從茶葉中提取咖啡因?qū)嶒?yàn)報(bào)告

從茶葉中提取咖啡因及薄層色譜法對(duì)APC各組分的分離鑒定實(shí)驗(yàn)課程基礎(chǔ)合成實(shí)驗(yàn)-有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目從茶葉中提取咖啡因薄層色譜法對(duì)APC各組分的分離專業(yè)化學(xué)工程與工藝班級(jí)學(xué)號(hào)姓名指導(dǎo)教師開課學(xué)期至學(xué)年二學(xué)期實(shí)驗(yàn)時(shí)間一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)索氏提取器的原理和方法，掌握從茶葉中提取咖啡因的原理和操作。2、了解咖啡因的一般性質(zhì)及掌握利用升華方法純化固體產(chǎn)物的原理和基本操作3、鞏固復(fù)習(xí)有機(jī)化合物熔點(diǎn)的測定方法。4、了解并分離鑒定解熱鎮(zhèn)痛藥復(fù)方阿司匹林的主要成分。5、掌握薄層色譜法分離鑒定藥物的原理和方法。二、藥品簡介◆咖啡因分子結(jié)構(gòu)式◆咖啡因的物理性質(zhì):純的咖啡因是白色的，強(qiáng)烈苦味的白色粉末或六角棱柱狀結(jié)晶。化學(xué)式為C8H10N4O2，化學(xué)名稱1，3，7-三甲基-2，6-二氧嘌呤，分子量194.19，相對(duì)密度：1.2g/cm*3，熔點(diǎn)：234.5℃，沸點(diǎn)：178℃，純品熔點(diǎn)235～236℃,味苦，易溶于氯仿(12.5%),水及乙醇(2%)等。含結(jié)晶水的咖啡因?yàn)闊o色針狀晶體,在100℃時(shí)失去結(jié)晶水,并開始升華，120◆來源食品工業(yè)中咖啡因的主要來源是咖啡豆、可可、茶葉，冬青等，但咖啡豆的咖啡因含量會(huì)因品種不同也有不同。也存在于自然界中100種植物的葉子，根和果實(shí)中?！粲猛荆孩賹?duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有較強(qiáng)的興奮作用，對(duì)大腦皮層具有選擇性興奮作用。②醫(yī)藥上可用作心臟和呼吸興奮劑，也是一種重要的解熱鎮(zhèn)痛劑，是復(fù)方阿司匹林和氨非加的主要成分之一，還有一定的利尿作用。③咖啡因作為興奮劑、苦味劑、香料，主要供可樂飲料及含咖啡、飲料使用。小劑量：振奮精神，減少疲勞。大劑量：則有興奮延腦生命中樞的作用，可使呼吸加深、加快，血壓回升及血循環(huán)改善?！舨枞~化學(xué)組成的一般含量：水分（75%）鮮茶葉無機(jī)化合物（3.5%--7%）干物質(zhì)（25%）有機(jī)化合物（93%--96%）水溶性部分：2%--4%無機(jī)化合物（3.5%--7%）(茶葉高溫灼燒、碳水不溶性部分：1.5%--3%化后剩下的灰燼）氨基酸：1--7%蛋白質(zhì)：20--30%含N化合物生物堿：2--5%酶茶多酚：20--35%有機(jī)化合物（93%--96%）芳香物質(zhì)：0.02%類脂：8%含C有機(jī)物糖類：20--30%有機(jī)酸：3%色素：1%維生素：0.6--1%◆茶葉中的主要成分及其作用：1、氨基酸：氨基酸是構(gòu)建生物機(jī)體的眾多生物活性大分子之一，是構(gòu)建細(xì)胞、修復(fù)組織的基礎(chǔ)材料對(duì)紡織早衰，促進(jìn)生長和智力發(fā)育，增強(qiáng)造血功能，有著重要的作用。

