微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)練習(xí)題(學(xué)生)

第1頁（共1頁）微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)與應(yīng)用練習(xí)題一．解答題（共30小題）（一）微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1．如圖所示是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列．(1）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以為唯一，鑒別培養(yǎng)基還需添加作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成色；(2)在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上,均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0。1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191．該過程采取的接種方法是，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為×108個(gè),與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比,此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較;（3）現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個(gè)核苷酸,使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼，終止密碼有UAG、UGA和UAA,突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中,終止密碼為,突變基因表達(dá)的蛋白含個(gè)氨基酸．2．牛奶中富含蛋白質(zhì),長(zhǎng)期飲用有助于增強(qiáng)體質(zhì)，但牛奶同時(shí)也是多種疾病的傳播載體．國家標(biāo)準(zhǔn)是每毫升牛奶中細(xì)菌數(shù)小于30000個(gè)．以下是牛奶消毒及細(xì)菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn)．（1)圖中步驟①稱為消毒法．步驟②是．（2）培養(yǎng)基中的蛋白胨可以為微生物提供．進(jìn)行步驟③操作時(shí),應(yīng)選用下列中的哪種工具？．為了避免雜菌污染，此步驟應(yīng)在附近進(jìn)行．（3）將接種后的培養(yǎng)基和作為對(duì)照的同時(shí)放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)36小時(shí)．取出后統(tǒng)計(jì)各平板的菌落數(shù),結(jié)果如表所示．應(yīng)該選擇其中稀釋倍數(shù)為的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),經(jīng)過消毒后的牛奶中，細(xì)菌數(shù)大約是/mL．牛奶稀釋倍數(shù)10﹣210﹣310﹣4平板1菌落數(shù)87101平板2菌落數(shù)83121平板3菌落數(shù)851003．人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動(dòng)物的胃，可用來發(fā)酵處理秸稈，提高秸稈的營養(yǎng)價(jià)值,為了增加發(fā)酵效果,研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，并對(duì)其降解纖維素能力進(jìn)行了研究，請(qǐng)回答下列問題：（1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項(xiàng)不需要的是（填序號(hào)）①酒精燈②培養(yǎng)皿③顯微鏡④無菌水（2）在涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是（3）向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí)，若試管口粘附有培養(yǎng)基，需要用酒精棉球擦凈的原因是（4）剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng),研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩到了幾株有透明降解圈的菌落（見圖1），圖中降解圈大小與纖維素酶的有關(guān)，圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是（填圖中序號(hào)）（5）研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4，在不同溫度和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵，測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見圖2，推測(cè)菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵，理由是4．回答下列關(guān)于微生物和酶的問題．高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性．研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如圖所示．（1）①過程稱為，②過程是為了．（2）Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基稱為﹣﹣(按功能分);該培養(yǎng)基中除了加入淀粉外，還需加入另一種重要的營養(yǎng)成分．A．