光度（OD值）。已知菌液吸光度與菌體密度成正比。該實(shí)驗(yàn)中對(duì)照菌液組的處理方式與實(shí)驗(yàn)組的區(qū)別是____，某實(shí)驗(yàn)組菌液抗生素抑菌率的計(jì)算公式為_______。（3）3種抗生素對(duì)上述微生物的抑菌率如下圖所示。據(jù)圖可知，向培養(yǎng)基中加入抗生素__________，控制其濃度為_________μg/mL，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)嗜鹽四聯(lián)球菌T的選擇培養(yǎng)?！即鸢浮剑?）①.無(wú)菌水②.（稀釋）涂布（平板）（2）①.不添加抗生素②.[(對(duì)照菌液OD值-實(shí)驗(yàn)組菌液OD值)/(對(duì)照菌液OD值-空白培養(yǎng)體系OD值)]×100%（3）①.萘夫西林鈉②.1.454〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)基表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！拘?wèn)1詳析】為避免雜菌感染，用無(wú)菌水稀釋豆瓣醬醬醅得到菌液，然后用（稀釋）涂布（平板）法將菌液接種在固體培養(yǎng)基表面。【小問(wèn)2詳析】實(shí)驗(yàn)的自變量為不同種類、不同濃度的抗生素，故該實(shí)驗(yàn)中對(duì)照菌液組的處理方式與實(shí)驗(yàn)組的區(qū)別是不添加抗生素。某實(shí)驗(yàn)組菌液抗生素抑菌率為[(對(duì)照菌液菌體密度-實(shí)驗(yàn)組菌液菌體密度)/(對(duì)照菌液菌體密度-空白培養(yǎng)體系菌體密度)]×100%，已知菌液吸光度與菌體密度成正比，故某實(shí)驗(yàn)組菌液抗生素抑菌率的計(jì)算公式為[(對(duì)照菌液OD值-實(shí)驗(yàn)組菌液OD值)/(對(duì)照菌液OD值-空白培養(yǎng)體系OD值)]×100%?！拘?wèn)3詳析】據(jù)圖可知，當(dāng)萘夫西林鈉濃度為1.454μg/mL時(shí)，該抗生素對(duì)其他三種微生物（葡萄球菌S、解淀粉芽孢桿菌Ba和融合魏斯氏菌W）的抑菌率幾乎為100%，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)嗜鹽四聯(lián)球菌T的選擇培養(yǎng)。17.枸杞是一味傳統(tǒng)中藥，野生黑果枸杞富含花青素，且抗逆性強(qiáng)，但比人工種植的寧夏枸杞個(gè)體小、產(chǎn)量低。研究人員嘗試?yán)貌粚?duì)稱植物體細(xì)胞雜交技術(shù)將野生黑果枸杞的抗逆性狀轉(zhuǎn)移到寧夏枸杞中。（1）愈傷組織細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛，是制備原生質(zhì)體的良好材料。在特定的培養(yǎng)條件下，外植體經(jīng)過(guò)______轉(zhuǎn)變成愈傷組織，培養(yǎng)基中________是影響該過(guò)程中植物細(xì)胞發(fā)育方向的關(guān)鍵因素。（2）不對(duì)稱植物體細(xì)胞雜交操作過(guò)程如下：①對(duì)黑果枸杞原生質(zhì)體進(jìn)行輻射處理，使其細(xì)胞核中的______部分?jǐn)嗔?，用藥物處理寧夏枸杞原生質(zhì)體，使其細(xì)胞質(zhì)中的某些酶失活，兩種原生質(zhì)體都失去分裂能力。②用化學(xué)誘導(dǎo)劑_________誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，培養(yǎng)體系中只有兩種不同枸杞的融合原生質(zhì)體可分裂形成再生愈傷組織。（3）研究人員對(duì)3種愈傷組織的同工酶進(jìn)行檢測(cè)。同工酶是功能相同，但酶本身的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)等方面有所不同的一組酶。①過(guò)氧化氫酶的功能是______。將提取的愈傷組織蛋白質(zhì)進(jìn)行電泳，電泳后的凝膠浸泡在淀粉、KI和H2O2混合溶液中，已知KI遇O2生成I2，一段時(shí)間后過(guò)氧化氫酶所在部位顯色，如下圖所示。