2025屆廣東省龍城高級中學(xué)高三壓軸卷生物試卷含解析

2025屆廣東省龍城高級中學(xué)高三壓軸卷生物試卷考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．2020年初，荷蘭某研究所利用蛇干細胞培養(yǎng)出可分泌毒液的蛇毒腺微型組織，讓毒素的獲取途徑更加安全和簡單。下列敘述正確的是（）A．培養(yǎng)蛇干細胞時O2的作用是維持培養(yǎng)液pH的穩(wěn)定B．蛇毒腺微型組織基因的表達與蛇干細胞不完全相同C．利用蛇干細胞的大量增殖即可獲得大量分泌毒液的細胞D．培養(yǎng)蛇毒腺微型組織與哺乳動物細胞培養(yǎng)的條件完全相同2．下列關(guān)于細胞內(nèi)蛋白質(zhì)和核酸的敘述，錯誤的是（）A．兩者都有可能降低活化能 B．兩者都可能轉(zhuǎn)運氨基酸C．兩者具有相同的空間結(jié)構(gòu) D．兩者的合成都需要能量3．2018年中國科學(xué)院首次人工創(chuàng)建了自然界不存在的生命——人造單染色體酵母，其與天然酵母細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能相似，但僅含有一條“超級染色體”。下列關(guān)于人造單染色體酵母的敘述正確的是A．沒有以核膜為界的細胞核 B．遺傳信息儲存在RNA中C．葡萄糖為其直接能源物質(zhì) D．在核糖體中合成蛋白質(zhì)4．北極熊生活在北極的冰原和浮冰上，海洋食物鏈中主要以海豹為食，陸地食物鏈中主要以馴鹿為食，食物網(wǎng)關(guān)系如圖所示，以下敘述正確的是（）A．圖中的魚類、北極狐都屬于第二營養(yǎng)級B．冰原和浮冰不同地段的物種組成的差異體現(xiàn)了群落的垂直結(jié)構(gòu)C．北極熊滯留在海洋中的時間延長，可使魚類的數(shù)量先減少后趨于穩(wěn)定D．農(nóng)藥DDT隨污染的水流進入北極，北極熊體內(nèi)該物質(zhì)的濃度最高5．某農(nóng)作物細胞間隙的濃度為a，細胞液的濃度為b，細胞質(zhì)基質(zhì)的濃度為c，在對農(nóng)作物施肥過多造成“燒苗”過程中，三者之間的關(guān)系是（）A．a(chǎn)>b>c B．b>c>a C．a(chǎn)>c>b D．b>a>c6．用PCR技術(shù)將DNA分子中的A1片段進行擴增，設(shè)計了引物Ⅰ、Ⅱ，其連接部位如圖所示，x為某限制酶識別序列。擴增后得到的絕大部分DNA片段是右圖中的A． B． C． D．7．生命是物質(zhì)、能量和信息的統(tǒng)一體。下列物質(zhì)的生物合成不需要信息分子作為合成模板的是（）A．DNA和mRNAB．mRNA和血紅蛋白C．胃蛋白酶和胃蛋白酶基因D．ATP和NADPH8．（10分）美國研究人員發(fā)現(xiàn)了一種含有集光綠色體的喜氧罕見細菌，每個集光綠色體含有大量葉綠素，使得細菌能夠同其他生物爭奪陽光來維持生存。下列有關(guān)該菌的敘述，正確的是A．該菌的基本結(jié)構(gòu)包括細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)和細胞核B．該菌是好氧細菌，其生命活動所需能量主要由線粒體提供C．由該細菌可知，細菌不一定都是分解者，也可以是生產(chǎn)者D．該菌是光能自養(yǎng)細菌，其光合作用的場所是葉綠體二、非選擇題9．（10分）下圖1為某雌性哺乳動物細胞的亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖；圖2是細胞膜內(nèi)陷形成的囊狀結(jié)構(gòu)即小窩，與細胞的信息傳遞等相關(guān)。請據(jù)圖回答下列問題：（1）圖1所示結(jié)構(gòu)中，參與生物膜系統(tǒng)構(gòu)成的有___________（填寫序號），從化學(xué)成分角度分析，新型冠狀病毒與圖1中結(jié)構(gòu)_________________（填結(jié)構(gòu)名稱）的化學(xué)組成最相似。在有絲分裂前期消失的結(jié)構(gòu)有_________（填寫序號）。（2）圖1中參與小窩蛋白形成的細胞器有__________（填寫序號）。小窩蛋白分為三段，中間區(qū)段主要由__________（填“親水性”或“疏水性”）的氨基酸殘基組成，其余兩段均位于圖1細胞的__________中（填寫序號）。（3）小窩蛋白中的某些氨基酸在一定的激發(fā)光下能夠發(fā)出熒光，當(dāng)膽固醇與這些氨基酸結(jié)合，會使熒光強度降低。為研究小窩蛋白中間區(qū)段與膽固醇的結(jié)合位點，分別向小窩蛋白的肽段1（82～101位氨基酸）和肽段2（101～126位氨基酸）加入膽固醇，檢測不同肽段的熒光強度變化，結(jié)果如圖3。據(jù)此分析可得到的結(jié)論是__________。（4）當(dāng)小窩中結(jié)合的膽固醇過少時，小窩蛋白的__________結(jié)構(gòu)改變，小窩會變扁平，影響細胞的信息傳遞功能。10．（14分）研究小組對某人工魚塘中部分生物的種群數(shù)量進行了調(diào)查，并對其消化道內(nèi)的食物組成分析后獲得如圖所示的食物網(wǎng)。