瓊脂B．葡萄糖C．硝酸銨D．碳酸氫鈉（3）一般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌，其中“高壓”是為了．在高溫淀粉酶運(yùn)用到工業(yè)生產(chǎn)前，需對(duì)該酶的最佳溫度范圍進(jìn)行測(cè)定．圖中的曲線①表示酶在各種溫度下酶活性相對(duì)最高酶活性的百分比．將酶在不同溫度下保溫足夠長(zhǎng)的時(shí)間，再在酶活性最高的溫度下測(cè)其殘余酶活性,由此得到的數(shù)據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù),即圖中的曲線②．（4）根據(jù)圖中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是．A．40℃一50℃B．50℃一60℃C．60℃一70℃D．70℃﹣80℃（5）據(jù)圖判斷下列敘述錯(cuò)誤的是．A．該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測(cè)出活性B．曲線②35℃數(shù)據(jù)點(diǎn)是在80℃時(shí)測(cè)得的C．曲線①表明80℃是該酶活性最高的溫度D．曲線②表明該酶的熱穩(wěn)定性在70℃之后急劇下降．5．多環(huán)芳烴菲在染料、殺蟲劑等生產(chǎn)過程中被廣泛使用，是土壤、河水中常見的污染物之一．如圖表示科研人員從被石油污染的土壤中分離獲得能降解多環(huán)芳烴菲的菌株Q的主要步驟．請(qǐng)回答:（1)步驟①→③的培養(yǎng)過程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，一方面使菌株與培養(yǎng)液充分接觸,提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率;另一方面能．（2)步驟④用平板劃線法純化菌株Q過程中，在做第二次以及其后的劃線操作時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，原因是．采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)要倒置培養(yǎng)的目的是（3）接種環(huán)通過灼燒來滅菌，完成步驟④中劃線操作，共需灼燒接種環(huán)次（4)為了獲得分解多環(huán)芳烴菲能力更強(qiáng)的菌株,研究人員又對(duì)菌種Q進(jìn)行了誘變處理，得到突變株K．為了進(jìn)一步鑒定菌株K并比較兩種菌株降解多環(huán)芳烴菲的能力,設(shè)計(jì)了下列實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)補(bǔ)全實(shí)驗(yàn)步驟：①取9只錐形瓶均分成三組,編號(hào)A、B、C②向A、B、C三組錐形瓶中加入的培養(yǎng)液．③向A、B、C三組培養(yǎng)液中分別加入．④28℃恒溫培養(yǎng)3天后，測(cè)定．6．【生物﹣﹣選修1生物技術(shù)實(shí)踐專題】從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測(cè)定．富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長(zhǎng)的特定環(huán)境條件，使其群落的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法．（1）接種前要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行處理．在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)過程中，一定要注意在條件下進(jìn)行．（2）不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化．如培養(yǎng)纖維素分解菌的菌樣應(yīng)從環(huán)境中采集．（3）從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中需要加入纖維素粉作為唯一的．(4）經(jīng)過梯度稀釋后，要將樣品均勻涂布在用于鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基中需要加入的特殊染料是，當(dāng)形成菌落以后可以根據(jù)菌落周圍是否產(chǎn)生來篩選纖維素分解菌．某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí),發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是．7．某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)．實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)．請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題．（1）培養(yǎng)基中含有蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了氮源和．除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是和．（2）對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是．（3）為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于中培養(yǎng),培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃．要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)．（4）培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有種細(xì)菌．一般說來,菌落總數(shù)越多,湖水遭受細(xì)菌污染的程度越．