2、茶蛋白茶葉中的蛋白質(zhì)絕大多數(shù)是非水溶性的,只有1%～2%為水溶性的。茶蛋白中氨基酸組成豐富、合理，含有人體所需的所有必需氨基酸。將茶蛋白提取純化后適當(dāng)改性，有望變?yōu)橄招暂^好的食用、飼用蛋白資源，以及加工成食用乳化劑、起泡劑和膠凝劑等產(chǎn)品。茶蛋白還具有清除超氧陰離子的功效，對(duì)預(yù)防放射治療時(shí)引起的致突變效應(yīng)有保護(hù)作用。3、生物堿：茶葉中的生物堿大部分是嘌呤類生物堿，以咖啡堿為主，，并含少量的可可堿茶堿和黃嘌呤。咖啡堿(caffeine)是茶葉生物堿的主體物質(zhì),其基本結(jié)構(gòu)是由一個(gè)嘧啶環(huán)和一個(gè)米唑環(huán)稠合而成的1,3,7-三甲基黃嘌呤。咖啡堿易溶于水，是形成茶葉滋味的重要物質(zhì)。過量飲（食）用，能擾亂胃液的正常分泌，影響食物消化，還能使人產(chǎn)生心慌、頭暈、四肢乏力等癥狀，是導(dǎo)致“醉茶”的主要因素?？Х纫蚩纱龠M(jìn)胃酸分泌，升高胃酸濃度，促進(jìn)食物消化。但因此也可誘發(fā)胃潰瘍甚至胃穿孔。4、酶類酶是一種蛋白體，在茶樹生命活動(dòng)和茶葉加工過程中參與一系列由酶促活動(dòng)而引起的化學(xué)變化，故又被稱為生物催化劑。茶葉中的酶較為復(fù)雜，種類很多，茶葉加工就是用技術(shù)手段鈍化或激發(fā)酶的活性，使其沿著茶類所需的要求發(fā)生酶促反應(yīng)而獲得各類茶特有的色香味。

5、茶多酚

茶多酚是茶葉中主要的功能性物質(zhì)之一,是茶葉中酚類物質(zhì)及其衍生物的總稱，因此常稱為多酚類。又稱作茶鞣質(zhì)、茶單寧。茶多酚約有30多種化合物，主要由兒茶素類黃酮花青素和酚酸等類物質(zhì)組成，其中兒茶素類占茶多酚總量的70%。茶葉中含多酚類的物質(zhì)約占干重15%--30%。茶多酚是一種淡褐色至白色的無定型粉末，易溶于水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、冰乙酸等，不溶于苯、氯仿、石油醚、茶多酚在酸性條件下較穩(wěn)定，堿性條件下易氧化聚合。是茶葉特有成份，具有苦、澀味及收斂性。茶多酚的功效主要有：能消除有害自由基、抗氧化、抗衰老、抗輻射、抑制癌細(xì)胞、抗菌殺菌、抑制艾滋病病毒。可以與食物中的鐵元素發(fā)生反應(yīng)，生成難以溶解的新物質(zhì)，時(shí)間一長引起人體缺鐵，甚至誘發(fā)貧血癥。6、芳香物質(zhì)

茶葉中的芳香物質(zhì)是指茶葉中揮發(fā)性物質(zhì)的總稱。茶葉中芳香物質(zhì)的含量雖不多，但其種類卻很復(fù)雜。0葉中的芳香物質(zhì)以醇類化合物為主，低沸點(diǎn)的青葉醇具有強(qiáng)烈的青草氣，高沸點(diǎn)的沉香醇、苯乙醇等，具有清香、花香等特性。7、類脂類

茶葉中的類脂類物質(zhì)包括脂肪、磷脂、甘油脂、糖酯和硫酯等，茶葉中的類脂類物質(zhì)，對(duì)形成茶葉香氣有著積極作用。類脂類物質(zhì)在茶樹體的原生質(zhì)中，對(duì)進(jìn)人細(xì)胞的物質(zhì)滲透起著調(diào)節(jié)作用。

