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1.果酒是以新鮮水果或果汁為原料,經(jīng)全部或部分發(fā)酵制作而成的。在果酒的基礎(chǔ)上繼續(xù)發(fā)醒
可得到果醋。下列有關(guān)果酒和果醋制作的敘述,正確的是()
A.制作果酒和果醋時(shí)用的菌種都是酵母菌
B.制果醋的溫度要比制果酒的溫度高些
C.傳統(tǒng)的葡萄酒制作一定需要人工接種菌種
D.葡萄汁裝入發(fā)醛瓶時(shí),要將瓶裝滿
畫(huà)果酒的制作離不開(kāi)酵母菌,果醋的制作中起作用的是醋酸菌。傳統(tǒng)的葡萄酒制作中起主要
作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí),要留有大約1/3的空間。
2.在制果酒、果醋、泡菜時(shí)?,發(fā)酵過(guò)程中對(duì)氧氣的需求分別是()
A.無(wú)氧、有氧、無(wú)氧
B.有氧、無(wú)氧、無(wú)氧
C.無(wú)氧、有氧、有氧
D.兼氧、無(wú)氧、有氧
|答案|A
庭畫(huà)制果酒、果醋、泡菜時(shí)用到的微生物分別是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌。酵母菌為異養(yǎng)兼
性厭氧型微生物,制果酒時(shí)需在無(wú)氧條件下進(jìn)行;醋酸菌為異養(yǎng)需氧型微生物;乳酸菌為異養(yǎng)
厭氧型微生物。
3.有關(guān)培養(yǎng)基配制原則表述正確的是()
A.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水及生長(zhǎng)因子
B.碳源和氮源必須具有一定比例,碳元素的含量最多,其次為氮元素
C.微生物的生長(zhǎng)除受營(yíng)養(yǎng)因素影響外,還受到溫度、pH、氧、滲透壓等的影響
D.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好
畫(huà)]培養(yǎng)基中碳源和氮源必須具有一定比例,但含量最多的元素不應(yīng)是碳元素,應(yīng)是氧元素。
營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度并不是越高越好,濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)物細(xì)胞失水。
4.下列關(guān)于PCR的描述,正確的是()
①PCR是一種酶促反應(yīng)②引物決定了擴(kuò)增的特異性③擴(kuò)增DNA利用了熱變性的原理④擴(kuò)
增的對(duì)象是氨基酸序列
A.①@④B.②③④
C.①?④D.①?③
fgD
的PCR是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù),在高溫條件下,DNA的雙鏈打開(kāi),緩慢冷卻后,
模板DNA與引物結(jié)合,然后耐高溫的DNA聚合酶從引物的3'端連接脫氧核甘酸。
5.
右圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5。下列操作方法正確的是()
A.操作前要將接種環(huán)放在火焰邊滅菌
B.劃線操作必須在火焰上進(jìn)行
C.最可能得到所需菌落的是區(qū)域1
D.在區(qū)域1、2、3、4、5中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌
|答案|D
畫(huà)操作前要將接種環(huán)放在火焰上灼燒滅菌;劃線操作必須在火焰旁進(jìn)行,而不是火焰上;最
可能得到所需菌落的是區(qū)域5。
6.下列有關(guān)高果糖漿生產(chǎn)過(guò)程的說(shuō)法,不正確的是()
A.葡萄糖與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸,轉(zhuǎn)化成的是果糖