（5）如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐細(xì)菌,這種培養(yǎng)基(按功能分)被稱為．8．在農(nóng)業(yè)用地中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑（含氮有機(jī)化合物）在土壤中不易降解,長(zhǎng)期使用可污染土壤．為修復(fù)被該除草劑污染的土壤,可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑在水中溶解度一定,該除草劑的培養(yǎng)基不透明)．(1）制備土壤浸出液時(shí),為避免菌體濃度過高,需將浸出液進(jìn)行處理．（2）要從長(zhǎng)期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點(diǎn)是：固體培養(yǎng)基且．若需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH,應(yīng)該在各種成分都溶化后且分裝（填“前”或“后,’)進(jìn)行．（3）在劃線前，接種環(huán)應(yīng)該在酒精燈火焰上．培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)的主要原因是或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長(zhǎng)．(4）在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是，有透明帶菌落利用的氮源主要是，據(jù)此可篩選出目的菌．（5）A細(xì)菌和B細(xì)菌都能降解該除草劑,研究發(fā)現(xiàn)以每克菌體計(jì)算，A細(xì)菌降解該除草劑的能力比B細(xì)菌要強(qiáng)，對(duì)此現(xiàn)象合理的假設(shè)是．9．燒傷病人容易感染綠膿桿菌,引起化膿性感染，比阿培南、美羅培南、頭抱菌素和碳青霉烯類抗生素都是非常經(jīng)典的抗綠膿桿菌的藥物．臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)．實(shí)驗(yàn)時(shí)，從病人身上獲取少量樣本，按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定該病人體內(nèi)的綠膿桿菌對(duì)不同抗生素的敏感性．（1）獲取綠膿桿菌單菌落：配制適于綠膿桿菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分一般含有、、水和無機(jī)鹽，調(diào)節(jié)pH至7，滅菌處理,待培養(yǎng)基冷卻至50℃時(shí),在附近倒平板．經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得單菌落．（2）檢測(cè)綠膿桿菌對(duì)不同抗生素的敏感性：取該單菌落適當(dāng)稀釋，用法接種于固體培養(yǎng)基表面,使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板．將分別含等劑量的比阿培南、美羅培南、頭抱菌素和碳青霉烯類抗生素的同大小的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，適宜條件培養(yǎng)一段時(shí)間，結(jié)果是含不同抗生素的濾紙片周圍均出現(xiàn)透明圈,這說明綠膿桿菌對(duì)上述抗生素；含頭抱菌素的濾紙片周圍的透明圈比含美羅培南的小，這說明；含比阿培南、碳青霉烯類的濾紙片周圍的透明圈也比含美羅培南的小，且比阿培南透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，請(qǐng)推測(cè)此菌落產(chǎn)生的可能原因：一是，二是．（3)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗綠膿桿菌的目的，對(duì)于該患者來說最好應(yīng)選用抗生素．10．生物﹣選修1:生物技術(shù)實(shí)踐金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物，可引起人類肺炎、腸炎等疾?。瘘S色葡萄球菌在血平板(培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長(zhǎng)時(shí)，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色．下圖為定性檢測(cè)鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請(qǐng)回答相關(guān)問題．（1）按細(xì)胞結(jié)構(gòu)分類，金黃色葡萄球菌屬于生物，從培養(yǎng)過程分析，金黃色葡萄球菌可進(jìn)行呼吸．（2)7.5％NaCl肉湯培養(yǎng)基可為微生物提供的營養(yǎng)成分包括，用7。5%NaCl肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)的主要目的是．(3）操作中在血平板上的接種方法是，接種操作前后需要對(duì)接種工具進(jìn)行滅菌．（4）在制備血平板時(shí)需將pH調(diào)節(jié)至（“微酸性”或“微堿性”)后滅菌,待培養(yǎng)基后，再加入適量血液．按培養(yǎng)基功能分類，血平板屬于培養(yǎng)基．（5)經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實(shí)驗(yàn)，血平板上均出現(xiàn)的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌,但鮮牛奶供應(yīng)商仍認(rèn)為此菌并非鮮牛奶所攜帶,因此，要對(duì)本操作進(jìn)行完善，完善的方案是．（二）土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離11．人和哺乳動(dòng)物的尿中含有尿素，大量尿素的存在會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染．