總論藥物的雜質(zhì)分析培訓(xùn)課件

總論藥物的雜質(zhì)分析本章要求熟悉藥物雜質(zhì)及其來源和分類，雜質(zhì)檢查的依據(jù)和方法掌握藥物雜質(zhì)限量及其計算要求熟悉一般雜質(zhì)檢查的原理、方法和注意事項了解雜質(zhì)鑒定的方法9/18/20242總論藥物的雜質(zhì)分析評價藥品質(zhì)量的三種分析手段：鑒別（identification）檢查（testforpurity）含量測定（assay）——反映純度雜質(zhì)9/18/20243總論藥物的雜質(zhì)分析什么是雜質(zhì)？指任何影響藥品純度的物質(zhì)在藥物中存在但存在無治療作用

使藥物的外觀性狀、物理常數(shù)變化影響藥物穩(wěn)定性使藥物活性降低、毒副作用增加氯化物、硫酸鹽砷鹽、重金屬對氨基酚、游離肼第一節(jié)藥物中的雜質(zhì)與雜質(zhì)限量一、基本概念9/18/20244總論藥物的雜質(zhì)分析理化常數(shù)含量測定雜質(zhì)檢查外觀性狀藥物純度的綜合評定注意藥物純度與化學(xué)純度的區(qū)別藥物的純度——指藥物的純凈純度，反映了藥物質(zhì)量的優(yōu)劣，藥物中的雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素9/18/20245總論藥物的雜質(zhì)分析區(qū)分：藥物的純度——

化學(xué)試劑的純度——

只有兩個等級：合格或不合格有很多等級，如基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級純（GR）、分析純（AR）、化學(xué)純（CP）、色譜純、光譜純考慮雜質(zhì)對生理作用的影響考慮雜質(zhì)對化學(xué)變化的影響9/18/20246總論藥物的雜質(zhì)分析

事例：

消化道檢查：化學(xué)試劑BaSO4

代替

胃透視用BaSO4

死亡因素：游離鋇超過0.8-0.9g

藥用硫酸鋇必須嚴(yán)格控制游離鋇的限量79/18/20247總論藥物的雜質(zhì)分析二、雜質(zhì)的來源9/18/20248總論藥物的雜質(zhì)分析示例：注射用NaCl生產(chǎn)過程中引入的雜質(zhì)以工業(yè)用NaCl精制而成，其中含有Br-、I-、K+等示例：安乃近的生產(chǎn)可能引入的雜質(zhì)為中間體MAA、原料AA、副產(chǎn)物等9/18/20249總論藥物的雜質(zhì)分析示例：腎上腺素注射液(制劑生產(chǎn))抗氧劑——焦亞硫酸鈉穩(wěn)定劑——EDTA-2Na腎上腺素磺酸

生產(chǎn)過程中引入的雜質(zhì)腎上腺素SO32-9/18/202410總論藥物的雜質(zhì)分析示例：中藥中的重金屬

生產(chǎn)過程中引入的雜質(zhì)土壤環(huán)境9/18/202411總論藥物的雜質(zhì)分析（1）原料、反應(yīng)中間體及副產(chǎn)物

（2）試劑、溶劑、催化劑類（3）制劑生產(chǎn)過程中產(chǎn)生新的雜質(zhì)（4）金屬器皿、裝置、工具帶來的雜質(zhì)受外界條件影響發(fā)生水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶形轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等9/18/202412總論藥物的雜質(zhì)分析貯藏過程中引入的雜質(zhì)示例：氧化利血平——氧化產(chǎn)物無降壓作用麻醉乙醚——過氧化物有毒嚴(yán)格控制藥品的貯藏條件，是保證臨床用藥安全、有效的一個重要方面

