2023-2024學年江蘇高二期中測生物生物試題01（解析版）

高級中學名校試卷PAGEPAGE3江蘇2023-2024學年高二期中測試卷01（考試時間：75分鐘試卷滿分：100分）一、單項選擇題：共14題，每題2分，共28分。每題只有一個選項最符合題意。1．傳統(tǒng)工藝釀酒過程中，會出現(xiàn)“釀酒不成反釀醋”的現(xiàn)象，即釀出的酒水變酸。下列相關(guān)說法錯誤的是（

）A．酒和醋都是利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作的食品，它們是我國傳統(tǒng)飲食文化的重要組成部分B．“酸酒”產(chǎn)生的過程中，糖類直接被分解成為乙酸C．“釀酒不成反釀醋”的原因可能是發(fā)酵條件控制出現(xiàn)問題，如容器的密封性D．釀酒前將釀酒容器高溫消毒不一定能夠防止酒變酸〖答案〗B〖祥解〗參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：醋酸菌是一種好氧性細菌，只有當氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動。若氧氣、糖源充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；若缺少糖源、氧氣充足，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，乙醛變?yōu)榇姿?。【詳析】A、酒和醋都是利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作的食品，它們是我國傳統(tǒng)飲食文化的重要組成部分，A正確；B、在釀酒的過程中糖類被酵母菌利用，由于缺少糖源，醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛轉(zhuǎn)化為乙酸，B錯誤；C、釀酒控制的發(fā)酵條件是無氧，溫度控制在18~30℃，釀醋控制的發(fā)酵條件是有氧，溫度控制在30—35℃，若釀酒過程容器的密封性出現(xiàn)問題，醋酸菌大量繁殖就可能出現(xiàn)“釀酒不成反釀醋”，C正確；D、釀酒前將酒缸高溫消毒不一定能夠防止酒變酸，若發(fā)酵過程中沒有嚴格把控發(fā)酵條件，也可能導致酒變酸，D正確。故選B。2．下圖為野生型谷氨酸棒狀桿菌經(jīng)誘變獲得精氨酸依賴型菌并進行篩選的過程示意圖。已知精氨酸依賴型菌株不能在缺少精氨酸的培養(yǎng)基上正常生長，但可作為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種。下列相關(guān)敘述錯誤的是（

）

A．野生型菌液的培養(yǎng)皿中不會出現(xiàn)菌落B．乙培養(yǎng)基中加入了精氨酸，甲中未加入C．乙中的菌落是通過影印法接種獲得的D．甲中的菌落B為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種〖答案〗B〖祥解〗由圖分析可知，圖中①表示將紫外線照射處理的菌液接種在含有精氨酸的培養(yǎng)基上，②表示影印到不含精氨酸的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，圖甲中有A、B兩種菌落，圖乙中只有A菌落，因此甲中A表示野生型谷氨酸棒狀桿菌，B為精氨酸依賴型菌株。【詳析】A、液體培養(yǎng)基的作用是讓細菌快速大量繁殖，細菌在固體培養(yǎng)基上才能形成菌落，A正確；B、圖示為野生型谷氨酸棒狀桿菌經(jīng)誘變獲得精氨酸依賴型菌并進行篩選的過程示意圖，精氨酸依賴型菌株不能在缺少精氨酸的培養(yǎng)基上正常生長，因此A為野生型谷氨酸棒狀桿菌，B為精氨酸依賴型菌株，乙培養(yǎng)基上沒有B菌落，據(jù)此推測乙培養(yǎng)基與甲相比缺少了精氨酸，B錯誤；CD、乙中的菌落是通過影印法獲得的，菌落A是野生型菌種，菌落B為精氨酸依賴型菌株，B可作為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種，CD正確。故選B。3．黃河入海口石油降解菌的篩選是修復石油污染，保護黃河的重要工作，如圖表示篩選石油降解菌的過程。下列敘述正確的是（

）A．圖示接種方法為稀釋涂布平板法，據(jù)結(jié)果推測1g土壤中石油分解菌數(shù)最多為1.6×106個B．分離、純化石油分解菌時，還可采用平板劃線法且該方法也需要進行③步驟操作C．稀釋涂布時，利用涂布器從盛有菌液的試管中蘸取菌液，進行涂布D．進行步驟⑤時，應用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)④中的石油降解菌，并檢測菌的數(shù)量和石油降解能力〖答案〗D〖祥解〗1、每克樣品中的菌株數(shù)=（C÷V）×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。2、常用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，其中稀釋涂布平板法分離純化土壤中微生物的步驟為土壤取樣→溶化→梯度稀釋→涂布平板。3、由題圖可知，①稱取10g土壤；②10g土壤加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中制備土壤懸浮液，稀釋了101；③進行梯度稀釋，即依次稀釋至101、102、103稀釋度；④使用稀釋涂布平板法篩選菌株，接種了104稀釋度菌液0.1mL，長出16個菌落；推測1g土壤中石油分解菌數(shù)=16÷0.1×104÷10=1.6×105個；⑤鑒別優(yōu)質(zhì)菌種，保存?zhèn)溆?，推測使用甘油管藏法或臨時保存法。【詳析】A、根據(jù)題圖分析可知，圖示接種方法為稀釋涂布平板法，涂布平板的稀釋度為104，據(jù)結(jié)果推測1g土壤中石油分解菌數(shù)最少為16÷0.1×104=1.6×106個，A錯誤；B、根據(jù)題圖分析可知，③進行梯度稀釋，雖然分離、純化石油分解菌時，可以采用稀釋涂布平板法，也可以采用平板劃線法，但平板劃線法不需要進行梯度稀釋，也就是不需要進行③步驟操作，B錯誤；C、稀釋涂布時，先取少量菌夜（不超過0.1ml）滴加到培養(yǎng)基表面，再將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻，用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面，而不是利用涂布器從盛有菌液的試管中蘸取菌液，進行涂布，C錯誤；D、根據(jù)題圖分析可知，⑤鑒別優(yōu)質(zhì)菌種和保存?zhèn)溆?，無論使用甘油管藏法或臨時保存法，都要應用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)④中的石油降解菌，獲得菌液，而鑒別優(yōu)質(zhì)菌種就是要檢測菌的數(shù)量和石油降解能力，D正確。故選D。4．如圖為醬油的制作流程，其中米曲霉發(fā)酵過程的主要目的是使米曲霉充分生長繁殖，大量分泌制作醬油所需的蛋白酶、脂肪酶等，該過程需要提供營養(yǎng)物質(zhì)、通入空氣。下列說法正確的是（）A．大豆、小麥和麥麩都要蒸煮的目的是為了破壞酶的活性B．發(fā)酵罐發(fā)酵需要將罐內(nèi)的pH控制在中性或弱堿性條件下C．發(fā)酵罐發(fā)酵類型為有氧發(fā)酵，而發(fā)酵池發(fā)酵為無氧發(fā)酵D．米曲霉在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵的過程主要為產(chǎn)生大量醬油〖答案〗C〖祥解〗在提供主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。例如，在培養(yǎng)乳酸桿菌時，需要在培養(yǎng)基中添加維生素；在培養(yǎng)霉菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性；在培養(yǎng)細菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性；在培養(yǎng)厭氧微生物時，需要提供無氧的條件?！驹斘觥緼、大豆、小麥和麥麩等原料中含有蛋白質(zhì)、糖類和脂肪等營養(yǎng)物質(zhì)，相當于培養(yǎng)基，在制作醬油時需要經(jīng)蒸煮和適當配比處理，其目的是滅菌和調(diào)整營養(yǎng)配比從而滿足微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求，A錯誤；B、發(fā)酵罐發(fā)酵需要黃曲霉菌，培養(yǎng)霉菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性，B錯誤；C、發(fā)酵罐發(fā)酵主要是米曲霉起作用，類型為有氧發(fā)酵，而發(fā)酵池發(fā)酵是乳酸菌和酵母菌起作用，為無氧發(fā)酵，C正確；D、根據(jù)題意信息可知，米曲霉發(fā)酵過程的主要目的是使米曲霉充分生長繁殖，大量分泌制作醬油所需的蛋白酶、脂肪酶等，該過程需要提供營養(yǎng)物質(zhì)、通入空氣，D錯誤。故選C。5．如圖為某二倍體植株花藥中未成熟的花粉在適宜培養(yǎng)基上形成完整植株的過程。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．過程①②表示脫分化，過程③表示再分化B．過程①②需要液體培養(yǎng)基C．過程①②③說明花粉細胞具有全能性D．通過過程③獲得的完整植株自交后代不會發(fā)生性狀分離〖答案〗C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的過程為：離體的植物組織，器官或細胞經(jīng)過脫分化（避光）形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過再分化（需光）過程形成胚狀體，進一步發(fā)育形成植株。圖中①表示脫分化，②③表示再分化?！驹斘觥緼、離體的植物組織，器官或細胞經(jīng)過脫分化（避光）形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過再分化（需光）過程形成胚狀體，進一步發(fā)育形成植株，圖中過程①表示脫分化，②③表示再分化，A錯誤；B、過程①表示脫分化形成愈傷組織，②表示再分化形成叢芽，需要固體培養(yǎng)基，B錯誤；C、過程①、②、③是植物組織培養(yǎng)過程，由花粉細胞最終獲得了完整植物個體，說明花粉細胞具有全能性，C正確；D、過程③獲得的完整植株屬于單倍體植株，高度不育，不能自交產(chǎn)生后代，D錯誤。故選C。6．植株甲金花菜是一種多年生開花植物，具有多種優(yōu)良性狀，另一種遠緣植株乙青花菜存在抗除草劑基因，欲將植株乙細胞中抗除草劑基因引入植株甲中，進行了如下操作。下列說法錯誤的是（

