肝膽疾病實驗室檢查課件

肝膽疾病實驗室檢查肝膽疾病實驗室檢查肝膽疾病實驗室檢查肝臟的主要生理功能

1、代謝功能(MetabolicFunction)2、排泄功能(ExcretionFunction)3、解毒功能(DetoxificationFunction)4、生成凝血和纖溶因子,纖溶抑制因子,清除活性凝血因子。肝膽疾病實驗室檢查肝臟實驗室檢查的主要目的了解肝細(xì)胞有無損傷及損傷程度動態(tài)觀察肝臟功能,了解病情的變化，治療效果和預(yù)后評估。協(xié)助診斷肝臟疾病（病毒性、肝炎、肝癌）協(xié)助判斷病原、病種和病型等。評價某些病人對一些手術(shù)的耐受力和用藥監(jiān)護(hù)。肝膽疾病實驗室檢查

患者王某，男，32歲，公司職員。因乏力，食欲不振，惡心，肝區(qū)不適2w而來診。既往健康，否認(rèn)肝炎接觸史。體檢:T，P，R，Bp均正常。一般狀況尚可，鞏膜黃染。心肺未見異常。腹軟，肝右肋下2.0cm，質(zhì)地稍韌，觸痛（＋），脾未觸及。實驗室檢查：血液一般檢查：RBC4.7×1012/L，Hb135g/L，WBC8.5×109/L；生化檢查：TP70g/L，ALB46g/L，GLB24g/L；ALT880U/L，AST90U/L，T-Bil110μmol/L，D-Bil40μmol/L。

尿液檢查：色黃，尿膽紅素定性（＋），尿膽原3.0μmol/L。病例肝膽疾病實驗室檢查

問：

1.根據(jù)以上資料，該患初步應(yīng)考慮為何種診斷？為什么？

2.為了明確診斷，還應(yīng)該做那些檢查？病例肝膽疾病實驗室檢查答案及病例分析

初步診斷：急性黃疸性肝炎

根據(jù)：1臨床癥狀和體征，病史

2實驗室檢查●蛋白檢查（TP，ALB，GLB均正常）●酶學(xué)檢查（ALT，AST均升高）●膽紅素檢查（肝細(xì)胞性黃疸）

應(yīng)進(jìn)一步檢查：

1.肝炎病毒血清標(biāo)志物（病因）

2.ALP，GGT（了解有無膽汁淤滯）

3.自身免疫性肝炎標(biāo)志物(病因)病例肝膽疾病實驗室檢查Examinationofenzymes1、檢查反映肝細(xì)胞有無損傷的酶

如:ALT(GPT)、AST(GOT)...2、檢查反映肝細(xì)胞合成功能的酶如:膽堿脂酶...3、檢查反映膽汁有無淤積的酶如:ALP、GGT、5'-NT...肝膽疾病實驗室檢查一、Examinationofenzymes

1、血清轉(zhuǎn)氨酶的測定

丙氨酸氨基移換酶

(AlanineAminotransferase,ALT)