8、茶多糖

茶多糖(teapolysaccharide簡稱TPS)是茶葉中一類與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起的酸性多糖或一種酸性糖蛋白,由阿拉伯糖、木糖、巖藻糖、葡萄糖、半乳糖等構(gòu)成。具有降血糖、防治糖尿病,降血脂、抗凝血、抗血栓、降血壓、減慢心率、耐缺氧和增加冠狀動(dòng)脈流動(dòng)的作用，以及抗炎、防輻射、增加碳粒廓清速度等藥理作用,還能使血清凝集素抗體增加,從而增強(qiáng)機(jī)體免疫功能,茶多糖對(duì)NaNO2也具有很強(qiáng)的清除作用。其顯著的降血糖效果和免疫活性,使茶多糖有望成為預(yù)防和治療糖尿病及心血管疾病、增加免疫功能的天然藥物。

9、有機(jī)酸

茶葉中有機(jī)酸種類較多，多為游離有機(jī)酸。茶葉中的有機(jī)酸是香氣的主要成分之一，雖然茶葉中檸檬酸對(duì)人體無直接危害，但可以促進(jìn)體內(nèi)鈣的排泄和沉積，如長期大量攝入，有可能導(dǎo)致低鈣血癥。

10、色素

茶色素分為脂溶性和水溶性，是茶葉中兒茶素等多酚類及其氧化衍生物的混合物，主要成分為茶黃素類，茶紅素類，其中茶黃素類具有極強(qiáng)的生理活性，在茶色素的藥理功能中發(fā)揮著極大的作用。茶色素色彩艷麗,著色效果好,本身又含有多種營養(yǎng)保健成分,對(duì)食品中的維生素等具有保護(hù)(防止降解)作用,是食品、飲料最理想的著色劑之一。茶色素還可以改善晚期腫瘤病人的血液高凝狀態(tài),提高血液中白細(xì)胞的含量,增強(qiáng)病人的免疫功能。11、維生素

茶葉中含有豐富的維生素類，分水溶性和脂溶性兩類。茶葉中含有豐富的維生素c，能防止壞血病，增強(qiáng)抵抗力，還有輔助抗癌和防止動(dòng)脈硬化的功效。愈新的茶，維他命Ｃ含量愈多。

茶葉中患有豐富的維生素b族維生素，其中維生素b2最重要，缺乏它會(huì)引起代謝的紊亂及口舌疾病。茶葉中還有較多維生素p類物質(zhì)，及茶葉中大量存在的茶多酚，其含量為10%-20%，它能維持微血管的正常透性，增強(qiáng)韌性，對(duì)于防止人體協(xié)管硬化和高血壓有著積極作用。12、果膠：