）

A．過程A取頂芽細胞的操作有利于獲得脫毒苗B．過程B中常用PEG誘導原生質(zhì)體融合C．兩個細胞融合完成的標志是再生出細胞壁D．獲得的融合原生質(zhì)體需放在無菌水中以防雜菌污染〖答案〗D〖祥解〗植物體細胞雜交技術(shù)是指將來源不同的植物體細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成新植物體的技術(shù)。【詳析】A、植物頂端分生區(qū)附近（如莖尖）的病毒極少，甚至無毒，因此過程A取頂芽細胞的操作有利于獲得脫毒苗，A正確；B、過程B為誘導原生質(zhì)體融合，常用PEG促融，B正確；C、雜種細胞融合完成的標志是再生出細胞壁，C正確；D、獲得的融合原生質(zhì)體（無細胞壁）不能放在無菌水中，以防原生質(zhì)體吸水漲破，D錯誤。故選D。7．下圖為小鼠細胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是（

）

A．動物細胞培養(yǎng)至一定代數(shù)，所培養(yǎng)的細胞全部都會衰老死亡B．為了保證細胞培養(yǎng)所需的無菌、無毒環(huán)境，可以添加適量的抗生素C．制備細胞懸液時，可用胃蛋白酶處理組織塊D．培養(yǎng)過程中，需要CO2濃度維持在5%左右，以促進細胞呼吸〖答案〗B〖祥解〗動物細胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)，在傳代培養(yǎng)的過程中可能會發(fā)生癌變。動物細胞培養(yǎng)的目的是獲得細胞群或細胞產(chǎn)物?！驹斘觥緼、動物細胞培養(yǎng)至一定代數(shù)，部分細胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變，并且?guī)в邪┳兊奶攸c，能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，A錯誤；B、抗生素能抑制細菌生長，因此為了保證細胞培養(yǎng)所需的無菌、無毒環(huán)境，可以添加適量的抗生素，B正確；C、制備細胞懸浮液時應用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，不能使用胃蛋白酶，因為胃蛋白酶需要在酸性環(huán)境下才能起作用，但這樣的環(huán)境不適于細胞生存，C錯誤；D、恒溫培養(yǎng)箱中的CO2濃度維持在5%左右，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH，D錯誤。故選B。8．為解決雜交瘤細胞在傳代培養(yǎng)中出現(xiàn)來自B淋巴細胞的染色體丟失問題，研究者將抗原刺激后的B淋巴細胞，用EBV（一種病毒顆粒）感染，獲得“染色體核型穩(wěn)定”的EBV轉(zhuǎn)化細胞。EBV轉(zhuǎn)化細胞能夠在HAT培養(yǎng)基中存活，但對Oua敏感。骨髓瘤細胞在HAT培養(yǎng)基中不能存活，但對Oua不敏感。下圖表示操作過程。下列分析錯誤的是（

）A．B淋巴細胞可從多次間歇注射某種抗原的動物脾臟中獲得B．HAT培養(yǎng)基和Oua篩選去除的是未融合的EBV轉(zhuǎn)化細胞C．雜交瘤細胞染色體丟失可能會導致抗體的產(chǎn)生能力下降D．圖中獲得的雜交瘤細胞需經(jīng)抗體檢測篩選后才可用于生產(chǎn)〖答案〗B〖祥解〗1、單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。2、兩次篩選：篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）；篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。【詳析】A、對動物進行間歇注射抗原處理，以刺激動物機體產(chǎn)生相應的B淋巴細胞；B淋巴細胞在骨髓中發(fā)育成熟，可分布于淋巴結(jié)和脾臟等處，故B淋巴細胞可從多次間歇注射某種抗原的動物脾臟中獲得，A正確；B、據(jù)題意“EBV轉(zhuǎn)化細胞能夠在HAT培養(yǎng)基中存活，但對Oua敏感；骨髓瘤細胞在HAT培養(yǎng)基中不能存活，但對Oua不敏感”可知，HAT培養(yǎng)基去除的是未與EBV轉(zhuǎn)化細胞融合的骨髓瘤細胞和自身融合的骨髓瘤細胞，Oua篩選去除的是未與骨髓瘤細胞融合的EBV轉(zhuǎn)化細胞和自身融合的EBV轉(zhuǎn)化細胞，B錯誤；C、抗體是由漿細胞分泌的，雜交瘤細胞若丟失來自B淋巴細胞的染色體，可能會導致抗體產(chǎn)生能力下降，C正確；D、圖示獲得的雜交瘤細胞還需要經(jīng)過進一步的篩選，用專一抗體檢測呈現(xiàn)陽性的雜交瘤細胞才能直接用于生產(chǎn)單克隆抗體，D正確。故選B。9．動物的某種退行性神經(jīng)疾病由基因t突變?yōu)榛騎導致。隨著生物工程技術(shù)的發(fā)展和基因編輯（CRISPR/Cas9）技術(shù)的出現(xiàn)，為治療該疾病提供了如下新思路。以下說法錯誤的是（）

A．①過程需采用MⅡ期卵母細胞B．ES細胞能分化為動物體內(nèi)任何一種組織細胞C．過程④的培養(yǎng)基中需要添加誘導分化因子D．移植的神經(jīng)干細胞會成為抗原，引發(fā)免疫排斥反應〖答案〗D〖祥解〗核移植技術(shù)指的是將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體?！驹斘觥緼、MII時期的卵母細胞體積大，易操作，細胞質(zhì)中含有促使細胞核全能性表達的物質(zhì)和營養(yǎng)條件，所以體細胞核移植技術(shù)要選擇MII期的卵母細胞作為受體細胞，A正確；B、ES細胞的細胞核大，核仁明顯，具有發(fā)育的全能性，可以誘導分化成動物體內(nèi)任何一種組織細胞，B正確；C、在培養(yǎng)液中加入誘導分化因子，就可以誘導胚胎干細胞向不同類型的組織細胞分化，用于患者的組織器官移植，C正確；D、由于移植的神經(jīng)干細胞的遺傳物質(zhì)與患者相同，不會成為抗原，因而不會發(fā)生免疫排斥，可用于治療該退行性神經(jīng)疾病，D錯誤。故選D。10．下圖為科研人員利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的過程，相關(guān)敘述正確的是（

