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文檔簡介

高中生物學(xué)選擇性必修3期末復(fù)習(xí)知識清單①防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染②防止水分過快蒸發(fā)

II、常用的接種方法有幾種?能否獲得單菌落?能否計數(shù)?

第1章發(fā)酵工程①平板劃線法、稀釋涂布平板法②都可獲得單菌落③稀釋涂布平板法可計數(shù)

1、腐乳制作中利用了哪些微生物?主要的是什么微生物?原理是?12、如何判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底?

①酵母菌、曲霉、毛霉②主要是毛霉③原理是蛋白質(zhì)被蛋白酶分解為小分子肽和氨基酸將空白平板置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),觀察是否有菌落長出

2、傳統(tǒng)發(fā)酵主要什么類型的發(fā)酵?混合菌種的固體及半固體的發(fā)酵13、什么叫選擇培養(yǎng)基?尿素分解細(xì)菌為什么可以利用尿素?如何篩選?

3、填表①允許特定微生物生長,同時阻止或抑制其他種類微生物生長的培養(yǎng)基

果酒果醋腐乳泡菜②因為尿素分解細(xì)菌可以分泌服酶,將尿素分解產(chǎn)生NH3,為其提供氮源

發(fā)酵菌酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌③配置以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基,接種樣品進(jìn)行篩選

真核原核真核原核真核原核14、計數(shù)微生物的方法?兩種方法的比較

代謝類型異養(yǎng)兼性厭氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)厭氧型①稀釋涂布平板法(活菌計數(shù)法)、顯微鏡直接計數(shù)法(用血球計數(shù)板或細(xì)菌計數(shù)板)

②()稀釋涂布平板法計數(shù),能直接區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞,但是計數(shù)結(jié)果偏少

產(chǎn)物酒精+CO2醋酸乳酸1

()顯微鏡直接計數(shù)法,不能直接區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞,除非用染色劑,如臺盼藍(lán)

需氧情況先有氧后無氧有氧有氧無氧2

15、稀釋涂布平板法計數(shù)的原理?結(jié)果偏小的原因是什么?

溫度18-30°C30-35°C15?18°C常溫

①當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個單菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌

檢測方法聞氣味、品嘗、酸性聞氣味、品嘗、聞氣味、品嘗、

②當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落

條件下的重鋁酸鉀pH試紙檢測pH試紙檢測

、稀釋涂布平板法計數(shù)時為什么選擇菌落數(shù)穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果?

(橙色一灰綠色)16

防止因培養(yǎng)時間不足,導(dǎo)致菌落遺漏

4、寫出果酒釀制的反應(yīng)式;果醋反應(yīng)式(糖源不充足的)青況)酶

、發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)是什么?發(fā)酵時要隨時檢測什么?要嚴(yán)格控制什么?

果酒:C6H12O6—雪2c2HQH+2c+能量,果醋:C2H5OH+O2與-CH3COOH+H2O+能量17

①發(fā)酵②隨時檢測培養(yǎng)液中微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等③嚴(yán)格控制溫度、pH、溶解氧等

5、果酒的制作中菌種來源?每隔12h排一次二氧化碳,如何操作?

18、發(fā)酵產(chǎn)品可以是什么?單細(xì)胞蛋白是什么?

①果皮表面附著的不同種類的野生型酵母菌②擰松瓶蓋

①發(fā)酵產(chǎn)品可以是微生物細(xì)胞本身、微生物的代謝物

6、培養(yǎng)基的成分一般都含有什么?根據(jù)物理狀態(tài)可分為?區(qū)別是什么成分?

②大量的微生物菌體

①培養(yǎng)基一般都含有水、無機(jī)鹽、碳源、氮源②固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基

③區(qū)別是是否含有瓊脂第2章細(xì)胞工程

7、無機(jī)碳源可以培養(yǎng)什么微生物?不加氮源可以培養(yǎng)什么生物?培養(yǎng)細(xì)菌一般培養(yǎng)基PH要呈?