茶葉中的果膠等物質(zhì)是糖的代謝產(chǎn)物，含量占干物質(zhì)總量的4%左右，水溶性果膠是形成茶湯厚度和外形光澤度的主要成分之一。

13、無機(jī)化合物

茶葉中無機(jī)化合物占干物質(zhì)的3.5-7.0%，分為水溶性和水不溶性兩部分。這些無機(jī)化合物經(jīng)高溫灼燒后的無機(jī)物質(zhì)稱之為“灰分”。①鉀：促進(jìn)血鈉排除。多飲茶可防止高血壓。②氟：具有防止蛀牙的功效。③錳：具有抗氧化及防止老化之功效，增強(qiáng)免疫功能，并有助于鈣的利用。可防止生殖機(jī)能紊亂和驚厥抽搐。④鋅可以促進(jìn)兒童生長發(fā)育，還可以防止心肌梗塞，⑤鐵能增強(qiáng)造血功能，防止貧血?！舭⑺酒チ质且环N應(yīng)用最早，最廣和最普通解熱鎮(zhèn)痛藥抗風(fēng)濕藥的解熱鎮(zhèn)痛藥，主要成分是乙酰水楊酸經(jīng)吸收后水解為水楊酸,以鹽的形式存在。右圖為阿司匹林分子結(jié)構(gòu)式名稱分子式性狀相對(duì)分子質(zhì)量密度g/cm*3熔點(diǎn)℃氣味阿司匹林C9H8O4白色針狀或板狀結(jié)晶或粉末180.161.35136無氣味，微帶酸味在干燥空氣中穩(wěn)定，在潮濕空氣中緩緩水解成水楊酸和乙酸而略帶酸臭味，故貯藏時(shí)應(yīng)置于密閉，干燥處，以防分解。在乙醇中易溶，在乙醚和氯仿溶解，也溶于氫氧化堿溶液或碳酸溶液，同時(shí)分解?！羯a(chǎn)方法及其他水楊酸乙?；茫涸诜磻?yīng)罐中加乙酐（加料量為水楊酸總量的0.7889倍），再加入三分之二量的水楊酸，攪拌升溫，在81-82℃反應(yīng)40-60min。降溫至81-82℃保溫反應(yīng)2h。檢查游離水楊酸合格后，降溫至13℃，析出結(jié)晶，甩濾，水洗甩干，于65◆適應(yīng)癥狀廣泛用于各種原因引起的發(fā)熱，頭痛，以及牙痛，肌肉痛，神經(jīng)痛，關(guān)節(jié)痛，腰痛，月經(jīng)痛，術(shù)后小傷口痛。對(duì)已確診為風(fēng)濕熱，活動(dòng)性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，幼年性關(guān)節(jié)炎，骨關(guān)節(jié)炎等病者，本品可用于維持治療。用于預(yù)防和治療缺血性心臟病、預(yù)防短暫性腦缺血、心絞痛、心肺梗塞、其他手術(shù)后的血栓形成，并可減少心律失常的發(fā)生率和死亡率，應(yīng)用于血管形成術(shù)及旁路移植術(shù)也有效?！舨涣挤磻?yīng)①對(duì)胃黏膜有刺激作用，有時(shí)可見惡心、嘔吐。大劑量或長期服用可引起消化道出血，還可抑制肝臟制造凝血酶元。②用量過大可引起頭痛、眩暈、耳鳴、聽力和視力減退等水楊酸反應(yīng)。③少數(shù)可引起皮疹、水腫、哮喘等過敏反應(yīng)，哮喘病人慎用?！糇⒁馐马?xiàng)①手術(shù)前一周應(yīng)停用，避免凝血功能障礙，造成出血不止。②飲酒后不宜用，因?yàn)槟芗觿∥刚衬て琳蠐p傷，從而導(dǎo)致胃出血。③潮解后不宜用，阿司匹林遇潮分解成水楊酸與醋酸，服后可造成不良反應(yīng)。④凝血功能障礙者避免使用，如嚴(yán)重肝損害、低凝血酶原血癥、維生素K缺乏者。⑤潰瘍病人不宜使用?；加形讣笆改c潰瘍的病人服用阿司匹林可導(dǎo)致出血或穿孔。⑥哮喘病人應(yīng)避免使用，有部分哮喘患者可在服用阿司匹林后出現(xiàn)過敏反應(yīng)，如蕁麻疹、喉頭水腫、哮喘大發(fā)作。⑦孕婦不宜服用。孕后三個(gè)月內(nèi)服用可引起胎兒異常；定期服用，可致分娩延期，并有較大出血危險(xiǎn)，在分娩前2-3周應(yīng)禁用。⑧不宜長期大量服用，否則可引起中毒，出現(xiàn)頭痛、眩暈、惡心、嘔吐、耳鳴、聽力和視力減退，嚴(yán)重者酸堿平衡失調(diào)、精神錯(cuò)亂、昏迷，甚至危及生命。⑨病毒性感染伴有發(fā)熱的兒童不宜使用，有報(bào)道，16歲以下的兒童、少年患流感、水痘或其它病毒性感染，再服用阿司匹林，出現(xiàn)嚴(yán)重的肝功能不全合并腦病癥狀，雖少見，卻可致死。三、實(shí)驗(yàn)原理◆咖啡因又叫咖啡堿,是一種生物堿,存在于茶葉、咖啡、可可等植物中。例如茶葉中含有1%～5%的咖啡因,同時(shí)還含有單寧酸、色素、纖維素等物質(zhì)?！艨Х纫蚴侨鯄A性化合物,可溶于氯仿、丙醇、乙醇和熱水中,難溶于乙醚和苯(冷)。純品熔點(diǎn)235～236℃,含結(jié)晶水的咖啡因?yàn)闊o色針狀晶體,在100℃時(shí)失去結(jié)晶水,并開始升華，120℃時(shí)顯著升華，◆茶葉中的生物堿對(duì)人體有一定程度的藥理功能，它具有刺激心臟、興奮方阿司匹林（APC）等藥物的組分之一。生物堿可用提取法或合成法制得，工業(yè)上主要通過人工合成制備。