土壤中有些細(xì)菌含有脲酶,可通過降解尿素作為其生長(zhǎng)的氮源．現(xiàn)對(duì)土壤中的這類細(xì)菌進(jìn)行分離實(shí)驗(yàn),請(qǐng)回答下列問題：（1）分離培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)必須進(jìn)行無菌操作，包括培養(yǎng)基和各種器皿都必須是無菌的，常用的滅菌方法有、和．（2)將樣液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后接種培養(yǎng)．在稀釋土壤溶液的過程中每一步都要在旁進(jìn)行操作．接種后的培養(yǎng)皿于37℃的中培養(yǎng)．（3）用含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基篩選能分泌脲酶的細(xì)菌,從功能上劃分該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基．若培養(yǎng)基中存在有分解尿素的細(xì)菌,其菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶，這是由于尿素被分解產(chǎn)生的使pH升高，酚紅指示劑產(chǎn)生的顏色變化，從而證明這一菌株可以尿素為氮源．變色區(qū)域越大,表明該菌株利用尿素的能力．（4）與全營養(yǎng)培養(yǎng)基中的菌落相比，以尿素為氮源的培養(yǎng)基中菌落數(shù)．A．多B．少C．相等D．幾乎為零．12．已知微生物A可以產(chǎn)生油脂，微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶，脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)．回答有關(guān)問題：（1)顯微觀察時(shí)，微生物A菌體中的油脂通?？捎萌旧⑸顰產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用（填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”）從菌體中提?。?2）為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落,可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣,并應(yīng)選用以為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)．（3）若要測(cè)定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用直接計(jì)數(shù)，若要測(cè)定其活菌數(shù)量，可選用法進(jìn)行計(jì)數(shù)．(4)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度,某同學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi),在35℃、40℃、45℃溫度下降解10g油脂所需酶量依次為4mg、1mg、6mg，則上述三個(gè)溫度中，℃條件下該酶活力最小，為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞℃設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)．13．回答下列關(guān)于微生物的問題．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解,就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，同學(xué)們嘗試從土壤中篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌）．他們?cè)O(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示，如表是培養(yǎng)基成分．KH2PO41。4gNa2HPO42。1gMgSO4?7H2O0。2g葡萄糖10g尿素［CO（NH2）2]1g瓊脂15g將上述物質(zhì)溶解后，用自來水定容到1000mL（1）此培養(yǎng)基按物理狀態(tài)屬于培養(yǎng)基．（2）培養(yǎng)基中加入尿素的作用是（多選)A．篩選目的菌B．作為氮源C．作為碳源D．殺死雜菌（3）圖中稀釋步驟的目的是．(4）此實(shí)驗(yàn)操作過程中，接種前應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，滅菌溫度為；接種時(shí)應(yīng)無菌操作,這兩個(gè)步驟的目的是為了使培養(yǎng)基接種培養(yǎng)后，培養(yǎng)基中（多選）A．無雜菌B．只有目的菌C．無菌D．有土壤中的固氮菌．14．一種廣泛使用的除草劑(含氮有機(jī)物)在土壤中不易被降解，長(zhǎng)期使用可污染土壤．為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按圖甲程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑在水中溶解度低,含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明)．（1）制備土壤浸出液時(shí)，為避免菌體濃度過高,需將浸出液進(jìn)行稀釋處理．現(xiàn)有一升土壤浸出液,用無菌吸管吸取1mL液樣至盛有9mL無菌水的試管中，依次稀釋103稀釋度．各取0.1mL已稀釋103倍的水樣分別接種到三個(gè)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則每升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)為．（2）要從長(zhǎng)期使用該除草劑的土壤中分離目的菌,從用途方面來看，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點(diǎn)是．