示例：水解（阿司匹林）生產(chǎn)中反應(yīng)不完全水楊酸殘留

貯藏中水解產(chǎn)生水楊酸9/18/202413總論藥物的雜質(zhì)分析三、雜質(zhì)的種類與分類按來源分一般雜質(zhì)在自然界中分布較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過程中容易引入的雜質(zhì)。如酸、堿、水分、氯化物、硫酸鹽、重金屬、砷鹽等特殊雜質(zhì)在個別藥物的生產(chǎn)和貯藏過程中引入的雜質(zhì)。如阿司匹林中的游離水楊酸、甲硝唑中的2-甲基-5-硝基咪唑等。9/18/202414總論藥物的雜質(zhì)分析按毒性分信號雜質(zhì)本身一般無害，但其含量的多少可以反映出藥物的純度水平，稱其為“信號”雜質(zhì)。如氯化物、硫酸鹽等屬于信號雜質(zhì)。毒性雜質(zhì)對人體有毒害的雜質(zhì)。如重金屬、砷鹽、氰化物等應(yīng)嚴(yán)格加以控制，以保證用藥安全。9/18/202415總論藥物的雜質(zhì)分析有機(jī)雜質(zhì)殘留溶劑

無機(jī)雜質(zhì)

按化學(xué)類別和特性分類合成中未反應(yīng)完全的原料、中間體、副產(chǎn)物、降解產(chǎn)物等生產(chǎn)中使用的有機(jī)溶劑來源于生產(chǎn)過程，一般是已知的和確定的，直接影響藥物的穩(wěn)定性，反映生產(chǎn)工藝情況9/18/202416總論藥物的雜質(zhì)分析四、雜質(zhì)的限量定義藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量。限量檢查百分之幾或百萬分之幾（ppm）（在不影響療效和不產(chǎn)生毒副作用的前提下，允許雜質(zhì)在一定限度范圍內(nèi)存在）通常不要求準(zhǔn)確測定含量，檢查雜質(zhì)是否超過限量雜質(zhì)量≤雜質(zhì)限量＜雜質(zhì)量藥品合格藥品不合格9/18/202417總論藥物的雜質(zhì)分析9/18/202418總論藥物的雜質(zhì)分析對照法一定量的被檢雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，與一定量供試品溶液，在相同實驗條件下，比較反應(yīng)結(jié)果以確定雜質(zhì)的含量是否超過限量靈敏度法比較法加入一定量的試劑，在一定反應(yīng)條件下不得有正反應(yīng)出現(xiàn)，以判斷雜質(zhì)的含量是否超過限量測定特定待檢雜質(zhì)的參數(shù)與規(guī)定的限量比較，不得更大9/18/202419總論藥物的雜質(zhì)分析供試品供試液對照品對照液色斑比較色斑顏色比色渾濁比濁雜質(zhì)最大允許量是否稀釋對照法平行操作供試管對照管9/18/202420總論藥物的雜質(zhì)分析甲管乙管甲管乙管自上向下透視《藥品檢驗操作標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定：遵循平行操作原則（1）儀器的配對性（2）對照品與供試品的同步操作219/18/202421總論藥物的雜質(zhì)分析計算9/18/202422總論藥物的雜質(zhì)分析示例1茶苯海明中氯化物的檢查已知：求：L＝？解：是否正確？=0.04%9/18/202423總論藥物的雜質(zhì)分析示例2谷氨酸鈉中重金屬的檢查已知：S＝1.0g

ρ＝10μg/mlL＝10×10－6求：V＝？解：9/18/202424總論藥物的雜質(zhì)分析示例3腎上腺素中酮體的檢查解：已知：=435A=0.05求：L＝？9/18/202425總論藥物的雜質(zhì)分析計算中應(yīng)注意①單位一致②稀釋體積③ppm的表示方法9/18/202426總論藥物的雜質(zhì)分析第二節(jié)藥物中雜質(zhì)的檢查方法藥物中雜質(zhì)檢查的原理9/18/202427總論藥物的雜質(zhì)分析產(chǎn)生特征實驗現(xiàn)象薄層色譜高效液相色譜氣相色譜紫外光譜紅外光譜原子吸收光譜熱重分析觀察顏色嗅、味等9/18/202428總論藥物的雜質(zhì)分析一、化學(xué)法與試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色與試劑反應(yīng)產(chǎn)生沉淀與試劑反應(yīng)產(chǎn)生氣體雜質(zhì)比色法比濁法

