高中生物蘇教版選擇性必修3生物技術(shù)與工程第一章第二節(jié)第2課時微生物分離純化和培養(yǎng)的無菌技術(shù)（80張）

第2課時微生物分離、純化和

培養(yǎng)的無菌技術(shù)1.概述平板劃線法分離和純化微生物的過程。2.概述稀釋涂布平板法分離和純化微生物的過程。3.進(jìn)行土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計數(shù)。學(xué)習(xí)目標(biāo)1.科學(xué)思維：能通過平板劃線法和稀釋涂布平板法的操

作，掌握微生物分離和純化的基本方法。2.科學(xué)探究：學(xué)會配制選擇培養(yǎng)基，以分離出能分解尿

素的細(xì)菌，并對實驗結(jié)果進(jìn)行分析和評價。素養(yǎng)要求內(nèi)容索引網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建課時對點練一、平板劃線法分離和純化微生物二、稀釋涂布平板法分離和純化微生物一、平板劃線法分離和純化微生物1.平板劃線法(1)概念：是指把含有多種微生物的

樣品，通過在特定的瓊脂平板表面

，從而獲得

的方法。(2)具體做法：將微生物樣品在瓊脂平板表面多次做“

”的稀釋劃線，經(jīng)過這樣的操作可得到較多獨立分布的

微生物。教材梳理預(yù)習(xí)新知

夯實基礎(chǔ)雜菌劃線稀釋單個菌落由點到線單個(3)操作步驟皿底第1第2過火滅菌由點到線倒置菌落2.通過平板劃線法獲得純化的酵母菌菌落(1)酵母菌①酵母菌是

真菌，可以進(jìn)行

生殖，也可以進(jìn)行

生殖；②培養(yǎng)的最適pH為

，最適生長溫度為

；③可以用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)，也可以用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，但要獲得純化的酵母菌菌落，則需要通過

培養(yǎng)基培養(yǎng)。單細(xì)胞出芽孢子4.5～5.028～30℃固體(2)實驗?zāi)康膰L試通過平板劃線法獲得純化的酵母菌菌落。(3)實驗原理①

培養(yǎng)基能滿足酵母菌生長、繁殖的營養(yǎng)需要；②

是實驗室中進(jìn)行微生物分離和純化的常用方法之一。(4)實驗器材和試劑酵母菌樣本(菌種)；接種環(huán)、酒精燈、恒溫培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌鍋；馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。馬鈴薯葡萄糖瓊脂平板劃線法(5)實驗步驟高壓蒸汽滅菌鍋50℃滅菌倒置恒溫箱(6)結(jié)果與分析①酵母菌被純化的標(biāo)準(zhǔn)：培養(yǎng)24h后，在劃線的

出現(xiàn)

