邊境口岸病媒生物跨境聯(lián)合監(jiān)測及檢測技術(shù)規(guī)程第2部分：鼠

1邊境口岸病媒生物跨境聯(lián)合監(jiān)測及檢測技術(shù)規(guī)程第2部分：鼠本部分規(guī)定了邊境口岸病媒生物鼠類跨境聯(lián)合監(jiān)測及檢測技本部分適用于邊境口岸病媒生物鼠類跨境聯(lián)合監(jiān)測及檢測技術(shù)規(guī)程的技下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件頻次和器具布放時間，一經(jīng)確定不得更改，如依據(jù)邊境口岸內(nèi)監(jiān)測區(qū)域及其生態(tài)環(huán)境制定監(jiān)測范圍，監(jiān)測范圍盡可能2——生境因素觀測分析：地理、海拔、地貌、植被、著白（淺）色防護(hù)服（連體）、白色長筒防蚤襪、長筒膠靴、無粉手套、口罩建議統(tǒng)一選用質(zhì)量可靠穩(wěn)定的中型鋼板夾和鼠籠，以各地便于獲得的材料線布放，行距約20m，日落前放置。次日晨檢查記錄捕獲鼠的數(shù)量，并送實驗室鑒定（見表1）。每次監(jiān)測有效夾數(shù)不每次監(jiān)測不少于50籠，鼠籠與墻基垂直平放，鼠籠開口朝向墻面，晚放晨收，鼠籠法鼠密度參考控制標(biāo)準(zhǔn)為小于同鼠類調(diào)查同時進(jìn)行，將捕獲鼠及器械放入白布的鼠體放在白瓷盤上，用梳子或刷子撿蚤，以濕毛筆沾起放入75%酒精中，每只鼠檢獲的蚤類放入同一試管內(nèi)，做好唯3所獲得所有鼠類樣本嚴(yán)格按照生物安全要求進(jìn)行包裝保存，運輸時需具有將捕獲的活鼠連同鼠籠（鼠夾）裝入有捆扎袋的鼠袋內(nèi)，扎緊袋口，嚴(yán)防跳蚤逃逸），），保證實驗流程無菌操作，使用已消毒或一次性無菌器材，血液和組織樣本保存需檢測鼠體體重（g）、體長（mm）、尾長(mm)、耳高(m鑒定檢測記錄表。采血和臟器前，應(yīng)先梳檢鼠體寄生蟲，采用乙醚或者氯仿麻醉致死后采4大鼠可采用股靜脈或股動脈采血，小鼠可采用眼眶動脈采血或尾靜脈采血，具體參考GB/T28940-2012《病媒生物感染病原體采樣規(guī)程鼠類》，采血后做好編號登記，先置放室溫1個小時，然后3000轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，取上清液后鑷。每種臟器存放在單獨無菌容器中，封口應(yīng)在活鼠經(jīng)過乙醚或者氯仿麻醉致死后采集，將鼠袋倒入白（淺）色的深搪瓷盆內(nèi)，慢慢管中；然后一只手用大鑷子夾持鼠體，另一手用梳子梳鼠體蚤、螨、蜱，由鼠頭部對死鼠采血可采用血紙條方式，應(yīng)做好鼠體消毒，并做好——用于細(xì)菌、病毒分離和檢測的組織樣本可直接-80℃冷凍保存，也可用干冰——用于血凝檢測的血清樣本，對于24h內(nèi)不能立即檢測的樣本，一周內(nèi)可保存在-2——鼠體寄生蟲樣本，可用75%酒精保存，-80℃或5病原體檢測必須在衛(wèi)生部《人間傳染病的病原微生物名錄》規(guī)定的相應(yīng)等級的生經(jīng)過相關(guān)培訓(xùn)，熟知實驗室管理制度、生物安全要求、技術(shù)操作規(guī)程等，需兩人以上同時開——鼠疫耶爾森氏菌培養(yǎng)按WS279-20——鼠疫耶爾森氏菌血清學(xué)檢測WS279-20——鼠疫耶爾森氏菌膠體金法檢測WS279-20——鼠疫耶爾森氏菌核酸檢測WS279-20——漢坦病毒核酸檢測按SN/T2616-201——巴爾通體核酸檢測按SN/T4616-201——鉤端螺旋體核酸檢測按SN/T1487-200——博卡病毒核酸檢測按《全國臨床檢驗操作規(guī)程（第四版）——拉沙熱病毒核酸檢測按國境口岸拉沙熱檢驗規(guī)程（SN/T1502-2006按照《人間傳染的病原微生物生物名錄》的要求，提取核酸，進(jìn)行全基因組9.1根據(jù)監(jiān)測結(jié)果分析情況，寫出口岸監(jiān)測總結(jié)報告，內(nèi)——通過對口岸病媒生物監(jiān)測情況，進(jìn)行傳染病傳播風(fēng)險評估，指出口岸鼠類防治表1口岸鼠類監(jiān)測現(xiàn)場記錄表監(jiān)測方法：監(jiān)測時間：年月日—年月日編號生境類型監(jiān)測用器械數(shù)有效器械數(shù)捕獲總數(shù)（只）天氣：監(jiān)測單位：風(fēng)速：m/s溫度：℃濕度：監(jiān)測人：%填報日期：海拔高度米1表2.鼠類鑒定檢測記錄表采集時間：采集地點：編號生境種類性別年齡體重g體長cm耳高cm右后足長cm體表寄生蟲數(shù)病原體檢測如檢測結(jié)果為陽性，應(yīng)注明檢測方法量成幼蜱蚤螨漢坦病毒伯氏疏螺旋體巴爾通體陰性陽性陰性陽性陽性陽性陰性陽性監(jiān)測單位：解剖制作者：表3新記錄種、新種登記表生境及地點種名采集方法數(shù)量采集人鑒定人、復(fù)核人科屬種拉丁文名稱天氣：監(jiān)測單位：風(fēng)速：m/s溫度：℃濕度海拔高度填報日期：年2表4國境口岸媒介生物攜帶病原體檢測結(jié)果媒介類型檢測項目檢測方法樣本總量/陽性數(shù)陽性率（%）樣品來源合計監(jiān)測單位：填報人：填報日期：年月日表5國境口岸鼠類監(jiān)測及體表寄生蚤調(diào)查結(jié)果地點布夾數(shù)（次）蚤（匹）蜱（只）監(jiān)測單位：填報人：填報日期：年月日3表6國境口岸鼠類、蚤類及蜱類種群構(gòu)成捕獲數(shù)（只）構(gòu)成比（%）蚤種類捕獲數(shù)（只）構(gòu)成比（%）蜱種類捕獲數(shù)（只）構(gòu)成比（%）監(jiān)測單位：填報人：填報日期：年月日表7