研究發(fā)現(xiàn)，適當(dāng)提高光能利用率、增加飼料投放量，均可使魚產(chǎn)量大幅度提高。回答下列問題：（l）流經(jīng)該魚塘生態(tài)系統(tǒng)的能量來自_______。該魚塘中不同的動物在垂直方向上具有垂直分層的現(xiàn)象，其主要的影響因素是_______。（2）小龍蝦屬于雜食性動物，可取食浮游植物和其他水生植物，也捕食魚塘中的B，小龍蝦與B的種間關(guān)系是_______。在小龍蝦入侵該魚塘后，如果放弁對該魚塘的管理，預(yù)期小龍蝦的種群數(shù)量將出現(xiàn)的變化是_______。（3）假設(shè)A的同化量以相同的比例來自各條食物鏈（相鄰營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率均以20%計算），當(dāng)A同化129kJ的能量時，則共需浮游植物和其他水生植物同化的能量為_______kJ。（4）研究發(fā)現(xiàn)，魚塘浮游植物對光能利用率較低，但對魚塘水體施加氮肥后，其對光能利用率明顯提高，這說明_______。（5）該池塘生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性低于自然生態(tài)系統(tǒng)的原因是_______11．（14分）甲醇酵母菌是基因工程中常用的受體菌，研究人員將人的膠原蛋白基因?qū)爰状冀湍妇胁⒊晒Ρ磉_?；卮鹣铝袉栴}。（1）獲取目的基因是實施基因工程的第一步，獲取目的基因的方法有_____、__________(答出兩種)。（2）要使膠原蛋白基因在甲醇酵母菌中表達，需要先構(gòu)建基因表達載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細胞，原因是_________________和_________________。（3）甲醇酵母菌可高效表達外源蛋白質(zhì)并分泌到細胞外，但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少，這一特點的優(yōu)點在于_____________，甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)與人的幾乎完全相同，從細胞結(jié)構(gòu)的角度分析，其原因可能是_______。（4）在構(gòu)建基因表達載體時，用兩種不同的限制酶分別切割目的基因的兩端和質(zhì)粒，使目的基因和質(zhì)粒獲得不同的黏性末端，其目的是______________。12．下圖是高等植物細胞中光合作用過程圖解，圖中A?F代表相應(yīng)物質(zhì)，①?④代表一定的生理過程。請據(jù)圖回答。（1）R酶（RuBP羧化酶）由8個大亞基蛋白（L）和8個小亞基蛋白（S）組成。高等植物細胞中L由葉綠體基因編碼并在葉綠體中合成，S由細胞核基因編碼并在核糖體合成后進入葉綠體，在葉綠體的_______中與L組裝成有功能的酶?；罨腞酶催化E物質(zhì)固定生成2C3，單位時間內(nèi)2C3生成量越多說明R酶的活性越_______（填低或高），影響該反應(yīng)的外部因素，除光照條件外，還包括_______（寫出兩個）。（2）研究過程中，研究者測得細胞并沒有從外界吸收E物質(zhì)，也沒有向外界釋放E物質(zhì)，若在這種情況下測得細胞光合作用lh產(chǎn)生了0.12mol的A物質(zhì)，那么這lh中該細胞呼吸作用消耗的葡萄糖為_______mol。（3）研究發(fā)現(xiàn)，原核生物藍藻（藍細菌）R酶的活性高于高等植物，有人設(shè)想通過基因工程技術(shù)將藍藻R酶的S、L基因轉(zhuǎn)入高等植物，以提高后者的光合作用效率。研究人員將藍藻S、L基因轉(zhuǎn)入某高等植物（甲）的葉綠體DNA中，同時去除甲的L基因。轉(zhuǎn)基因植株能夠存活并生長。檢測結(jié)果表明，轉(zhuǎn)基因植株中的R酶活性高于未轉(zhuǎn)基因的正常植株。由上述實驗?zāi)懿荒芡茰y得出“轉(zhuǎn)基因植株中有活性的R酶是由藍藻的S、L組裝而成”這一結(jié)論？_________（填能或不能）請說明理由。______________________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)；細胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達?！驹斀狻緼、培養(yǎng)蛇干細胞時，二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液pH穩(wěn)定，A錯誤；B、蛇毒腺微型組織已經(jīng)分化，具有特定的形態(tài)，與蛇干細胞的一些基因的表達相同，如呼吸酶基因，與一些特定基因的表達不同，如與毒素合成有關(guān)的基因的表達，B正確；C、蛇干細胞沒有分化成腺細胞，不能合成大量毒素，不能增殖得到大量分泌毒液的細胞，C錯誤；D、蛇屬于變溫動物，培養(yǎng)時需要的溫度低于哺乳動物，D錯誤。故選B。2、C【解析】