）A．嵌合鼠的培育依據(jù)的原理是基因重組和細胞全能性B．過程①中需利用相關(guān)技術(shù)去除早期胚胎外的滋養(yǎng)層C．過程②中可利用聚乙二醇誘導卵裂球細胞發(fā)生融合D．嵌合胚胎發(fā)育到囊胚時期細胞發(fā)生分化〖答案〗D〖祥解〗由圖可知，將白鼠的早期胚胎的卵裂球和黑鼠的早期胚胎的卵裂球放在一起培養(yǎng)，將形成嵌合胚胎，將嵌合胚胎發(fā)育至囊胚后移植到代孕母體內(nèi)發(fā)育，可形成嵌合鼠?！驹斘觥緼、嵌合鼠的培育依據(jù)的原理是細胞全能性，并沒有進行基因重組，A錯誤；B、過程①中需利用相關(guān)技術(shù)去除早期胚胎外的透明帶，而滋養(yǎng)層屬于早期胚胎的一部分，B錯誤；C、過程②不需要誘導卵裂球細胞發(fā)生融合，C錯誤；D、過程③操作前需對多只代孕母鼠進行同期發(fā)情處理，以保證受體與供體的生殖器官的生理變化是相同的，D正確。故選D。11．下列有關(guān)限制性內(nèi)切核酸酶的敘述，正確的是（）A．用限制性內(nèi)切核酸酶切割一個DNA分子中部，獲得一個目的基因時，被水解的磷酸二酯鍵有2個B．限制性內(nèi)切核酸酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大C．—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性內(nèi)切核酸酶切出的黏性末端可用DNA連接酶連接D．只有用相同的限制性內(nèi)切核酸酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒，才能形成重組質(zhì)?！即鸢浮紹〖祥解〗限制酶的來源、作用及其結(jié)果：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來。（2）作用（特異性）：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端；特別注意：用限制酶切割DNA時，每切開一個切口需要水解兩個磷酸二酯鍵?！驹斘觥緼、用限制性內(nèi)切核酸酶切割一個DNA分子中部，獲得一個目的基因時，需要切割目的基因的兩側(cè)，又因DNA為雙鏈結(jié)構(gòu)，因此要斷裂4個磷酸二酯鍵，即被水解的磷酸二酯鍵有4個，A錯誤；B、限制酶具有專一性，限制性內(nèi)切核酸酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大，B正確；C、—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性內(nèi)切核酸酶切出的黏性末端不同，分別為—CATG和GATC—，因此不能用DNA連接酶連接，C錯誤；D、用不同的限制性內(nèi)切核酸酶處理含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒，若產(chǎn)生的黏性末端相同，則也能形成重組質(zhì)粒，D錯誤。故選B。12．若要利用某目的基因（見圖甲）和P1噬菌體載體（見圖乙）構(gòu)建重組DNA（見圖丙），限制性內(nèi)切核酸酶的酶切位點分別是BglⅡ（－A↓GATCT－），EcoRⅠ（－G↓AATTC－）和Sau3AⅠ（－↓GATC－）。下列分析合理的是（）A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體B．用BglⅡ和EcoRI切割目的基因和P1噬菌體載體C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體〖答案〗D〖祥解〗限制酶選擇原則：（1）應選擇切點位于目的基因兩端的，不能位于目的基因內(nèi)部，防止破壞目的基因，同時為避免目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化或隨意連接，可使用不同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒。（2）根據(jù)質(zhì)粒特點確定限制酶種類具體原則：①保證切割的黏性末端與目的基因的相同，以便兩者能夠連接。②保證切割后的質(zhì)粒至少保留一個標記基因，以便進行篩選；保留復制原點，以便在受體細胞中維持穩(wěn)定和表達。【詳析】A、用EcoRⅠ切割目的基因和P1質(zhì)粒載體，產(chǎn)生相同的黏性末端，用DNA連接酶連接時可能會發(fā)生反向連接，A錯誤；B、用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1質(zhì)粒載體，這與A選項中僅用EcoRⅠ切割一樣，B錯誤；C、用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1質(zhì)粒載體，會產(chǎn)生相同的黏性末端，可能會發(fā)生反向連接，C錯誤；D、只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1質(zhì)粒載體，產(chǎn)生不同的黏性末端，防止發(fā)生反向連接，且這樣目的基因插入運載體后，RNA聚合酶的移動方向與圖丙實線方向相同，D正確。故選D。13．胰島素用于治療糖尿病，但胰島素注射后易在皮下堆積，需較長時間才能進入血液，進入血液后又易被分解，因此治療效果受到影響。科研人員研制了速效胰島素，其生產(chǎn)過程如圖所示。下列說法錯誤的是（）A．速效胰島素的生產(chǎn)需要用到蛋白質(zhì)工程和發(fā)酵工程B．大腸桿菌合成的新的胰島素不能正常發(fā)揮作用C．除人工合成DNA外，還可以通過定點突變技術(shù)獲得目的基因D．可以用Ca2+處理的方法直接將新的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌細胞中〖答案〗D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程的過程：預期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有氨基酸序列→找到對應的脫氧核苷酸序列（基因）。蛋白質(zhì)工程得到的蛋白質(zhì)一般不是天然存在的蛋白質(zhì)。【詳析】A、圖示的前半部分是利用蛋白質(zhì)工程設(shè)計速效胰島素的生產(chǎn)過程，后半部分是利用發(fā)酵工程生產(chǎn)速效胰島素的過程，A正確；B、大腸桿菌是原核生物，沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體對胰島素原進行加工，因此大腸桿菌合成的新的胰島素不能正常發(fā)揮作用，B正確；C、基因定點突變是指按照特定的要求，使基因的特定序列發(fā)生插入、刪除、置換、重排等變異，除人工合成DNA外，還可以通過定點突變技術(shù)獲得目的基因，C正確；D、可以用Ca2+處理的方法可以將含有新的胰島素基因的基因表達載體導入大腸桿菌細胞中，D錯誤。故選D。14．下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性與倫理問題的說法正確的是（

）A．轉(zhuǎn)基因食品中的外源基因經(jīng)過食用后會進入人體細胞并整合到人體的基因組中B．任何情況下我們必須堅決抵制生物武器，防止生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴散C．試管嬰兒技術(shù)已經(jīng)成熟，為保證嬰兒的健康可對植入前的胚胎進行遺傳學診斷D．生殖性克隆和治療性克隆都涉及到核移植技術(shù)，中國政府不接受任何克隆試驗〖答案〗B〖祥解〗目前對轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭論主要是食物安全和環(huán)境安全，另外還有生物安全問題，轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題。轉(zhuǎn)基因食品、產(chǎn)品上都要標注原料來自轉(zhuǎn)基因生物。當今社會的普遍觀點是反對生殖性克隆人實驗，但不反對治療性克?。辉嚬軏雰嚎梢栽O(shè)計嬰兒的性別，反對設(shè)計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒?！驹斘觥緼、轉(zhuǎn)基因食品中含有外源基因，但是食用后外源基因會被酶水解，不能進入人體細胞并改變?nèi)梭w遺傳物質(zhì)，A錯誤；B、在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴散，以確保人類生存安全，B正確；C、試管嬰兒技術(shù)已經(jīng)成熟，設(shè)計試管嬰兒技術(shù)對植入前胚胎進行遺傳學診斷，判斷其是否含有遺傳病基因或者異常染色體，C錯誤；D、克隆人技術(shù)并未完全成熟，中國政府不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實驗，但是不反對治療性克隆，D錯誤。二、多項選擇題：共5題，每題3分，共15分。每題有不止一個選項符合題意。每題全選對者得3分，選對但不全的得1分，錯選或不答的得0分。15．某種物質(zhì)A（一種含有C、H、N的有機物）難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細菌能降解A。研究人員按照如圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解A的細菌菌株。圖中③將M中的菌液稀釋一定倍數(shù)后，取0.1mL涂布到平板上，初步估測搖瓶M中1mL菌液中細菌數(shù)為2.4×108個。下列說法錯誤的是（）

A．實驗時，淤泥及盛有培養(yǎng)基的搖瓶通常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌B．③接種方法為稀釋涂布平板法，涂布時用涂布器蘸取菌液均勻涂布于平板上C．乙平板中大小不同的菌落是分解菌分解能力不同導致的D．乙平板上菌落數(shù)平均為240個，菌液稀釋倍數(shù)為105〖答案〗ABC〖祥解〗分析題圖：①為淤泥取樣進行稀釋，②為接種到液體培養(yǎng)基上，③稀釋涂布平板法接種到以S為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上，其中Y為瓊脂，④為挑取單菌落接種，⑤在以A為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上進一步篩選出高效降解A的菌株。【詳析】A、實驗時，從淤泥中分離得到能高效降解A的細菌菌株，則圖①為淤泥取樣進行稀釋，可以取淤泥加無菌水制成菌懸液，淤泥中有菌種，因此不能進行滅菌處理；盛有培養(yǎng)基的搖瓶通常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，A錯誤；B、識圖分析可知，③稀釋涂布平板法接種到以A為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上，因此步驟③的接種工具是涂布器，但是不能用涂布器蘸取菌液，應該將菌液加入到培養(yǎng)基中，用涂布器進行均勻涂抹，B錯誤。C、乙平板中大小不同的菌落說明分解菌對物質(zhì)A的分解能力不同，但是乙平板中可能還存在其他分解菌，也可能是不同分解菌所形成的菌落大小不同，C錯誤。D、利用稀釋涂布平板法對細菌進行計數(shù)，要保證每個平板上長出的菌落數(shù)平均為240個，假設(shè)稀釋倍數(shù)為a，根據(jù)搖瓶M中1mL菌液中細菌數(shù)為2.4×108個，在每個平板上涂布100μL（即0.1mL）稀釋后的菌液，則有240×a÷0.1=2.4×108，則稀釋倍數(shù)a=105，D正確。故選ABC。16．為了培育新型苜品種，科學家們用野生型清水紫花苜和里奧百脈根為材料進行了實踐研究。研究的主要流程如圖所示，判斷以下說法正確的是（

）

（注：IOA可抑制植物細胞呼吸第一階段，里奧百脈根原生質(zhì)體對其較為敏感。R-6G可阻止線粒體的呼吸作用，清水紫花蓿原生質(zhì)體對其較為敏感。）A．制備兩種原生質(zhì)體所需的酶溶液含纖維素酶和果膠酶B．本研究主要用到的技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，目的是獲得雜種植株C．圖中①的完成依賴細胞膜的流動性，②需要給予適當?shù)墓庹?，③一般不需要光照D．用IOA和R-6G處理的目的是篩選出雜種細胞，雜種細胞能夠存活的原因是代謝途徑互補〖答案〗ABD〖祥解〗分析題圖：圖中①表示原生質(zhì)體融合形成雜種細胞以及雜種細胞的增殖，②表示脫分化過程，③表示再分化過程?！驹斘觥緼、由于植物細胞壁的成分主要是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性可知，制備兩種原生質(zhì)體所需的酶溶液含纖維素酶和果膠酶以去除細胞壁制備原生質(zhì)體，A正確；B、本研究所用技術(shù)是植物體細胞雜交技術(shù)，其中包括原生質(zhì)體融合和植物組織培養(yǎng)技術(shù)，主要用到的技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，目的是獲得雜種植株，B正確；C、圖中①示原生質(zhì)體融合形成雜種細胞的過程，該過程的完成依賴細胞膜的流動性，②表示脫分化過程，脫分化需要避光處理，③表示再分化過程，再分化需要給予光照處理，C錯誤；D、由題意可知，IOA可抑制植物細胞呼吸第一階段，里奧百脈根原生質(zhì)體對其較為敏感，R-6G可阻止線粒體的呼吸作用，清水紫花蓿原生質(zhì)體對其較為敏感，用IOA和R-6G處理的目的是篩選出雜種細胞，雜種細胞能夠存活的原因是代謝途徑互補，D正確。故選ABD。17．如圖所示為治療性克隆的基本過程，首先取病人的體細胞核，移植到去核的卵母細胞中，在早期胚胎形成后，從中分離獲得胚胎干細胞（ES細胞），對ES細胞進行基因修飾和定向分化處理，將定向分化后的細胞移植給病人，從而達到治療疾病的目的。下列相關(guān)敘述正確的是（