天門冬氨酸氨基移換酶

(AsparateAminotransferase,AST)肝膽疾病實驗室檢查酶法sASTsALT30℃

＜30IU/L

＜30IU/L37℃

＜45IU/L

＜40IU/L

ReferenceInterval肝膽疾病實驗室檢查正常人組織中轉(zhuǎn)氨酶含量U/g或U/ml肝膽疾病實驗室檢查血清ALT

的臨床意義

(1)急性病毒性肝炎

(2)慢性病毒性肝炎

(3)自身免疫性肝炎

(4)肝硬化、肝癌

(5)其他肝膽疾病實驗室檢查AST/ALTRatio

血清中AST/ALT比值約為1.15/1

肝臟中AST/ALT比值約為2.5/1肝細(xì)胞早期損傷血中ALT比AST水平高

ALT易于透過肝細(xì)胞膜

ALT在血中的半壽期比AST要長

ALT大部分在細(xì)胞漿,AST的60%在細(xì)胞漿肝膽疾病實驗室檢查ChangesofAST/ALTRatio（1）急性肝炎早期輕度肝細(xì)胞損傷

ALT＞AST（2）慢性肝炎活動期：ALT＞AST

隨病情好轉(zhuǎn),AST/ALT逐漸恢復(fù)正常（3）肝纖維化、肝癌、阻塞性黃疸可有AST＞ALT

肝膽疾病實驗室檢查

ALT與黃疸分離現(xiàn)象

嚴(yán)重肝損傷時,

血清Bili.逐漸↑,而sALT逐漸↓，

表明有大量肝細(xì)胞的死亡。肝膽疾病實驗室檢查IsoenzymesofAST

肝細(xì)胞內(nèi)AST同工酶

(1)AST(c):60%存在于胞漿中

(2)AST(m):40%存在于線粒體中正常人血中90%是胞漿中的AST。臨床意義

肝膽疾病實驗室檢查

注意事項

紅細(xì)胞中AST和ALT分別為血清含量的15倍與7倍,故明顯溶血標(biāo)本可干擾測定。肝膽疾病實驗室檢查2、乳酸脫氫酶及同工酶乳酸脫氫酶

(LactateDehydrogenase,LDandLDisoenzyme)廣泛存在于心、腎、肝、肺等多種組織之中。LDandLDIsoenzyme

肝膽疾病實驗室檢查LDIsoenzymeLD1LD2LD3LD4LD5亞基組成H4H3M1H2M2H1M3M4存在組織心肌腎RBC心肌腎RBC腦肺腎膀胱肝臟參考值

(%)25-3232-4218-246-102-8

肝膽疾病實驗室檢查

正常人血清LD同工酶水平

LD2＞LD1＞LD3＞LD4＞LD5

注意事項

因為紅細(xì)胞內(nèi)有LD,

溶血標(biāo)本干擾測定。

肝膽疾病實驗室檢查惡性腫瘤：LD總活力↑肝臟疾病：LD5↑

血清LD同工酶檢查的臨床意義肝膽疾病實驗室檢查溶血性貧血LD1、LD

2

心肌梗死

LD1

、LD2

肺梗塞LD

3

肝膽疾病實驗室檢查

3、堿性磷酸酶

(AlkalinePhosphatase,ALP)

1、分布

ALP廣泛存在于多種組織之中如:肝臟、骨骼、腸、胎盤等

2、ReferenceInterval

成年人20～115U/L

肝膽疾病實驗室檢查

ALP的生理性升高２、妊娠3個月胎盤可產(chǎn)生ALP,妊娠

9個月為同齡婦女水平的3-4倍。1、血清ALP水平↑;1-5歲是成人水平的2-4倍;10-18歲是成人水平的4-5倍;臨床意義；ALP病理性增高；肝膽管梗阻骨骼系統(tǒng)疾病肝膽疾病實驗室檢查ALPIsoenzyme肝膽疾病實驗室檢查

臨床意義

(1)

膽道梗阻時,原發(fā)或轉(zhuǎn)移性肝癌時血GGT↑。急、慢性酒精性肝炎,乙醇誘導(dǎo)微粒體生物轉(zhuǎn)化系統(tǒng),使血GGT↑。

(2)系統(tǒng)性紅斑狼瘡、單核細(xì)胞增多癥等患者血GGT↑。

(3)

某些藥物如抗癲癇藥、鎮(zhèn)靜藥等可使血

GGT↑,停藥可恢復(fù)。4、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶

(γ-glutamyltranspeptidase,GGT)肝膽疾病實驗室檢查(4)

肝炎

急性肝炎:

早期血GGT↑,恢復(fù)期比ALT下降慢,

可提示急性肝炎尚沒有痊愈。慢性肝炎:

如血清GGT有持續(xù)性↑一般表示病情不穩(wěn)或惡化。肝膽疾病實驗室檢查5、假性膽堿脂酶

（Pseudocholinesterase,PCHE

）

機(jī)體中膽堿脂酶分為二類

真性膽堿脂酶(ACHE，乙酰膽堿脂酶)

存在于RBC、肺、腦、交感神經(jīng)節(jié)