顯色條帶為_____色，顯色深淺由酶的_______決定。②結(jié)果顯示融合原生質(zhì)體再生愈傷組織中缺乏來(lái)自______的部分過(guò)氧化氫同工酶，原因可能是_______。（4）本研究中，獲得多株雜種植株后下一階段的研究方向是___________?！即鸢浮剑?）①.脫分化②.生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素的濃度、比例（2）①.染色體（DNA）②.聚乙二醇（PEG）（3）①.催化過(guò)氧化氫分解②.藍(lán)③.活性④.寧夏枸杞和黑果枸杞⑤.相關(guān)基因丟失或未表達(dá)（4）依據(jù)其抗逆性進(jìn)一步篩選〖祥解〗植物組織培養(yǎng)是一種在無(wú)菌條件下，將植物的離體器官、組織或細(xì)胞培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，使其發(fā)育成完整植株的技術(shù)?！拘?wèn)1詳析】植物組織培養(yǎng)，在特定的培養(yǎng)條件下，外植體經(jīng)過(guò)脫分化轉(zhuǎn)變成愈傷組織；培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素的濃度、比例是影響該過(guò)程中植物細(xì)胞發(fā)育方向的關(guān)鍵因素。【小問(wèn)2詳析】①對(duì)黑果枸杞原生質(zhì)體進(jìn)行輻射處理，使其細(xì)胞核中的染色體（DNA）部分?jǐn)嗔眩瑢?dǎo)致其發(fā)生變異，使其細(xì)胞質(zhì)中的某些酶失活，兩種原生質(zhì)體都失去分裂能力。②用化學(xué)誘導(dǎo)劑聚乙二醇（PEG）誘導(dǎo)植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合?！拘?wèn)3詳析】①過(guò)氧化氫酶的功能是催化過(guò)氧化氫分解。首先，過(guò)氧化氫酶的主要功能是催化過(guò)氧化氫分解為水和氧氣。在實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)特定的方法可以檢測(cè)過(guò)氧化氫酶的活性。在進(jìn)行同工酶電泳時(shí)，會(huì)使用特定的顯色劑。如果存在過(guò)氧化氫酶，它會(huì)與顯色劑發(fā)生反應(yīng)，從而產(chǎn)生顯色現(xiàn)象。通常，如果顯色結(jié)果為藍(lán)色，說(shuō)明存在過(guò)氧化氫酶的作用。顯色的深淺程度與過(guò)氧化氫酶的活性密切相關(guān)。②在對(duì)融合原生質(zhì)體再生愈傷組織進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，發(fā)現(xiàn)其中缺少寧夏枸杞和黑果枸杞部分過(guò)氧化氫同工酶。這意味著在融合過(guò)程中，可能由于相關(guān)基因丟失或未表達(dá)等其他遺傳變化，導(dǎo)致某些原本存在于親本中的過(guò)氧化氫同工酶基因沒有在融合后的細(xì)胞中正常表達(dá)，或者表達(dá)量顯著降低，以至于在檢測(cè)中無(wú)法呈現(xiàn)出相應(yīng)的同工酶條帶。【小問(wèn)4詳析】比如可以進(jìn)一步研究雜種植株的生長(zhǎng)特性、生理特性、對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性、依據(jù)其抗逆性進(jìn)一步篩選，或者探索如何提高雜種植株的產(chǎn)量、品質(zhì)等方面。18.抑郁癥與腸道菌群之間存在密切的聯(lián)系。我國(guó)科研人員發(fā)現(xiàn)某些腸道微生物產(chǎn)生的代謝物高香草酸（HVA）與抑郁癥的發(fā)生有關(guān)，并對(duì)其相關(guān)機(jī)理進(jìn)行了研究。（1）抑郁癥患者血清HVA水平較低。研究人員取抑郁癥患者和健康志愿者糞便樣本進(jìn)行腸道微生物體外培養(yǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)含有水、______和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)患者腸道菌群中缺乏能產(chǎn)生HVA的B菌。