）

A．接受細胞核的卵母細胞處于減數(shù)第二次分裂中期B．獲得圖中去核的卵母細胞時，可通過顯微操作去核C．圖中形成的器官用于移植，理論上可以避免免疫排斥反應D．治療性克隆過程采用的技術(shù)有核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)〖答案〗ABC〖祥解〗減數(shù)分裂是有性生殖的生物產(chǎn)生生殖細胞時，從原始生殖細胞發(fā)展到成熟生殖細胞的過程。這個過程中DNA復制一次，細胞分裂兩次，產(chǎn)生的生殖細胞中染色體數(shù)目是本物種體細胞中染色體數(shù)目的一半?！驹斘觥緼、卵母細胞進行減數(shù)分裂時停止在減數(shù)第二次分裂中期，因此接受細胞核的卵母細胞處于減數(shù)第二次分裂中期，A正確；B、顯微鏡下可以通過顯微操作去核，B正確；C、圖中形成的器官來源于病人的細胞，用于移植，理論上可以避免免疫排斥反應，C正確；D、治療性克隆過程采用的技術(shù)有核移植技術(shù)，不用進行胚胎移植技術(shù)，D錯誤。故選ABC。18．線粒體腦肌病是由線粒體DNA異常而引起的人類遺傳病，“三親嬰兒”技術(shù)的應用可避免該遺傳病基因傳遞給子代，培育過程如下圖，下列相關(guān)敘述正確的是（

）

A．該過程涉及細胞核移植、體外受精、胚胎移植等技術(shù)B．卵母細胞在MⅡ期與獲能后的精子受精C．“三親嬰兒”胚胎早期發(fā)育依次經(jīng)歷了受精卵、囊胚、桑葚胚、原腸胚階段D．“三親嬰兒”的基因來自于自己的父親、母親和捐獻者〖答案〗AD〖祥解〗核移植技術(shù)指的是將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體；用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物，原理是動物細胞核的全能性；動物細胞核移植可分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植?！驹斘觥緼、試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)，圖示表示三親嬰兒的培育過程，由圖可知，三親嬰兒的培育采用了細胞核移植、體外受精、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等技術(shù)，A正確；B、精子與卵子結(jié)合前，受精過程若想順利進行必須滿足兩個條件：來自父方的精子要進行精子獲能；來自母方的卵子要培養(yǎng)至培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期，B錯誤；C、胚胎發(fā)育的過程為受精卵→桑葚胚→囊胚→原腸胚→幼體，所以哺乳動物胚胎的早期發(fā)育依次經(jīng)歷桑葚胚、囊胚、原腸胚等不同發(fā)育階段，C錯誤；D、分析題意可知，“三親嬰兒”的細胞核基因一半來自母親，一半來自父親，線粒體基因來自于卵母細胞捐獻者，D正確。故選AD。19．OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四個基因分別編碼四種不同的酶，研究人員將這些基因分別與葉綠體轉(zhuǎn)運肽（引導合成的蛋白質(zhì)進入葉綠體）基因連接，構(gòu)建多基因表達載體（載體中部分序列如圖所示），利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化棉花，在棉花葉綠體內(nèi)構(gòu)建了一條新的代謝途徑，提高了棉花的產(chǎn)量。下列敘述錯誤的是（）A．四個基因都在棉花葉綠體內(nèi)進行轉(zhuǎn)錄、翻譯B．OsGLO1、EcCAT基因轉(zhuǎn)錄時以DNA的不同單鏈為模板C．應選用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選被農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的棉花細胞D．若轉(zhuǎn)基因棉花的產(chǎn)量提高則可確定四個基因在棉花中成功表達〖答案〗AC〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等，標記基因可便于目的基因的鑒定和篩選。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、四個基因在葉綠體外合成蛋白質(zhì)，由葉綠體轉(zhuǎn)運肽引導合成的蛋白質(zhì)進入葉綠體，即這四個基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程都在葉綠體外完成，A錯誤；B、啟動子位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，圖中OsGLO1、EcCAT基因啟動子的位置不同，因而，轉(zhuǎn)錄時以DNA的不同單鏈為模板，B正確；C、卡那霉素抗性基因不在T-DNA上，沒有轉(zhuǎn)移到宿主細胞的染色體DNA上，因此應用潮霉素培養(yǎng)基篩選被農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的水稻細胞，C錯誤；D、通過導入四個基因，在棉花葉綠體內(nèi)構(gòu)建了一條新的代謝途徑，提高了棉花的產(chǎn)量，據(jù)此推測，若轉(zhuǎn)基因棉花的產(chǎn)量提高則可確定四個基因在棉花中成功表達，D正確。故選AC。三、非選擇題：共5題，共57分。20．青梅果肉營養(yǎng)豐富，成熟的青梅果實易腐爛，不易運輸保存。進行青梅果酒研究，既可提高青梅資源利用率，又可提高產(chǎn)品附加值。圖1為制作青梅果酒的簡易裝置圖；由于青梅果肉含糖量低，往往在青梅果漿中加入白砂糖后再進行釀制，圖2為在青梅果漿中添加白砂糖對酒精度和果酒感官評分的影響（感官評分越高，果酒的品質(zhì)越高）。(1)在青梅果酒發(fā)酵過程中，圖1裝置中的充氣口應處于狀態(tài)，排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接，目的是。可在酸性條件下，用（填試劑名稱）檢測有無果酒產(chǎn)生。(2)生產(chǎn)酒和醋都需要嚴格篩選菌種和控制溫度條件。在酒精發(fā)酵時，使用的菌種為；在醋酸發(fā)酵時，使用的菌種為。從圖2可看出，青梅果酒釀制時果漿中初始糖濃度為時效果最佳，在此濃度之前，果酒酒精度隨初始糖濃度的增加而增加，原因是。（答出2點）在青梅果酒釀制過程中，若發(fā)酵時間過長，產(chǎn)酒率不再增加，但會增加被雜菌污染的風險，若被醋酸菌污染，（填“會”或“不會”）經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生大量醋酸，理由是。（答出2點）〖答案〗（1）關(guān)閉避免空氣中其他微生物進入發(fā)酵裝置（或防止空氣中的微生物污染）重鉻酸鉀溶液（2）酵母菌醋酸菌20%糖類是主要的能源物質(zhì)，可為酵母菌的生長、繁殖提供能源物質(zhì)，還可作為酒精發(fā)酵的原料不會酒精發(fā)酵是無氧環(huán)境，而醋酸發(fā)酵需要氧氣，且酒精發(fā)酵與醋酸發(fā)酵的溫度不同〖祥解〗1、果酒工藝生產(chǎn)流程：選料一沖洗一壓榨過濾一滅菌一接種一發(fā)酵一過濾一果酒。2、果酒制作過程中溫度控制在18-25℃，先通氣后密封，發(fā)酵10-12d；果醋制作過程中溫度控制在30-35℃，全程通氣，發(fā)7-8d?！驹斘觥浚?）果酒發(fā)酵是在無氧環(huán)境中進行的，因此在青梅果酒發(fā)酵時，圖1裝置中的充氣口應關(guān)閉，排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接，目的是避免空氣中其他微生物進入發(fā)酵裝置(或防止空氣中的微生物污染)。酒精可用酸性重鉻酸鉀來檢測，顏色由橙色變成灰綠色，因此，可在酸性條件下，用重鉻酸鉀溶液與發(fā)酵液反應檢測有無果酒產(chǎn)生。（2）酒精發(fā)酵的菌種是酵母菌，醋酸發(fā)酵的菌種是醋酸菌。從圖2曲線可看出，當初始糖濃度為20%時，酒精度及果酒感官評分均最高，效果最佳。糖類是主要的能源物質(zhì)，在果汁中加入糖可為酵母菌的生長繁殖提供能源物質(zhì)，另外，糖是發(fā)酵的原料，加入的糖可作為酒精發(fā)酵的原料，所以在初始糖度低于20%時果酒酒精度隨初始糖度的增加而增加。果酒發(fā)酵后期若被醋酸菌污染，仍不會經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生醋酸，因為酒精發(fā)酵是無氧環(huán)境，而醋酸菌是需氧型生物，醋酸發(fā)酵需要氧氣，且酒精發(fā)酵與醋酸發(fā)酵的溫度不同，果酒制作過程中溫度比果醋制作的溫度低。21．土壤中的有些細菌可以利用石油中的多環(huán)芳烴，據(jù)此研究人員通過實驗從土壤中分離得到了能降解石油的細菌菌株M和N，實驗所用的培養(yǎng)基成分如下表所示：成分培養(yǎng)基1K2HPO4、MgSO4、NH4NO3、石油培養(yǎng)基ⅡK2HPO4、MgSO4、石油(1)實驗時，培養(yǎng)基通常采用的方法進行滅菌。培養(yǎng)基中提供碳源的是。(2)用稀釋涂布平板法對菌株M計數(shù)時，每毫升菌液中細菌細胞數(shù)為2×107個，每個平板上涂布0．1mL，且每個平板上長出的菌落數(shù)約200個，則至少應將菌株M的菌液稀釋倍。(3)為進一步探究并比較M和N兩個菌株在不同條件下降解石油的能力，科研人員繼續(xù)進行了如下實驗：步驟一：將M、N兩個菌株分別接種在兩液體培養(yǎng)基Ⅰ中，得到M、N菌液。步驟二：另取培養(yǎng)基Ⅰ、Ⅱ，添加瓊脂分別制成平板Ⅰ、Ⅱ，在平板Ⅰ上制作兩個直徑相等的孔標號ⅠA、ⅠB，平板Ⅱ重復以上的操作，兩個孔分別標號ⅡA、ⅡB。步驟三：將等量等濃度的M菌液和N菌液分別接種到平板Ⅰ的ⅠA和ⅠB，平板Ⅱ也進行同樣的操作。步驟四：相同且適宜條件下培養(yǎng)一段時間，記錄平板Ⅰ、Ⅱ的透明圈大小如下表所示：菌株平板Ⅰ平板ⅡⅠAIBⅡAⅡB透明圈大小+++++++—注：“+”表示有透明圈，“+”越多表示透明圈越大，“-”表示無透明圈。①本實驗的自變量是。②平板上透明圈出現(xiàn)的原因是。③本實驗可以得出的結(jié)論是?！即鸢浮剑?）高壓蒸汽滅菌石油（2）10?（3）培養(yǎng)基的成分和菌株的類型細菌將平板中的石油分解在有氮源的培養(yǎng)基上，M菌株降解石油的能力高于N菌株；在無氮源的培養(yǎng)基上，N菌株無降解石油的能力，但M菌株降解石油的能力減弱〖祥解〗1、選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學物質(zhì)，允許特定微生物生長，阻止或抑制其他微生物生長的培養(yǎng)基。2、培養(yǎng)基的成分主要包括碳源、氮源、無機鹽和水?！驹斘觥浚?）通常采用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進行滅菌。表中只有石油含有碳元素，所以提供碳源的是石油。（2）若要在每個平板上涂布0.1ml稀釋液后的菌液，且每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則搖瓶M中的菌液稀釋的倍數(shù)至少為2×107÷1000×100÷200=1×104倍。（3）①本實驗中人為改變的量是培養(yǎng)基的成分和菌株的類型，所以培養(yǎng)基的成分和菌株的類型是本實驗的自變量。②由于細菌將平板中的石油分解，則在平板上出現(xiàn)透明圈。③培養(yǎng)基Ⅰ和培養(yǎng)基Ⅱ的區(qū)別就是培養(yǎng)基Ⅰ有氮源，培養(yǎng)基Ⅱ沒有氮源，所以根據(jù)本實驗中透明圈的大小可以判斷在有氮源的培養(yǎng)基上，M菌株降解石油的能力高于N菌株；在無氮源的培養(yǎng)基上，N菌株無降解石油的能力，但M菌株降解石油的能力減弱。22．中醫(yī)治療疾病多用復方，三白草和魚腥草是同科不同屬的兩種常見藥用植物，二者因療效相近且具有疊加效應常被用作“藥對”，在我國全年可采收兩次。研究者欲利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將復方的配伍（兩種或兩種以上藥物配合使用）提前到個體生長或生產(chǎn)過程，并實現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn)，具體操作如圖1。