假性膽堿脂酶(PCHE,丁酰膽堿脂酶)PCHE是一種糖蛋白，由肝臟合成分布在血中。肝膽疾病實驗室檢查臨床意義

嚴(yán)重肝病時，血中PCHE↓與肝病變程度成正比。PCHE水平持續(xù)↓,提示預(yù)后不良。遺傳性PCHE病、營養(yǎng)不良、有機(jī)磷中毒時也可有血PCHE↓。

注意事項

標(biāo)本不能溶血,避免紅細(xì)胞內(nèi)CHE

干擾測定。肝膽疾病實驗室檢查

ALT、GGT和PCHE的檢查可作為肝病的實驗室酶學(xué)過篩試驗有文獻(xiàn)報道三種試驗聯(lián)合應(yīng)用，其肝病檢查陽性率可達(dá)99%。

ALT：反映有無肝細(xì)胞損傷

GGT：反映有無膽汁淤積

PCHE：反映肝臟蛋白質(zhì)合成功能肝膽疾病實驗室檢查來源

(1)衰老或死亡的RBC代謝產(chǎn)生：

(網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)破壞釋放入血)為主(2)骨髓無效造血:少部分(3)其它:如肌紅蛋白、過氧化物酶等

(很少)

二、Bilirubin肝膽疾病實驗室檢查2、膽紅素性質(zhì)UCBCB化學(xué)結(jié)構(gòu)未與UDPGA結(jié)合與UDPGA結(jié)合物理性質(zhì)非極性極性重氮試劑反應(yīng)不直接反應(yīng)直接反應(yīng)與組織親合力比較高（蛋白非結(jié)合）低尿中無可出現(xiàn)T-Bili結(jié)合Bili非結(jié)合Bili

蛋白結(jié)合Bili蛋白非結(jié)合Bili與白蛋白dBcmBc

共價鍵

葡萄糖醛酸

HPLC

T-Bili間接Bili直接Bili

蛋白非結(jié)合Bili蛋白結(jié)合Bili

J-G

HPLC

3、膽紅素的分類

肝膽疾病實驗室檢查4、ReferenceInterval

重氮試劑測定血清膽紅素總膽紅素1.7-20μmol/L直接膽紅素0-6.8μmol/L尿膽紅素陰性尿膽原＜3.5g/日

總膽紅素(TotalBilirubin,TB)

間接膽紅素=TB-直接膽紅素肝膽疾病實驗室檢查5、臨床意義總膽紅素間接膽紅素直接膽紅素健康人1.7-20μmol/L1.7-13.7μmol/L0-6.8μmol/L溶血性黃疸↑↑↑微↑或正常肝細(xì)胞黃疸↑↑↑梗阻性黃疸↑微↑或正?！R床上常見黃疸類型的鑒別(血）肝膽疾病實驗室檢查臨床常見黃疸類型鑒別（尿）

顏色尿膽原尿膽紅素健康人淡黃1：4(-)溶血性黃疸加深(++)(-)肝細(xì)胞性黃疸加深(+)(+)梗阻性黃疸深黃褐色(-)(++)BilirubinuriaHemoglobinuriaHematuriaPyuria

肝膽疾病實驗室檢查

臨床意義

新生兒生理性黃疸:

出生在24h后至一周內(nèi)血清總膽紅素

12mg/dl,直接膽紅素1.0mg/dl。原因(1)RBC破壞過多

(2)新生兒葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶不足

(3)新生兒肝細(xì)胞中Y蛋白不足

(4)新生兒的腸肝循環(huán)增加肝膽疾病實驗室檢查

臨床意義遺傳性黃疸的疾病

Grigler-Najjar、Gilber綜合癥患者由于葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶缺乏或減少,血清總、直膽紅素結(jié)果雷同

Rotor、Dubin-Johnson綜合癥患者由于肝細(xì)胞向毛細(xì)膽管排泄膽紅素異常，血清總、直膽紅素結(jié)果雷同溶血性黃疸。梗阻性黃疸。肝膽疾病實驗室檢查

三、血清總膽汁酸

(TotalBileAcid)

肝細(xì)胞膽固醇

初級膽汁酸

次級膽汁酸體外膽酸（CA)

脫氧膽酸(DCA)

鵝脫氧膽酸（CDCA)石膽酸(LCA)