◆脂肪提取器是利用溶劑回流和虹吸原理，使固體物質(zhì)連續(xù)不斷地為純?nèi)軇┧腿〉膬x器。溶劑沸騰時(shí)，其蒸氣通過側(cè)管上升，被冷凝管冷凝成液體，滴入套筒中，浸潤固體物質(zhì)，使之溶于溶劑中，當(dāng)套筒內(nèi)溶劑液面超過虹吸管的最高處時(shí)，即發(fā)生虹吸，回流入燒瓶中。通過反復(fù)的回流和虹吸，從而將固體物質(zhì)富集在燒瓶中。脂肪提取器為配套儀器，其任一部件損壞將會(huì)導(dǎo)致整套儀器的報(bào)廢，特別是虹吸管極易折斷，所以在安裝儀器和實(shí)驗(yàn)過程中須特別小心?！糁咎崛∑饕部梢詫⒐腆w物質(zhì)中所含有的的可溶性物質(zhì)富集，根據(jù)其原理固體物質(zhì)每一次都能被純的溶劑所萃取，因而效率較高，為增加液體浸溶的面積，萃取前應(yīng)先將物質(zhì)研細(xì)，用濾紙?zhí)装弥糜谔崛∑髦?，通過不斷萃取虹吸，固體中的可溶物質(zhì)富集到燒瓶中，將提取液濃縮后，得到想得到的固體物質(zhì)?！籼崛】Х纫虻姆椒ㄓ袎A液提取法和索氏提取器提取法。本實(shí)驗(yàn)以乙醇為溶,用索氏提取器提取,再經(jīng)濃縮、中和、升華,得到含結(jié)晶水的咖啡因。本實(shí)驗(yàn)是用提取法從茶葉中提取咖啡因，往往用適當(dāng)?shù)娜軇确隆⒁掖?、苯等）在脂肪提取器中連續(xù)抽提，然后蒸出溶劑，即得初產(chǎn)物——咖啡因。由于其初產(chǎn)物中還含有其他的一些生物堿和雜質(zhì)，故可利用升華進(jìn)一步提純。