B.從固定化能反應(yīng)柱下端流出的是果糖
C.高果糖漿不會(huì)像蔗糖那樣誘發(fā)肥胖、糖尿病、螭齒和心血管疾病
D.酶溶解于葡萄糖溶液后,可從糖漿中回收
|答案|D
畫(huà)酶溶解于葡萄糖溶液后,不能從糖漿中回收,但是固定化酶可以回收重復(fù)利用。
7.下列有關(guān)生物技術(shù)在實(shí)踐中的應(yīng)用的敘述,正確的是()
A.制葡萄醋的溫度要比制腐乳的溫度低些
B.使用加酶洗衣粉在任何條件下洗衣效果都比普通的洗衣粉好
C.凝膠色譜法是一種根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量大小不同而分離蛋白質(zhì)的有效方法
D.固定化細(xì)胞比固定化酶的催化效率高,適用于所有生產(chǎn)過(guò)程
畫(huà)參與葡萄醋發(fā)酵的是醋酸菌,其最適生長(zhǎng)溫度為30—35℃,而參與腐乳發(fā)酵的主要是毛霉,
其最適生長(zhǎng)溫度是15~18℃。加前洗衣粉只是在適宜的條件下洗滌血漬、奶漬等污漬的效果比
普通洗衣粉好。凝膠色譜法是一種根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量大小來(lái)分離蛋白質(zhì)的有效方法。對(duì)一系
列連續(xù)的生化反應(yīng),固定化細(xì)胞比固定化酶的催化效率高,但二者都不能用于所有生產(chǎn)過(guò)程。
8.下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述,正確的是()
A.愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞
B.二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株
C.用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子
D.植物耐鹽突變體可通過(guò)添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得
|答案|【)
畫(huà)愈傷組織是一團(tuán)排列疏松而無(wú)規(guī)則、高度液泡化的、呈無(wú)定形狀態(tài)的、具有分生能力的
薄壁細(xì)胞,不具有特定的結(jié)構(gòu)和功能,A項(xiàng)錯(cuò)誤。二倍體植株的花粉中只含一個(gè)染色體組,花藥
離體培養(yǎng)得到的個(gè)體為單倍體,高度不育,幼苗用秋水仙素處理后得到的植株能穩(wěn)定遺傳,B項(xiàng)
錯(cuò)誤。人工種子中包裹的是再分化形成的胚狀體或不定芽、頂芽和腋芽等,不是愈傷組織,C項(xiàng)
錯(cuò)誤。用特定的選擇培養(yǎng)基可篩選出所需的突變體類(lèi)型,如植物耐鹽突變體的篩選可利用添加
了適量NaCl的培養(yǎng)基,D項(xiàng)正確。
9.下圖表示氧氣濃度對(duì)培養(yǎng)液中的醋酸菌、乳酸菌和酵母菌的呼吸作用的影響,試分析呼吸曲
線a、b、c分別代表()
呼吸速率
20
15
10
A.酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
B.酵母菌、乳酸菌、醋酸菌
C.乳酸菌、酵母菌、醋酸菌
D.醋酸菌、乳酸菌、酹母菌
畫(huà)酵母菌、醋酸菌、乳酸菌分別為兼性厭氧菌、好氧菌和厭氧菌。兼性厭氧菌隨氧氣濃度
增大無(wú)氧呼吸逐漸受到抑制,有氧呼吸逐漸增強(qiáng),導(dǎo)致總的呼吸強(qiáng)度先下降,后上升;好氧菌隨
氧氣濃度的增大,有氧呼吸逐漸增強(qiáng);厭氧菌隨氧氣濃度的增大無(wú)氧呼吸逐漸被抑制。
10.玫瑰精油素有“液體黃金”之稱(chēng),下面是提取玫瑰精油的實(shí)驗(yàn)流程圖,據(jù)圖分析不正確的
是()