(1)取魚腥草和三白草充分展開的嫩葉片，用用70%乙醇和2%的次氯酸鈉對其（填填“消毒”或“滅菌”），每次處理后用（填“蒸餾水”或“無菌水”）沖洗葉片5次，去除殘留于葉片上的藥劑，處理后的葉片撕去表皮，切成1mm薄片備用。(2)過程①通過酶解法去除獲取原生質(zhì)體，并向三白草和魚腥草細胞酶解液中分別加入紅、綠熒光色素（帶熒光色素的原生質(zhì)體仍能融合和再生）。過程②利用化學誘導劑誘導融合，隨后在熒光顯微鏡下選擇帶的雜種原生質(zhì)體。(3)科研人員研究不同的原生質(zhì)體密度對三白草和魚腥草原生質(zhì)體融合率的影響，結(jié)果如圖2。

注：雙核異核融合體指具有兩個不同來源細胞核的細胞由圖2可知促進三白草和魚腥草原生質(zhì)體融合的最適密度為，高于此密度不利于形成雙核異核融合體的原因是。此外，影響原生質(zhì)體融合的因素還應包括等。(4)通常情況下，能增加免疫器官的重量表明該物質(zhì)具有一定的增強免疫力的作用。為判斷融合體對動物免疫力的影響，科研人員取同種小鼠30只，雌雄各半，隨機均分為三組，實驗處理如下表。組別A組B組C組（空白對照組）實驗處理三白草和魚腥草雜種愈傷組織的蒸餾水提取物三白草和魚腥草直接混合后的蒸餾水提取物每天一次等量灌胃，連續(xù)一周，檢測各組小鼠的胸腺重量①在表格中將C組的實驗處理補充完整。②若實驗結(jié)果為，則支持利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將復方的配伍提前并實現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn)?！即鸢浮剑?）消毒無菌水（2）細胞壁PEG/聚乙二醇紅、綠熒光色素（3）1×106個/mL密度過高，原生質(zhì)體的相互黏連、聚集作用過強，PEG的誘導作用受到抑制PEG的濃度（4）等量的蒸餾水A、B兩組的胸腺重量相同且都大于C組〖祥解〗分析圖可知，圖1表示三白草和魚腥草體細胞雜交過程，其中①為去除細胞壁，②為原生質(zhì)體融合，③為脫分化形成愈傷組織，④為提取代謝產(chǎn)物。圖2柱形圖中，隨著原生質(zhì)體密度增大，雙核異核融合體比例先升高后降低，其中在1×106個/mL1時，比例最高?！驹斘觥浚?）為防止微生物污染，應取魚腥草和三白草充分展開的嫩葉片，用70%乙醇和2%的次氯酸鈉對其消毒；為防止雜菌污染，每次處理后用無菌水沖洗葉片5次，去除殘留于葉片上的藥劑。（2）據(jù)圖示可知，過程①通過酶解法去除細胞壁獲取原生質(zhì)體，需要用纖維素酶、果膠酶處理破壞細胞壁；過程②誘導植物細胞融合的方法有利用化學誘導劑PEG（（聚乙二醇））誘導融合；由于三百草細胞酶解液中加入了紅熒光色素，魚腥草細胞酶解液中加入了綠熒光色素，所以雜種原生質(zhì)體應該帶紅、綠熒光色素。（3）由圖2柱形圖可知，在密度為1×106個/mL時，雙核異核融合體比例最高，說明促進三白草和魚腥草原生質(zhì)體融合的最適密度為1×106個/mL；高于此密度不利于形成雙核異核融合體，因為密度過高，原生質(zhì)體的相互黏連、聚集作用過強，PEG的誘導作用受到抑制；此外，影響原生質(zhì)體融合的因素還應包括PEG的濃度、培養(yǎng)液的滲透壓等。（4）①本實驗目的是判斷融合體對動物免疫力的影響，因為C組為對照組，因此根據(jù)對A、B兩組的處理，C組應用等量的蒸餾水每天一次等量灌胃，連續(xù)一周。②若實驗結(jié)果為A、B兩組的胸腺重量相同且都大于C組，則支持利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將復方的配伍提前并實現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn)。23．CD47是一種免疫抑制蛋白，腫瘤細胞通過過量表達CD47抑制巨噬細胞的吞噬作用以實現(xiàn)免疫逃逸?？笴D47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，其制備流程如下圖甲所示。(1)制備過程中需要用CD47對小鼠進行多次處理，目的是。為保證細胞培養(yǎng)環(huán)境無菌、無毒，需要進行的相關(guān)操作是。(2)下圖乙表示核苷酸合成的兩條途徑，物質(zhì)A可以阻斷全合成途徑，轉(zhuǎn)化酶和激酶是補救合成途徑所必需的兩種酶。正常細胞中含有轉(zhuǎn)化酶和激酶，骨髓瘤細胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶。已知圖甲的篩選1利用的是加入了H、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”，其篩選得到是細胞，該細胞能在HAT培養(yǎng)基中存活并增殖的原因是；經(jīng)篩選2獲得的細胞的特點是。(3)為驗證抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，研究人員設(shè)計如下實驗，實驗組：將抗CD47的單克隆抗體加入巨噬細胞和腫瘤細胞的共培養(yǎng)系中，檢測巨噬細胞的吞噬指數(shù)（與被吞噬腫瘤細胞的比例呈正相關(guān)）；對照組為，預期實驗結(jié)果：?！即鸢浮剑?）獲得較多的已免疫（對CD47產(chǎn)生免疫）的B淋巴細胞對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理；保證在無菌環(huán)境下進行操作；定期更換培養(yǎng)液（2）雜交瘤HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑，雜交瘤細胞含有從B細胞獲得的轉(zhuǎn)化酶和激酶，可以通過補救合成途徑來合成核苷酸，同時又具備骨髓瘤細胞能無限增殖的特性，因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47的抗體（3）不加單克隆抗體的巨噬細胞和腫瘤細胞的共培養(yǎng)系對照組巨噬細胞的吞噬指數(shù)顯著低于實驗組〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斘觥浚?）用CD47（抗原）對小鼠進行多次處理，可以獲得較多的已免疫（對CD47產(chǎn)生免疫）的B淋巴細胞；對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理；保證在無菌環(huán)境下進行操作；定期更換培養(yǎng)液，可以保證細胞培養(yǎng)環(huán)境無菌、無毒。（2）在HAT培養(yǎng)基上能生長的為雜交瘤細胞；HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑，雜交瘤細胞含有從B細胞獲得的轉(zhuǎn)化酶和激酶，可以通過補救合成途徑來合成核苷酸，同時又具備骨髓瘤細胞能無限增殖的特性，因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖；篩選2是為了得到既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47的抗體的細胞。（3）為驗證抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，實驗組為將抗CD47的單克隆抗體加入巨噬細胞和腫瘤細胞的共培養(yǎng)系中，對照組為不加單克隆抗體的巨噬細胞和腫瘤細胞的共培養(yǎng)系；由于抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，因此對照組巨噬細胞的吞噬指數(shù)顯著低于實驗組。24．人的血清蛋白（HSA）具有重要的醫(yī)用價值，研究人員欲用乳腺生物反應器來大量生產(chǎn)HSA。下圖所示為HSA基因片段和人工構(gòu)建的大腸桿菌質(zhì)粒pBR322，圖中Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭頭表示切割形成末端完全不同的4種限制酶的切割位點。請據(jù)圖回答問題：