◆工業(yè)上咖啡因主要是通過人工合成制得?！舭⑺酒チ?、非那西汀等都是常見的非處方止痛藥。除了單獨(dú)成方制成藥片外，在非處方止痛藥商品中還常見到復(fù)方止痛藥，即它們中的二種或三種復(fù)配。有的還加入咖啡因或其他活性組分進(jìn)行復(fù)配，滿足不同人群和不同疼痛癥狀的需要?！羰惺鄣慕鉄徭?zhèn)痛藥——復(fù)方阿司匹林（APC），每片藥片中含有一定的有效成分：阿司匹林（A）0.22g、非那西?。≒）0.15g、咖啡因（C）0.035g，此外，還含有大量淀粉及堿性物質(zhì)（氫氧化鋁、氫氧化鈣）等。本實(shí)驗(yàn)用薄層色譜法對(duì)APC各組分進(jìn)行分離和鑒定。薄層色譜是一種微量而快速的分離方法，它的原理是根據(jù)分析試樣中各組分在不相混溶并做相對(duì)運(yùn)動(dòng)的兩相——流動(dòng)相和固定相中的溶解度不同或者在固定相上的物理吸附程度的不同，即在兩相中的分配不同，而使各組分進(jìn)行分離。四、所用試劑、儀器與有關(guān)數(shù)據(jù)從茶葉中提取咖啡因名稱性狀相對(duì)分子質(zhì)量比重熔點(diǎn)（℃）沸點(diǎn)（℃）折光率溶解度咖啡因白色針狀晶體194.191.23238178----溶于水、醇、酮乙醇無色透明溶液46.070.79-11478.41.3614與水任意比互溶所用試劑：茶葉末、80--100ml95%乙醇、4g生石灰、二氯甲烷儀器：索氏提取器、圓底燒瓶、冷凝管、鐵架臺(tái)、錐形瓶、漏斗、蒸發(fā)皿、濾紙、紫外分光光度計(jì)、研缽、電熱套薄層色譜法對(duì)APC各組分的分離鑒定化合物Ｒｆ值λmax熔點(diǎn)（℃）阿司匹林0.81276135--138非那西汀0.60249134--136咖啡因0.30273234--237乙酰水楊酸0.86304159所用試劑：咖啡因、乙酰水楊酸、阿司匹林的點(diǎn)樣水溶液、展開劑（苯:乙醚:冰醋酸:甲醇=120:60:18:1（已準(zhǔn)備））儀器：薄層板、蒸發(fā)皿、燒杯、短波紫外分析儀、毛細(xì)管五、實(shí)驗(yàn)裝置圖索氏提取器升華裝置蒸餾裝置六、實(shí)驗(yàn)步驟１、咖啡因的提取簡要實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象粗提稱取15g茶葉末,裝入濾紙筒內(nèi),輕輕壓實(shí),濾紙筒上口微向內(nèi)折,置于抽提筒中,圓底燒瓶內(nèi)加入80-100ml95%乙醇,加熱乙醇至沸,回流提取，連續(xù)抽提1.5h，直到提取液顏色較淺為止，待冷凝液剛剛虹吸下去時(shí),立即停止加熱。加熱回流后得到棕黑色溶液，提取液顏色變淺蒸餾稍冷后，將儀器改裝成蒸餾裝置,蒸出大部分乙醇，至提取液濃縮至約為15-20ml時(shí)，停止蒸餾。趁熱把瓶中剩余液倒入蒸發(fā)皿中，再用5ml乙醇清洗燒瓶，一并倒入蒸發(fā)皿中。蒸餾過程中，有無色透明液體蒸出，蒸餾燒瓶中的液體呈棕色粘稠狀焙炒往盛有提取液的蒸發(fā)皿中加入4g生石灰粉,攪成漿狀,用電熱套加熱,蒸發(fā)至干,使成粉末。然后小火加熱，焙炒片刻，除去水分。加入生石灰后呈棕色漿狀體，加熱焙炒后得到棕色粉末狀小顆粒升華將一張刺有許多小孔的圓形濾紙蓋在蒸發(fā)皿上,取一只大小合適的玻璃漏斗罩于其上,漏斗頸部疏松地塞一團(tuán)棉花。用電熱套小心加熱蒸發(fā)皿,適當(dāng)控制溫度,使咖啡因升華。當(dāng)發(fā)現(xiàn)有棕色煙霧時(shí)，即升華完畢。冷卻后,揭開漏斗和濾紙,仔細(xì)用小刀把附著于濾紙及漏斗壁上的咖啡因刮入表面皿中。將蒸發(fā)皿內(nèi)的殘?jiān)右詳嚢?重新放好濾紙和漏斗,用較高的溫度再加熱片刻，使升華完全。此時(shí),溫度也不宜太高,否則蒸發(fā)皿內(nèi)大量冒煙,產(chǎn)品既受污染又遭損失。合并兩次升華所收集的咖啡因。測定熔點(diǎn)，計(jì)算產(chǎn)率。加熱一段時(shí)間后，濾紙小孔處出現(xiàn)白色透明狀晶體，漏斗內(nèi)壁出現(xiàn)黃色油狀液體，升華完成后，濾紙背面有白色針狀晶體附著所測得的產(chǎn)品重量為0.04g，熔點(diǎn)測試結(jié)果：起始溫度237.9℃實(shí)驗(yàn)流程圖提取液（咖啡因、丹寧酸、色素、葉綠素、乙醇）提取液（咖啡因、丹寧酸、色素、葉綠素、乙醇）餾出液（乙醇、水）母液（咖啡因、丹寧酸、色素、葉綠素、少量水）茶葉（咖啡因、丹寧酸、色素、纖維素、蛋白質(zhì)、葉綠素、水）殘液（纖維素、蛋白質(zhì)）９５％乙醇提純蒸餾生石灰粉（除去水、中和酸）氫氧化鈣咖啡因、丹寧酸、色素、葉綠素升華殘?jiān)兛Х纫?、薄層色譜法對(duì)APC各組分的分離鑒定１、點(diǎn)樣