耀花一回T油水混合物?或[分離油層|圖睜]
—③
玫瑰油卜―
A.A表示水蒸氣蒸僧
B.①和②操作要求分別加入NaCl和無(wú)水Na2soi
C.③操作是萃取,以除去固體N&S0,,
D.該實(shí)驗(yàn)流程也可用于從薄荷葉中提取薄荷油
薊|加入NaCl是為了促進(jìn)玫瑰油與水的分層;加入無(wú)水N&SO,是為了吸收精油中殘留的水分;
③操作是利用過(guò)濾的方法除去固體NazSOi。
11.提取玫瑰精油的過(guò)程中,油水混合物中要加入NaCl,不屬于其目的的是()
A.增大玫瑰油的溶解度
B.鹽析,促使玫瑰油和水分開(kāi)
C.利于玫瑰油的純化
D.利于玫瑰液的回收
|答案|A
畫(huà)加入NaCl是促使油水混合物分層,然后將其倒入分液漏斗,利于玫瑰油的純化和玫瑰液的
IBItl收o
a
Ib
s
12.凝膠色譜技術(shù)是一種快速而又簡(jiǎn)單的分離技術(shù),該技術(shù)設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便,不需要有機(jī)溶
劑,且對(duì)大分子物質(zhì)有很好的分離效果。如圖是a和b兩種蛋白質(zhì)分子分離的過(guò)程,下列相關(guān)
分析不正確的是()
A.裝填凝膠色譜柱時(shí),色譜柱內(nèi)不能有氣泡
B.洗脫時(shí),對(duì)洗脫液的流速要求是保持相對(duì)穩(wěn)定
C.洗脫用的液體與洗滌平衡凝膠所用的液體不同
I).先從層析柱中洗脫出來(lái)的是a
|答案長(zhǎng)
畫(huà)色譜柱中有氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)分子的洗脫次序,降低分離效果;洗脫時(shí),對(duì)洗脫
液的流速要求是保持相對(duì)穩(wěn)定,且洗脫用的液體應(yīng)與浸泡凝膠所用的液體盡可能相同;相對(duì)分
子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)分子能進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道,路程較長(zhǎng),移動(dòng)速度較慢,而相對(duì)分子質(zhì)量較大
的蛋白質(zhì)分子只能在凝膠外部移動(dòng),路程較短,移動(dòng)速度較快,a的相對(duì)分子質(zhì)量比b大,故先從
層析柱中洗脫出來(lái)。
13.固定化單寧酶應(yīng)用于茶飲料加工,可消除其中的苦澀味。下列有關(guān)敘述正確的是()
A.在單寧酶純化時(shí)可采用透析法去除雜蛋白
B.化學(xué)結(jié)合法比吸附法對(duì)單寧酶活性影響更小
C.溫度、pH和重金屬離子都可能影響固定化單寧酶活性
D.酶的高效性決定固定化單寧酶不會(huì)降解茶飲料中的有益成分
ggc
畫(huà)透析可以除去樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì),去除雜蛋白的方法應(yīng)是凝膠色譜法,A項(xiàng)
錯(cuò)誤?;瘜W(xué)結(jié)合法可能影響酶的活性部位,而物理吸附法不影響酶的分子結(jié)構(gòu),所以化學(xué)結(jié)合
法比物理吸附法對(duì)單寧酶的活性影響更大,B項(xiàng)錯(cuò)誤。溫度、pH和重金屬離子都會(huì)影響固定化
單寧酶的活性,C項(xiàng)正確。固定化單寧酶不會(huì)降解茶飲料中的有益成分的原因是酶具有專(zhuān)一
性,D項(xiàng)錯(cuò)誤。
14.下圖為形成cDNA的過(guò)程和PCR擴(kuò)增的過(guò)程。據(jù)圖分析,下列說(shuō)法正確的是()
RNA鏈DNA鏈
㈤閏3||一^
RNA單鏈雜交雙鏈雙鏈DNA
自/。⑤70-75℃
警)?95(
—?55.?@60(A■==
A.催化①過(guò)程的酶是RNA聚合酶