（2）檢測(cè)發(fā)現(xiàn)抑郁癥模型小鼠血清和腦組織中HVA水平均顯著低于對(duì)照組健康小鼠，且腸道菌群中也缺乏B菌。研究人員對(duì)抑郁癥模型小鼠進(jìn)行HVA給藥或腸道移植B菌，獲得圖1、圖2所示實(shí)驗(yàn)結(jié)果。①圖1結(jié)果表明移植B菌能產(chǎn)生HVA到達(dá)腦部，依據(jù)是___________。②將小鼠在無(wú)法逃離的水槽中放置5min，小鼠放棄掙扎、漂浮不動(dòng)的總時(shí)長(zhǎng)是評(píng)估抑郁癥狀的重要指標(biāo)。圖2結(jié)果表明________。（3）已有研究表明腦部海馬區(qū)的突觸損傷是抑郁癥的主要病理基礎(chǔ)，而細(xì)胞過(guò)度自噬參與了突觸損傷。細(xì)胞自噬過(guò)程中，細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的LC3-Ⅰ蛋白被剪切轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)C3-Ⅱ，LC3-Ⅱ定位到自噬體膜上，位于自噬體內(nèi)膜上的LC3-Ⅱ最終在溶酶體中被降解（圖3），因此細(xì)胞中兩種LC3蛋白含量和兩種蛋白的含量比（LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ）是細(xì)胞自噬水平的重要指標(biāo)。研究人員以體外培養(yǎng)的小鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞為材料，進(jìn)行相關(guān)處理后檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ含量，結(jié)果如圖4所示。①培養(yǎng)基中缺乏葡萄糖時(shí)，細(xì)胞自噬水平升高，從物質(zhì)與能量的角度說(shuō)明該現(xiàn)象對(duì)細(xì)胞生存的意義：______。②圖4中自噬抑制劑能夠抑制溶酶體功能，第4組與第2組的“LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ”的差異產(chǎn)生原因是______。③實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，HVA能夠通過(guò)___________減輕海馬區(qū)突觸損傷，從而改善抑郁癥狀?！即鸢浮剑?）碳源、氮源（2）①.移植B菌的抑郁癥模型小鼠腦組織中HVA水平顯著高于抑郁癥模型小鼠②.移植B菌或HVA給藥都能促進(jìn)抑郁癥狀改善（3）①.為細(xì)胞生存提供氨基酸、葡萄糖等必需原料物質(zhì)和能源物質(zhì)②.第4組自噬抑制劑使自噬小體上LC3-Ⅱ降解速率下降，“LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ”增加③.抑制海馬神經(jīng)細(xì)胞自噬〖祥解〗細(xì)胞自噬(autophagy)就是細(xì)胞吃掉自身的結(jié)構(gòu)和物質(zhì)。在一定條件下，細(xì)胞會(huì)將受損或功能退化的細(xì)胞結(jié)構(gòu)等，通過(guò)溶酶體降解后再利用，這就是細(xì)胞自噬。處于營(yíng)養(yǎng)缺乏條件下的細(xì)胞，通過(guò)細(xì)胞自噬可以獲得維持生存所需的物質(zhì)和能量;在細(xì)胞受到損傷、微生物入侵或細(xì)胞衰老時(shí)，通過(guò)細(xì)胞自噬，可以清除受損或衰老的細(xì)胞器，以及感染的微生物和毒素，從而維持細(xì)胞內(nèi)部環(huán)境的穩(wěn)定。有些激烈的細(xì)胞自噬，可能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。研究表明，人類許多疾病的發(fā)生，可能與細(xì)胞自噬發(fā)生障礙有關(guān)，因此，細(xì)胞自噬機(jī)制的研究對(duì)許多疾病的防治有重要意義?！拘?wèn)1詳析】微生物體外培養(yǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)?！拘?wèn)2詳析】①圖1中的抑郁癥模型組+B菌的而小鼠腦組織中HVA水平與抑郁癥模型組小鼠相比明顯要高，所以可以表明移植B菌產(chǎn)生的HVA到達(dá)腦部，使抑郁癥模型組+B菌的而小鼠腦組織中HVA水平升高。