氣體檢查法9/18/202429總論藥物的雜質(zhì)分析示例芐氨噻嗪中芳香第一胺的檢查分子結(jié)構(gòu)中無芳香第一胺基，不能發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)，而芳香第一胺雜質(zhì)可以發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生顏色，采用分光光度法檢查。芐氟噻嗪9/18/202430總論藥物的雜質(zhì)分析1mol/L鹽酸溶液4％亞硝酸鈉溶液10％氨基磺酸銨溶液2％二鹽酸萘基乙二胺溶液步驟518nm處測定，A≤0.119/18/202431總論藥物的雜質(zhì)分析在某一波長處雜質(zhì)有最大吸收，藥物無吸收。在此波長處測定樣品溶液的吸光度，通過控制吸光度值的大小來控制雜質(zhì)的量二、光譜方法藥物雜質(zhì)對光選擇吸收性質(zhì)的差異紫外吸收光譜法9/18/202432總論藥物的雜質(zhì)分析地蒽酚432nm無吸收二羥基蒽醌432nm有最大吸收規(guī)定0.01%地蒽酚氯仿溶液A432nm<0.12二羥基蒽醌地蒽酚示例

地蒽酚中二羥基蒽醌的檢查二羥基蒽醌地蒽酚9/18/202433總論藥物的雜質(zhì)分析示例

兩性霉素B中兩性霉素A的檢查兩性霉素A兩性霉素B

兩性霉素B305nm幾乎無吸收兩性霉素A305nm有最大吸收

ChP要求測定兩性霉素B供試液的吸光度A305nm<0.409/18/202434總論藥物的雜質(zhì)分析檢查藥物中無效或低效晶型。示例：甲苯咪唑中A晶型的檢查（C晶型有效晶型，A無效）紅外吸收光譜法A晶型C晶型640cm-1有強(qiáng)吸收

吸收很弱662cm-1吸收很弱

有強(qiáng)吸收9/18/202435總論藥物的雜質(zhì)分析662cm-1640cm-1803cm-1620cm-1基線：消除背景吸收D1D2對照品（含10％A晶型）

662cm-1640cm-1D2D1供試品D2’D1’<結(jié)果判斷9/18/202436總論藥物的雜質(zhì)分析三、色譜法（chromatography）藥物中的有機(jī)雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)往往和藥物相近，色譜法可以利用藥物與雜質(zhì)在色譜性質(zhì)的差異，能有效的將雜質(zhì)與藥物進(jìn)行分離和檢測。9/18/202437總論藥物的雜質(zhì)分析供試對照1.雜質(zhì)對照品法適用于已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對照品的情況TLC法（應(yīng)用廣泛）點樣→展開→晾干薄層板→檢視斑點9/18/202438總論藥物的雜質(zhì)分析示例枸櫞酸乙胺嗪中N-甲基哌嗪的檢查判斷結(jié)果：供試品溶液如顯與對照品相應(yīng)的雜質(zhì)斑點，其顏色與對照品溶液的主斑點比較，不得更深。供試品溶液：枸櫞酸乙胺嗪（50mg/ml）對照品溶液：N-甲基哌嗪對照品(50μg/ml)供試對照品9/18/202439總論藥物的雜質(zhì)分析2.供試品溶液自身稀釋對照法適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不能確定，或無雜質(zhì)對照品的情況。以供試液的稀釋液作為對照液，限于雜質(zhì)斑點的顏色與主成分斑點顏色相同或相近的情況下使用。高低濃度對比法9/18/202440總論藥物的雜質(zhì)分析示例

吡羅昔康中有關(guān)物質(zhì)的檢查供試品溶液：20mg/ml對照溶液：0.2mg/ml結(jié)果判斷：供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點，與對照液所顯的主斑點比較，不得更深。