蛋白質(zhì)和核酸是細胞內(nèi)的兩種生物大分子有機物，其中蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸，氨基酸有20種，主要由C、H、O、N元素組成；核酸分DNA和RNA，DNA分子的堿基有A、G、C、T四種，RNA分子的堿基有A、G、C、U四種，由C、H、O、N、P元素組成；DNA的多樣性決定了蛋白質(zhì)的多樣性?！驹斀狻緼、酶具有催化作用的原理是降低化學(xué)反應(yīng)所需的活化能，大多數(shù)的酶是蛋白質(zhì)，少部分是RNA，A正確；B、細胞膜上的載體蛋白可以轉(zhuǎn)運氨基酸，翻譯過程中tRNA轉(zhuǎn)運氨基酸，B正確；C、蛋白質(zhì)具有空間結(jié)構(gòu)，RNA一般是單鏈，DNA一般是雙螺旋結(jié)構(gòu)，C錯誤；D、氨基酸脫水縮合形成蛋白質(zhì)需要能量，核苷酸脫水聚合形成核酸需要能量，D正確。故選C。3、D【解析】

原核生物和真核生物的本質(zhì)區(qū)別在于是否有以核膜包被的細胞核，原核生物和真核生物的遺傳物質(zhì)都是DNA，常見的真核生物有真菌、植物和動物，據(jù)此作答?！驹斀狻緼、酵母菌屬于真菌，有以核膜為界的細胞核，A錯誤；B、酵母菌的遺傳信息儲存在DNA中，B錯誤；C、ATP為其直接能源物質(zhì)，C錯誤；D、酵母菌有核糖體，核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所，D正確。故選D。4、D【解析】