熊脫氧膽酸（UDCA)腸道細(xì)菌

腸-肝循環(huán)肝膽疾病實驗室檢查

臨床意義

(1)急性肝炎、慢性活動性肝炎：肝內(nèi)毛細(xì)膽管損傷，膽汁酸進(jìn)入血液。

(2)膽汁淤積綜合癥肝內(nèi)外膽汁淤積，膽汁排泌障礙。

ReferenceInteral

總膽汁酸＜10μmol/L肝膽疾病實驗室檢查四、血漿蛋白質(zhì)功能

維持血液的正常膠體滲透壓和pH值運(yùn)輸多種物質(zhì)：如維生素、脂肪、金屬、微量元素、激素、藥物…

免疫功能：抗體和補(bǔ)體…

凝血和纖溶營養(yǎng)肝膽疾病實驗室檢查1、血清蛋白測定

總蛋白(Totalprotein,TP)

白蛋白(Albumin,A)

球蛋白(Globulin,G)

白蛋白/球蛋白比值(A/G)肝膽疾病實驗室檢查ReferenceIntervalTP60～82g/LA35～52g/LG20～30g/LA/G1～2/1血清球蛋白(G)=TP-A肝膽疾病實驗室檢查

2、血清蛋白電泳

serumelectrophoresis

(1)

原理:

各種蛋白質(zhì)所帶電荷、等電點不同，蛋白質(zhì)分子大小不同，在電場中的遷移率不同?？蓪⒀逯械牟煌鞍踪|(zhì)分開。

肝膽疾病實驗室檢查正常血清蛋白電泳圖譜電泳圖譜光密度掃描圖譜蛋白質(zhì)組分肝膽疾病實驗室檢查ReferenceInterval

(醋酸纖維膜法)種類白蛋白α1球蛋白α2球蛋白β球蛋白γ球蛋白

%62～702～56～107～1510～20

(瓊脂糖凝膠電泳)%48～

642.5～5.48.3～148.7～1512～15

血清白蛋白減少，γ球蛋白增加是肝病血清蛋白電泳的特征。肝膽疾病實驗室檢查

惡性腫瘤

Alb

、

1、2

肝病Alb、

1、

2、

-globulin-globulin

肝病的蛋白電泳圖肝膽疾病實驗室檢查Alb

or

1、2、

形成

-橋(IgAorIgM)A/G倒置

1、多發(fā)性骨髓瘤

2、巨球蛋白血癥

3、良性單克隆免疫球蛋白增生癥肝膽疾病實驗室檢查

3、血清前白蛋白

（SerumPrealbumin,PA)

由肝細(xì)胞合成，分子量6萬KD，電泳時在白蛋白前。其半壽期為1天左右，半壽期短。

PA是載體蛋白，可與T3、T4、視黃醇結(jié)合。肝膽疾病實驗室檢查

患者，男性，48歲。主因“上腹飽脹不適、納差乏力1個月余”入院?，F(xiàn)病史：患者1個月前感到上腹飽脹不適，食欲減退，偶有惡心，服用“胃藥”多次未見好轉(zhuǎn)，乏力明顯，體重較前明顯減輕，近1周來牙齦時有出血。

既往史：2年前發(fā)現(xiàn)乙肝“大三陽”(HBsAg、HBeAg和抗HBc陽性)。否認(rèn)煙酒嗜好。查體：肝大，質(zhì)硬，有結(jié)節(jié)，移動性濁音陽性。脾大，質(zhì)中，雙下肢凹陷性水腫。肝膽疾病實驗室檢查

五、肝纖維化檢查

肝纖維化是肝硬化前期的必經(jīng)階段，其病理改變是肝臟中肝細(xì)胞數(shù)量和所占空間減少，間質(zhì)細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)含量增加。

檢查

Ⅲ型前膠原、Ⅳ型膠原

項目層粘連蛋白、透明質(zhì)酸肝膽疾病實驗室檢查

1、Ⅲ型前膠原、Ⅳ膠原

肝及間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的Ⅲ型前膠原,

肝細(xì)胞膠原合成，血中P-Ⅲ-P

。

Ⅳ型膠原是基底膜的主要成分，在肝纖維化時，Ⅳ型膠原的合成量

。參考值：＜140ng/ml（EIA）肝膽疾病實驗室檢查2、層粘連蛋白

(Laminin,LN)