B.④過(guò)程發(fā)生的變化是引物與單鏈DNA的結(jié)合
C.催化②⑤過(guò)程的酶都是DNA聚合醐,都能耐高溫
I).如果RNA單鏈中A與U之和占該鏈堿基含量的40%,則一個(gè)雙鏈DNA中,A與U之和也占該雙
鏈DNA堿基含量的40%
?]B
畫(huà)由題圖可知,①過(guò)程表示以RNA單鏈為模板,合成RNA和DNA雜合雙鏈的過(guò)程,即逆轉(zhuǎn)錄過(guò)
程,此過(guò)程需要逆轉(zhuǎn)錄酶,A項(xiàng)錯(cuò)誤。④過(guò)程為復(fù)性,發(fā)生的變化是引物與單鏈DNA的結(jié)合,B項(xiàng)
正確。②⑤過(guò)程都是DNA復(fù)制過(guò)程,都需要DNA聚合酶,但不是都能耐高溫,C項(xiàng)錯(cuò)誤。雙鏈DNA
中不含堿基U,D項(xiàng)錯(cuò)誤。
15.某興趣小組學(xué)習(xí)了酵母細(xì)胞的固定化技術(shù)后,以酵母菌為材料進(jìn)行“固定化原生質(zhì)體”實(shí)
驗(yàn)。下列敘述錯(cuò)誤的是()
A.酵母菌去除細(xì)胞壁后更利于胞內(nèi)物質(zhì)的分泌
B.為了提高原生質(zhì)體的形成率應(yīng)盡量延長(zhǎng)酶解時(shí)間
C.凝膠珠呈白色是因?yàn)楹T逅徕c的濃度偏低
1).醐解法去壁制備原生質(zhì)體應(yīng)在等滲或略高滲透壓的溶液中進(jìn)行
ggB
函酵母菌去除細(xì)胞壁后更利于胞內(nèi)物質(zhì)的分泌,A項(xiàng)正確;原生質(zhì)體的形成過(guò)程中不能延長(zhǎng)
酶解時(shí)間,否則會(huì)破壞原生質(zhì)體,B項(xiàng)錯(cuò)誤;凝膠珠呈白色是因?yàn)楹T逅徕c的濃度偏低,包埋的
酵母菌數(shù)量少,C項(xiàng)正確;酶解法去壁制備原生質(zhì)體應(yīng)在等滲或略高滲透壓的溶液中進(jìn)行,防止
原生質(zhì)體在低滲溶液中吸水脹破,D項(xiàng)正確。
16.在生物實(shí)踐中,顏色的變化能幫助我們作出正確的判斷,下列說(shuō)法不正確的是()
A.發(fā)酵后的果汁在酸性條件下與重銘酸鉀反應(yīng)呈灰綠色,證明發(fā)酵后的果汁中有酒精
B.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,可鑒定尿素分解菌
C.提取的絲狀物若是DNA,將其溶解于NaCl溶液中再加入二苯胺試劑,混勻后就變藍(lán)
D.纖維素培養(yǎng)基中加入剛果紅,周?chē)a(chǎn)生透明圈的菌落很可能是纖維素分解菌
畫(huà)酸性條件下,酒精與重倍酸鉀反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色,A項(xiàng)正確。尿素被尿素分解菌分解成氨,與
酚紅指示劑反應(yīng)呈紅色,B項(xiàng)正確。提取的絲狀物若是DNA,將其溶于物質(zhì)的量濃度為2mol/L
的NaCl溶液中,再加入二苯胺試劑,用沸水浴加熱5min后,呈現(xiàn)藍(lán)色,C項(xiàng)錯(cuò)誤。剛果紅指示劑
與纖維素反應(yīng)呈紅色,纖維素分解菌可將纖維素分解,故纖維素培養(yǎng)基中加入剛果紅,周?chē)a(chǎn)
生透明圈的菌落很可能是纖維素分解菌,D項(xiàng)正確。
17.對(duì)PCR過(guò)程中“溫度的控制”的說(shuō)法,錯(cuò)誤的是()
A.PCR反應(yīng)需要高的溫度,是為了確保DNA復(fù)制時(shí)模板是單鏈
B.延伸的溫度必須大于復(fù)性溫度,而小于變性溫度
C.反應(yīng)中會(huì)有高溫,要用耐高溫的DNA聚合酶
I).要用耐高溫的DNA解旋酶,將DNA解旋為單鏈
U]D
函]PCR是體外DNA擴(kuò)增技術(shù),DNA雙鏈的解開(kāi)不需要解旋酶,靠高溫使其變性,雙螺旋結(jié)構(gòu)解