的單個菌落。②純化失敗的原因a.接種環(huán)滅菌后未

直接在斜面上挑取菌體，菌體可能因為接觸高溫接種環(huán)而

。b.第一次劃線前挑取的菌體

，則也有可能無法獲得由一個酵母菌形成的單個菌落。末端不連續(xù)冷卻死亡過多(1)倒平板后，待平板冷凝之后需將其倒置(

)(2)若皿蓋和皿底之間濺上培養(yǎng)基，這個培養(yǎng)基不可再用(

)(3)平板劃線法接種時，每一次劃線前都要挑取菌體(

)(4)培養(yǎng)微生物的溫度因菌種不同而稍有差異(

)判斷正誤√√×√核心探討1.平板劃線法接種菌種時，哪些操作可防止雜菌污染？突破重難強化素養(yǎng)提示(1)接種前將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒。(2)劃線操作在酒精燈火焰旁進(jìn)行。(3)接種環(huán)挑取菌體前后，要將試管口通過火焰。(4)劃線時將培養(yǎng)皿的皿蓋打開一條縫隙，用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃線，劃線后及時蓋上皿蓋。2.在瓊脂平板表面多次做“由點到線”的稀釋劃線的目的是什么？提示這樣做可以得到較多獨立分布的單個微生物增殖而成的菌落。3.接種操作完成后，需將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，此時倒置的目的是什么？提示防止水分過快揮發(fā)，防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。4.若在培養(yǎng)基上觀察到不同形態(tài)的菌落，原因是什么？提示原因可能是菌種不純，混入其他雜菌，或在實驗操作過程中被雜菌污染。核心歸納1.配制培養(yǎng)基的注意事項(1)如果需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，應(yīng)該在定容完成后，滅菌之前進(jìn)行操作。(2)培養(yǎng)基滅菌后要冷卻到50℃左右時開始倒平板。其原因是瓊脂是一種多糖，在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，倒平板時高于50℃會燙手，低于50℃時，若不及時操作，瓊脂會凝固。(3)倒平板時，要使錐形瓶的瓶口迅速通過火焰2～3次。通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。(4)平板冷卻凝固后，要將平板倒置。因為平板凝固后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，又可避免培養(yǎng)基中的水分過快蒸發(fā)。(5)在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，那么這個平板不能用來培養(yǎng)微生物，因為空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。2.平板劃線操作中三種灼燒的目的不同項目目的挑取菌體前灼燒避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染菌種每次劃線前灼燒殺死上一次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時接種環(huán)上的菌種直接來源于上一次劃線的末端劃線操作結(jié)束后灼燒及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免菌種污染環(huán)境和感染操作者3.實驗結(jié)果的分析(1)培養(yǎng)未接種的培養(yǎng)基的目的是檢查培養(yǎng)基制備是否合格。未接種的培養(yǎng)基表面若有菌落生長，則說明培養(yǎng)基被污染，應(yīng)該重新制備；若無菌落生長，則說明未被污染。(2)在接種酵母菌的培養(yǎng)基上可觀察到獨立的菌落，這些菌落在顏色、形狀和大小上相似，酵母菌菌落一般表面光滑，多呈乳白色。(3)若在培養(yǎng)基中觀察到不同形態(tài)的菌落，原因可能是菌液不純，混入其他雜菌，或在實驗操作過程中被雜菌污染。典題應(yīng)用1.下列關(guān)于倒平板的敘述，錯誤的是A.待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時倒平板B.倒平板整個過程應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行C.完全打開培養(yǎng)皿皿蓋，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立

即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋D.為避免水滴滴入培養(yǎng)基，平板應(yīng)倒過來放置及時反饋知識落實√解析C項應(yīng)是用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于錐形瓶瓶口的縫隙，而不是完全打開皿蓋，目的是防止雜菌污染。2.(2021·江蘇蘇州月考)微生物接種的方法很多，平板劃線法是常用的一種。如圖是平板劃線示意圖，劃線的順序為①②③④。下列相關(guān)敘述錯誤的是A.劃線操作時，將挑有菌體的接種環(huán)插入培養(yǎng)基B.平板劃線后培養(yǎng)微生物時要倒置培養(yǎng)C.不能將第④次的劃線與第①次的劃線相連D.在第②～④次劃線前都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌√劃線時要避免最后一次的劃線與第一次的劃線相連，如果連在一起則有可能影響單個菌落的分離效果，C正確；在第②～④次劃線前都要對接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，保證每次劃線的菌種都來自上一次劃線的末端，D正確。解析劃線時不能將接種環(huán)插入培養(yǎng)基，而是在培養(yǎng)基表面劃線，A錯誤；用平板培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物時，為防止水蒸氣凝集滴入培養(yǎng)基造成干擾或污染，應(yīng)將平板倒置培養(yǎng)，B正確；二、稀釋涂布平板法分離和純化微生物1.稀釋涂布平板法(1)具體做法：將待分離的材料做一系列的

，再取一定量的某一稀釋度的菌液

，然后用無菌的

將菌液均勻地涂布在整個平板表面，使其中的微生物

分散，培養(yǎng)后在平板培養(yǎng)基表面形成多個單菌落。(2)應(yīng)用：既可用于菌種的

，也可以用于微生物的

。(3)混合平板法：將稀釋的少量菌懸液與

左右的培養(yǎng)基混合均勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中，再將培養(yǎng)皿置于合適溫度下培養(yǎng)，這樣在培養(yǎng)基表面和內(nèi)部均可長出