(1)人工構(gòu)建pBR322質(zhì)粒除了含特定限制酶切割位點、標記基因、復制原點外，還必須有（答出兩點）等，(2)若選用牛作為受體動物，可將人血清蛋白基因與等調(diào)控組件重組在一起，通過方法將目的基因?qū)肱５氖芫阎校缓笫蛊浒l(fā)育成轉(zhuǎn)基因牛。(3)據(jù)圖分析，在構(gòu)建基因表達載體時，選擇作為切割質(zhì)粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和載體的正確連接效率，其原因是。(4)為了排除普通受體細胞（未導入質(zhì)粒）、空質(zhì)粒受體細胞（導入pBR322質(zhì)粒而非重組質(zhì)粒）的干擾，目的基因?qū)牒?，進行了進一步篩選：制備甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲培養(yǎng)基含新霉素，乙培養(yǎng)基含新霉素和氨芐青霉素，含重組質(zhì)粒的受體細胞在甲培養(yǎng)基上（填“能”或“不能”）生存，在乙培養(yǎng)基上（填“能”或“不能”）生存。(5)據(jù)下圖分析，利用PCR技術(shù)獲取HSA基因時，應選擇甲、乙、丙、丁四種引物中的，需擴增次后得到HSA目的基因。

〖答案〗(1)啟動子、終止子（2）在乳腺中特異表達的基因的啟動子（牛乳腺蛋白基因的啟動子）顯微注射（3）EcoRⅠ和PstⅠ這兩種酶能切割質(zhì)粒和目的基因，能得到不同的黏性末端，避免質(zhì)粒和目的基因自連及反接（這兩種酶切割DNA形成不同的黏性末端，可避免質(zhì)粒和目的基因的自身環(huán)化和反向連接）（4）能不能（5）乙、丙3〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定?！驹斘觥浚?）基因工程的關(guān)鍵步驟是構(gòu)建基因表達載體，基因表達載體主要由啟動子、目的基因、標記基因和終止子組成，因此人工構(gòu)建pBR322質(zhì)粒除了含特定限制酶切割位點、標記基因、復制原點外，還必須有啟動子、終止子等。（2）因為乳腺蛋白基因只能在乳腺細胞中表達，故要從奶牛的乳汁中獲得人血清白蛋白，選用牛作為受體動物，則在構(gòu)建基因的表達載體時，要將人血清白蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子調(diào)控組件重組在一起。根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣，將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法。（3）據(jù)圖可知，BamHⅠ會切割目的基因，TthⅢ1會切割質(zhì)粒中的復制原點，而EcoRⅠ和PstⅠ這兩種酶能切割質(zhì)粒和目的基因，不破壞抗性基因和復制原點等，且能能得到不同的黏性末端，避免質(zhì)粒和目的基因自連及反接，因此在構(gòu)建基因表達載體時，選擇EcoRⅠ和PstⅠ作為切割質(zhì)粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和載體的正確連接效率。（4）分析題圖可知，PstI破壞了氨芐青霉素抗性基因（Ampr），構(gòu)建的重組質(zhì)粒無氨芐青霉素抗性，但具有新霉素抗性基因，而甲培養(yǎng)基中含有新霉素，因此，含重組質(zhì)粒的受體細胞能在甲培養(yǎng)基上生存；乙培養(yǎng)基中含有新霉素和氨芐青霉素，能殺死含有目的基因的受體細胞，不能在乙培養(yǎng)基中生存。（5）PCR時，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端向3'端延伸的，因此據(jù)圖分析，利用PCR技術(shù)獲取HSA基因時，應選擇乙、丙作為引物。擴增3次后得到HSA目的基因（第一次循環(huán)擴增出來的新片段很長，第二次循環(huán)以新的長片段為模板進行，但新片段的一端是引物開頭的，所以第二個循環(huán)得到的片段就是我們需要的長度，但只是一條鏈，所以還不能分離出目的基因。第三次循環(huán)，當以第二次循環(huán)得到的新片段為模板時，因為這個片段的長度就是需要擴增的長度，當?shù)谌窝h(huán)完成時，這個片段是需要的長度，且是雙鏈DNA，這就得到了需要的目的基因了）。江蘇2023-2024學年高二期中測試卷01（考試時間：75分鐘試卷滿分：100分）一、單項選擇題：共14題，每題2分，共28分。每題只有一個選項最符合題意。1．傳統(tǒng)工藝釀酒過程中，會出現(xiàn)“釀酒不成反釀醋”的現(xiàn)象，即釀出的酒水變酸。下列相關(guān)說法錯誤的是（

）A．酒和醋都是利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作的食品，它們是我國傳統(tǒng)飲食文化的重要組成部分B．“酸酒”產(chǎn)生的過程中，糖類直接被分解成為乙酸C．“釀酒不成反釀醋”的原因可能是發(fā)酵條件控制出現(xiàn)問題，如容器的密封性D．釀酒前將釀酒容器高溫消毒不一定能夠防止酒變酸〖答案〗B〖祥解〗參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：醋酸菌是一種好氧性細菌，只有當氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動。若氧氣、糖源充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；若缺少糖源、氧氣充足，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，乙醛變?yōu)榇姿??！驹斘觥緼、酒和醋都是利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作的食品，它們是我國傳統(tǒng)飲食文化的重要組成部分，A正確；B、在釀酒的過程中糖類被酵母菌利用，由于缺少糖源，醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛轉(zhuǎn)化為乙酸，B錯誤；C、釀酒控制的發(fā)酵條件是無氧，溫度控制在18~30℃，釀醋控制的發(fā)酵條件是有氧，溫度控制在30—35℃，若釀酒過程容器的密封性出現(xiàn)問題，醋酸菌大量繁殖就可能出現(xiàn)“釀酒不成反釀醋”，C正確；D、釀酒前將酒缸高溫消毒不一定能夠防止酒變酸，若發(fā)酵過程中沒有嚴格把控發(fā)酵條件，也可能導致酒變酸，D正確。故選B。2．下圖為野生型谷氨酸棒狀桿菌經(jīng)誘變獲得精氨酸依賴型菌并進行篩選的過程示意圖。已知精氨酸依賴型菌株不能在缺少精氨酸的培養(yǎng)基上正常生長，但可作為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種。下列相關(guān)敘述錯誤的是（

）

A．野生型菌液的培養(yǎng)皿中不會出現(xiàn)菌落B．乙培養(yǎng)基中加入了精氨酸，甲中未加入C．乙中的菌落是通過影印法接種獲得的D．甲中的菌落B為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種〖答案〗B〖祥解〗由圖分析可知，圖中①表示將紫外線照射處理的菌液接種在含有精氨酸的培養(yǎng)基上，②表示影印到不含精氨酸的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，圖甲中有A、B兩種菌落，圖乙中只有A菌落，因此甲中A表示野生型谷氨酸棒狀桿菌，B為精氨酸依賴型菌株。【詳析】A、液體培養(yǎng)基的作用是讓細菌快速大量繁殖，細菌在固體培養(yǎng)基上才能形成菌落，A正確；B、圖示為野生型谷氨酸棒狀桿菌經(jīng)誘變獲得精氨酸依賴型菌并進行篩選的過程示意圖，精氨酸依賴型菌株不能在缺少精氨酸的培養(yǎng)基上正常生長，因此A為野生型谷氨酸棒狀桿菌，B為精氨酸依賴型菌株，乙培養(yǎng)基上沒有B菌落，據(jù)此推測乙培養(yǎng)基與甲相比缺少了精氨酸，B錯誤；CD、乙中的菌落是通過影印法獲得的，菌落A是野生型菌種，菌落B為精氨酸依賴型菌株，B可作為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種，CD正確。故選B。3．黃河入?？谑徒到饩暮Y選是修復石油污染，保護黃河的重要工作，如圖表示篩選石油降解菌的過程。下列敘述正確的是（