（3）接種技術(shù)的核心是．在劃線接種時(shí)，連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步，培養(yǎng)時(shí)，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)的主要原因是或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長(zhǎng)．（4）在培養(yǎng)基上形成的菌落中,無透明帶菌落利用的氮源主要是，有透明帶菌落利用的氮源主要是，據(jù)此可篩選出目的菌．實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖乙顯示的A～E五種菌株中，是最理想菌株．（5)科研人員用放射線處理該細(xì)菌獲得兩個(gè)突變株A和B，然后對(duì)突變株A和B進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下表所示：接種的菌種一般培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果A不生長(zhǎng)添加營養(yǎng)物質(zhì)甲，能生長(zhǎng)B不生長(zhǎng)添加營養(yǎng)物質(zhì)乙，能生長(zhǎng)A+B能生長(zhǎng)不添加營養(yǎng)物質(zhì)甲、乙就能生長(zhǎng)突變株A不能在一般培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的原因是．突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)的最可能原因是．15．尿素是一種高濃度氮肥且長(zhǎng)期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細(xì)菌的分解作用，才能被植物吸收利用．某同學(xué)要分離出土壤中能分解尿素的細(xì)菌,并嘗試進(jìn)行計(jì)數(shù)，培養(yǎng)基配方如下：K2HPO4NaClH2O葡萄糖尿素酚紅瓊脂0。12g0。12g15mL0。025g2.0g0.25mg0.5g（1）分解尿素的細(xì)菌都能合成,該種細(xì)菌在生態(tài)平衡中起到什么作用?．寫出細(xì)菌分解尿素的方程式．(2）根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？（能/不能）,原因是．（3）分離得到分解尿素的細(xì)菌后，如果要擴(kuò)大培養(yǎng)，則應(yīng)選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)．培養(yǎng)一段時(shí)間后,使用對(duì)微生物細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)．計(jì)數(shù)過程中,下列哪種行為會(huì)影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性A．計(jì)數(shù)時(shí)直接從靜置培養(yǎng)的試管底部取培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)B．如果方格內(nèi)微生物細(xì)胞數(shù)量多于300個(gè),培養(yǎng)液先稀釋后再計(jì)數(shù)C．如果微生物細(xì)胞有粘連，要數(shù)出團(tuán)塊中的每一個(gè)細(xì)胞D．壓在方格線上的細(xì)胞只計(jì)左線和上線上的細(xì)胞數(shù)（4）為了提高尿素肥效,可以將分解尿素的酶和尿素混合,制成“加酶尿素”．為了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用技術(shù)．16．土壤是“微生物的天然培養(yǎng)基",下面是有關(guān)土壤中分解尿素的細(xì)菌分離和計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)過程,請(qǐng)根據(jù)圖回答相關(guān)問題：(1）能分解尿素的細(xì)菌代謝類型為,應(yīng)從富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層取土樣．(2）為分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)該用的培養(yǎng)基進(jìn)行分離,并加入指示劑進(jìn)行鑒別．（3）若取土樣5g，應(yīng)加入ml的無菌水配制成稀釋10倍土壤溶液．因土壤中細(xì)菌密度很大，需要不斷加以稀釋，配制成如圖所示的不同濃度的土壤溶液．取樣稀釋前，一定要以減少誤差．將103﹣107倍的稀釋液分別吸取0。1mL加入到固體培養(yǎng)基上，用將菌液鋪平．這種接種方法稱為．（4）將接種的培養(yǎng)皿放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48h,觀察并統(tǒng)計(jì)具有（現(xiàn)象）的菌落數(shù)，結(jié)果如下表,其中倍的稀釋比較合適．稀釋倍數(shù)103104105106107菌落數(shù)(個(gè))500367248361817．如表為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方，請(qǐng)回答有關(guān)間題：KH2PO4Na2HPO4MgSO4?7H2O葡萄糖尿素蒸餾水1.4g2。1g0.2g10。0g1。0g定容至1000mL（1）該培養(yǎng)基只允許分解尿素的細(xì)菌生長(zhǎng)，這種培養(yǎng)基稱為培養(yǎng)基．該培養(yǎng)基會(huì)抑制其它種類微生物生長(zhǎng)，其原因是該培養(yǎng)基．(2）若要通過統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中菌落數(shù)來估計(jì)樣品中的細(xì)菌數(shù)，上述培養(yǎng)基中還需要添加的成分是，接種時(shí)應(yīng)采用法，該方法接種培養(yǎng)后的菌落，不可能是圖中的(單選）．