。教材梳理預(yù)習(xí)新知

夯實基礎(chǔ)梯度稀釋涂布平板涂布器充分分離和純化計數(shù)50℃單個菌落(4)平板劃線法的缺點是不能

，而

則能用于微生物的計數(shù)。(5)計數(shù)依據(jù)：如果經(jīng)稀釋涂布平板法培養(yǎng)出的都是

增殖形成的菌落，那么統(tǒng)計這些

的數(shù)目，即可計算出單位體積樣品中的微生物數(shù)量。計數(shù)稀釋涂布平板法單個細(xì)胞菌落2.分離土壤中分解尿素的細(xì)菌并進(jìn)行計數(shù)(1)實驗?zāi)康蘑賹W(xué)會配制選擇培養(yǎng)基，以分離出能分解尿素的細(xì)菌。②學(xué)會采用

分離和培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌，并進(jìn)行計數(shù)。(2)實驗原理①利用

培養(yǎng)基可以篩選和分離某種微生物。②在

的條件下，于固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)該微生物，形成

菌落。單個菌落即為

，通過對菌落數(shù)量的統(tǒng)計，可以計算出樣品中的含菌數(shù)。稀釋涂布平板法選擇高度稀釋單個純化培養(yǎng)物(3)實驗器材和試劑①土壤樣品。②滅菌處理過的各種工具。③配制以

為氮源的1000mL選擇培養(yǎng)基的試劑以及調(diào)節(jié)pH的相關(guān)試劑。尿素(4)實驗步驟3~5無菌水氮源無菌水污染最低3倒置2430~300稀釋體積(5)結(jié)果與分析：菌落數(shù)目在30～300的一組平板上一般可以獲得單個分解尿素的細(xì)菌菌落。(1)稀釋涂布平板法能分離細(xì)菌，也能計數(shù)(

)(2)測定不同微生物數(shù)量時，接種的土壤懸液的稀釋度相同(

)(3)采用稀釋涂布平板法培養(yǎng)和計算得到的微生物的數(shù)量一般比稀釋液中實際微生物的數(shù)量要少(

)判斷正誤√×√核心探討甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)。在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計結(jié)果。1.甲同學(xué)在該濃度下涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)為230，該同學(xué)的統(tǒng)計結(jié)果

(填“可靠”或“不可靠”)，若不可靠，應(yīng)如何改進(jìn)？突破重難強化素養(yǎng)提示為增加實驗的說服力與準(zhǔn)確性，應(yīng)設(shè)置重復(fù)實驗，在同一稀釋度下至少涂布3個平板，統(tǒng)計結(jié)果后計算平均值。不可靠2.乙同學(xué)在該濃度下涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為21、212、256，該同學(xué)將21舍去，然后取平均值。該同學(xué)對實驗結(jié)果的處理

(填“合理”或“不合理”)。微生物計數(shù)時，如果實驗中出現(xiàn)重復(fù)實驗的結(jié)果差別很大的情況，應(yīng)

