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PAGE11-微生物的基本培育技術(shù)【合格考全員做】(學(xué)業(yè)水平一、二)1.下列關(guān)于培育基的說法,正確的是()A.任何培育基都必需含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水B.培育基只有兩類:液體培育基和固體培育基C.固體培育基中加入少量水即可制成液體培育基D.配制培育基時要留意各種組分的濃度和比例2.下列關(guān)于微生物的養(yǎng)分的說法,正確的是()A.同一種物質(zhì)不行能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能供應(yīng)能量C.除水以外的無機(jī)物僅供應(yīng)無機(jī)鹽D.無機(jī)氮源也可能供應(yīng)能量3.自養(yǎng)微生物與異養(yǎng)微生物的培育基的主要差別是()A.碳源B.氮源C.無機(jī)鹽D.特別養(yǎng)分物質(zhì)4.下表為某培育基的配方,有關(guān)敘述正確的是()成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4瓊脂蒸餾水含量10g10g2g適量定容至1000mLA.能在此培育基上生長的只有大腸桿菌B.該培育基調(diào)整合適的pH后就可以接種運(yùn)用C.該培育基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,屬于氮源的物質(zhì)是牛肉膏D.從物理性質(zhì)看該培育基屬于液體培育基5.下列操作與消毒或滅菌無關(guān)的是()A.接種前用酒精燈火焰灼燒接種環(huán)B.接種前用酒精擦拭雙手C.將平板倒置,放入培育箱中培育D.在酒精燈的火焰旁完成接種6.培育基、培育皿、接種針、試驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采納的滅菌或消毒方法依次是()①化學(xué)藥物消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線消毒⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒A.⑤③②①④⑥B.①②③④⑤⑥C.⑥②③④①⑤D.③④②①⑥⑤7.下列有關(guān)倒平板操作的敘述,錯誤的是()A.將滅過菌的培育皿放在火焰旁的桌面上B.使打開的錐形瓶瓶口快速通過火焰C.將培育皿打開,培育皿蓋倒放在桌面上D.等待培育基冷卻凝固后須要倒過來放置8.將接種后的培育基和一個未接種的培育基都放入37℃恒溫箱的目的是()A.對比視察培育基有沒有被微生物利用B.對比分析培育基是否被雜菌污染C.沒必要放入未接種的培育基D.為了下次接種時再運(yùn)用9.下列關(guān)于平板劃線操作的敘述,錯誤的是()A.每次劃線前都要灼燒接種環(huán)B.灼燒接種環(huán)后,要馬上用接種環(huán)接種,防止雜菌污染接種環(huán)C.要在酒精燈火焰旁進(jìn)行D.接種前,要將菌種試管口通過火焰10.某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染狀況而進(jìn)行了試驗(yàn)。試驗(yàn)包括制備培育基、滅菌、接種及培育、菌落視察、計數(shù)。請回答與此試驗(yàn)相關(guān)的問題:(1)培育基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌的培育供應(yīng)了________和________。除此之外,培育基還必需含有的基本成分是________和________。(2)對培育基進(jìn)行滅菌,應(yīng)當(dāng)采納的方法是________________。(3)為了盡快視察到細(xì)菌培育的試驗(yàn)結(jié)果,應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于____________中培育,培育的溫度設(shè)定在37℃。要使該試驗(yàn)所得結(jié)果牢靠,還應(yīng)當(dāng)同時在另一平板上接種________作為比照進(jìn)行試驗(yàn)。(4)培育20小時后,視察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落,這說明湖水樣品中有________種細(xì)菌。一般來說,菌落總數(shù)越多,湖水遭遇細(xì)菌污染的程度越________?!镜燃壙歼x學(xué)做】(學(xué)業(yè)水平三、四)11.下列關(guān)于制備固體培育基時倒平板的敘述,正確的是()A.倒好的培育基和培育皿要進(jìn)行干熱滅菌B.應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊,以免培育基濺到皿蓋上C.為防止微生物侵入培育基,要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作D.倒好培育基后,馬上將平板倒過來放置,不須要冷凝12.下圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的依次為1→2→3→4→5。下列操作方法正確的是()A.操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B.劃線操作應(yīng)在火焰上進(jìn)行C.在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌13.(多選)下列有關(guān)平板劃線法的操作,正確的是()A.