（3)從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌后，要對(duì)其作進(jìn)一步的鑒定，可在上述培養(yǎng)基中加入指示劑,培養(yǎng)該菌后，如果指示劑變,可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素．（4）某同學(xué)用0。1mL稀釋液在稀釋倍數(shù)為106的平板中測(cè)得菌落數(shù)的平均值為163,則每mL樣品中的細(xì)菌數(shù)是．18．【生物﹣選修1生物技術(shù)實(shí)踐】某研究小組設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)探究土壤中微生物對(duì)尿素是否有分解作用,并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌）．實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示，培養(yǎng)基成分如表所示．請(qǐng)分析回答問題：KH2PO41。4gNa2HPO42。1gMgSO4?7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15。0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL（1)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選,這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基．（2)“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的和，實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，原因是．(3)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí),常采用的方法接種，獲得后繼續(xù)篩選．（4)下列材料或用具中：①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管；③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手．需要滅菌的是；需要消毒的是．(填序號(hào))（5）在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落．A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有(填序號(hào))．①由于土樣不同②由于培養(yǎng)基污染③由于操作失誤④沒有設(shè)置對(duì)照（6）在該實(shí)驗(yàn)中，可以通過檢測(cè)培養(yǎng)基pH的變化來判斷尿素是否被分解,所依據(jù)的原理是．所用方法是在培養(yǎng)基中加入，若尿素被分解，則培養(yǎng)基變成紅色．19．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多,同學(xué)們?cè)噲D探究土壤中微生物對(duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn),并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌），培養(yǎng)基成分如表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示，請(qǐng)分析回答問題:KH2PO41。4gNa2HPO42。1gMgSO4?7H2O0。2g葡萄糖10g尿素1g瓊脂15g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到100mL(1）此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)?為什么?．（2）如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖．則獲得圖A效果的接種方法是，圖B效果的接種方法是，一同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是（答出一條即可)．（3）“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源來自培養(yǎng)基中的，其同化作用類型是．（4）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選到,這種培養(yǎng)基從功能上屬于培養(yǎng)基．20．2011年，荷蘭皇家航空公司宣布，從9月份起，啟用以生物柴油（即俗稱的“地溝油”）為燃料的客機(jī)執(zhí)飛阿姆斯特丹至巴黎的航班,以減少碳排放．科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，在微生物M（單細(xì)胞)產(chǎn)生的脂肪酶作用下,可以將地溝油提取的植物油與甲醇反應(yīng)能夠合成生物柴油．(1）用培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物時(shí)，培養(yǎng)基中應(yīng)有、、和等營養(yǎng)，同時(shí)還必須滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)、、的要求．在篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M時(shí)，應(yīng)用培養(yǎng)基,可以在培養(yǎng)基中添加作為唯一碳源．（2)培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是法．（3)圖示是采用純化微生物M培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，過程一的接種方法是,過程二的接種方法是,此方法計(jì)數(shù)的微生物M的數(shù)目（＞、=、＜）實(shí)際活菌數(shù),接種后應(yīng)注意培皿基要放置．