植物細(xì)胞工程

①無機(jī)碳源可以培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物②不加氮源可以培養(yǎng)固氮菌

1、植物組織培養(yǎng)的過程

③一般培養(yǎng)基PH要呈中性或弱堿性

8、消毒的原理,及常見方法及對應(yīng)物品?外植體典鷲愈傷組織型&根、芽等器官生長雪完整植株

消毒是用較溫和的物理、化學(xué)、生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物

2、植物組織培養(yǎng)中生長素和細(xì)胞分裂素比值對誘導(dǎo)結(jié)果的影響?

巴氏消毒法牛奶等不耐高溫的液體(能殺死牛奶中絕大多數(shù)微生物,并且基本不會破會牛奶

①比值高有利于根的分化②比值低有利于芽的分化③比值適中促進(jìn)形成愈傷組織

的營養(yǎng)成分)

3、植物組織培養(yǎng)的過程哪個階段不需要光照?

煮沸消毒法家庭餐具等

脫分化,即形成愈傷組織的階段

紫外線消毒接種室、超凈工作臺等

4、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)中,去除細(xì)胞細(xì)胞壁用什么?誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有哪些?體細(xì)胞雜交

化學(xué)藥劑消毒皮膚、傷口等

的原理是什么?植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的優(yōu)點?

9、滅菌的原理,及常用的方法及對應(yīng)物品?

①去除植物細(xì)胞壁用纖維素酶和果膠酶

滅菌是用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽抱和狗子

②誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有:離心、電融合、PEG、高Ca?+-高pH.

灼燒滅菌接種環(huán)、涂布器、試管口及金屬用具

③體細(xì)胞雜交的原理是:細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞全能性

干熱滅菌耐高溫的、需要保持干燥的物品如玻璃器皿、金屬用具等

④植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的優(yōu)點是打破生殖隔離,實現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種

濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)培養(yǎng)基

5、培養(yǎng)脫毒苗的原理?

10、倒平板后為什么要倒置?

植物頂端分生區(qū)附近的病毒極少,甚至無病毒

6、單倍體育種的步驟和原理及優(yōu)點?證明了已經(jīng)分化的動物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性

①步驟:先花藥離體培養(yǎng),再用秋水仙素加倍12、受精的準(zhǔn)備包括什么?受精的場所?人工配置的精子獲能液的有效成分?

②原理:植物細(xì)胞的全能性和染色體變異①包括精子的獲能和卵子的成熟(MII期)②受精的場所是輸卵管③肝素和Ca?+載體

③優(yōu)點:明顯縮短育種年限;一般培育出的是穩(wěn)定遺傳的純合子14、防止多個精子進(jìn)入卵細(xì)胞的兩個反應(yīng)分別是?

7、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)中,一般培養(yǎng)到哪個階段?透明帶發(fā)生生理反應(yīng)、卵細(xì)胞膜發(fā)生生理反應(yīng)

一般將外植體脫分化形成愈傷組織,再將愈傷組織制成細(xì)胞懸液進(jìn)行培養(yǎng),提取產(chǎn)物15、受精的標(biāo)志?受精完成的標(biāo)志?

動物細(xì)胞工程受精的標(biāo)志:觀察到2個極體或者雌、雄原核

1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件有哪些?受精完成的標(biāo)志:雌雄原核融合

(1)營養(yǎng)條件:除各種營養(yǎng)物質(zhì)外還要加血清等天然成分16、早期胚胎發(fā)育的特點?什么時期開始分化?

(2)無菌無毒:培養(yǎng)液和用具無菌處理,定期更換培養(yǎng)液,以便清除代謝廢物,防止細(xì)胞代謝物積細(xì)胞數(shù)量不斷增加,胚胎總體積并不增加。囊胚期開始分化

累對細(xì)胞造成危害17、囊胚的結(jié)構(gòu)?

(3)溫度、pH和滲透壓:溫度:36.5pH7.2-7.4滋養(yǎng)層(發(fā)育為胎盤和胎膜)、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)

(4)氣體環(huán)境:95%空加5%CO2,CO2主要維持培養(yǎng)液的pH。18、什么叫孵化?

2、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞的兩種生長方式是?哪一種是常見類型?囊胚從透明帶中伸展出來

懸浮生長和貼壁生長;貼壁生長19、胚胎移植前要對供體和受體進(jìn)行什么處理?為什么?如何處理?