開(kāi),雙鏈分開(kāi)。復(fù)性后,在耐高溫的DNA聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA,
因此延伸的溫度要大于復(fù)性溫度,小于變性溫度。
18.玫瑰精油是世界上最昂貴的精油,被稱(chēng)為“精油之后”。下列關(guān)于玫瑰精油的提取裝置的
說(shuō)法,正確的是()
A.圖中2為進(jìn)水口,3為出水口
B.收集后的液體中,要加入NaCl,促使油水分離
C.本裝置為萃取裝置
D.使用該裝置時(shí),由于原料在水中,不易產(chǎn)生原料焦糊問(wèn)題
S]B
麗|圖中3為進(jìn)水口,2為出水口;加入NaCl的目的是促使油水分層;本裝置為蒸儲(chǔ)裝置,該裝
置適用于原料不易焦糊或有效成分不易水解的精油的提取。
19.下列有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的敘述,正確的是()
A.探究果膠酶用量的實(shí)驗(yàn)中,果汁量與果膠酶的用量始終呈正相關(guān)
B.在提取胡蘿卜素時(shí),可選用乙醇或石油酸作為萃取劑
C.果膠酶是由植物、霉菌、細(xì)菌等產(chǎn)生的能分解果膠的一類(lèi)酶的總稱(chēng)
D.為提高胡蘿卜素的萃取速度,應(yīng)采用明火加熱
|答案《
題由于底物的量是一定的,所以隨著果膠酶增加到一定值,果汁量將不再增加,因此不會(huì)始
終呈正相關(guān)。萃取胡蘿卜素的萃取劑不能與水混溶,而乙醇能與水混溶,所以乙醇不能作為其
萃取劑;萃取劑為有機(jī)溶劑,一般是易燃物,直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸。果膠酶是
一類(lèi)酶的總稱(chēng),可從植物、霉菌等生物中提取。
20.圖1、2分別為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中部分操作步驟示意圖,下列敘述錯(cuò)誤的是
()
雞血細(xì)胞液
圖1
DNA濃鹽溶液
圖2
A.圖1、2中加入蒸儲(chǔ)水的目的相同
B.圖1中完成過(guò)濾之后保留濾液
C.圖2中完成過(guò)濾之后棄去濾液
D.在圖1濾液中加入少許嫩肉粉有助于去除雜質(zhì)
|答案上
而圖1中加入蒸鐳水的目的是使雞血細(xì)胞漲破,過(guò)濾以獲取細(xì)胞核物質(zhì)。圖2中加入蒸儲(chǔ)水
的目的是稀釋DNA濃鹽溶液至物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L,以利于析出DNA,A項(xiàng)錯(cuò)誤。圖1中
完成過(guò)濾之后保留的濾液含有DNA,B項(xiàng)正確。圖2中完成過(guò)濾后,DNA己析出,濾液可以棄之,C
項(xiàng)正確。圖1中濾液中加入嫩肉粉,因嫩肉粉中有木瓜蛋白酶,能分解蛋白質(zhì),有助于去除雜
質(zhì),D項(xiàng)正確。
二、非選擇題(共5個(gè)小題,50分)
21.(2021全國(guó)乙)(10分)工業(yè)上所說(shuō)的發(fā)酵是指微生物在有氧或無(wú)氧條件下通過(guò)分解與合成
代謝將某些原料物質(zhì)轉(zhuǎn)化為特定產(chǎn)品的過(guò)程。利用微生物發(fā)酵制作醬油在我國(guó)具有悠久的歷
史。某企業(yè)通過(guò)發(fā)酵制作醬油的流程示意圖如下。
米曲霉發(fā)辭發(fā)醉池發(fā)醉提取醬油
回答下列問(wèn)題。
(1)米曲霉發(fā)酵過(guò)程中,加入大豆、小麥和麥秋可以為米曲霉的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),大豆中的—
可為米曲霉的生長(zhǎng)提供氮源,小麥中的淀粉可為米曲霉的生長(zhǎng)提供。
(2)米曲霉發(fā)酵過(guò)程的主要目的是使米曲霉充分生長(zhǎng)繁殖,大量分泌制作醬油過(guò)程所需的酶類(lèi),