（三）分解纖維素的微生物的分離21．[生物﹣﹣選修l生物技術(shù)實(shí)踐]下列是對(duì)土壤微生物開展探究活動(dòng)的三個(gè)案例,請(qǐng)?jiān)谙鄳?yīng)的空白處作答．（1）案例l：探究落葉在土壤微生物的作用下是否發(fā)生腐爛（分解）．設(shè)計(jì)思路:組別對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組處理情況不做處理的帶落葉的土壤處理過的帶落葉的土壤將等量的帶落葉的土壤,用帶有編號(hào)的相同的塑料袋分別包扎好，并埋在5cm深的土壤中對(duì)實(shí)驗(yàn)組土壤應(yīng)該進(jìn)行處理，盡可能排除的作用．（2）案例Ⅱ:探究土壤微生物對(duì)淀粉的分解作用．實(shí)驗(yàn)步驟:①將取自農(nóng)田的土壤制成土壤浸出液,放在燒杯中靜置一段時(shí)間．②另取兩只燒杯，編號(hào)為A、B,放入等量的淀粉糊．在A燒杯中加入30mL土壤浸出液，B燒杯中加入．③在室溫條件下放置7天后，從A燒杯中取20mL溶液，分別加入A1和A2兩支試管各10mL；從B燒杯中取20mL溶液,分別加入B1和B2兩支試管各10mL．④在A1和B1中加入碘液；在A2和B2中加入，并進(jìn)行處理．⑤觀察各試管的，記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果．（3)案例Ⅲ：探究土壤微生物中是否含有分解纖維素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)將土壤浸出液接種在以為惟一碳源的培養(yǎng)基上，并用（試劑）加以鑒別．22．某些農(nóng)作物秸稈富含纖維素，纖維素經(jīng)過水解可以形成葡萄糖，葡萄糖再經(jīng)過發(fā)酵可以生產(chǎn)酒精．如圖是利用農(nóng)作物秸稈生產(chǎn)酒精的大致流程，請(qǐng)回答下列問題：（1)農(nóng)作物秸稈含有豐富的纖維素，纖維素要經(jīng)過纖維素分解菌分解成葡萄糖．人們常常是從土壤中分離纖維素分解菌．分離纖維素分解菌常用的方法是．其實(shí)驗(yàn)流程是；土壤取樣→選擇培養(yǎng)→→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生的菌落．（2）纖維素分解菌能合成纖維素酶，纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少含有三種組分，即．前兩種酶使纖維素分解成，第三種酶將它分解成葡萄糖．（3)圖中發(fā)酵階段常用的菌種是酵母菌，在酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在℃．發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用來檢驗(yàn)．（4)利用葡萄能生產(chǎn)果酒，進(jìn)而生產(chǎn)果醋,生產(chǎn)果醋常用的菌種是醋酸桿菌,醋酸桿菌與酵母菌在代謝類型上的區(qū)別是．23．食物中的纖維素(即膳食纖維)對(duì)人體的健康有著重要的作用，其主要存在于蔬菜和粗加工的谷類中，有促進(jìn)腸道蠕動(dòng)、利于糞便排出等功能．但纖維素不能被人體吸收，因?yàn)槿梭w缺乏分解纖維素的酶．某校生物興趣小組開展了以下探究纖維素酶研究的工作，請(qǐng)回答下列問題:（1）纖維素酶是一種酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖昔酶三種,其中能夠?qū)⒗w維二糖分解為葡萄糖的是．（2）自然界中不少微生物都具有分解纖維素的能力．要從土壤中篩選含有纖維素酶的微生物即纖維素分解菌，應(yīng)在含有纖維素豐富的土中采樣．取回的土樣中含有多種微生物,興趣小組可在培養(yǎng)基中加入來幫助篩選纖維素分解菌，目標(biāo)菌落的特征是．為了提高酶的產(chǎn)量，研究人員欲利用誘變育種的方法獲得能產(chǎn)生較多纖維素酶的菌株，把實(shí)驗(yàn)組的菌株接種于多個(gè)配制好的培養(yǎng)基中,同時(shí)接種對(duì)照組，相同條件下培養(yǎng)，觀察兩組菌株菌落周圍的情況，選出（填“透明圈大的”“透明圈小的"或“無透明固的”）菌株即為所需菌株．(3)馬、牛、羊等食草動(dòng)物也具有消化纖維素的能力．若從馬的胃中分離出纖維素分解菌，與從土壤中分離出的纖維素分解菌相比較，除了要調(diào)整培養(yǎng)基的pH外,還必須控制的條件是．配制好的培養(yǎng)基還應(yīng)進(jìn)行滅菌處理，一般采用的方法是．從功能上看，該培養(yǎng)基是培養(yǎng)基．（4）對(duì)篩選得到的微生物還需進(jìn)一步純化培養(yǎng)以增加菌種的數(shù)量，為方便后續(xù)的計(jì)數(shù)，宜采用的純化方法是．（5）用物理和化學(xué)的方法使篩選出的纖維素分解菌破裂后，用的方法可將纖維素酶溶液與其他細(xì)胞成分分離開．分離出的纖維素酶還需進(jìn)一步鑒定．纖維素酶能催化纖維素分解為還原性的葡萄糖，根據(jù)這一特性，可加入試劑并水浴加熱，判斷提取物是否起到了降解纖維素的作用．24．纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)，下列是關(guān)于分離土壤中能夠分解纖維素的微生物的相關(guān)問題，請(qǐng)回答：(1）自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物是．某些微生物能分解纖維素，因?yàn)樗麄兡墚a(chǎn)生纖維素酶，纖維素酶至少包括三種組分，即．（2）實(shí)驗(yàn)室中篩選微生物的原理是．篩選纖維素分解菌應(yīng)先將從土壤中獲得的微生物，在以纖維素為唯一碳源的(填“固體"或“液體”）培養(yǎng)基上進(jìn)行選擇培養(yǎng)，選擇培養(yǎng)的目的是．（3）用剛果紅染色法對(duì)分離出的微生物進(jìn)行篩選，剛果紅可以與纖維素形成，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的．