）A．圖示接種方法為稀釋涂布平板法，據(jù)結(jié)果推測1g土壤中石油分解菌數(shù)最多為1.6×106個B．分離、純化石油分解菌時，還可采用平板劃線法且該方法也需要進行③步驟操作C．稀釋涂布時，利用涂布器從盛有菌液的試管中蘸取菌液，進行涂布D．進行步驟⑤時，應用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)④中的石油降解菌，并檢測菌的數(shù)量和石油降解能力〖答案〗D〖祥解〗1、每克樣品中的菌株數(shù)=（C÷V）×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。2、常用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，其中稀釋涂布平板法分離純化土壤中微生物的步驟為土壤取樣→溶化→梯度稀釋→涂布平板。3、由題圖可知，①稱取10g土壤；②10g土壤加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中制備土壤懸浮液，稀釋了101；③進行梯度稀釋，即依次稀釋至101、102、103稀釋度；④使用稀釋涂布平板法篩選菌株，接種了104稀釋度菌液0.1mL，長出16個菌落；推測1g土壤中石油分解菌數(shù)=16÷0.1×104÷10=1.6×105個；⑤鑒別優(yōu)質(zhì)菌種，保存?zhèn)溆?，推測使用甘油管藏法或臨時保存法?！驹斘觥緼、根據(jù)題圖分析可知，圖示接種方法為稀釋涂布平板法，涂布平板的稀釋度為104，據(jù)結(jié)果推測1g土壤中石油分解菌數(shù)最少為16÷0.1×104=1.6×106個，A錯誤；B、根據(jù)題圖分析可知，③進行梯度稀釋，雖然分離、純化石油分解菌時，可以采用稀釋涂布平板法，也可以采用平板劃線法，但平板劃線法不需要進行梯度稀釋，也就是不需要進行③步驟操作，B錯誤；C、稀釋涂布時，先取少量菌夜（不超過0.1ml）滴加到培養(yǎng)基表面，再將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻，用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面，而不是利用涂布器從盛有菌液的試管中蘸取菌液，進行涂布，C錯誤；D、根據(jù)題圖分析可知，⑤鑒別優(yōu)質(zhì)菌種和保存?zhèn)溆?，無論使用甘油管藏法或臨時保存法，都要應用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)④中的石油降解菌，獲得菌液，而鑒別優(yōu)質(zhì)菌種就是要檢測菌的數(shù)量和石油降解能力，D正確。故選D。4．如圖為醬油的制作流程，其中米曲霉發(fā)酵過程的主要目的是使米曲霉充分生長繁殖，大量分泌制作醬油所需的蛋白酶、脂肪酶等，該過程需要提供營養(yǎng)物質(zhì)、通入空氣。下列說法正確的是（）A．大豆、小麥和麥麩都要蒸煮的目的是為了破壞酶的活性B．發(fā)酵罐發(fā)酵需要將罐內(nèi)的pH控制在中性或弱堿性條件下C．發(fā)酵罐發(fā)酵類型為有氧發(fā)酵，而發(fā)酵池發(fā)酵為無氧發(fā)酵D．米曲霉在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵的過程主要為產(chǎn)生大量醬油〖答案〗C〖祥解〗在提供主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。例如，在培養(yǎng)乳酸桿菌時，需要在培養(yǎng)基中添加維生素；在培養(yǎng)霉菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性；在培養(yǎng)細菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性；在培養(yǎng)厭氧微生物時，需要提供無氧的條件?！驹斘觥緼、大豆、小麥和麥麩等原料中含有蛋白質(zhì)、糖類和脂肪等營養(yǎng)物質(zhì)，相當于培養(yǎng)基，在制作醬油時需要經(jīng)蒸煮和適當配比處理，其目的是滅菌和調(diào)整營養(yǎng)配比從而滿足微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求，A錯誤；B、發(fā)酵罐發(fā)酵需要黃曲霉菌，培養(yǎng)霉菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性，B錯誤；C、發(fā)酵罐發(fā)酵主要是米曲霉起作用，類型為有氧發(fā)酵，而發(fā)酵池發(fā)酵是乳酸菌和酵母菌起作用，為無氧發(fā)酵，C正確；D、根據(jù)題意信息可知，米曲霉發(fā)酵過程的主要目的是使米曲霉充分生長繁殖，大量分泌制作醬油所需的蛋白酶、脂肪酶等，該過程需要提供營養(yǎng)物質(zhì)、通入空氣，D錯誤。故選C。5．如圖為某二倍體植株花藥中未成熟的花粉在適宜培養(yǎng)基上形成完整植株的過程。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．過程①②表示脫分化，過程③表示再分化B．過程①②需要液體培養(yǎng)基C．過程①②③說明花粉細胞具有全能性D．通過過程③獲得的完整植株自交后代不會發(fā)生性狀分離〖答案〗C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的過程為：離體的植物組織，器官或細胞經(jīng)過脫分化（避光）形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過再分化（需光）過程形成胚狀體，進一步發(fā)育形成植株。圖中①表示脫分化，②③表示再分化?！驹斘觥緼、離體的植物組織，器官或細胞經(jīng)過脫分化（避光）形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過再分化（需光）過程形成胚狀體，進一步發(fā)育形成植株，圖中過程①表示脫分化，②③表示再分化，A錯誤；B、過程①表示脫分化形成愈傷組織，②表示再分化形成叢芽，需要固體培養(yǎng)基，B錯誤；C、過程①、②、③是植物組織培養(yǎng)過程，由花粉細胞最終獲得了完整植物個體，說明花粉細胞具有全能性，C正確；D、過程③獲得的完整植株屬于單倍體植株，高度不育，不能自交產(chǎn)生后代，D錯誤。故選C。6．植株甲金花菜是一種多年生開花植物，具有多種優(yōu)良性狀，另一種遠緣植株乙青花菜存在抗除草劑基因，欲將植株乙細胞中抗除草劑基因引入植株甲中，進行了如下操作。下列說法錯誤的是（

）

A．過程A取頂芽細胞的操作有利于獲得脫毒苗B．過程B中常用PEG誘導原生質(zhì)體融合C．兩個細胞融合完成的標志是再生出細胞壁D．獲得的融合原生質(zhì)體需放在無菌水中以防雜菌污染〖答案〗D〖祥解〗植物體細胞雜交技術(shù)是指將來源不同的植物體細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成新植物體的技術(shù)?！驹斘觥緼、植物頂端分生區(qū)附近（如莖尖）的病毒極少，甚至無毒，因此過程A取頂芽細胞的操作有利于獲得脫毒苗，A正確；B、過程B為誘導原生質(zhì)體融合，常用PEG促融，B正確；C、雜種細胞融合完成的標志是再生出細胞壁，C正確；D、獲得的融合原生質(zhì)體（無細胞壁）不能放在無菌水中，以防原生質(zhì)體吸水漲破，D錯誤。故選D。7．下圖為小鼠細胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是（

）

A．動物細胞培養(yǎng)至一定代數(shù)，所培養(yǎng)的細胞全部都會衰老死亡B．為了保證細胞培養(yǎng)所需的無菌、無毒環(huán)境，可以添加適量的抗生素C．制備細胞懸液時，可用胃蛋白酶處理組織塊D．培養(yǎng)過程中，需要CO2濃度維持在5%左右，以促進細胞呼吸〖答案〗B〖祥解〗動物細胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)，在傳代培養(yǎng)的過程中可能會發(fā)生癌變。動物細胞培養(yǎng)的目的是獲得細胞群或細胞產(chǎn)物?！驹斘觥緼、動物細胞培養(yǎng)至一定代數(shù)，部分細胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變，并且?guī)в邪┳兊奶攸c，能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，A錯誤；B、抗生素能抑制細菌生長，因此為了保證細胞培養(yǎng)所需的無菌、無毒環(huán)境，可以添加適量的抗生素，B正確；C、制備細胞懸浮液時應用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，不能使用胃蛋白酶，因為胃蛋白酶需要在酸性環(huán)境下才能起作用，但這樣的環(huán)境不適于細胞生存，C錯誤；D、恒溫培養(yǎng)箱中的CO2濃度維持在5%左右，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH，D錯誤。故選B。8．為解決雜交瘤細胞在傳代培養(yǎng)中出現(xiàn)來自B淋巴細胞的染色體丟失問題，研究者將抗原刺激后的B淋巴細胞，用EBV（一種病毒顆粒）感染，獲得“染色體核型穩(wěn)定”的EBV轉(zhuǎn)化細胞。EBV轉(zhuǎn)化細胞能夠在HAT培養(yǎng)基中存活，但對Oua敏感。骨髓瘤細胞在HAT培養(yǎng)基中不能存活，但對Oua不敏感。下圖表示操作過程。下列分析錯誤的是（

）A．B淋巴細胞可從多次間歇注射某種抗原的動物脾臟中獲得B．HAT培養(yǎng)基和Oua篩選去除的是未融合的EBV轉(zhuǎn)化細胞C．雜交瘤細胞染色體丟失可能會導致抗體的產(chǎn)生能力下降D．圖中獲得的雜交瘤細胞需經(jīng)抗體檢測篩選后才可用于生產(chǎn)〖答案〗B〖祥解〗1、單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。2、兩次篩選：篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）；篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群?！驹斘觥緼、對動物進行間歇注射抗原處理，以刺激動物機體產(chǎn)生相應的B淋巴細胞；B淋巴細胞在骨髓中發(fā)育成熟，可分布于淋巴結(jié)和脾臟等處，故B淋巴細胞可從多次間歇注射某種抗原的動物脾臟中獲得，A正確；B、據(jù)題意“EBV轉(zhuǎn)化細胞能夠在HAT培養(yǎng)基中存活，但對Oua敏感；骨髓瘤細胞在HAT培養(yǎng)基中不能存活，但對Oua不敏感”可知，HAT培養(yǎng)基去除的是未與EBV轉(zhuǎn)化細胞融合的骨髓瘤細胞和自身融合的骨髓瘤細胞，Oua篩選去除的是未與骨髓瘤細胞融合的EBV轉(zhuǎn)化細胞和自身融合的EBV轉(zhuǎn)化細胞，B錯誤；C、抗體是由漿細胞分泌的，雜交瘤細胞若丟失來自B淋巴細胞的染色體，可能會導致抗體產(chǎn)生能力下降，C正確；D、圖示獲得的雜交瘤細胞還需要經(jīng)過進一步的篩選，用專一抗體檢測呈現(xiàn)陽性的雜交瘤細胞才能直接用于生產(chǎn)單克隆抗體，D正確。故選B。9．動物的某種退行性神經(jīng)疾病由基因t突變?yōu)榛騎導致。隨著生物工程技術(shù)的發(fā)展和基因編輯（CRISPR/Cas9）技術(shù)的出現(xiàn)，為治療該疾病提供了如下新思路。以下說法錯誤的是（）