這些酶中的、能分別將發(fā)酵池中的蛋白質(zhì)和脂肪分解成易于吸收、風(fēng)味獨(dú)
特的成分,如將蛋白質(zhì)分解為小分子的肽和o米曲霉發(fā)酵過(guò)程需要提供營(yíng)養(yǎng)物
質(zhì)、通入空氣并攪拌,由此可以判斷米曲霉屬于(填“自養(yǎng)厭氧”“異養(yǎng)厭氧”
或“異養(yǎng)好氧”)微生物。
(3)在發(fā)酵池發(fā)酵階段添加的乳酸菌屬于(填“真核生物”或“原核生物”);
添加的酵母菌在無(wú)氧條件下分解葡萄糖的產(chǎn)物是o在該階段抑制雜菌污染和繁
殖是保證醬油質(zhì)量的重要因素,據(jù)圖分析該階段中可以抑制雜菌生長(zhǎng)的物質(zhì)是
(答出1點(diǎn)即可)。
整](1)蛋白質(zhì)碳源(2)蛋白前脂肪酶氨基酸異養(yǎng)好氧(3)原核生物CO?和酒精
乳酸(或酒精、食鹽)
畫(huà)(1)大豆富含蛋白質(zhì),可以為米曲霉的生長(zhǎng)提供氮源;小麥富含淀粉,可以為米曲霉的生長(zhǎng)
提供碳源。(2)由酶的專(zhuān)一性可知,蛋白酶可以分解蛋白質(zhì),脂肪酶可以分解脂肪。蛋白酶能將
蛋白質(zhì)分解為小分子的肽和氨基酸,脂肪醐可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。由題意可知,米曲
霉發(fā)酵過(guò)程需要提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),說(shuō)明米曲霉屬于異養(yǎng)微生物;米曲霉發(fā)酵過(guò)程需要通入空氣并
攪拌,說(shuō)明米曲霉屬于好氧微生物。綜上可知,米曲霉為異養(yǎng)好氧微生物。(3)乳酸菌沒(méi)有以核
膜為界限的細(xì)胞核,為原核生物。酵母菌在無(wú)氧條件下分解葡萄糖,可以產(chǎn)生CO?和酒精。由題
圖可知,乳酸菌的代謝產(chǎn)物一一乳酸、酵母菌的代謝產(chǎn)物一一酒精以及添加的食鹽都有抑制雜
菌生長(zhǎng)的作用。
22.(8分)乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖,具有重要應(yīng)用價(jià)值。乳糖酶的制備及固
定化步驟如下。
產(chǎn)乳糖酶產(chǎn)乳糖褥—?乳糖睡的乳糖酶的
微生物L(fēng)的篩選微生物L(fēng)的培養(yǎng)提取純化固定化
(1)篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時(shí),宜用作為培養(yǎng)基中的唯一碳源。培養(yǎng)基中瓊脂的作
用是。從功能上講,這種培養(yǎng)基屬于,
(2)培養(yǎng)微生物L(fēng)前,宜采用方法對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌。
(3)純化后的乳糖酶可用電泳法檢測(cè)其相對(duì)分子質(zhì)量大小。在相同條件下,帶電荷相同的蛋白
質(zhì),電泳速度越快的蛋白質(zhì),其相對(duì)分子質(zhì)量越。
(4)乳糖酶宜采用化學(xué)結(jié)合法(共價(jià)鍵結(jié)合法)進(jìn)行固定化,可通過(guò)檢測(cè)固定化乳糖酶的
確定其應(yīng)用價(jià)值。除化學(xué)結(jié)合法外,酶的固定化方法還包括、
等。
■⑴乳糖凝固劑選擇培養(yǎng)基⑵灼燒(3)?、龋福┗钚裕ɑ颍海福┗盍Γ┌?/p>
法物理吸附法
畫(huà)(1)在只有乳糖的培養(yǎng)基上,只有產(chǎn)乳糖酶的微生物才能正常生存,從而篩選出產(chǎn)乳糖酶
的微生物,這類(lèi)培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)接種微生物之前,對(duì)接種環(huán)要灼燒滅菌。(3)相同