，找出差異的原因，而不能簡單地將結(jié)果舍棄后進(jìn)行計數(shù)。不合理分析實驗過程中可能的影響因素3.某同學(xué)在三種稀釋度下吸取0.1mL的菌液涂布平板，統(tǒng)計菌落數(shù)，得到以下的數(shù)據(jù)，試計算1g樣品的活菌數(shù)。平板菌落數(shù)稀釋度平板1平板2平板3104320360356105212234287106212318提示105的稀釋度下取0.1mL的菌液涂布的三個平板上的菌落數(shù)在30～300之間，計算其平均值為(212＋234＋287)/3≈244。進(jìn)一步可以換算出1g樣品中活菌數(shù)為244×105÷0.1＝2.44×108(個)。4.為什么統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低？提示當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。核心歸納1.分離尿素分解菌操作中的注意事項(1)在實驗操作中，每個步驟都要注意無菌操作，以防培養(yǎng)基被污染，影響實驗效果。(2)樣品稀釋液的最佳濃度為培養(yǎng)后每個平板上有30～300個菌落的濃度。(3)每一稀釋倍數(shù)的菌液都至少要涂布3個平板，作為重復(fù)實驗，求其平均值，若其中有菌落數(shù)與其他平板差別很大的，則需要重新實驗。2.試比較兩種分離和純化方法項目操作特點結(jié)果稀釋涂布平板法取一定稀釋度的樣品涂布平板↓用無菌玻璃涂布器將樣品涂布均勻先制作平板后加入菌液細(xì)菌菌落通常僅在平板表面生長混合平板法取稀釋的少量菌懸液與50℃左右的培養(yǎng)基混合均勻↓將與樣品混合后的培養(yǎng)基倒入無菌培養(yǎng)皿中菌液與培養(yǎng)基混合，共同倒平板細(xì)菌菌落出現(xiàn)在平板表面和內(nèi)部典題應(yīng)用3.用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，其中正確的是A.涂布了1個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是230B.涂布了2個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是215和260，取平均值238C.涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是13、234和254，取平均值167D.涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為210、240和250，取平均值233及時反饋知識落實√解析A、B項中只涂布了1個和2個平板，所以A、B錯誤；C項雖涂布了3個平板，但是，其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠(yuǎn)，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，數(shù)據(jù)重復(fù)性差，不能簡單地將3個平板的計數(shù)值用來求平均值，C錯誤；D項涂布了3個平板，并且數(shù)據(jù)接近，可重復(fù)性強，D正確。4.分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，對培養(yǎng)基的要求是①加尿素②不加尿素③加瓊脂④不加瓊脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸鹽⑧不加硝酸鹽A.①③⑤⑦

B.②④⑥⑧C.①③⑤⑧

D.①④⑥⑦√網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建課時對點練題組一平板劃線法分離和純化微生物1.(2021·江蘇鹽城市高二練習(xí))下列有關(guān)用平板劃線法接種的操作，錯誤的是A.將接種環(huán)放在火焰上灼燒B.用已冷卻的接種環(huán)挑取菌體C.用取菌體和劃線都要在火焰旁進(jìn)行D.接種環(huán)劃線要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連√12345678910對點訓(xùn)練11121314151617解析劃線時，不能將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連，D錯誤。182.(2021·河北邢臺期末)下列有關(guān)微生物的分離與培養(yǎng)的敘述，錯誤的是A.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B.倒置平板可防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落造成污染C.倒平板時將培養(yǎng)皿的蓋拿開，以便于將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿D.檢驗培養(yǎng)基是否被雜菌污染的最有效方法是將接種等體積無菌水的培

養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)√解析倒平板時用食指和拇指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于錐形瓶瓶口的縫隙，使其恰好能讓錐形瓶瓶口伸入，隨后倒入培養(yǎng)基，C錯誤。1234567891011121314151617183.微生物接種方法有很多，平板劃線法是最常用的一種。如圖是平板劃線示意圖，劃線的順序為①②③④。下列操作方法正確的是A.劃線操作時，如接種環(huán)不慎劃破培養(yǎng)基，可以繼續(xù)

正常操作B.對培養(yǎng)皿進(jìn)行編號或?qū)N進(jìn)行標(biāo)注時，應(yīng)使用記

號筆在皿底標(biāo)記C.可以將第④區(qū)域的劃線與第①區(qū)域的劃線相連D.在該操作過程中只需要灼燒接種環(huán)4次1234567891011121314151617√18解析劃線操作時，接種環(huán)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基，否則菌落不易分離，A項錯誤；培養(yǎng)時需要倒置培養(yǎng)，對培養(yǎng)皿進(jìn)行編號或?qū)N進(jìn)行標(biāo)注時，應(yīng)使用記號筆在皿底標(biāo)記，B項正確；1234567891011121314151617第④區(qū)域的劃線不能與第①區(qū)域的劃線相連，C項錯誤；接種前和接種后接種環(huán)均需要灼燒，在該操作過程中需要灼燒接種環(huán)5次，D項錯誤。184.下列有關(guān)倒平板操作錯誤的是A.將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上B.使打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰C.將培養(yǎng)皿打開，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌面上D.待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時進(jìn)行倒平板操作√1234567891011121314151617解析倒平板時，培養(yǎng)皿的蓋不能完全打開。185.下圖為實驗室培養(yǎng)和純化酵母菌過程中的部分操作步驟，下列說法錯誤的是1234567891011121314151617A.①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行B.步驟①中，待倒入的培養(yǎng)基冷卻后蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋C.步驟③中，每次劃線前后都需對接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理D.劃線接種結(jié)束后，將圖④平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)√18解析培養(yǎng)與純化酵母菌的過程需要在酒精燈的火焰旁進(jìn)行，故A項正確；步驟①中倒入培養(yǎng)基后應(yīng)立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，故B項錯誤；步驟③接種時，每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理，故C項正確；劃線接種結(jié)束后，將平板倒置后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)，防止冷凝水污染培養(yǎng)基，故D項正確。123456789101112131415161718題組二稀釋涂布平板法分離和純化微生物6.如圖是從土壤中篩選具有較強降解磷能力菌株過程中的一些操作。下列相關(guān)敘述錯誤的是A.倒平板后的培養(yǎng)皿需進(jìn)行滅菌B.培養(yǎng)時培養(yǎng)皿的放置應(yīng)如圖乙