A．①過程需采用MⅡ期卵母細胞B．ES細胞能分化為動物體內(nèi)任何一種組織細胞C．過程④的培養(yǎng)基中需要添加誘導分化因子D．移植的神經(jīng)干細胞會成為抗原，引發(fā)免疫排斥反應〖答案〗D〖祥解〗核移植技術(shù)指的是將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體?！驹斘觥緼、MII時期的卵母細胞體積大，易操作，細胞質(zhì)中含有促使細胞核全能性表達的物質(zhì)和營養(yǎng)條件，所以體細胞核移植技術(shù)要選擇MII期的卵母細胞作為受體細胞，A正確；B、ES細胞的細胞核大，核仁明顯，具有發(fā)育的全能性，可以誘導分化成動物體內(nèi)任何一種組織細胞，B正確；C、在培養(yǎng)液中加入誘導分化因子，就可以誘導胚胎干細胞向不同類型的組織細胞分化，用于患者的組織器官移植，C正確；D、由于移植的神經(jīng)干細胞的遺傳物質(zhì)與患者相同，不會成為抗原，因而不會發(fā)生免疫排斥，可用于治療該退行性神經(jīng)疾病，D錯誤。故選D。10．下圖為科研人員利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的過程，相關(guān)敘述正確的是（

）A．嵌合鼠的培育依據(jù)的原理是基因重組和細胞全能性B．過程①中需利用相關(guān)技術(shù)去除早期胚胎外的滋養(yǎng)層C．過程②中可利用聚乙二醇誘導卵裂球細胞發(fā)生融合D．嵌合胚胎發(fā)育到囊胚時期細胞發(fā)生分化〖答案〗D〖祥解〗由圖可知，將白鼠的早期胚胎的卵裂球和黑鼠的早期胚胎的卵裂球放在一起培養(yǎng)，將形成嵌合胚胎，將嵌合胚胎發(fā)育至囊胚后移植到代孕母體內(nèi)發(fā)育，可形成嵌合鼠?！驹斘觥緼、嵌合鼠的培育依據(jù)的原理是細胞全能性，并沒有進行基因重組，A錯誤；B、過程①中需利用相關(guān)技術(shù)去除早期胚胎外的透明帶，而滋養(yǎng)層屬于早期胚胎的一部分，B錯誤；C、過程②不需要誘導卵裂球細胞發(fā)生融合，C錯誤；D、過程③操作前需對多只代孕母鼠進行同期發(fā)情處理，以保證受體與供體的生殖器官的生理變化是相同的，D正確。故選D。11．下列有關(guān)限制性內(nèi)切核酸酶的敘述，正確的是（）A．用限制性內(nèi)切核酸酶切割一個DNA分子中部，獲得一個目的基因時，被水解的磷酸二酯鍵有2個B．限制性內(nèi)切核酸酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大C．—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性內(nèi)切核酸酶切出的黏性末端可用DNA連接酶連接D．只有用相同的限制性內(nèi)切核酸酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒，才能形成重組質(zhì)?！即鸢浮紹〖祥解〗限制酶的來源、作用及其結(jié)果：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來。（2）作用（特異性）：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端；特別注意：用限制酶切割DNA時，每切開一個切口需要水解兩個磷酸二酯鍵?！驹斘觥緼、用限制性內(nèi)切核酸酶切割一個DNA分子中部，獲得一個目的基因時，需要切割目的基因的兩側(cè)，又因DNA為雙鏈結(jié)構(gòu)，因此要斷裂4個磷酸二酯鍵，即被水解的磷酸二酯鍵有4個，A錯誤；B、限制酶具有專一性，限制性內(nèi)切核酸酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大，B正確；C、—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性內(nèi)切核酸酶切出的黏性末端不同，分別為—CATG和GATC—，因此不能用DNA連接酶連接，C錯誤；D、用不同的限制性內(nèi)切核酸酶處理含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒，若產(chǎn)生的黏性末端相同，則也能形成重組質(zhì)粒，D錯誤。故選B。12．若要利用某目的基因（見圖甲）和P1噬菌體載體（見圖乙）構(gòu)建重組DNA（見圖丙），限制性內(nèi)切核酸酶的酶切位點分別是BglⅡ（－A↓GATCT－），EcoRⅠ（－G↓AATTC－）和Sau3AⅠ（－↓GATC－）。下列分析合理的是（）A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體B．用BglⅡ和EcoRI切割目的基因和P1噬菌體載體C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體〖答案〗D〖祥解〗限制酶選擇原則：（1）應選擇切點位于目的基因兩端的，不能位于目的基因內(nèi)部，防止破壞目的基因，同時為避免目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化或隨意連接，可使用不同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒。（2）根據(jù)質(zhì)粒特點確定限制酶種類具體原則：①保證切割的黏性末端與目的基因的相同，以便兩者能夠連接。②保證切割后的質(zhì)粒至少保留一個標記基因，以便進行篩選；保留復制原點，以便在受體細胞中維持穩(wěn)定和表達?！驹斘觥緼、用EcoRⅠ切割目的基因和P1質(zhì)粒載體，產(chǎn)生相同的黏性末端，用DNA連接酶連接時可能會發(fā)生反向連接，A錯誤；B、用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1質(zhì)粒載體，這與A選項中僅用EcoRⅠ切割一樣，B錯誤；C、用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1質(zhì)粒載體，會產(chǎn)生相同的黏性末端，可能會發(fā)生反向連接，C錯誤；D、只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1質(zhì)粒載體，產(chǎn)生不同的黏性末端，防止發(fā)生反向連接，且這樣目的基因插入運載體后，RNA聚合酶的移動方向與圖丙實線方向相同，D正確。故選D。13．胰島素用于治療糖尿病，但胰島素注射后易在皮下堆積，需較長時間才能進入血液，進入血液后又易被分解，因此治療效果受到影響?？蒲腥藛T研制了速效胰島素，其生產(chǎn)過程如圖所示。下列說法錯誤的是（）A．速效胰島素的生產(chǎn)需要用到蛋白質(zhì)工程和發(fā)酵工程B．大腸桿菌合成的新的胰島素不能正常發(fā)揮作用C．除人工合成DNA外，還可以通過定點突變技術(shù)獲得目的基因D．可以用Ca2+處理的方法直接將新的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌細胞中〖答案〗D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程的過程：預期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有氨基酸序列→找到對應的脫氧核苷酸序列（基因）。蛋白質(zhì)工程得到的蛋白質(zhì)一般不是天然存在的蛋白質(zhì)?！驹斘觥緼、圖示的前半部分是利用蛋白質(zhì)工程設(shè)計速效胰島素的生產(chǎn)過程，后半部分是利用發(fā)酵工程生產(chǎn)速效胰島素的過程，A正確；B、大腸桿菌是原核生物，沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體對胰島素原進行加工，因此大腸桿菌合成的新的胰島素不能正常發(fā)揮作用，B正確；C、基因定點突變是指按照特定的要求，使基因的特定序列發(fā)生插入、刪除、置換、重排等變異，除人工合成DNA外，還可以通過定點突變技術(shù)獲得目的基因，C正確；D、可以用Ca2+處理的方法可以將含有新的胰島素基因的基因表達載體導入大腸桿菌細胞中，D錯誤。故選D。14．下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性與倫理問題的說法正確的是（

）A．轉(zhuǎn)基因食品中的外源基因經(jīng)過食用后會進入人體細胞并整合到人體的基因組中B．任何情況下我們必須堅決抵制生物武器，防止生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴散C．試管嬰兒技術(shù)已經(jīng)成熟，為保證嬰兒的健康可對植入前的胚胎進行遺傳學診斷D．生殖性克隆和治療性克隆都涉及到核移植技術(shù)，中國政府不接受任何克隆試驗〖答案〗B〖祥解〗目前對轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭論主要是食物安全和環(huán)境安全，另外還有生物安全問題，轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題。轉(zhuǎn)基因食品、產(chǎn)品上都要標注原料來自轉(zhuǎn)基因生物。當今社會的普遍觀點是反對生殖性克隆人實驗，但不反對治療性克隆；試管嬰兒可以設(shè)計嬰兒的性別，反對設(shè)計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒。【詳析】A、轉(zhuǎn)基因食品中含有外源基因，但是食用后外源基因會被酶水解，不能進入人體細胞并改變?nèi)梭w遺傳物質(zhì)，A錯誤；B、在任何情況下不發(fā)展