條件下,帶電荷相同的蛋白質(zhì),分子量小的蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中移動(dòng)速度要比分子量大的蛋白質(zhì)移
動(dòng)速度快。(4)獲取酶后要檢測(cè)其活性(活力)大小,活性(活力)大的酶才能用于生產(chǎn)。酶的固
定化方法包括化學(xué)結(jié)合法、包埋法、物理吸附法等。
23.(10分)生物大分子物質(zhì)的提取與分離有著重要的實(shí)踐意義。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。
(1)在“血紅蛋白的提取與分離”實(shí)驗(yàn)中,純化分離血紅蛋白用的方法
是,利用鑒定血紅蛋白的純度。
(2)從玫瑰花中提取出的玫瑰精油稱(chēng)為“液體黃金”,是世界香料工業(yè)不可取代的原料,多用
于制造高級(jí)香水、化妝品等。用鮮玫瑰花瓣作原料,選用法提取玫瑰精油可提
高出油率,在提取過(guò)程中,加入NaCl的目的是,加入無(wú)水
Na2soi的目的是。
(3)人參是一種名貴中藥材,其有效成分主要是人參皂貳。利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂貳的
大致流程如下。
|培養(yǎng)厚干粉|
[提取
|人.皂貳|
配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基,分裝后要進(jìn)行,接種前,要對(duì)人參根進(jìn)
行。用少量酶處理愈傷組織,獲取單細(xì)胞或小細(xì)
胞團(tuán),在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng),可有效提高人參皂戒合成量。人參皂由易溶于水溶性(親
水性)有機(jī)溶劑,從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂貳宜選用方法,操作時(shí)應(yīng)采用_
加熱。
彝(1)凝膠色譜法電泳法(或SDS一聚丙烯酰胺凝膠電泳法)(2)蒸鐲促使油水分層
吸去油層中的殘余水分(3)滅菌消毒果膠酶和纖維素萃取水浴
畫(huà)(1)純化血紅蛋白的方法是凝膠色譜法。利用電泳法(SDS一聚丙烯酰胺凝膠電泳法)對(duì)血
紅蛋白進(jìn)行純度鑒定。(2)玫瑰精油不溶于水,揮發(fā)性強(qiáng),可采用蒸饋法提取,提取時(shí)加入的
NaCl可促進(jìn)油水分層,再加入無(wú)水Na2soi可除去油層中的殘余水分。⑶接種前,要對(duì)材料進(jìn)行
消毒,配制的培養(yǎng)基分裝后要用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。利用果膠酶和纖維素酶處理愈傷組
織可以獲得單個(gè)的細(xì)胞。人參皂或易溶于親水性有機(jī)溶劑,故而采用萃取的方法可以從培養(yǎng)物
干粉中提取人參皂玳,萃取過(guò)程應(yīng)該避免明火加熱,采用水浴加熱。
24.(12分)圓褐固氮菌是自生固氮菌,為經(jīng)濟(jì)有效地提高農(nóng)作物產(chǎn)量,人們一直在努力研究、尋
找固氮基因。對(duì)基因的研究常常因研究樣品中DNA含量太低而難以進(jìn)行,PCR技術(shù)有效地解決
了這個(gè)問(wèn)題。如今對(duì)基因的深入研究使人類(lèi)跨入了蛋白質(zhì)組研究時(shí)代,從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中
提取、分離高純度的蛋白質(zhì)是該研究要做的基本工作之一。
(1)用基因工程技術(shù)從經(jīng)過(guò)分離、提純的圓褐固氮菌中獲取固氮基因,然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增。下