（1）樣品液的制備：取藥片APC一片在研缽中研細(xì)，然后轉(zhuǎn)移到盛有二氯甲烷８ml和水８ml的小燒杯中，經(jīng)過充分?jǐn)嚢?，使固體物幾乎全部溶解，分液，將有機(jī)層轉(zhuǎn)移到一個(gè)25mL的小錐形瓶中，用無水硫酸鎂干燥，過濾，除去干燥劑后可直接用于點(diǎn)樣。（已準(zhǔn)備）另外，把少量咖啡因（茶葉提取物）和乙酰水楊酸（實(shí)驗(yàn)合成物）也分別溶于二氯甲烷中制成點(diǎn)樣溶液。

（2）點(diǎn)樣：把以上制得的樣品用毛細(xì)管點(diǎn)加到預(yù)制的層析板離板端1.0cm的起點(diǎn)線上，點(diǎn)樣量不宜過多，一般在10-50mg，樣品點(diǎn)不宜過大，控制直徑在2-3mm。點(diǎn)樣時(shí)只需用毛細(xì)管稍蘸一下樣液，輕輕地在預(yù)定的位置上一觸即可。點(diǎn)樣后應(yīng)使溶劑揮發(fā)至干后再開始下一步操作。

２、展開：將事先選好的展開劑（苯：乙醚：冰醋酸：甲醇＝120:60:18:1）放入燒杯內(nèi)，展開劑液體的深度達(dá)0.5－1cm即可。馬上蓋好表面皿，使缸內(nèi)達(dá)到蒸汽壓飽和。放入點(diǎn)好樣品的層析板，蓋好表面皿，使樣品在缸內(nèi)進(jìn)行展開分離。當(dāng)展開劑上升到預(yù)定的位置時(shí)，立即取出層析板并盡快用鉛筆在展開劑上升的前沿處劃一記號(hào)，再將它置于水平位置上風(fēng)干，然后在紅外燈下烘干冰醋酸。

３、鑒定：將烘干的層析板放入254nm紫外分析儀中照射顯色，可以清晰地看出展開得到的三個(gè)粉紅色斑點(diǎn)，定出它們的相對(duì)位置。用尺子量出從三個(gè)斑點(diǎn)中心到起點(diǎn)的距離和展開劑從起點(diǎn)到終點(diǎn)的距離，測算出Rf值。Rf=化合物移動(dòng)的距離/展開劑移動(dòng)的距離。根據(jù)Rf值對(duì)照文獻(xiàn)值可以確定APC藥片的主要成分。七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析咖啡因的提取實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在“從茶葉中提取咖啡因”這個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目中，制得咖啡因0.04g，產(chǎn)品為無色針狀晶體，產(chǎn)品較為純凈。理論產(chǎn)值大概為0