分析題圖：圖示為食物網(wǎng)，其中藻類、苔蘚和地衣屬于生產(chǎn)者，其余動物均為消費者，生態(tài)系統(tǒng)的成分還缺少分解者、非生物的物質(zhì)和能量?！驹斀狻緼、圖中的魚類、北極狐都屬于第三營養(yǎng)級，A錯誤；B、冰原和浮冰不同地段的物種組成的差異體現(xiàn)了群落的水平結(jié)構(gòu)，B錯誤；C、北極熊滯留在海洋中的時間延長，北極熊以海豹為食，短時間內(nèi)海豹數(shù)量減少，魚類數(shù)量增加，由于魚類受到食物短缺，天敵存在的原因，最終可使魚類的數(shù)量趨于穩(wěn)定，C錯誤；D、農(nóng)藥DDT隨污染的水流進入北極，由于生物富集作用，北極熊體內(nèi)該物質(zhì)的濃度最高，D正確。故選D。5、C【解析】

植物細胞的質(zhì)壁分離：當(dāng)細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細胞就會通過滲透作用而失水，細胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進入到溶液中，使細胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細胞壁的收縮性大，當(dāng)細胞不斷失水時，原生質(zhì)層就會與細胞壁分離。質(zhì)壁分離復(fù)原的原理：當(dāng)細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時，細胞就會通過滲透作用而吸水，外界溶液中的水分就通過原生質(zhì)層進入到細胞液中，整個原生質(zhì)層就會慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài)，緊貼細胞壁，使植物細胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原?！驹斀狻克钟扇芤簼舛鹊偷牧飨蛉芤簼舛雀叩?，缺水而萎蔫是細胞失水的表現(xiàn)，所以濃度高低依次是細胞間隙大于細胞質(zhì)基質(zhì)大于細胞液。故選C?！军c睛】本題主要考查對細胞的吸水和失水等考點的理解。6、D【解析】

利用PCR技術(shù)將DNA分子中的A1片段進行擴增，當(dāng)引物與母鏈通過堿基互補配對結(jié)合后，子鏈延伸的方向總是從5′端到3′端，據(jù)此依題意和圖示分析可知，A、B、C均錯誤，D正確。7、D【解析】

中心法則的含義：過程模板原料堿基互補產(chǎn)物實例DNA復(fù)制

（DNA→DNA）DNA兩條鏈含A、T、G、C的四種脫氧核苷酸A-T

G-CDNA絕大多數(shù)生物DNA轉(zhuǎn)錄（DNA→RNA）DNA

一條鏈含A、U、G、C的四種核糖核苷酸A-U

T-A

G-CRNA絕大多數(shù)生物RNA復(fù)制

（RNA→RNA）RNA含A、U、G、C的四種核糖核苷酸A-U

G-CRNA以RNA為遺傳物質(zhì)的生物，如煙草花葉病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄

（RNA→DNA）RNA含A、T、G、C的四種脫氧核苷酸A-T

U-A

G-C

DNA某些致癌病毒、艾滋病病毒、SARS病毒翻譯（RNA→多肽）mRNA20種氨基酸A-U

G-C多肽所有生物【詳解】A、DNA和mRNA的合成均需要模板，前者的模板可以是DNA或RNA，后者的模板是DNA，A錯誤；B、mRNA和血紅蛋白的合成均需要模板，前者的模板是DNA，后者的模板是mRNA，B錯誤；C、胃蛋白酶和胃蛋白酶基因的合成均需要模板，前者的模板是mRNA，后者的模板主要是DNA，C錯誤；D、ATP和NADPH的合成均不需要模板，D正確。故選D?！军c睛】本題考查中心法則及其發(fā)展，要求考生識記中心法則的主要內(nèi)容及后人對其進行的補充和完善，能根據(jù)題干要求準確判斷各選項。8、C【解析】