稀釋供試對照液9/18/202441總論藥物的雜質(zhì)分析3.雜質(zhì)對照品法與供試品溶液自身稀釋對照法并用當(dāng)藥物中存在多個雜質(zhì)時，其已知雜質(zhì)有對照品時，采用雜質(zhì)對照品法檢查；共存的未知雜質(zhì)或沒有對照品的雜質(zhì)，可采用供試品溶液自身稀釋對照法檢查。9/18/202442總論藥物的雜質(zhì)分析判斷：供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點不得多于2個，與對照品溶液相同位置上所顯雜質(zhì)斑點顏色與對照品溶液主斑點比較，不得更深，另一雜質(zhì)斑點的顏色與對照液主斑點比較，不得更深。示例

鹽酸黃酮哌酯中有關(guān)物質(zhì)的檢查供試品溶液：20mg/ml對照溶液：

0.10mg/ml對照品溶液：3-甲基黃酮-8-羧酸0.10mg/ml稀釋供試對照品對照液9/18/202443總論藥物的雜質(zhì)分析4.對照藥物法當(dāng)無合適的雜質(zhì)對照品，或者是供試品顯示的雜質(zhì)斑點顏色與主成分斑點顏色有差異，難以判斷限量時，可用與供試品相同的藥物作為對照，此對照藥物中所含待檢雜質(zhì)需符合限量要求，且穩(wěn)定性好。9/18/202444總論藥物的雜質(zhì)分析1.外標(biāo)測定法HPLC法（應(yīng)用日益廣泛）適用于有雜質(zhì)對照品的情況采用HPLC法測定含量，同一條件下可進(jìn)行雜質(zhì)檢查9/18/202445總論藥物的雜質(zhì)分析示例卡托普利及其片劑中卡托普利二硫化物的檢查

供試品溶液：0.5mg/ml對照品溶液：卡托普利二硫化物對照品，5μg/ml結(jié)果判斷：以峰面積計算其含量，原料藥中的二硫化物不得超過1.0%9/18/202446總論藥物的雜質(zhì)分析2.加校正因子的主成分自身對照測定法消除雜質(zhì)與主成分的響應(yīng)可能不同所引起的測定誤差適用于已知雜質(zhì)的控制。需要雜質(zhì)對照品和藥物對照品建立內(nèi)標(biāo)法計算f，測定時以供試液稀釋液為對照，不用雜質(zhì)對照品藥物對照品的峰面積雜質(zhì)對照品的峰面積9/18/202447總論藥物的雜質(zhì)分析示例

紅霉素A中紅霉素B、C組分及有關(guān)物質(zhì)的檢查供試品溶液：4mg/ml對照溶液：0.2mg/ml稀釋

結(jié)果判斷：供試品溶液中各雜質(zhì)的峰面積分別乘以相應(yīng)的校正因子后，與對照溶液中主成分的峰面積比較。其他單個雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積9/18/202448總論藥物的雜質(zhì)分析3.不加校正因子的主成分自身對照法適用于沒有雜質(zhì)對照品的情況，以供試液的稀釋液作為對照液自身對照液供試品溶液A雜總=A1＋A2＋A39/18/202449總論藥物的雜質(zhì)分析供試品溶液：1mg/ml對照溶液：5μg/ml結(jié)果判斷：單個雜質(zhì)的峰面積不得大于對照溶液的主峰面積（0.5%），各雜質(zhì)的峰面積的和不得大于對照溶液的主峰面積的4倍（2.0%）示例甲氨蝶呤中有關(guān)物質(zhì)的檢查稀釋9/18/202450總論藥物的雜質(zhì)分析適用于粗略測量供試品中雜質(zhì)的含量。計算各雜質(zhì)峰面積及其總和占總峰面積（含藥物的峰面積，而不含溶劑峰面積）的百分率。該法一般不宜用于微量雜質(zhì)的檢查。4.面積歸一化法9/18/202451總論藥物的雜質(zhì)分析主要用于藥物中揮發(fā)性雜質(zhì)（殘留溶劑）的檢查。方法：方法同HPLC另外有標(biāo)準(zhǔn)溶液加入法雜質(zhì)對照品液+供試液外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法測定總量GC法9/18/202452總論藥物的雜質(zhì)分析1.原理對照法Cl-

