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DB37/T2995—2017副豬嗜血桿菌熒光定量PCR檢測技術(shù)山東省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布IDB37/T2995—2017本標準由山東省畜牧業(yè)專業(yè)標準化技術(shù)委員會歸口。本標準主要起草單位：山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所。本標準主要起草人：吳家強、于江、郭立輝、張玉玉、杜以軍、李俊、陳蕾、陳智、孫文博、叢曉燕、時建立、王金寶。本標準為首次發(fā)布。1DB37/T2995—2017副豬嗜血桿菌熒光定量PCR檢測技術(shù)件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。4縮略語HPS:副豬嗜血桿菌(Haemophilusparasuis)5儀器與試劑5.3熒光定量PCR儀。5.6-20℃冰箱。2DB37/T2995—20175.14SYBRGreenI核酸染料(含酶)。5.15蛋白酶K(見附錄A.1)。5.1610%SDS液(見附錄A.2)。5.1770%乙醇(見附錄A.3)。6.1.3細菌培養(yǎng)物：37℃培養(yǎng)24h～48h的細菌培養(yǎng)6.3.5取上清于一新離心管中，加入2倍體積的無水乙醇，-20℃靜止20min,10000r/min離心153DB37/T2995—20177.1.2陽性對照Ct值<30,并出現(xiàn)特定擴增曲線，否則，此試驗視為無效。Ct值>35,表明樣品為陰性。4A.1蛋白酶K溶液(20蛋白酶K滅菌雙蒸水(資料性附錄)十二烷基硫酸鈉滅菌雙蒸水滅菌雙蒸水無水乙醇滅菌雙蒸水5DB37/T2995—2017(規(guī)范性附錄)表B.1熒光定量PCR反應(yīng)體系組分反應(yīng)體系引物P1引物P2滅菌水總量

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