3、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,懸浮生長和貼壁生長的細(xì)胞分裂受阻的原因分別是?①進(jìn)行同期發(fā)情處理②保證供體與受體的生理狀態(tài)一致③用性激素處理

懸浮生長:細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累、培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏20、供體母牛還要進(jìn)行什么處理?如何處理?

貼壁生長:細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累、培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏、接觸抑制①超數(shù)排卵②用促性腺激素

4、懸浮生長和貼壁生長的細(xì)胞分裂受阻后進(jìn)行分瓶培養(yǎng),怎么收集細(xì)胞?分瓶后的培養(yǎng)叫什么?21、胚胎移植的優(yōu)勢?

①懸浮生長:離心法收集貼壁生長:先用胰蛋白酶處理,再離心法收集②分瓶后叫傳代培養(yǎng)充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力

5、干細(xì)胞的種類?干細(xì)胞的來源?誘導(dǎo)iPS的方法有?22、胚胎分割可選擇什么階段的胚胎?需要注意的問題是?

胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等①發(fā)育良好的桑甚胚或囊胚②選擇囊胚階段的胚胎時,要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割

胚胎干細(xì)胞來源于早期胚胎,成體干細(xì)胞中的造血干細(xì)胞來源于骨髓和臍帶血、外周血等23、通過胚胎分割產(chǎn)生的胚胎是什么繁殖方式?若進(jìn)行性別鑒定,選擇什么細(xì)胞?

借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞;直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞;用小分子化合物誘導(dǎo)①屬于無性繁殖或者克隆②選擇滋養(yǎng)層細(xì)胞

6、傳統(tǒng)方法如何生產(chǎn)抗體?生產(chǎn)抗體的缺點是?

從動物血清中分離產(chǎn)量低、純度低、特異性差

7、單克隆抗體的制備中第一次、第二次篩選分別用什么方法?

①第一次篩選:用特定的選擇培養(yǎng)基,只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長第3章基因工程

②第二次篩選:克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。技術(shù):抗原一抗體

1、基因工程的操作原理、操作對象、操作水平、優(yōu)點分別是什么?

雜交技術(shù)

操作原理一基因重組;操作對象一基因;操作水平一分子水平;

8、單克隆抗體的優(yōu)點?

優(yōu)點:定向改造生物的性狀,打破生殖隔離

①能準(zhǔn)確地識別抗原的細(xì)微差異②與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合③可大量制備

2、基因工程的三種工具分別是什么?

9、單克隆抗體的應(yīng)用?

限制酶、DNA連接酶、載體

①作為診斷試劑盒②運載藥物,如ADC③治療疾病

3、限制酶的來源?作用的結(jié)果是什么?為什么不切割原核細(xì)胞中的DNA?

10、誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有?

來源主要來自原核生物;結(jié)果是產(chǎn)生黏性末端或平末端;

PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法

含某種限制酶的細(xì)菌的DNA分子不具備這種限制酶的識別序列,或者甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到了限制

10.1、核移植技術(shù)中,受體細(xì)胞選擇Mil期卵母細(xì)胞的原因?

酶所識別序列的堿基上,使限制酶不能將其切開

細(xì)胞體積大,易操作;卵母細(xì)胞中含有激活細(xì)胞全能性表達(dá)所需的物質(zhì)

4、DNA連接酶的作用和種類?

10.2激活重構(gòu)胚的方法?

電刺激、Ca"載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑①作用:將兩個DNA片段連接起來,恢復(fù)被限制酶切開的兩個核昔酸之間的磷酸二酯鍵。

11、動物克隆的成功證明了?②種類:E.coliDNA連接酶,來源于大腸桿菌,只能將具有互補黏性末端的DNA片段連接起來

T4DNA連接酶,來源于T4噬菌體,既可以連接黏性末端,又可以連接平末端,但連接③延伸:當(dāng)溫度上升到72℃左右時,4種脫氧核昔酸在耐高溫的DNA聚合酶的作用下合

平末端的效率相對較低成新的DNA鏈

(2)鑒定:常采用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物

5、能做用于磷酸二酯鍵的酶有哪些?作用于氫鍵的酶有哪些?13、基因表達(dá)載體構(gòu)建的目的是什么?

