THBCIA 018-2023 谷子種傳病害綠色控制技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.99CCSB20Technicalregulationsforthegreencontrolofmilletseed-borndisea2023-12-31發(fā)布1本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》、“國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)民政部關(guān)于印發(fā)《團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)定》的通知（國標(biāo)委聯(lián)[2019]1號）”的要求和規(guī)定起草。本文件由河北省特色產(chǎn)業(yè)協(xié)會(huì)雜糧專業(yè)委員會(huì)提出。本文件由河北省特色產(chǎn)業(yè)協(xié)會(huì)歸口。本文件起草單位：河北省農(nóng)林科學(xué)院谷子研究所、中國作物學(xué)會(huì)粟類作物專業(yè)委員會(huì)、河北省特色產(chǎn)業(yè)協(xié)會(huì)雜糧專業(yè)委員會(huì)。本文件主要起草人：劉佳、董志平、白輝、李志勇、張夢雅、馬繼芳、王永芳、全建章、董立、劉磊、劉峰、梁國輝。本文件為首次發(fā)布。2T/HBCIA018-2023本文件規(guī)定了谷子種傳病害綠色控制技術(shù)的術(shù)語和定義、病情分級、控制原則與控制技本文件適用于谷子種傳病害的綠色標(biāo)準(zhǔn)化控制。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4404.1糧食作物種子第1部分：禾谷類GB/T8321農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則NY/T393綠色食品農(nóng)藥使用準(zhǔn)則NY/T1276農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則DB13/T2338.3谷子抗病蟲性鑒定技術(shù)規(guī)程第3部分：白發(fā)病DB13/T2338.4谷子抗病蟲性鑒定技術(shù)規(guī)程第4部分：粒黑穗病DB13/T2338.5谷子抗病蟲性鑒定技術(shù)規(guī)程第5部分：線蟲病3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1谷子種傳病害milletseed-borndisease以種子攜帶病原物傳播為主的谷子病害。包括谷子白發(fā)?。⊿clerosporagraminicola）、谷子線蟲?。ˋphelenchoidesbessyi）和谷子粒黑穗?。║stilagocrameri），三種病害的癥狀和發(fā)生規(guī)律，見附錄A。3.2無病種子cleaningproduction不攜帶谷子種傳病害活體病原物的種子。3.3谷田清潔生產(chǎn)cleaningproduction清除田間病源的一種病害防治措施。將寄生在谷子或谷田野生寄主上的病原物，在擴(kuò)散前將病部徹底清理出田間，并進(jìn)行滅活處理。3T/HBCIA018-20234病情分級根據(jù)谷子種傳白發(fā)病和線蟲病發(fā)生程度，將谷田病情進(jìn)行分級如下：5控制原則以生產(chǎn)和使用無病種子為前提，谷田清潔生產(chǎn)為重點(diǎn)，根據(jù)病情分級對不同發(fā)生程度的地塊采用分級治理的原則。多措并舉控制重病地塊；種子處理等技術(shù)防控常發(fā)地塊；谷田清潔生產(chǎn)控制零星發(fā)生地塊；重點(diǎn)保護(hù)無病地塊。實(shí)現(xiàn)地塊病情逐年降級，由點(diǎn)到片再到面，逐步實(shí)現(xiàn)不用農(nóng)藥控制病害的目的。