②圖2中的抑郁癥模型組+B菌的小鼠漂浮不動(dòng)時(shí)長(zhǎng)與抑郁癥模型組小鼠相比明顯要低很多，抑郁癥模型組+HVA的小鼠漂浮不動(dòng)時(shí)長(zhǎng)與抑郁癥模型組小鼠相比明顯也低很多，這說(shuō)明移植B菌或HVA給藥都能促進(jìn)抑郁癥狀改善?！拘?wèn)3詳析】①處于營(yíng)養(yǎng)缺乏條件下的細(xì)胞，通過(guò)細(xì)胞自噬可以獲取維持生存所需的物質(zhì)和能量，所以培養(yǎng)基中缺乏葡萄糖時(shí)，細(xì)胞自噬水平升高，從物質(zhì)與能量的角度說(shuō)明該現(xiàn)象對(duì)細(xì)胞生存的意義是為細(xì)胞生存提供氨基酸、葡萄糖等必需原料物質(zhì)和能源物質(zhì)②圖4中第2組為培養(yǎng)基中缺乏葡萄糖，細(xì)胞自噬水平會(huì)升高，細(xì)胞LC3-Ⅰ含量和LC3-Ⅱ含量都較低，且LC3-Ⅱ含量比LC3-Ⅰ含量還要少。另由題干信息知，細(xì)胞自噬過(guò)程中，細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的LC3-Ⅰ蛋白被剪切轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)C3-Ⅱ，LC3-Ⅱ定位到自噬體膜上，位于自噬體內(nèi)膜上的LC3-Ⅱ最終在溶酶體中被降解，圖4中第4組為培養(yǎng)基中缺乏葡萄糖且加入自噬抑制劑，題干知自噬抑制劑能夠抑制溶酶體功能，從而使自噬體內(nèi)的物質(zhì)以及自噬體內(nèi)膜上的LC3-Ⅱ降解速率減慢，而LC3-Ⅰ蛋白仍可轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)C3-Ⅱ，從而使LC3-Ⅱ/

LC3-Ⅰ比值增加，并且高于第2組。③圖4中第1組為培養(yǎng)基中添加有葡萄糖，圖中細(xì)胞只含有LC3-Ⅰ，說(shuō)明細(xì)胞基本上不發(fā)生自噬；圖4中第2組為培養(yǎng)基中缺乏葡萄糖，細(xì)胞自噬水平會(huì)升高，細(xì)胞LC3-Ⅰ含量和LC3-Ⅱ含量都較低，且LC3-Ⅱ含量比LC3-Ⅰ含量還要少；圖4中第4組為培養(yǎng)基中缺乏葡萄糖且加入自噬抑制劑，題干知自噬抑制劑能夠抑制溶酶體功能，從而使自噬體內(nèi)的物質(zhì)以及自噬體內(nèi)膜上的LC3-Ⅱ降解速率減慢，而LC3-Ⅰ蛋白仍可轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)C3-Ⅱ，從而使LC3-Ⅱ/

LC3-Ⅰ比值增加，并且高于第2組細(xì)胞自噬組；圖4中第3組為培養(yǎng)基中缺乏葡萄糖且加入HVA，LC3-Ⅱ/

LC3-Ⅰ比值增加，并且高于第2組細(xì)胞自噬組，和第4組一樣使LC3-Ⅱ/

LC3-Ⅰ比值增加，并且高于第2組細(xì)胞自噬組，說(shuō)明HVA和自噬抑制劑作用一樣，能夠抑制神經(jīng)細(xì)胞自噬，從而減輕海馬區(qū)突觸損傷，從而改善抑郁癥狀。19.學(xué)習(xí)以下材料，回答（1）～（5）題。阿爾茨海默病早期診斷的新技術(shù)阿爾茨海默病（AD）是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)的退行性病變。血漿外泌體是由活細(xì)胞分泌到血液中的囊泡。與健康人相比，AD患者血漿外泌體上蛋白質(zhì)Aβ1-42含量顯著升高，可作為AD診斷的生物標(biāo)志物。我國(guó)科研人員開發(fā)了檢測(cè)血漿外泌體Aβ1-42水平的新技術(shù)——免疫磁珠外泌體聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（iMEP）技術(shù)。研究者首先將抗Aβ1-42抗體與DNA單鏈1結(jié)合成DNA-抗體偶聯(lián)物，然后除去未偶聯(lián)成功的游離抗體，獲得純化的DNA-抗體偶聯(lián)物，純化過(guò)程如下：?jiǎn)捂?上的片段b通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與預(yù)先偶聯(lián)了納米顆粒（SA）的單鏈2上的片段b*結(jié)合，偶聯(lián)物隨納米顆粒沉淀。