中a所示C.在火焰旁操作，可以防止雜菌污染D.進(jìn)行菌落計數(shù)時，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板√123456789101112131415161718解析培養(yǎng)基滅菌后倒平板，倒平板后的培養(yǎng)皿不再進(jìn)行滅菌，A錯誤；等待平板冷卻凝固后，應(yīng)將平板倒過來放置，如圖a所示，B正確；操作時為避免雜菌污染，應(yīng)在火焰旁操作，C正確；進(jìn)行菌落計數(shù)時，應(yīng)選擇菌落數(shù)在30～300之間的平板進(jìn)行計數(shù)，D正確。1234567891011121314151617187.用平板劃線法或稀釋涂布平板法都可以純化大腸桿菌，二者的共同點有A.都需要使用接種環(huán)進(jìn)行接種B.接種后都需要進(jìn)行濕熱滅菌C.都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行接種D.都可以用來計數(shù)活菌數(shù)√123456789101112131415161718解析平板劃線法采用接種環(huán)進(jìn)行操作，而稀釋涂布平板法采用涂布器進(jìn)行操作，A錯誤；接種后不能再滅菌，B錯誤；接種時，要進(jìn)行無菌操作，需要在酒精燈火焰旁接種，避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基，C正確；稀釋涂布平板法可以用來進(jìn)行微生物的計數(shù)，而平板劃線法不能，D錯誤。1234567891011121314151617188.(2021·四川廣安月考)為了判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染和選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，需要設(shè)置的對照組的培養(yǎng)基分別是A.未接種的選擇培養(yǎng)基，未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基B.未接種的培養(yǎng)基，接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C.接種了的選擇培養(yǎng)基，接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D.接種了的培養(yǎng)基，未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基√123456789101112131415161718解析若要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染，可將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，一段時間后若有菌落產(chǎn)生，說明培養(yǎng)基被污染，若無菌落產(chǎn)生，說明培養(yǎng)基沒有被污染。要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，接種了的選擇培養(yǎng)基是實驗組，將等量的稀釋相同倍數(shù)的菌液接種到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，作為對照組，在相同的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，觀察比較對照組和實驗組中的菌落數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，綜上所述，B正確。1234567891011121314151617189.下列是關(guān)于測定土壤中細(xì)菌總數(shù)實驗操作的敘述，其中錯誤的是A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)濕熱滅菌后倒平板B.取質(zhì)量濃度為10－8g·mL－1、10－7g·mL－1、10－6g·mL－1的土壤懸液和

無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上C.將實驗組和對照組平板倒置，37℃溫度下培養(yǎng)1～2dD.確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進(jìn)行計數(shù)12345678910√111213141516171810.如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)”實驗中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析錯誤的是A.3號試管中樣品液的稀釋

倍數(shù)為104倍B.對4號試管中的稀釋液進(jìn)