6控制技術(shù)6.1無病原種繁育無谷子種傳病害的地塊，或4年內(nèi)沒有種植谷子的地塊，且周邊500m之內(nèi)沒有谷子種植，或確保沒有白發(fā)病或粒黑穗病發(fā)生。6.1.2種子處理6.1.2.1溫湯浸種播種前，用55℃~56℃溫水浸種10min，晾干后備用。6.1.2.2藥劑處理根據(jù)種子攜帶病原種類選擇適宜藥劑對谷子原原種進(jìn)行處理。白發(fā)病使用種子重量0.2%～0.3%的35%精甲霜靈種子處理乳劑進(jìn)行拌種，線蟲病使用種子重量0.2%～0.3%的40%辛硫磷乳油加水6%拌勻后悶種4h。如防線蟲病兼白發(fā)病，先拌殺蟲劑并悶種后再拌殺菌劑。藥劑使用應(yīng)符合NY/T1276規(guī)定。4T/HBCIA018-20236.1.3繁種田管理6.1.3.1中耕除草及時(shí)中耕除草，清除田間、地頭的狗尾草、谷莠子等谷子種傳病害野生寄主?？钩輨┕茸悠贩N在3葉～5葉期應(yīng)及時(shí)噴施相應(yīng)除草劑。6.1.3.2谷田清潔生產(chǎn)生長季密切關(guān)注制種田零星病株的清理。白發(fā)病在孕穗期拔除灰背病株，抽穗初期拔除白尖病株，抽穗后拔除綠色刺猬頭等；灌漿中期注意線蟲病和粒黑穗病零星病株的拔除，并帶到田外燒毀或深埋（＞30cm），確保生產(chǎn)的原種不攜帶種傳病害的病原物。6.2無病良種繁育6.2.1地塊選擇6.2.2原種選擇利用無病原種生產(chǎn)的不攜帶種傳病原物的原種種子。6.2.3種子處理可用600g/L吡蟲啉懸浮種衣劑或70%噻蟲嗪種子處理可分散粉劑，按種子量的0.3%拌種，預(yù)防地下害蟲和苗期病蟲害。6.2.4繁種田管理6.2.4.1中耕除草6.2.4.2谷田清潔生產(chǎn)6.2.5良種病原檢測種子取樣參照GB/T3543.2執(zhí)行。檢測技術(shù)見附錄B。發(fā)現(xiàn)種子攜帶種傳病害的病原物5T/HBCIA018-2023則不能作為無病種子使用。6.3大田控制根據(jù)谷子種傳白發(fā)病、線蟲病在當(dāng)?shù)氐陌l(fā)生情況，因地制宜選用下列相應(yīng)病情級別的控制技術(shù)。6.3.1重病地塊控制6.3.1.1土壤深翻谷子收獲后深翻25cm～30cm。6.3.1.2輪作倒茬實(shí)行4年以上輪作。選擇玉米、高粱、大豆、花生、蔬菜、甘薯、油料等非寄主作物進(jìn)行輪作。6.3.1.3優(yōu)選抗病品種種植的抗病品種應(yīng)符合DB13/T2338.3、或DB13/T2338.5的規(guī)定。6.3.1.4優(yōu)選無病良種禁止從病區(qū)調(diào)運(yùn)種子，優(yōu)先選用無種傳病害的良種。種子質(zhì)量應(yīng)符合GB4404.1的規(guī)定。6.3.1.5種子處理沒能選用無種傳病害的良種，則需要選用農(nóng)藥對谷子種子進(jìn)行處理，方法同6.1.2.2。6.3.1.6適期播種、淺播春谷氣溫穩(wěn)定在15℃以上時(shí)適期播種，根據(jù)土壤墑情和谷子品種生育期，可以適期晚播。有條件地區(qū)采用地膜覆蓋促進(jìn)出苗。夏谷區(qū)搶墑早播，保證土壤墑情、適當(dāng)淺播，加快谷子出苗速度。6.3.1.7中耕除草6.3.1.8谷田清潔生產(chǎn)6T/HBCIA018-20236.3.2常發(fā)地塊控制6.3.2.1輪作倒茬實(shí)行2年～3年輪作。選擇輪作倒茬的非寄主作物同6.2.1.2。6.3.2.2優(yōu)選抗病品種6.3.2.3優(yōu)選無病良種6.3.2.4種子處理6.3.2,5適期晚播、淺播6.3.2.6中耕除草6.3.2.7谷田清潔生產(chǎn)6.3.3零星發(fā)病地塊控制6.3.3.1優(yōu)選無病良種6.3.3.2種子處理7T/HBCIA018-20236.3.3.3中耕除草6.3.3.4谷田清潔生產(chǎn)6.3.4無病地塊保護(hù)6.3.4.1優(yōu)選無病良種6.3.4.2種子處理8T/HBCIA018-2023（資料性附錄）A.1谷子白發(fā)病癥狀及發(fā)生規(guī)律A.1.1谷子白發(fā)病癥狀谷子白發(fā)病是系統(tǒng)侵染性病害，從種子發(fā)芽到穗期陸續(xù)顯現(xiàn)癥狀。