沉淀物溶解后再加入單鏈3，單鏈3與單鏈1競(jìng)爭(zhēng)性雜交結(jié)合單鏈2，因此可將DNA-抗體偶聯(lián)物從納米顆粒上替換下來(lái)（圖1）。CD63是外泌體表面特異性高表達(dá)的蛋白，且AD患者外泌體CD63含量與健康人相同。研究者將抗CD63抗體固定在磁珠上，抗體-磁珠偶聯(lián)物能夠結(jié)合血液外泌體，使其富集。再利用DNA-抗體偶聯(lián)物結(jié)合外泌體表面的Aβ1-42，最后利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)DNA-抗體偶聯(lián)物中的DNA進(jìn)行指數(shù)擴(kuò)增。PCR體系中含有熒光染料，該染料在游離狀態(tài)不發(fā)光，與雙鏈DNA結(jié)合后發(fā)出熒光，根據(jù)產(chǎn)物熒光強(qiáng)度可計(jì)算DNA模板量（圖2）。iMEP技術(shù)能夠靈敏地檢測(cè)血液樣本AD生物標(biāo)志物的含量，還可以擴(kuò)展到檢測(cè)外泌體上其他生物標(biāo)志物，因此有可能成為復(fù)雜臨床環(huán)境中疾病篩查和進(jìn)展監(jiān)測(cè)的新工具。（1）制備抗Aβ1-42單克隆抗體時(shí)，多次注射_______到小鼠體內(nèi)，從小鼠的脾臟中獲得B淋巴細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，先篩選得到雜交瘤細(xì)胞，再進(jìn)行______培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，得到能分泌抗Aβ1-42抗體的雜交瘤細(xì)胞。（2）圖1中DNA單鏈1的5’和3’末端堿基序列為：5’-CATGTT…CGACTA-3’，則DNA單鏈3的5’末端堿基序列應(yīng)為__________，沉淀物溶解后加入的DNA單鏈3的量應(yīng)_______（多于/等于/少于）溶液中DNA單鏈1的量。（3）研究人員用iMEP技術(shù)檢測(cè)比較健康人與AD患者血液樣本外泌體中Aβ1-42含量，下列關(guān)于該實(shí)驗(yàn)的敘述正確的是_______A.應(yīng)在兩類樣本的外泌體CD63總量相等的條件下檢測(cè)Aβ1-42含量B.如果DNA-抗體偶聯(lián)物中混有游離抗體，會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)值偏小C.PCR擴(kuò)增的模板是單鏈，因此PCR體系中只需要加入一種引物D.AD患者血液樣本PCR擴(kuò)增終產(chǎn)物的熒光強(qiáng)度顯著高于健康人（4）iMEP技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)之一是靈敏度高，其高靈敏度的原因是________。（5）在iMEP技術(shù)中，同時(shí)使用兩種DNA-抗體偶聯(lián)物，并將PCR產(chǎn)物檢測(cè)環(huán)節(jié)更改為電泳檢測(cè)，可以同時(shí)檢測(cè)兩種生物標(biāo)志物分子。此時(shí)使用的兩種DNA-抗體偶聯(lián)物之間的區(qū)別是_________?！即鸢浮剑?）①.Aβ1-42②.克隆化（2）①.CGACTA…②.多于（3）ABD（4）抗CD63抗體-磁珠偶聯(lián)物能夠富集血液中外泌體；抗Aβ1-42單抗靈敏度高；實(shí)時(shí)熒光定量PCR能夠放大信號(hào)（5）抗體不同；DNA單鏈長(zhǎng)度不同〖祥解〗單克隆抗體制備流程：（1）對(duì)小鼠注射特定的抗原使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)；（2）從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；（3）將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選；（4）在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)；（5）對(duì)上述雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選就可獲得足量的能分泌所需抗體的細(xì)胞；（6）最后，將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。