行平板培養(yǎng)得到的菌落

平均數(shù)可能恰為5號試管的10倍C.5號試管的結(jié)果表明每克土壤樣品中的活菌數(shù)為1.7×108D.該實驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要低12345678910√11121314151617181234567891011121314151617解析5號試管的結(jié)果表明每克土壤樣品中細(xì)菌數(shù)為(168＋175＋167)÷3×106÷0.1＝1.7×109，C錯誤；用這種計數(shù)方法得到的結(jié)果往往比活菌的實際數(shù)目低，因為有可能多個細(xì)菌形成一個菌落，D正確。18選擇題11～12題為單選題，13～16題為多選題。11.(2021·遼寧沈陽鐵路實驗中學(xué)期中)在分離、純化酵母菌實驗中，劃線接種(甲)、培養(yǎng)結(jié)果(乙)如圖所示，且甲、乙的對應(yīng)位置不變。下列有關(guān)敘述錯誤的是A.配制培養(yǎng)基時需進(jìn)行濕熱滅菌B.甲中a區(qū)域為劃線的起始位置C.連續(xù)劃線的目的是獲得單個細(xì)菌形成的菌落D.圖示接種過程中接種環(huán)灼燒了5次12345678910√11121314151617綜合強化18連續(xù)劃線的目的是獲得單個細(xì)菌形成的菌落，C正確；由于每次使用接種環(huán)前后都要灼燒滅菌，圖示甲中共有4次劃線接種，接種過程中接種環(huán)灼燒了5次，D正確。1234567891011121314151617解析為了能徹底滅菌，配制的培養(yǎng)基需進(jìn)行濕熱滅菌，A正確；起始劃線的區(qū)域長出的菌落多且密，甲中d區(qū)域為劃線的起始位置，a區(qū)域為劃線的結(jié)束位置，B錯誤；1812.下圖表示從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程。下列與該實驗相關(guān)的敘述中不正確的是A.實驗中所用的培養(yǎng)基①②

③④均屬于選擇培養(yǎng)基B.圖中Ⅰ、Ⅱ過程實現(xiàn)了對

目標(biāo)微生物的稀釋C.統(tǒng)計⑤處培養(yǎng)基中的菌落

數(shù)并不一定代表接種到④上的活菌數(shù)D.在⑤處培養(yǎng)基上形成菌落的微生物同化作用類型為異養(yǎng)型1234567891011121314151617√18解析該實驗的目的是從土壤中分離能降解對羥基苯甲酸的微生物，所以使用的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，A項正確；1234567891011121314151617圖中Ⅰ、Ⅱ過程為選擇培養(yǎng)，目的是增大所分離的微生物的濃度，B項錯誤；18⑤處的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，原因是當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，C項正確；所分離的微生物利用現(xiàn)成的有機物生長繁殖，所以該微生物的同化作用類型為異養(yǎng)型，D項正確。12345678910111213141516171813.(2021·南京市第十三中學(xué)高二期末)硝化細(xì)菌可將氨或銨鹽氧化為易被植物吸收的硝酸鹽，釋放的能量可用于將二氧化碳和水轉(zhuǎn)化成有機物。如圖為從土壤中分離硝化細(xì)菌菌株的過程示意圖。下列有關(guān)說法錯誤的是A.制作該固體培養(yǎng)基時應(yīng)先滅

菌再調(diào)pHB.Ⅰ號培養(yǎng)基在功能上屬于選擇培養(yǎng)基C.要篩選硝化細(xì)菌，Ⅰ號培養(yǎng)基的成分應(yīng)不含碳源、氮源D.接種后的Ⅱ號培養(yǎng)基在恒溫箱中通常需要倒置培養(yǎng)12345678910√11121314151617√18解析為了防止雜菌污染，配制培養(yǎng)基時，應(yīng)該先調(diào)節(jié)pH，然后滅菌，A錯誤；Ⅰ號培養(yǎng)基在功能上屬于選擇培養(yǎng)基，可通過選擇培養(yǎng)基增加該菌的濃度，B正確；硝化細(xì)菌可將氨或銨鹽氧化為易被植物吸收的硝酸鹽，該培養(yǎng)基應(yīng)加入氮源，硝化細(xì)菌利用氧化銨鹽獲得化學(xué)能合成有機物，C錯誤；操作完后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫箱中培養(yǎng)，D正確。12345678910111213141516171814.下列關(guān)于選擇培養(yǎng)基的敘述，正確的是A.選擇培養(yǎng)基可允許特定種類的微生物在其上生長B.制備選擇培養(yǎng)基時，應(yīng)根據(jù)所選微生物的特點確定培養(yǎng)基的配方C.篩選能分解尿素的細(xì)菌時，應(yīng)以尿素作為唯一氮源D.與普通培養(yǎng)基相比，選擇培養(yǎng)基上生長的微生物的數(shù)量一般較多1234567891011121314151617√解析普通培養(yǎng)基可滿足多數(shù)微生物的生長需求，而選擇培養(yǎng)基上只能生長特定種類的微生物，因此與普通培養(yǎng)基相比，選擇培養(yǎng)基上生長的微生物的數(shù)量一般較少?！獭?815.圖甲所示是稀釋涂布平板法中的部分操作，圖乙所示是平板劃線法的操作結(jié)果。下列相關(guān)敘述正確的是A.圖甲中涂布前要將涂布器灼燒，