根據(jù)題意，該細菌含有集光綠色體，每個集光綠色體含有大量葉綠素，故該細菌可進行光合作用，但細菌屬于原核生物，無細胞核等結(jié)構(gòu)?！驹斀狻緼、細菌屬于原核生物，原核細胞沒有細胞核，A錯誤；B、細菌屬于原核生物，無線粒體，B錯誤；C、據(jù)題意可知，該細菌含葉綠素，能進行光合作用，屬于自養(yǎng)細菌，故細菌不一定都是分解者，也可以是生產(chǎn)者，C正確；D、細菌沒有葉綠體，之所以能進行光合作用，是因為細胞中含有葉綠素，D錯誤。故選C。二、非選擇題9、①⑥⑧⑨⑩核糖體③⑨（④）①⑤⑥⑩疏水性②小窩蛋白中間區(qū)段與膽固醇的結(jié)合位點在肽段1中空間【解析】

分析圖1可知：①~⑩分別是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、細胞質(zhì)基質(zhì)、核仁、染色質(zhì)、核糖體、線粒體、中心體、細胞膜、核膜和高爾基體。分析圖2可知，小窩是細胞膜的一部分，屬于生物膜，生物膜的主要成分是蛋白質(zhì)和脂質(zhì)，磷脂雙分子層構(gòu)成了膜的基本骨架，由于磷脂分子和大多數(shù)蛋白質(zhì)分子是可以運動的，因此生物膜的結(jié)構(gòu)特點是具有一定的流動性。分析圖3可知，肽段1+膽固醇曲線與肽段1比，熒光強度明顯降低，而肽段2+膽固醇曲線與肽段2比，熒光強度變化不明顯，由此結(jié)果可知小窩蛋白中間區(qū)段與膽固醇的結(jié)合位點在肽段1中?！驹斀狻浚?）據(jù)上分析可知，生物膜系統(tǒng)包括細胞膜、細胞器膜、核膜，故圖1所示結(jié)構(gòu)中，參與生物膜系統(tǒng)構(gòu)成的有①⑥⑧⑨⑩，從化學(xué)成分角度分析，新型冠狀病毒由RNA和蛋白質(zhì)組成，與圖1中核糖體的化學(xué)組成最相似。③核仁、⑨核膜會在有絲分裂前期消失，末期重建。（2）由題圖可知，小窩是細胞膜向內(nèi)凹陷形成的，細胞膜的主要組成成分是蛋白質(zhì)和脂質(zhì)；小窩蛋白合成的場所是⑤核糖體，在核糖體上氨基酸脫水縮合形成肽鏈，肽鏈依次進入①內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和⑩高爾基體進行加工，由囊泡運輸?shù)郊毎?，稱為細胞膜的上的小窩蛋白；該過程還需要⑥線粒體提供能量。小窩分為三段，中間由疏水的氨基酸殘基組成，其余兩段位于②細胞質(zhì)基質(zhì)中。（3）由題圖分析可知，肽段1與加入膽固醇后，熒光強度明顯降低，肽段2加入膽固醇后熒光強度基本不變，又知膽固醇與這些氨基酸結(jié)合，會使熒光強度降低，因小窩蛋白中間區(qū)段與膽固醇的結(jié)合位點在肽段1中。（4）膽固醇參與動物細胞膜的組成成分，對于維持細胞膜蛋白結(jié)構(gòu)穩(wěn)定具有一定作用，小窩結(jié)合的膽固醇過少，小窩蛋白的空間結(jié)構(gòu)改變，小窩會變扁平，影響細胞的信息傳遞功能?！军c睛】本題考查動物細胞的亞顯微結(jié)構(gòu)及生物膜的組成成分及流動鑲嵌模型、生物膜的結(jié)構(gòu)特點的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識圖能力和判斷能力，運用所學(xué)知識綜合分析問題和解決問題的能力。10、生產(chǎn)者（浮游植物和其他水生植物）固定的太陽能和人工輸入的有機物（飼料）食物和棲息空間捕食和競爭先快速增加，然后減少，最后穩(wěn)定3365水體中無機氮含量太低，已經(jīng)成為浮游植物光能利用率提高的限制因子池塘生態(tài)系統(tǒng)生物種類較少，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)比較簡單【解析】

圖示分析：圖中食物網(wǎng)由三條食物鏈，分別是浮游植物→B→A；其他水生植物→C→A；其他水生植物→A。1、生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)包括生態(tài)系統(tǒng)的組成成分和營養(yǎng)結(jié)構(gòu)，組成成分又包括非生物的物質(zhì)和能量，生產(chǎn)者、消費者和分解者，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)就是指食物鏈和食物網(wǎng)。生產(chǎn)者主要指綠色植物和化能合成作用的生物，消費者主要指動物，分解者指營腐生生活的微生物和動物。