主要癥狀有：（1）芽死：種子發(fā)芽過程中被谷子白發(fā)病病菌侵染，幼芽變色扭曲，嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致腐爛，造成芽死，不能出土，從而引起缺苗斷壟。（2）灰背和黃斑：從二葉期至拔節(jié)期陸續(xù)顯現(xiàn)灰背苗，有系統(tǒng)灰背和黃斑灰背兩種。系統(tǒng)灰背植株葉片正面產(chǎn)生與葉脈平行的蒼白色或黃白色條紋，背面密生粉狀白色霉層（病菌的孢子囊及孢囊梗黃斑灰背在葉正面出現(xiàn)形狀不規(guī)則的油浸狀黃斑，病斑背面有白色霉層，有時(shí)甚至出現(xiàn)褐色或深褐色邊緣。植株越大，癥狀越明顯。其中，系統(tǒng)灰背后期變成“槍桿”比例大，黃斑灰背變成“槍桿”比例小。（3）白尖、槍桿和白發(fā)：灰背病株繼續(xù)發(fā)展，抽穗前，植株頂部2～3片葉叢生，葉尖或全葉黃白，心葉抽出后呈卷筒狀直立，黃白色，形成“白尖”；以后病株逐漸變成深褐色，枯死，直立田間，稱為“槍桿”；槍桿頂部的葉片組織縱向分裂為細(xì)絲，內(nèi)部包被的黃褐色卵孢子粉末散落，剩下的灰白色卷曲如頭發(fā)狀的葉脈組織殘余，即“白發(fā)”，是谷子白發(fā)病的典型癥狀。（4）刺猬頭：又稱看谷老，發(fā)生于穗期。病穗短縮、肥腫，小花內(nèi)外穎變長，呈小卷葉狀，全穗蓬松，宛如雞毛帚或刺猬。初為綠色或帶紅暈，后變褐色，組織破裂，也能散出大量卵孢子。病穗不結(jié)實(shí)或部分結(jié)實(shí)。A.1.2谷子白發(fā)病發(fā)生規(guī)律谷子白發(fā)病病菌以卵孢子在種子表面、土壤中或未腐熟糞肥上越冬。卵孢子在土壤中可存活2年～3年，是主要初侵染源。病菌侵染谷子主要發(fā)生在幼芽期。種子萌發(fā)時(shí)，土壤中或種子表面的卵孢子也同時(shí)萌發(fā)，以芽管侵入谷子胚芽鞘，引起死亡或定殖其中，隨著生長點(diǎn)的分化和發(fā)育，菌絲達(dá)到葉部或穗部，病株陸續(xù)出現(xiàn)灰背、白尖、槍桿、白發(fā)、刺猬頭等癥狀。灰背時(shí)期孢子囊和游動(dòng)孢子借氣流和雨水傳播，進(jìn)行再侵染，形成灰背和局部黃斑癥狀。孢子囊進(jìn)入心葉，也可形成白發(fā)癥狀。低溫種子萌發(fā)和幼苗出土速度慢，發(fā)病重。土壤墑情差，播種深時(shí)，發(fā)病重。大氣溫濕度影響再侵染，田間飽和濕度，特別是有水滴的條件和20℃~25℃氣溫適于孢子囊生長，有利于孢子囊和游動(dòng)孢子再侵染。不同品種對谷子白發(fā)病抗性有差異。9圖1谷子白發(fā)病發(fā)生規(guī)律A.2.1谷子線蟲病癥狀A(yù).2.2谷子線蟲病發(fā)生規(guī)律土壤中或室內(nèi)的線蟲至少能存活3年以上。谷子病原線蟲為外寄生，谷子播種后，在谷粒、高溫(25℃~30℃)能促使線蟲更為活躍，若此時(shí)雨水較多，植物體表存在水膜，線蟲可在A.3谷子粒黑穗病癥狀及發(fā)生規(guī)律A.3.1谷子粒黑穗病癥狀冬孢子附著在種子表面越冬，谷子播種后冬孢子萌發(fā)，從谷子胚芽鞘侵入圖3谷子粒黑穗病發(fā)生規(guī)律T/HBCIA018-2023（資料性附錄）B.1谷子種子帶白發(fā)病病菌檢測B.1.1檢測方法取谷子種子1.5g放入試管中，加入無菌水3mL，充分?jǐn)嚢?，取出種子，將洗脫水離心，抽取下部少許，在顯微鏡10×10倍下觀察，若有橘黃色白發(fā)病病原孢子，說明種子帶菌。試驗(yàn)重復(fù)3次。為了更加精準(zhǔn)檢測，或者進(jìn)一步證明以上鏡檢的病原孢子是白發(fā)病菌，可以采用分子檢測技術(shù)。