＋Ag+AgCl（白色渾濁）稀硝酸2.方法SRS：供試品溶液R：雜質(zhì)對照品溶液五、藥物中雜質(zhì)檢查示例（一般雜質(zhì)）氯化物檢查操作要求：平行操作黑色背景比較濁度9/18/202453總論藥物的雜質(zhì)分析3.測定條件標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液：以50ml中含50~80μg的Cl為宜酸度以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜（所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉5～8ml）（1）加速AgCl↓形成，產(chǎn)生較好的白色乳濁如Ag2CO3↓、Ag3PO4↓和Ag2O↓（2）避免弱酸銀鹽的形成（3）避免氧化銀沉淀生成9/18/202454總論藥物的雜質(zhì)分析3.測定條件暗處放置5分鐘后比濁

因氯化銀見光易分解9/18/202455總論藥物的雜質(zhì)分析4.干擾的排除供試品若不澄清共試品若有色內(nèi)消色法供試品溶液供試品溶液AgNO3放置10min反復(fù)過濾澄清溶液AgNO3標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液水對照溶液暗處放置5min后比濁過濾AgNO39/18/202456總論藥物的雜質(zhì)分析補(bǔ)充：外消色法1、加合適的試劑使供試液褪色

KMnO7+乙醇→褪色2、向?qū)φ找杭悠渌麩o干擾的有色溶液使與供試液顏色一致稀焦糖溶液或標(biāo)準(zhǔn)比色液579/18/202457總論藥物的雜質(zhì)分析1.原理對照法2.方法SRS：供試品溶液R：雜質(zhì)對照品溶液硫酸鹽檢查基本等同于氯化物檢查SO42-

＋Ba2+BaSO4（白色渾濁）HCl消除弱酸鋇鹽沉淀的干擾9/18/202458總論藥物的雜質(zhì)分析1.原理對照法2.方法SRS：供試品溶液R：雜質(zhì)對照品溶液鐵鹽檢查操作要求：平行操作白色背景比較顏色Fe3+＋6SCN-[Fe(SCN)6]3-(紅色)HCl不要忘了還有Fe2+哦！9/18/202459總論藥物的雜質(zhì)分析3.測定條件標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液：[FeNH4(SO4)2·12H2O]以50ml中含10~50μg的Fe3+為宜酸度以50ml供試溶液中含稀鹽酸4ml為宜（以硫酸鐵銨配制，加入硫酸，防止鐵鹽水解）防止鐵鹽水解，避免弱酸鹽的干擾9/18/202460總論藥物的雜質(zhì)分析3.測定條件加入過硫酸銨B、防止光線使反應(yīng)產(chǎn)物硫氰酸鐵還原或分解褪色A、氧化Fe2+為Fe3+4.干擾的排除當(dāng)供試溶液管與標(biāo)準(zhǔn)溶液管色調(diào)不一致或紅色太淺可用正丁醇或異戊醇提取后，分取醇層比色9/18/202461總論藥物的雜質(zhì)分析1.什么是重金屬重金屬檢查在規(guī)定實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)，如銀、鉛、汞、銅、鎘、錫、銻、鉍等重金屬的毒性有毒砷、汞殘留阿膠的重金屬限量不得過30ppm黃連上清丸的重金屬限量不得過25ppm9/18/202462總論藥物的雜質(zhì)分析檢查時以鉛為代表ChP2010收載三種檢查方法第一法硫代乙酰胺法第二法熾灼后的硫代乙酰胺法第三法硫化鈉法2.方法9/18/202463總論藥物的雜質(zhì)分析1.原理CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2SH2S+Pb2+pH3.5PbS+2H+適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物，最常用的方法第一法硫代乙酰胺法2.方法

對照法SR操作要求：平行操作白色背景比較濁度9/18/202464總論藥物的雜質(zhì)分析應(yīng)用實例H2O至25mL

放置2’硫代乙酰胺2mL醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2mL供試對照水解條件、最佳濁度硝酸鉛供試對照葡萄糖0.1g標(biāo)準(zhǔn)鉛2mL9/18/202465總論藥物的雜質(zhì)分析增加第3支比色管：如該比色管中顯出的顏色淺于對照管，按第二法重新檢查操作要點強(qiáng)調(diào)供試對照比濁供試對照121212供試+對照33供試+對照39/18/202466總論藥物的雜質(zhì)分析供試品若有色：調(diào)節(jié)兩管顏色一致（外消色法）供試對照加入稀焦糖溶液3.干擾的排除9/18/202467總論藥物的雜質(zhì)分析H2SFe3+弱酸性S混濁，對比色有影響排除Fe3+Fe2+