這樣從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的單克隆抗體。【小問(wèn)1詳析】抗體是在相應(yīng)抗原刺激機(jī)體時(shí)產(chǎn)生的，該實(shí)驗(yàn)的目的是制備抗Aβ1-42單克隆抗體，因此要用多次注射Aβ1-42使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)，以便從小鼠脾臟中獲取足夠的已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞。由于一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體，因此，從免疫的小鼠中獲取的B淋巴細(xì)胞可能產(chǎn)生不同抗體。為了獲得單克隆抗體，經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選出來(lái)的雜交瘤細(xì)胞還要經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，才能得到能分泌抗Aβ1-42抗體的雜交瘤細(xì)胞?！拘?wèn)2詳析】依題意，單鏈1上的片段b與單鏈2上的片段b*通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合，單鏈3與單鏈1競(jìng)爭(zhēng)性雜交結(jié)合單鏈2，可知單鏈1上的片段b與單鏈3上的片段b堿基序列相同。又知，圖1中DNA單鏈1的5’和3’末端堿基序列為：5’-CATGTT…CGACTA-3’，則DNA單鏈3的5’末端堿基序列應(yīng)為CGACTA…。依題意，單鏈3與單鏈1競(jìng)爭(zhēng)性雜交結(jié)合單鏈2，且要將DNA-抗體偶聯(lián)物從納米顆粒上替換下來(lái)，則沉淀物溶解后加入的DNA單鏈3的量應(yīng)多于溶液中DNA單鏈1的量，才能成功將單鏈1從納米顆粒上替換下來(lái)?！拘?wèn)3詳析】A、依題意，與健康人相比，AD患者血漿外泌體上蛋白質(zhì)Aβ1-42含量顯著升高。若要比較健康人與AD患者血液樣本外泌體中Aβ1-42含量，則要先保證兩類樣本的外泌體數(shù)量相等。又知，AD患者外泌體CD63含量與健康人相同，因此，用iMEP技術(shù)檢測(cè)比較健康人與AD患者血液樣本外泌體中Aβ1-42含量時(shí)，應(yīng)在兩類樣本的外泌體CD63總量相等的條件下檢測(cè)Aβ1-42含量，A正確；B、依據(jù)檢測(cè)的原理，若有游離抗體，則游離抗體也會(huì)與外泌體結(jié)合，但其上無(wú)單鏈DNA片段，無(wú)法被檢測(cè)出來(lái)。因此，如果DNA-抗體偶聯(lián)物中混有游離抗體，會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)值偏小，B正確；C、DNA-抗體偶聯(lián)物上結(jié)合的是單鏈DNA片段，但復(fù)制一次后，會(huì)出現(xiàn)雙鏈DNA片段，且檢測(cè)時(shí)是檢測(cè)雙鏈DNA結(jié)合的熒光，即檢測(cè)雙鏈DNA分子的含量，因此，PCR體系中也要加入一對(duì)引物，C錯(cuò)誤；D、依題意，AD患者血漿外泌體上蛋白質(zhì)Aβ1-42含量顯著升高，DNA-抗體偶聯(lián)物與蛋白質(zhì)Aβ1-42結(jié)合。則蛋白質(zhì)Aβ1-42含量越高，結(jié)合的DNA-抗體偶聯(lián)物越多，擴(kuò)增產(chǎn)物更多。又知，熒光染料與雙鏈DNA結(jié)合后發(fā)出熒光，因此，AD患者血液樣本PCR擴(kuò)增終產(chǎn)物的熒光強(qiáng)度顯著高于健康人，D正確。故選ABD?！拘?wèn)4詳析】依題意，抗CD63抗體-磁珠偶聯(lián)物能夠富集血液中外泌體、且抗Aβ1-42單抗本身靈敏度高、實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)DNA-抗體偶聯(lián)物中的DNA進(jìn)行指數(shù)擴(kuò)增，因此，iMEP技術(shù)靈敏度高。