另取1.5g谷子種子進(jìn)行脫皮，將種皮放入研缽內(nèi)，加入液氮充分研碎，采用CTAB方法提取基因組DNA。利用谷子白發(fā)病病菌特異性引物Sg-28S-403-F/Sg-28S-1221-R對基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，利用1.2%瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測。檢測到819bp的特異性擴(kuò)增片段則谷子種子帶白發(fā)病病菌。試驗(yàn)重復(fù)3次。B.1.2谷子白發(fā)病病菌特異性引物Sg-28S-403-F：5'-ACCGAATCGTTTCCAGTGTC-3'Sg-28S-1221-R：5'-TTCCCCGAATCCTCTAATCA-3'B.1.3PCR擴(kuò)增體系與程序25μLPCR反應(yīng)體系：2×EsTaqMasterMix12.5μL、模板DNA2.0μL、10μmol/L上下游引物各1μL、滅菌ddH2O8.5μL。PCR擴(kuò)增程序：94℃預(yù)變性2min；94℃變性30s，56℃退火30s，72℃延伸30s，35個(gè)循環(huán)反應(yīng)；最后72℃再延伸5min。B.1.4PCR擴(kuò)增片段核苷酸序列ACCGAATCGTTTCCAGTGTCTATAATCTGCGATATATTTCATCGGCGAATGTGTGCGTGCGTGTACTATGGCAGCGGCTTTTTGGCTGCGCTTGGTATGTGTGCTGTGCTTCCTTGCTGGTGCCCTGTATTGTGGTGGGACGCCAATGTCAGTTCGTAAACCGCGGGAAATGACTACCGAGGAGGTAAGGCTTACGCTTGCGTTTGTCTGTTATATCTTGGTGGACGAGTAGTTGTGGTTGGGACTGAGGTGCCTACAACGTGCTTTTGAGTGGGACTGCGTCTCCGTGTGCGCCGTGTGCGGATAGCTTGCTATATGCGTGTGGTTGTGTATGGATTGATGCGGACTTTAACTTGTTGCCGTTCGGGACGTTGGCGAAATGGAGCGATTTGACCCGTCTTGAAACACGGACCAAGGAGTCTAACATGTGTGCAAGTGTTAGGGTGTCGAAACCCGGACGCGTAATTAACGTGAAGGGCAGCGCAAGCTGTCTGAGGTAGGAAACGTTGCGGACTTCGGTCTGCGATGTGGCACTATCGACCGATCATGAACCTTCGTGGTGAAAGATTTGAGTTTGAGCACATATGTTGGTACCCGAAAGATGGTGAACTATGCCTGAGTAGAGTGAAGCCT/HBCIA018-2023AGGGGAAACTCTGGTGGAAGCTCGTAGCGATTCTGACGTGCAAATCGATCGTTGAACTTGGGTATAGGGGCGAAAGACTAATCGAACCATCTAGTAGCTGGTTCCCTCCGAAATCTCCCTCAGGATAGCAACAACTTATTTACGATAGTTTTATGAGGTAAAGCGAATGATTAGAGGATTCGGGGAAB.2谷子種子帶病原線蟲檢測B.2.1檢測方法用普通醫(yī)用紗布包裹谷子種子1.5g、在20mL無菌水中浸泡4h，將浸泡液離心后吸出底部1mL洗脫液至計(jì)數(shù)板，在顯微鏡4×10倍下觀察并進(jìn)行線蟲計(jì)數(shù)。試驗(yàn)重復(fù)3次。為了進(jìn)一步驗(yàn)證該線蟲是谷子病原線蟲，吸出其中的線蟲，使用“酶裂解”法提取線蟲DNA，通過線蟲特異性引物GU-F/GU-R進(jìn)行PCR擴(kuò)增，利用1.2%瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測，檢測到245bp