Vc或鹽酸羥胺供試品若有微量Fe3+9/18/202468總論藥物的雜質(zhì)分析適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及難溶于水、稀酸及乙醇的有機(jī)藥物。第二法熾灼后的硫代乙酰胺法原理重金屬游離,再加鹽酸轉(zhuǎn)化為溶于水的氯化物，再按第一法檢查熾灼破壞基本等同于第一法9/18/202469總論藥物的雜質(zhì)分析

應(yīng)用實例

緩緩熾灼放冷H2SO4

0.5-1.0mL炭化加熱

HNO3

500-600℃H2SO4

除盡放冷完全灰化蒸干HCl2mL水15mL

中性按第一法檢查蒸干氨試液供試液黃連上清丸

對照液9/18/202470總論藥物的雜質(zhì)分析注意事項強(qiáng)調(diào)用配制供試液的試劑做空白試驗，消除硫酸、硝酸、鹽酸和氨試液等試劑可能夾帶的重金屬對測定的干擾灼燒樣品時，溫度必須控制在500～600℃加入硫酸和硝酸可促使有機(jī)物完全分解,且必須加熱揮盡硫酸和硝酸，否則影響測定9/18/202471總論藥物的雜質(zhì)分析第三法硫化鈉法適用于溶于堿性水溶液而難溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的藥物。稀酸1.原理2.方法

對照法SR9/18/202472總論藥物的雜質(zhì)分析第一法第二法第三法共同點限量檢查、對照法、比濁pH條件醋酸鹽緩沖液（3.5）NaOH顯色劑硫代乙酰胺硫化鈉特殊處理500-600℃熾灼適用范圍溶于水、稀酸和乙醇含芳環(huán)、雜環(huán)及不溶于水,稀酸和乙醇溶于堿不溶于酸9/18/202473總論藥物的雜質(zhì)分析ChPJPUSPBP古蔡氏法

Ag-DDC法

次磷酸法

各國藥典砷鹽檢查法比較砷鹽檢查法

★意義三價砷鹽毒性極強(qiáng)，多由藥物生產(chǎn)過程中所使用的無機(jī)溶劑引入?！吨袊幍洹芬?guī)定了砷鹽限量檢查項目，如阿膠中砷鹽含量不得過3ppm，黃連上清丸中砷鹽含量不得過2ppm。9/18/202474總論藥物的雜質(zhì)分析（一）古蔡氏法1.原理(黃色～棕色)有機(jī)破壞9/18/202475總論藥物的雜質(zhì)分析2.方法（平行操作）H2O至28ml

Zn2g放置

10′供試液對照液1HCl5ml2

KI5ml3SnCl25滴4Pb(Ac)2

棉花5HgBr2

試紙6

45′25～40℃7比較砷斑8立即觀察9/18/202476總論藥物的雜質(zhì)分析結(jié)果判斷樣品溶液標(biāo)準(zhǔn)砷溶液樣品砷斑標(biāo)準(zhǔn)砷斑醋酸鉛棉花

H2S↑

AsH3↑

還原反應(yīng)(25-40℃)溴化汞試紙

供試品砷斑顏色比標(biāo)準(zhǔn)砷斑顏色淺，則砷鹽限量檢查符合規(guī)定反之則砷鹽限量檢查不符合規(guī)定9/18/202477總論藥物的雜質(zhì)分析3.測定條件（1）標(biāo)準(zhǔn)溶液三氧化二砷