【小問(wèn)5詳析】依題意，在iMEP技術(shù)中，要同時(shí)使用兩種DNA-抗體偶聯(lián)物分別檢測(cè)不同的生物標(biāo)志物，抗原-抗體的結(jié)合有特異性，若要檢測(cè)不同生物標(biāo)志物，則要使用不同的抗體。電泳的原理是帶電粒子在電場(chǎng)的作用下，會(huì)向著與它所帶電荷相反的電極移動(dòng)，帶電粒子在凝膠中的遷移速率與DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)。因此，若要采用電泳法檢測(cè)不同產(chǎn)物，則此時(shí)使用的兩種DNA-抗體偶聯(lián)物上的DNA單鏈長(zhǎng)度要不同。20.我國(guó)科研工作者對(duì)大豆群體進(jìn)行基因檢測(cè)和光合作用相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)Gm基因與光合作用效率有一定相關(guān)性。為培育高產(chǎn)大豆新品種，對(duì)Gm基因的作用進(jìn)行了研究。（1）研究人員將Gm基因與高效表達(dá)啟動(dòng)子連接，用________法導(dǎo)入野生型大豆細(xì)胞，獲得Gm基因過(guò)表達(dá)大豆；利用基因編輯技術(shù)獲得Gm基因敲除大豆（2）檢測(cè)3組大豆不同光照強(qiáng)度下的光合作用速率，獲得圖1所示結(jié)果，結(jié)果顯示_______，說(shuō)明Gm基因表達(dá)水平升高能提高大豆葉片在強(qiáng)光下的光能利用率。電鏡觀察不同植株葉綠體結(jié)構(gòu)，結(jié)果如圖2所示，與野生型相比，Gm高表達(dá)植株葉綠體中_______，這是其光能利用率提高的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。（3）研究人員推測(cè)Gm蛋白通過(guò)與其他蛋白相互作用實(shí)現(xiàn)功能，利用酵母雙雜交技術(shù)尋找Gm蛋白的互作蛋白。酵母雙雜交的原理是：AD蛋白與BD蛋白在空間上充分接近時(shí)，能夠與酵母細(xì)胞中LacZ基因啟動(dòng)子上游激活序列結(jié)合，啟動(dòng)LacZ基因表達(dá)，LacZ基因表達(dá)產(chǎn)物能催化培養(yǎng)基中X-gal形成藍(lán)色物質(zhì)（圖3）。①該實(shí)驗(yàn)設(shè)置1個(gè)實(shí)驗(yàn)組和3個(gè)對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組如圖3所示，將重組質(zhì)粒1和2導(dǎo)入不具有色氨酸和亮氨酸合成能力的酵母細(xì)胞中，在固體培養(yǎng)基表面培養(yǎng)形成菌落。為實(shí)現(xiàn)檢測(cè)目的，該培養(yǎng)基的成分特點(diǎn)應(yīng)為_______。②對(duì)照組1的重組質(zhì)粒1、2上攜帶的目的基因分別是BD基因和AD基因，對(duì)照組2和對(duì)照組3的重組質(zhì)粒上攜帶的目的基因是______、______。③實(shí)驗(yàn)結(jié)果為______，表明GL蛋白能夠與Gm蛋白發(fā)生相互作用。GL蛋白是參與光反應(yīng)的一種蛋白質(zhì)，研究人員發(fā)現(xiàn)Gm蛋白能與多種參與光反應(yīng)的蛋白相互作用，在葉綠體光損傷修復(fù)等生命活動(dòng)中發(fā)揮重要功能?！即鸢浮剑?）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化（2）①.Gm過(guò)表達(dá)組在強(qiáng)光下的光合作用速率高于野生型，Gm敲除組低于野生型②.基粒更發(fā)達(dá)（3）①.含有X-gal、不含有色氨酸和亮氨酸②.Gm-BD融合基因和AD基因③.BD基因和GL-AD融合基因④.實(shí)驗(yàn)組菌落為藍(lán)色，對(duì)照組菌落為白色〖祥解〗基因工程（重組DNA技術(shù)）的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定?！拘?wèn)1詳析】將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一