LN又稱板層素，存在于組織基底膜，是非膠原性糖蛋白，它與Ⅳ型膠原構(gòu)成基底膜的主要成分。

3、透明質(zhì)酸(Hyaluronicacid,HA)HA由成纖維細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞合成經(jīng)淋巴入血,主要在肝臟代謝，血HA水平變化可反映肝臟病變和肝纖維化情況。

肝膽疾病實驗室檢查

HBV肝炎免疫學(xué)檢測

HBV肝炎核酸檢測

血HBV-DNA定量檢測

(雜交捕獲法、定量PCR法)

HBsAgHBcAg

HbeAg

DNA肝膽疾病實驗室檢查

血清中不同HBV標(biāo)志物的臨床意義

HBsAganti-Hbsanti-HBcHBeAganti-HbeDNA

意義

+-++-+病毒活動

+-+-+/-+病毒活動

+-+-+/--正在消退的急性

肝炎健康攜帶者

-++-+/--自然感染后的免疫

-+----疫苗接種后的免疫

肝膽疾病實驗室檢查急性乙肝病毒感染的康復(fù)

AcuteHepatitisBVirusInfectionwithRecoverySymptoms癥狀HBeAganti-HBeTotalanti-HBcIgManti-HBcanti-HBsHBsAg0481216202428323652100

暴露時間（周）抗原抗體滴度肝膽疾病實驗室檢查急性乙肝病毒感染發(fā)展為慢性感

AcuteHepatitisBVirusInfectionwithProgressiontoChronicInfection

IgManti-HBcTotalanti-HBcHBsAg急性(6months)（6月)HBeAg

慢性(Years)(多年)anti-HBe0481216202428323652Years

暴露時間（周）抗原抗體滴度肝膽疾病實驗室檢查

檢驗單報告形式：

<103copies/ml（低于檢測敏感性，無擴(kuò)增曲線）

4x106copies/ml

肝膽疾病實驗室檢查

HCV的檢測

方法:(1)HCV抗體

(2)HCV-RNA(定量RT-PCR或探針法)

報道

windowofHCV-RNAafterinfection11-13days(detectHCV-RNA)13-14days(detectHCV-Ag)70days(3代）(detectHCV-Ab)

肝膽疾病實驗室檢查

檢測HCV-RNA的優(yōu)點1、HCV-RNA可作為有無傳染的直接指標(biāo)。2、可早期檢出，如；獻(xiàn)血員的早期檢測，保證安全輸血。3、可檢測組織、體液和血液中RNA。4、HCV有6個亞型，各型對干擾素的治療的效果不同。通過監(jiān)測病毒滴度反映療效肝膽疾病實驗室檢查臨床一般選擇原則健康體檢

ALT、AST:有無肝細(xì)胞損傷

HbsAg:有無乙型肝炎病毒感染進(jìn)一步:血清膽紅素、血清蛋白等。一般肝功能檢查:GGT、ALP、LD、PCHE血清蛋白等。肝膽疾病實驗室檢查肝炎(1)膽紅素（TB/DB):

黃疸或非黃疸、尿膽原/尿膽紅素(2)血清GGT、LD、ALP

了解肝細(xì)胞損傷情況和有無膽汁淤積。(3)肝炎相關(guān)抗原抗體的免疫學(xué)檢查判斷為哪種類型的肝炎。(4)血清自身抗體的檢查，判斷是否自身免疫性肝炎?？购丝贵w、線粒體抗體心肌抗體、平滑肌抗體胃壁細(xì)胞抗體線粒體抗體M2亞型抗肝腎微粒體抗體肝膽疾病實驗室檢查

原發(fā)性肝細(xì)胞癌

檢查血清AFP和CEAGGT、ALP等

肝纖維化

血清P-Ⅲ-P、Ⅳ膠原、LA、HA等肝膽疾病實驗室檢查1、肝細(xì)胞早期輕度損傷時，血清中哪種酶最敏感?AAST

BALTCGGTDLDEALP2、紅細(xì)胞中的ALT是血清中含量的多少倍？

A7倍

B10倍

C12倍

D15倍

E