(臨用新配)1

gAs/ml√藥典規(guī)定用2ml制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑（2）KI-SnCl2試液78A.使As5+→As3+AsO43-＋2I-＋2H+AsO33-＋I(xiàn)2＋H2OAsO43-＋Sn2+＋2H+AsO33-＋Sn4+＋H2O9/18/202478總論藥物的雜質(zhì)分析（2）KI-SnCl2試液I2＋Sn2+2I-＋Sn4+4I-＋Zn2+[ZnI4]2-B.使I2褪色，有利于H3As的形成C.氯化亞錫在鋅粒表面形成Zn-Sn齊，起去極化的作用，有利于H2均勻連續(xù)發(fā)生D.抑制SbH3的生成，消除微量Sb干擾

9/18/202479總論藥物的雜質(zhì)分析（3）醋酸鉛棉花[Pb(Ac)2]消除鋅粒及供試品中少量硫化物的干擾（4）溴化汞試紙[Hg(Br)2]與砷化氫作用形成砷斑醋酸鉛棉花60mg裝管高度60～80mm809/18/202480總論藥物的雜質(zhì)分析測砷瓶測砷管Hg(Br)2試紙Pb(Ac)2棉花玻璃試管古蔡法Ag(DDC)反應(yīng)液Ag(DDC)法適用不含或含Sb小于100

g供試品

適用含Sb量小于500

g的供試品9/18/202481總論藥物的雜質(zhì)分析（二）Ag-DDC法直接比色或于510nm波長處測定吸收度1.原理(紅色膠態(tài))9/18/202482總論藥物的雜質(zhì)分析Sb干擾更嚴(yán)重（含銻藥物）例如：葡萄糖酸銻鈉SbH3+HgBr2SbH2(HgBr)+HBr（灰色）白田道夫(Betterdorff)法干擾：

2As3＋+3SnCl2+6HCl→2As↓+3SnCl4+6H＋

(棕褐色的膠態(tài)砷)干擾砷斑檢查9/18/202484總論藥物的雜質(zhì)分析酸堿滴定法pH法指示劑法酸堿性的差異酸堿度檢查法9/18/202485總論藥物的雜質(zhì)分析酸堿滴定法例：己酸羥孕酮中正己酐、對甲苯磺酸的檢查要求：V<0.50ml

規(guī)定消耗滴定液的體積本品0.20g(NaOH0.02mol/L)顯微藍(lán)色中性乙醇溴麝香草酚藍(lán)Vml9/18/202486總論藥物的雜質(zhì)分析主要檢查在合成原料藥，輔料或制劑生產(chǎn)的過程中使用的，但在工藝中未能完全除去有機(jī)溶劑第一類：應(yīng)該避免使用第二類：應(yīng)該限制使用第三類：GMP或其他質(zhì)控要求限制使用第四類：尚無足夠毒理學(xué)資料殘留溶劑檢查法9/18/202487總論藥物的雜質(zhì)分析第一法：毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法有機(jī)溶劑數(shù)量不多、極性差異較小第二法：毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣程序升溫法有機(jī)溶劑數(shù)量較多、極性差異較大第三法：溶液直接進(jìn)樣法采用填充柱、適宜極性的毛細(xì)管柱測定方法ChP采用GC法9/18/202488總論藥物的雜質(zhì)分析頂空分析也稱液上氣相色譜分析，是指用氣相色譜法來分析封閉系統(tǒng)中與液體（或固體）樣品相平衡的氣體的一種方法頂空進(jìn)樣器頂空進(jìn)樣瓶1-2g固體或3-5mL液體（平衡30-45min）9/18/202489總論藥物的雜質(zhì)分析內(nèi)標(biāo)法外標(biāo)法

限度檢查被測溶劑峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比不得大于對照品溶液的相應(yīng)比值被測溶劑峰面積不得大于對照品溶液的相應(yīng)峰面積結(jié)果判斷內(nèi)標(biāo)法外標(biāo)法

定量測定9/18/202490總論藥物的雜質(zhì)分析第三節(jié)降解物和雜質(zhì)的分離與鑒定

最大日劑量報告限度鑒定限度質(zhì)控限度原料藥≤2g

0.05%0.10%或1.0mg0.15%或1.0mg

＞2g0.03%0.05%0.05%制劑≤1g0.1%＞1g