列表1和表2分別表示用PCR擴(kuò)增固氮基因的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件。
表1
PCR反應(yīng)體
50UL
系
緩沖液5uL
脫氧核甘酸1uL
引物A0.5uL
引物B0.5uL
DNA聚合酶0.5U
模板DNA廣2uL
加去離子水補(bǔ)足至
50UL
表2
反應(yīng)
溫度時(shí)間
條件
變性95℃30s
復(fù)性55℃30s
延伸72℃1min
30次
5~10
循環(huán)適宜
min
后
保溫4℃2h
從上表中可得出,PCR技術(shù)與DNA復(fù)制相比較,主要區(qū)別之一
是。此外,從反應(yīng)條件看,所使用的DNA聚
合酶應(yīng)具有的特點(diǎn)。每次循環(huán)都需要2種引物的主要原因
是O
(2)在對(duì)固氮基因產(chǎn)物的生物研究中,需要從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質(zhì)。
下圖表示蛋白質(zhì)提取和分離實(shí)驗(yàn)涉及的相關(guān)原理。
2
場(chǎng)
將
^
①圖甲表示相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠色譜法分離的過(guò)程。試管中收集到的液體最
先出現(xiàn)的是相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì),原因
②圖乙所示實(shí)驗(yàn)?zāi)M電泳現(xiàn)象,U形管左側(cè)的顏色逐漸變深,原因
是
登第(1)不需要ATP(或需要加入引物,或不需要解旋酶,或不需要DNA連接酶)耐高溫DNA
聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈(2)①相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì),被排阻在凝膠顆粒外面,
在顆粒之間迅速通過(guò)②Fe(OH),膠體帶正電荷,在電場(chǎng)作用下,向陰極移動(dòng)
畫(huà)⑴體內(nèi)DNA復(fù)制和PCR技術(shù)的區(qū)別有很多,如PCR技術(shù)不需要添加ATP、不需要解旋酶、
不需要DNA連接酶、需要耐高溫的DNA聚合酶等。(2)①凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí),由于小分
子蛋白質(zhì)可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部,路程較長(zhǎng),移動(dòng)速度慢;而相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無(wú)法進(jìn)入
凝膠內(nèi)部,路程較短,移動(dòng)速度快,因此相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先洗脫出來(lái)。②電泳過(guò)程中,
分子向著與自身所帶電荷相反的電極移動(dòng),Fe(0H)3膠體帶正電荷,因此會(huì)向著陰極移動(dòng)。
25.(2021廣東)(10分)中國(guó)科學(xué)家運(yùn)用合成生物學(xué)方法構(gòu)建了一株嗜鹽單胞菌H,以糖蜜(甘蔗
榨糖后的廢棄液,含較多蔗糖)為原料,在實(shí)驗(yàn)室發(fā)酵生產(chǎn)PHA等新型高附加值可降解材料,期
望提高甘蔗的整體利用價(jià)值。工藝流程如下圖。
攪拌器
調(diào)節(jié)
嗜鹽單胞菌1pH
其他營(yíng)養(yǎng)溫度調(diào)節(jié)
物質(zhì)、空氣
I鹽
糖蜜或餐廚PHA分離
垃圾等各種純化制備
廢棄原料理
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