運(yùn)用已滅菌的接種環(huán)、培育皿,操作過程中不再滅菌B.打開含菌種的試管需通過火焰滅菌,取出菌種后需立刻塞上棉塞C.不能將最終一次的劃線與第一次的劃線相連D.最終將平板倒置,放入恒溫培育箱中培育14.(多選)如圖為酵母菌純培育過程中的部分操作步驟,下列說法正確的是()A.①步驟運(yùn)用的培育基已經(jīng)滅菌并調(diào)整過pHB.②步驟接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落C.④中每次劃線前后都須要對接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理D.①②③步驟操作時都須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行15.在培育基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個細(xì)胞,使其長成單個的菌落,這個菌落就是一個純化的細(xì)菌菌落。試驗(yàn)基本步驟如下:eq\x(配制培育基)→eq\x(滅菌、倒平板)→eq\x(培育)→eq\x(視察)請回答下列有關(guān)問題:(1)配制培育基時,各成分含量確定的原則是______________________________________。不論何種培育基,在各種成分都溶化后分裝前,要進(jìn)行的是________________。(2)倒平板的相宜溫度是50℃左右,緣由是____________________________。待平板冷凝后,要將平板倒置,這樣既可使培育基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可防止____________________________________。(3)純化菌株時,若運(yùn)用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種,應(yīng)選擇的涂布工具是圖中的________;若運(yùn)用平板劃線法進(jìn)行接種,應(yīng)選擇的接種工具是圖中的________。ABCD(4)劃線的某個平板培育后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落,其次劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)若用大腸桿菌進(jìn)行試驗(yàn),運(yùn)用過的培育基及培育物必需經(jīng)過________處理后才能丟棄,以防止培育物的擴(kuò)散?!舅仞B(yǎng)養(yǎng)成練】16.炭疽桿菌能引起人畜患炭疽病。炭疽桿菌呈竹節(jié)狀排列,菌落呈卷發(fā)狀。對炭疽病疑似患者,可依據(jù)噬菌體的寄主專一性,通過試驗(yàn)進(jìn)行確診。①細(xì)菌培育:采集疑似患者的樣本,分別培育,獲得可疑菌落。②細(xì)菌鑒定:試驗(yàn)流程圖如下所示。(1)對配制的液體培育基要采納______________________(方法)進(jìn)行滅菌。培育基配制和滅菌時,滅菌與調(diào)整pH的先后依次是____________________________。(2)選擇可疑菌落制片后,用____________視察,可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。(3)接種可疑菌后,35℃培育24h,液體培育基變渾濁,緣由是________________。圖中的比照組試管中應(yīng)加入____________。兩組試管同時培育6h后,進(jìn)行比較,若試驗(yàn)組液體培育基的渾濁度________(填“提高”“降低”或“不變”),則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染。此試驗(yàn)依據(jù)的原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。課后分層檢測案2微生物的基本培育技術(shù)1.解析:不同微生物對養(yǎng)分物質(zhì)的需求不同,如自養(yǎng)微生物的培育基不須要加碳源,自生固氮菌的培育基不須要加氮源;按不同的分類標(biāo)準(zhǔn),培育基種類也不同,如培育基按物理性質(zhì)可分為液體培育基和固體培育基兩大類,按培育基用途可分為選擇培育基和鑒別培育基;固體培育基是在液體培育基里加入瓊脂等凝固劑配制而成的;配制培育基時要留意各種組分的濃度和比例。答案:D2.解析:對一些微生物來說,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源;CO2是光能自養(yǎng)細(xì)菌的碳源,但不能供應(yīng)能量;CO2和N2都是無機(jī)物,也是微生物的碳源和氮源;硝化細(xì)菌所利用的氮源是氨,氨為無機(jī)氮源,同時氨也為硝化細(xì)菌供應(yīng)用以化能合成作用的能源。答案:D3.解析:自養(yǎng)微生物利用的碳源是二氧化碳、碳酸鹽等無機(jī)碳,異養(yǎng)微生物利用的碳源是含碳有機(jī)物,所以培育兩種微生物的培育基的主要差別是碳源。答案:A4.解析:在此培育基上能生長多種微生物,不僅僅只有大腸桿菌,A錯誤;該培育基調(diào)整合適的pH后要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,B錯誤;該培育基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,屬于氮源的物質(zhì)是牛肉膏,C正確;從物理性質(zhì)看該培育基含有瓊脂,屬于固體培育基,D錯誤。答案:C5.