《單體克隆抗體》名師課件2

單克隆抗體高二人教版西安電子科技大學(xué)附屬中學(xué)張博--錢江晚報張先生好心去獻了一次血，結(jié)果卻接到通知，他的血液不能用。街頭獻血檢出乙肝陽性

假陽性

張先生第二天請假去醫(yī)院做了復(fù)檢。

進行了一堆檢查后，醫(yī)生告訴他，各項指標(biāo)正常，沒有得乙肝。新聞鏈接（1）一般情況下，醫(yī)院是如何檢測人體內(nèi)是否存在乙肝病毒的？（2）抗體如何產(chǎn)生的？（3）一種效應(yīng)B細(xì)胞能產(chǎn)生多種抗體嗎？（4）傳統(tǒng)獲得抗體的方法是什么？溫故知新不僅產(chǎn)量低、而且抗體的特異性差，純度低，靈敏度低?？乖瓌游矬w內(nèi)從動物的血清中獲取抗體刺激效應(yīng)B細(xì)胞傳統(tǒng)抗體的獲得方法：B1B2B3B4多種抗體單種抗體不僅產(chǎn)量低，而且抗體的特異性差，純度低，靈敏度低。抗體不純篩選單一的B淋巴細(xì)胞（不能在體外大量增殖）抗原動物體內(nèi)從動物血清中獲取抗體刺激效應(yīng)B細(xì)胞傳統(tǒng)抗體獲得方法的缺點：單克隆抗體怎樣能得到既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞？一個大膽的猜想德國科勒英國米爾斯坦單克隆抗體獲得雜交瘤細(xì)胞獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞動物細(xì)胞培養(yǎng)1如何得到B淋巴細(xì)胞？2如何誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合？3融合過程中會出現(xiàn)幾種類型的細(xì)胞？4上述過程得到的細(xì)胞哪種是我們需要的？其特點是什么？

怎樣淘汰我們不需要的細(xì)胞？5淘汰后的細(xì)胞所產(chǎn)抗體是單一的嗎？如何檢測？6如何獲得大量“單克隆抗體”？一單克隆抗體的制備過程提取單克隆抗體補充資料已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖。一單克隆抗體的制備過程獲得雜交瘤細(xì)胞獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞動物細(xì)胞培養(yǎng)1如何得到B淋巴細(xì)胞？2如何誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合？3融合過程中會出現(xiàn)幾種類型的細(xì)胞？4上述過程得到的細(xì)胞哪種是我們需要的？其特點是什么？

怎樣淘汰我們不需要的細(xì)胞？5淘汰后的細(xì)胞所產(chǎn)抗體是單一的嗎？如何檢測？6如何獲得大量“單克隆抗體”？提取單克隆抗體多孔板陽性孔有限稀釋法（1）取出陽性孔培養(yǎng)液將其稀釋到每毫升10個細(xì)胞。（2）如果在多孔板中每孔加0.1毫升，使每孔內(nèi)落入一個細(xì)胞。（3）根據(jù)檢測的陽性結(jié)果再次進行克隆化。通過適當(dāng)?shù)南♂屵_(dá)到分離單個細(xì)胞進行培養(yǎng)的目的。一單克隆抗體的制備過程獲得雜交瘤細(xì)胞獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞動物細(xì)胞培養(yǎng)1如何得到B淋巴細(xì)胞？2如何誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合？3融合過程中會出現(xiàn)幾種類型的細(xì)胞？4上述過程得到的細(xì)胞哪種是我們需要的？其特點是什么？

怎樣淘汰我們不需要的細(xì)胞？5淘汰后的細(xì)胞所產(chǎn)抗體是單一的嗎？如何檢測？6如何獲得大量“單克隆抗體”？提取單克隆抗體3、整個制備過程需要幾次篩選？細(xì)胞融合技術(shù)和動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)2、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合？繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體?？偨Y(jié)提升4、單克隆抗體有什么優(yōu)點？特異性強，靈敏度高，并可以大量制備。1、本過程利用了細(xì)胞工程的哪些技術(shù)？第一次：得到雜交瘤細(xì)胞。第二次：在雜交瘤細(xì)胞中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。二單克隆抗體的應(yīng)用1作為診斷試劑抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體2用于治療疾病和運載藥物