2、生態(tài)系統(tǒng)的功能包括能量流動、物質(zhì)循環(huán)和信息傳遞，三者缺一不可；物質(zhì)循環(huán)是生態(tài)系統(tǒng)的基礎(chǔ)，能量流動是生態(tài)系統(tǒng)的動力，信息傳遞則決定著能量流動和物質(zhì)循環(huán)的方向和狀態(tài)；信息傳遞是雙向的，能量流動是單向的，物質(zhì)循環(huán)具有全球性?！驹斀狻浚╨）該魚塘生態(tài)系統(tǒng)屬于人工生態(tài)系統(tǒng)，故流經(jīng)該魚塘生態(tài)系統(tǒng)的能量來自生產(chǎn)者（浮游植物和其他水生植物）固定的太陽能和人工輸入的有機物（飼料）。影響動物垂直分層的主要因素是食物和棲息空間。（2）小龍蝦屬于雜食性動物，即可取食水生植物，也對魚塘中的B進行捕食，因而小龍蝦與B的種間關(guān)系是捕食和競爭。在小龍蝦入侵該魚塘后，如果放棄對該魚塘的管理，小龍蝦的種群數(shù)量將出現(xiàn)的變化是先快速增加，然后減少，最后穩(wěn)定，符合S型增長規(guī)律。

（3）A同化129kJ的能量，1/3來自浮游植物→B→A；1/3來自其他水生植物→C→A；1/3來自其他水生植物→A。能量傳遞效率為20%，則共需浮游植物和其他水生植物同化的能量為129×1/3÷20%+129×1/3÷20%÷20%+129×1/3÷20%÷20%=3365kJ。（4）研究發(fā)現(xiàn)，魚塘浮游植物對光能利用率較低，但對魚塘水體施加氮肥后，其對光能利用率明顯提高，這說明水體中無機氮含量太低，已經(jīng)成為浮游植物光能利用率提高的限制因子。（5）由于池塘生態(tài)系統(tǒng)生物種類較少，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)比較簡單，所以該池塘生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性低于自然生態(tài)系統(tǒng)?！军c睛】此題主要考查的是生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能，意在考查學(xué)生對基礎(chǔ)知識的理解和掌握程度，難度不大。11、從基因文庫中獲取人工合成目的基因無表達所需的啟動子目的基因無復(fù)制原點（目的基因不能在受體細胞中穩(wěn)定存在）便于目的蛋白的分離和純化甲醇酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接【解析】

基因工程是狹義的遺傳工程，基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因（即目的基因）在宿主細胞中穩(wěn)定高效地表達。為了實現(xiàn)基因工程的目標(biāo)，通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細胞等基本要素，并按照一定的程序進行操作，它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成，重組DNA導(dǎo)入受體細胞也稱（宿主）細胞、篩選含有目的基因的受體細胞和目的基因的表達等幾個方面?；虮磉_載體的構(gòu)建（即目的基因與運載體結(jié)合）是實施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其構(gòu)建目的是使目的基因能在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用?！驹斀狻浚?）獲取目的基因是實施基因工程的第一步，獲取目的基因的方法有從基因文庫中獲?。康幕蛐蛄形粗?、人工合成（目的基因序列已知）。（2）單獨的目的基因容易丟失，且目的基因的表達需要啟動子和終止子，目的基因的復(fù)制需要復(fù)制原點，因此要使膠原蛋白基因在甲醇薛母菌中表達，需要先構(gòu)建基因表達載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細胞。（3）甲醇酵母菌可高效表達外源蛋白質(zhì)并分泌到細胞外，但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少，這樣分泌到細胞外的蛋白主要是我們需要的目的蛋白，這一特點的優(yōu)點在于便于目的蛋白的分離和純化。甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)與人的幾乎完全相同，從細胞結(jié)構(gòu)的角度