解析:接種用具、器皿、空氣中都存在大量微生物,必需進(jìn)行嚴(yán)格地消毒或滅菌。A、B、D三項(xiàng)都是試驗(yàn)操作過程中涉及的消毒或滅菌的措施。將平板倒置,放入培育箱中培育與滅菌無關(guān)。答案:C6.解析:培育基用高壓蒸汽滅菌法滅菌;培育皿能耐高溫且須要保持干燥,可用干熱滅菌法滅菌;接種針可用灼燒滅菌法滅菌,以達(dá)到快速徹底的滅菌效果;試驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)藥物如酒精進(jìn)行消毒;空氣可用紫外線消毒法;為了不破壞牛奶的養(yǎng)分成分可采納巴氏消毒法。答案:A7.解析:整個倒平板過程要防止外來雜菌的入侵,因此滅過菌的培育皿應(yīng)放在火焰旁,打開的錐形瓶瓶口應(yīng)快速通過火焰,培育皿應(yīng)打開一條稍大于瓶口的縫隙,而不能將培育皿蓋完全打開,等待培育基冷卻凝固后須要倒過來放置。答案:C8.解析:對未接種的培育基進(jìn)行培育,起到比照作用,可用來確定培育基是否被雜菌污染。答案:B9.解析:灼燒接種環(huán)后,將接種環(huán)伸入管內(nèi),讓環(huán)端先接觸培育基上未長菌的部位,使其冷卻,然后輕輕挑取少量菌體,再進(jìn)行接種。灼燒接種環(huán)后,不行馬上用接種環(huán)接種,以免接種環(huán)溫度過高,將菌種殺死。答案:B10.解析:用于培育微生物的培育基中,一般含有微生物所須要的碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等成分,碳源、氮源一般分別由糖類和蛋白質(zhì)類物質(zhì)所供應(yīng)。對培育基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。在檢測湖水中細(xì)菌的污染狀況時,應(yīng)設(shè)置比照試驗(yàn),才能得出牢靠的結(jié)果。答案:(1)氮源碳源無機(jī)鹽水(2)高壓蒸汽滅菌(3)恒溫培育箱無菌水(4)多高11.解析:應(yīng)當(dāng)在倒平板之前將培育基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,將培育皿進(jìn)行干熱滅菌,A錯誤;倒平板時,用左手將培育皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培育基(10~20mL)倒入培育皿,左手馬上蓋上培育皿的皿蓋,B錯誤;為防止微生物侵入培育基,要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作,C正確;倒好培育基后,等培育基冷凝后再將平板倒過來放置,D錯誤。答案:C12.解析:在每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌,接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒,接種時劃線操作是在火焰旁進(jìn)行的。在5個區(qū)域中,只要有單個活細(xì)菌,通過培育即可獲得所需菌落。答案:D13.解析:平板劃線過程中,接種環(huán)在每次劃線之前和之后均需灼燒滅菌,A錯誤;打開含菌種的試管需通過火焰滅菌,取出菌種后還需通過火焰滅菌,再塞上棉塞,B錯誤;最終一次的劃線用于篩選出單個菌落,不能與第一次的劃線相連,C正確;劃線操作結(jié)束后,將平板倒置,放入恒溫培育箱中培育,D正確。答案:CD14.解析:①步驟為倒平板,運(yùn)用的培育基已經(jīng)滅菌并調(diào)整過pH,A正確;②步驟為接種,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)冷卻后再挑取菌落,以防高溫殺死酵母菌,B錯誤;④中每次劃線前后對接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理,是為了殺死接種環(huán)上殘留的菌種,使劃線時接種環(huán)上的菌種干脆來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌種的數(shù)目漸漸削減,以便得到單菌落,C正確;①②③步驟操作時都須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,防止雜菌污染,D正確。答案:ACD15.解析:(1)培育基中各成分含量要依據(jù)微生物的生長須要來確定。微生物生長須要肯定的pH,所以培育基裝瓶前須要調(diào)整pH。(3)由圖可知,A為接種環(huán),B為涂布器,C為膠頭滴管,D為接種針,故稀釋涂布平板法應(yīng)選擇的涂布工具是B,平板劃線法應(yīng)選擇的接種工具是A。(4)由題意分析可知,造成此現(xiàn)象的緣由可能有兩個:一是接種環(huán)灼燒后未冷卻,菌種接觸到高溫的接種環(huán)而死亡;二是劃其次劃線區(qū)域第一條線時未從第一區(qū)域末端起先。(5)有的大腸桿菌會釋放一種劇烈的毒素,因此,運(yùn)用過的培育基及其培育物必需經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄,以防止培育物的擴(kuò)散。答案:(1)所培育微生物對各養(yǎng)分成分的須要量調(diào)整pH(2)溫度過高會燙手,過低培育基又會凝固皿蓋上的水珠落入培育基,造成污染(3)BA(4)①接種環(huán)灼燒后未冷卻;②劃線未從第一區(qū)域末端起先(5)滅菌16.解析:(1)培育基一般采納高壓蒸汽滅菌。在配制培育基時,須要先調(diào)整pH,后滅菌。(2)菌落可以通過肉眼視察,
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