從培養(yǎng)基的用途上分類,剛果紅培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基．25．某實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟如下，請(qǐng)給予合理的補(bǔ)充．（1)采樣與培養(yǎng)：將采集的土樣混勻后稱取1g,置于經(jīng)過法滅菌處理的(填“固體"或“液體"）培養(yǎng)基中,28℃振蕩培養(yǎng)．（2）接種與選擇:為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進(jìn)行處理．之后，將菌液涂布接種于以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,30℃條件下培養(yǎng)．為避免污染，需將培養(yǎng)皿呈狀態(tài)放置．此外，為排除其他因素的影響,提高實(shí)驗(yàn)可信度，本步驟需設(shè)計(jì)作為空白對(duì)照．(3）篩選與純化：將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍,如果菌落周圍的現(xiàn)象是,則說明此種菌能夠．從平板中挑取實(shí)驗(yàn)效果明顯的目的菌株，采用法接種于新的培養(yǎng)基平板，可對(duì)菌株進(jìn)行進(jìn)一步的純化．26．飼養(yǎng)動(dòng)物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動(dòng)物吸收利用，還影響對(duì)其他營養(yǎng)物質(zhì)的利用．若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等．以下是科研人員從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的菌株的過程示意圖．請(qǐng)分析作答．（1）培養(yǎng)基中除了添加植酸鈣以外，應(yīng)含有、、水、無機(jī)鹽等基本營養(yǎng)物質(zhì)．(2）為防止雜菌污染，要對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿等進(jìn)行，而且須將接種后的培養(yǎng)皿呈狀態(tài)放置．(3）接種以前進(jìn)行的一系列操作,目的是在培養(yǎng)皿表面形成．根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的就能大致推測(cè)出樣品中的活菌數(shù)．（4）由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會(huì)水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域,根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶．實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示A～E五種菌株中，是產(chǎn)植酸酶的理想菌株．（5）獲得目的菌以后，若要用于植酸酶的生產(chǎn)，還需要進(jìn)行．27．農(nóng)作物秸稈在生產(chǎn)實(shí)踐中具有多種用途．在特定微生物產(chǎn)生的纖維素酶的催化下，秸稈中的纖維素可被分解為葡萄糖，經(jīng)發(fā)酵后形成乙醇，再加工即可制成燃料乙醇，減少了人類生活對(duì)石油資源的依賴．請(qǐng)分析回答：（1）欲從土壤中分離獲取上述特定微生物，可采用稀釋涂布法或法進(jìn)行接種，所用培養(yǎng)基以纖維素為唯一碳源，目的是只允許能產(chǎn)生的微生物生長(zhǎng)，而其他微生物均不能生長(zhǎng)．在培養(yǎng)基中加入適量的剛果紅染料，若觀察到即可初步篩選到目的菌．（2）某研究人員經(jīng)上述培養(yǎng)獲得了三種微生物（甲、乙、丙），現(xiàn)通過如下實(shí)驗(yàn)比較三種微生物所產(chǎn)生纖維素酶的活性大?。賹⒓?、乙、丙三種微生物經(jīng)離心等方法處理后,制成酶濃度相同的纖維素酶提取液，取等體積的三種提取液分別與等量的纖維素懸浮液混合，在相同且適宜的pH和溫度條件下放置一段時(shí)間．②利用試劑檢測(cè)產(chǎn)物中的葡萄糖，并通過比較顏色深淺程度判斷酶活性的大?。蹖?shí)驗(yàn)結(jié)果如下:甲提取液乙提取液丙提取液顏色深淺程度++++++注：“+"越多,顏色越深由表分析，三種微生物產(chǎn)生的纖維素酶活性不同，最可能的原因是．其中產(chǎn)生酶活性最強(qiáng)的微生物是．（3）農(nóng)作物秸稈除用于生產(chǎn)燃料乙醇外,還可用于培育蘑菇和生產(chǎn)沼氣等．下圖為某生態(tài)農(nóng)場(chǎng)的部分結(jié)構(gòu)模式圖．水稻、雜草在此生態(tài)系統(tǒng)的組成成分中屬于．輸入到鴨體內(nèi)的能量除通過呼吸作用以熱能形式散失外，還用于鴨自身的等生命活動(dòng)．在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上，將蘑菇房與蔬菜大棚連通可提高蔬菜產(chǎn)量,增產(chǎn)的原因最可能是．(4）對(duì)農(nóng)作物秸稈的充分利用可促進(jìn)生態(tài)系統(tǒng)中物質(zhì)在之間不斷地循環(huán)往返,同時(shí)合理調(diào)整了生態(tài)系統(tǒng)中的能量流動(dòng)關(guān)系，有效緩解了燃燒秸稈造成的污染和浪費(fèi)．28．根據(jù)分解纖維素的微生物的分離回答下列問題：(1）纖維素是一種由糖首尾相連而成的高分子化合物．土壤中某些微生物能夠分解纖維素是由于該微生物能產(chǎn)生．（2）纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即、酶和酶,前兩種酶使纖維素分解成，第三種酶將纖維二糖分解成．（3）纖維素分解菌的篩選方法是染色法．其篩選原理是：剛果紅可以與纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,