冷卻后才能涂布菌液B.對于濃度較高的菌液，若圖甲

中的最高稀釋倍數(shù)僅為102，則

所得到的菌落不一定是由單一的細(xì)胞繁殖而成的C.圖乙所示培養(yǎng)皿中每個劃線區(qū)域都可得到符合要求的菌落D.圖乙中連續(xù)劃線的起點是上一次劃線的末端(除第一次劃線外)12345678910√11121314151617√√18解析平板劃線法中多次劃線的目的是降低菌種濃度，經(jīng)過連續(xù)劃線才有可能得到由單一的細(xì)胞繁殖而成的菌落，這種菌落才符合要求，C錯誤。12345678910111213141516171816.(2020·四川綿陽期末)某同學(xué)將1mL土壤樣液稀釋100倍，在3個平板上用稀釋涂布平板法分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為56、57和58。下列敘述正確的是A.可得出土壤樣液中活菌大約為5.7×108個/LB.此方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比實際的活菌數(shù)目低C.一般選擇菌落數(shù)為30～300的平板進(jìn)行計數(shù)D.也可用平板劃線法進(jìn)行計數(shù)1234567891011121314151617√√18解析將1mL樣品稀釋100倍，在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為56、57和58，據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為(56＋57＋58)÷3×1000×100÷0.1＝5.7×107，A錯誤；由于兩個或多個細(xì)胞連在一起時，在平板上觀察到的只是一個菌落，所以統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比實際的活菌數(shù)目低，B正確；為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為30～300的平板進(jìn)行計數(shù)，C正確；平板劃線法不能用于計數(shù)，D錯誤。12345678910111213141516171817.(2021·江蘇南通模擬)牛奶是適合微生物生長的良好培養(yǎng)基。牛奶在飲用前都要用巴氏消毒法消毒，以殺死有害微生物。某小組為檢測自制酸奶是否被雜菌污染，進(jìn)行了如圖所示操作。請回答下列問題：1234567891011121314151617(1)取最終的牛奶稀釋液0.1mL在培養(yǎng)基上進(jìn)行涂布，應(yīng)選擇的工具是圖2中的____。B18解析圖1表示的是稀釋涂布平板法，可以用來分離菌種和對菌種進(jìn)行計數(shù)；圖2中A為接種環(huán)，B為涂布器，C為滴管，D為接種針。將牛奶稀釋液在培養(yǎng)基上進(jìn)行涂布的方法是稀釋涂布平板法，所用的接種工具是涂布器，即圖2中的B。123456789101112131415161718(2)圖1所示方法為稀釋涂布平板法，理想情況下，培養(yǎng)一段時間后可在培養(yǎng)基表面形成菌落。若用該方法培養(yǎng)設(shè)置了3個培養(yǎng)皿，菌落數(shù)分別為65、63、64，則可以推測每毫升酸奶中所含細(xì)菌數(shù)為__________，運用這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往較實際值____(填“大”或“小”)，如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)_______________________的菌落，說明自制酸奶已被雜菌污染。12345678910111213141516176.4×107小(形狀、大小、顏色)不同181234567891011121314151617解析據(jù)圖分