DNA聚合酶、DNA連接酶、限制酶、DNA水解酶、逆轉(zhuǎn)錄酶;氫鍵的酶是DNA解旋酶讓目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用

6、載體的種類有哪些?14、基因表達(dá)載體的組成包括什么?

質(zhì)粒、噬菌體、動植物病毒等

目的基因

7、常用載體一質(zhì)粒的本質(zhì)是什么?

「位置:位于基因的醺

質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于真核細(xì)胞細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外,并具有自我啟動子《功能:是典塞食迷識別和結(jié)合的部

復(fù)制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子位,癡基因轉(zhuǎn)錄出

復(fù)制原點IjmRNA

8、質(zhì)粒作為載體所具備的條件及原因

.位置:位于基因的下游

終止子

條件原因功能:終止轉(zhuǎn)錄

穩(wěn)定存在并能自我復(fù)制或整合到受體DNA上能使目的基因穩(wěn)定存在且數(shù)量可擴(kuò)增標(biāo)記基因:便于重組DNA分子的篩選

有一個至多個限制酶切割位點可攜帶多個或多種外源基因

15、基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程是什么?

具有特殊的標(biāo)記基因便于重組DNA分子的篩選

(1)首先用一定的限制酶切割載體

對受體細(xì)胞無毒害作用,避免受體細(xì)胞

無毒害作用(2)然后用同種限制酶或能產(chǎn)生相同末端的限制酶切割含有目的基因的DNA片段

受到損傷

(3)再利用DNA連接酶將含目的基因的DNA片段拼接到載體的切口處

16、用不同的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因的優(yōu)點是什么?

9、基因工程的基本操作程序是?

可以防止質(zhì)粒和目的基因的自身環(huán)化;以及目的基因與載體的反向連接

(1)目的基因的篩選與獲取

17、將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞的方法和常用的受體細(xì)胞?

(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建

①方法:顯微注射技術(shù)

(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞

②受體細(xì)胞:受精卵

(4)目的基因的檢測與鑒定

18、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法和常用的受體細(xì)胞

10、獲取目的基因的方法有什么?

①常以大腸桿菌作為受體細(xì)胞

(1)人工合成目的基因

②一般先用Ca2+處理大腸桿菌細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀

⑵常用PCR特異性地快速擴(kuò)增目的基因

態(tài),然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。

⑶通過構(gòu)建基因文庫來獲取目的基因

19、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有哪些?

11、PCR的原理和需要的基本條件分別是什么?

①花粉管通道法(我國科學(xué)家獨創(chuàng))

(1)DNA半保留復(fù)制。

②農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(主要適用于雙子葉和裸子植物)

(2)基本條件

a.轉(zhuǎn)化:目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。

①場所:一定的緩沖溶液中,一般要添加Mg?+

b.原理:農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)含有Ti質(zhì)粒,當(dāng)它侵染植物細(xì)胞后,能將Ti質(zhì)粒上的T-DNA(可轉(zhuǎn)

②模板:DNA母鏈

移的DNA)轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞,并且將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上

③原料:4種脫氧核甘酸

④酶:耐高溫的DNA聚合酶

⑤引物:2種

12、PCR的過程和產(chǎn)物的鑒定分別是?

20、目的基因的檢測與鑒定如何進(jìn)行?

(1)過程

(1)分子水平的檢測

①變性:當(dāng)溫度超過90℃時,雙鏈DNA解聚為單鏈

①通過PCR等技術(shù)檢測受體細(xì)胞的染色體DNA上是否插入了目的基因

②復(fù)性:當(dāng)溫度下降到50℃左右時,兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合

②利用PCR技術(shù)檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA

③用相應(yīng)抗體進(jìn)行抗原一抗體雜交檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)等

(2)個體生物學(xué)水平的鑒定;抗蟲、抗病接種實驗等⑴生殖性克?。和ㄟ^克隆技術(shù)產(chǎn)生獨立生存的新個體

19、乳腺生物反應(yīng)器的構(gòu)建,受體細(xì)胞是什么?有什么限制?⑵治療性克隆:利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官,用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、

受體細(xì)胞是受精卵;發(fā)育出的個體必須是雌性個體

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